葡萄叶片植株再生及基因导入研究

葡萄不同组织的植株再生已多有研究 ,然而 ,葡萄的外源基因转移相对于其组织再生的难度大得多。迄今 ,大多限于砧木和酿造品种。国内 ,黄学森首次报道了葡萄外源基因转移工作 ,以后再未见报导。我们研究了不同品种的植株再生、抗生素对其再生植株的影响及外源基因转导 ,结果如下。1　材料和方法葡萄无病毒试管苗按常规方法进行快繁 ,苗高5cm左右、长有 3～ 5片展开叶时 ,切取完全展开的嫩叶 ,沿主脉横切数个伤口 ,远轴面接触培养基 ,置培养室进行再生植株诱导。培养基 :植株再生诱导培养基为NN 69 蔗糖 2 0 .0 g/L 琼酯 4 .5g/L附加 BA …     

葡萄属植物核糖体基因的RFLP分析

葡萄属植物核糖体基因的ＲＦＬＰ分析张立平１林伯年２沈德绪２董继新２（１浙江农业大学生物科学系；２浙江农业大学园艺系，杭州３１００２９）关键词葡萄属；核糖体基因；ＲＦＬＰＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＲＦＬＰｉｎＲｉｂｏｓｏｍａｌＤＮＡｏｆＶｉｔｉｓＺｈａｎｇＬ...     

农杆菌介导BADH基因转化葡萄的研究

以葡萄品种鲁贝的花丝为试材,在葡萄的细胞悬浮系得到胚性愈伤组织及悬浮细胞再生植株的基础上,通过农杆菌介导转化甜菜碱醛脱氢酶基因,利用共培养后GUS染色组织分析探讨了影响转化效率的各种因素,优化了转化体系。组培苗经PCR检测,证明获得了转基因葡萄植株。     

中国野生葡萄果实抗白腐病基因的分子标记

 以感病×抗病的葡萄种间杂交组合白玉霓×塘尾的F₁ 代17 个单株及塘尾自交一代16 个单株为试材, 采用BSA 法和RAPD 技术, 通过对155 个随机引物的筛选, 获得了一个与中国野生葡萄抗白腐病基因连锁的RAPD 标记OPP09-760 , 并在中国野生葡萄8 个种的32 个株系及欧洲葡萄16 个品种中得到验证。进一步将该DNA 片段克隆并测序, 根据两端序列, 设计了一对长26 bp 的特异引物分别扩增供试材料, 获得了与该RAPD 标记相同大小的DNA 片段, 成功地将RAPD 标记转化为SCAR 标记, 可以用作抗白腐病基因的分子辅助选择的依据。     

葡萄病毒病研究进展

葡萄是果树中感染病毒病最多的树种之一,其病毒种类之多、分布之广、危害之大倍受世界关注.截止1997年,世界各地报道的在葡萄上已经鉴定的病毒已由1994年的40种上升到44种[1].     

鲜食葡萄浆果蔗糖积累基因的初步分析

据日本福冈园艺研究中心的研究人员在《Scientia Horticulturae》（2012年4月）上发表的一篇研究报告,该研究组对鲜食葡萄浆果中控制蔗糖积累的基因进行了初步分析。根据葡萄浆果中糖分的HPLC分析结果,将鲜食葡萄分为两类：     

葡萄中糖基化花色苷研究进展

葡萄果实与葡萄酒的颜色由其所含花色苷的种类和含量决定,而花色苷是由花色素经过糖基化修饰转变而成,所以糖基化修饰在葡萄果实花色苷合成途径中起着重要作用。葡萄果实中的糖基化花色苷主要包括花色素的3–O–葡萄糖基和3,5–O–双葡萄糖基,即花色素单糖苷和花色素双糖苷,糖基化花色苷的组成是决定红葡萄酒品质的关键因素之一。对糖基化花色苷在葡萄果实中的组成及其对葡萄酒颜色和稳定性的影响进行了简要介绍,重点对花色素单糖苷和花色素双糖苷合成的关键酶基因以及转录因子进行了综述,以期为葡萄果实糖基化花色苷合成的调控机理的全面揭示和优质红色酿酒葡萄品种的选育提供信息。     

