平菇漆酶对农药六六六降解作用研究

研究了平菇(Pleurotus ostreatus)菌株产漆酶规律、漆酶对农药六六六的降解作用和农药消解动态变化。结果表明:平菇菌株在液体培养基中,漆酶酶活性随着培养时间的增加先逐渐增强, 8 d达到峰值,随后逐渐降低;平菇漆酶对农药六六六具有降解作用,漆酶酶活性与农药降解呈正相关关系;在菌丝生长过程中,农药六六六残留量随着菌丝的培养时间延长而逐渐减少,半衰期为7.0 d,农药六六六对平菇漆酶影响较大,降低了培养基中漆酶酶活性。     

食用菌中漆酶的研究进展(英文)

漆酶是已被广泛研究的用来降解酚类、苯胺等异生物质的酶之一,很多漆酶已经从真菌培养物中被提取。主要讨论从食用菌中获得的漆酶,包括漆酶的催化结构和机制,漆酶基因的克隆和表达以及对食用菌研究的潜在应用。     

不同培养基成分对灵芝漆酶酶活的影响

灵芝具有巨大的潜在漆酶生产能力。研究采用ABTS法测定灵芝漆酶的酶活,比较液体发酵培养基中不同培养基成分对灵芝漆酶酶活的影响。结果显示:PDB加富培养基、Cu2+培养基诱导漆酶最大酶活期提前;PDB加富培养基有利于灵芝菌丝的前期生长及漆酶的产生,秸秆粉对漆酶酶活诱导作用最大、Cu2+培养基次之,Ca2+对试验灵芝菌株没有明显的影响。     

食用菌漆酶及其对农药残留降解作用的研究进展

综述食用菌产漆酶规律、食用菌农药残留消解规律,以及漆酶对农药残留降解作用等方面的研究进展。其中,食用菌产漆酶规律的研究包括不同食用菌的产酶规律、食用菌漆酶的酶学特性、漆酶与食用菌生长相关性等;食用菌的农药残留消解规律的研究内容含食用