葡萄抗寒性研究进展

葡萄是我国的重要果树之一,对其抗寒性的研究意义深远。现从葡萄的组织结构、膜系统及生理生化指标、种质资源、防冻措施、基因工程等方面,对近年来葡萄的抗寒性研究进行了综述。     

无核葡萄育种技术研究进展

总结了国内外无核葡萄育种技术的研究进展,内容包括无核葡萄的常规杂交育种,胚、胚珠培养,无核葡萄的有籽处理技术,多倍体无核葡萄育种,转基因技术等,并对今后研究提出展望。     

葡萄斑点病毒研究进展

葡萄斑点病(Grapevine fleck virus disease GFkV)是世界各主要葡萄栽培区一种普遍而又严重的病毒病。以前，人们一直认为斑点病是葡萄扇叶病的一种，Vuittenez等(1966)首先发现了该病的病原，就该病毒的为害状、寄主范围、理化特性进行了研究，并命名Grnpevine marbrure virus。     

木本果树遗传转化研究进展

从遗传转化方法和影响遗传转化的因素两方面综述了木本果树遗传转化技术近年来的进展。木本果树遗传转化方法主要有农杆菌介导法和基因枪法;影响转化的因素主要从受体与再生系统、选择标记基因与转化细胞的筛选、培养方法与培养条件等方面进行论述。文章还归纳了导入目的基因并获得再生植株的木本果树种类,并对木本果树基因工程进展及展望进行了讨论。     

食用菌遗传转化研究进展

食用菌遗传转化的方法主要有PEG法、电激法、基因枪法、限制酶介导法，农杆菌介导法；采用的启动子有ras启动子和gpd启动子，采用的筛选标记有营养缺陷型标记，抗生素抗性筛选标记，除草剂和杀菌剂抗性筛选标记，代谢产物抗性筛选标记，本文综述了这些遗传转化方法以及启动子，筛选标记的最新研究进展。     

葡萄病毒病研究进展

综述了近5年来国际葡萄病毒病最新确立的病毒属、鉴定的新种及几种重要葡萄病毒形态、基因组、病原、病毒检测技术及防治策略。葡萄病毒已由1999年的17个属,47种增加到2003年的20个属,55种。其中葡萄病毒属(Vitivirus),凹陷病毒属(Foveavirus)、葡萄斑点病毒属(Maculavirus)和葡萄卷叶病毒属(Ampelovirus)为新确定的4个属。已完成葡萄扇叶病毒(GFLV)和葡萄斑点病毒(GFkV)的全序列测序(2001年)。新发现葡萄卷叶相关病毒-9号(GLRaV-9)(2002年)。新增加GLRaV-8和葡萄D病毒(GVD)的单克隆抗体和沙地葡萄茎痘相关病毒(GRSPaV)的多克隆抗体。RT-PCR技术已成功地应用于GRLaV-1、GRLaV-2、GRLaV-3、GRLaV-4、GRLaV-5、GRLaV-6、GRLaV-7、GVB、GVA、GVD、GRSPaV、葡萄拟卷叶病毒(GFkV-likeviruses)、GFLV和南芥菜花叶病毒(ArMV)等病毒及葡萄病毒属(Vitivirus)和凹陷病毒属(Foveavirus)病毒的检测。GFLV、ArMV、GVA及GVB和GVA、GFLV、GLRaV-2、GLRaV-3外壳蛋白(CP)基因已分别导入到欧洲葡萄(Vitisvinifera)和沙地葡萄(Vitisrupestrsis)及其他砧木中,目前仍在检测阶段。     

根癌农杆菌介导的西瓜遗传转化研究进展

介绍了根癌农杆菌介导的西瓜遗传转化的研究现状,综述了西瓜高效再生体系的建立和遗传转化过程中的主要影响因素,包括最佳外植体的选择、最适培养基的制备,以及抗生素、农杆菌菌株类型、菌液浓度、侵染时间、预培养时间、共培养时间和添加乙酰丁香酮等内容,讨论了西瓜遗传转化存在的问题,并对这一体系的发展进行了展望。     

茄子体细胞融合与遗传转化研究进展

茄子黄萎病在北方地区发病田块达40％—100％，青枯病为害在长江流域一般导致减产20％—30%，严重时损失达50%—60％。通过生物技术的手段和方法，为解决这些问题提供了新的途径。现将茄子在体细胞融合与遗传转化方面的研究进展作一综述，并讨论茄子在体细胞融合和遗传转化方面存在的主要问题。     

桃组织培养和遗传转化研究现状及展望

现代生物技术如组织培养和遗传转化在植物育种方面有重要作用。综述了桃树的组织培养技术和桃遗传转化研究取得的成绩。文中侧重介绍了广泛应用于桃树研究的茎尖培养法、胚培养法两种主要的组织培养技术和农杆菌介导法、基因枪轰击法两种主要的遗传转化方法;详细说明了品种、外植体类型及其发育阶段、培养基类型、生长调节因子和培养环境等对桃组织培养的影响;初步分析了影响桃树遗传转化的关键问题,并对进一步的工作重点提出了建议。     

榛子遗传多样性研究进展

榛子是营养价值和经济价值极高的干果(木本经济作物),在许多国家和地区广泛种植.现就榛属资源研究与保存,新品种选育及表型分析、同工酶酶谱分析、分子标记等手段在榛属遗传多样性研究中的进展进行综述,同时提出榛子遗传改良中存在的一些问题及解决对策.     

萝卜遗传转化体系的建立

系统研究了影响根癌农杆菌介导的萝卜(Raphanus sativus L.)遗传转化的若干因素,建立了萝卜遗传转化体系:即切取萝卜带柄子叶外植体,先进行2 d预培养,用OD600为0.3~0.5的EHA105农杆菌菌液侵染5~7 min后,再进行5 d共培养,然后将外植体转接到MS+6-BA 6 mg.L-1+NAA 0.05 mg.L-1+Cef 500 mg.L-1的培养基上进行7 d延迟筛选,再将外植体转接到MS+6-BA 6 mg.L-1+NAA 0.05 mg.L-1+Cef 500 mg.L-1+Hyg 5 mg.L-1的培养基上进行10 d的抗性筛选。结果共获得126个抗性芽,其中8个抗性芽经PCR检测扩增出目的基因的启动子BcA9,约850bp,阳性率为6.3%,初步验证目的基因已经转入萝卜再生芽中。     

根癌农杆菌介导荔枝遗传转化研究

利用带有内含子的GUS基因(uidA)的瞬时表达,研究影响根癌农杆菌介导荔枝胚性愈伤组织遗传转化的若干因素。结果表明:在AGL-1、LBA4404和EHA105三种菌株中,EHA105对荔枝胚性愈伤组织的侵染力最强;采用2d的共培养时间既有较高的瞬时表达率,又避免了农杆菌的过度生长;0.5×10~8个细胞/mL的菌液密度为最佳侵染浓度;继代培养15d的胚性愈伤组织处于最旺盛分裂的时期,是转化的合适受体;愈伤组织转化前干燥处理对uidA瞬时表达率的提高有一定的促进作用。使用优化的农杆菌侵染条件获得了稳定表达uidA基因的荔枝抗性愈伤组织。     

担子菌遗传转化研究进展

担子菌遗传转化目前主要采用电激法和PEG法。本文着重介绍自第一例担子菌的遗传转化开始,担子菌中转化系统的构建和转化的一般特点;并列出了截止到1996年9月报道的一些实例,说明了担子菌遗转传化的理论价值和应用价值。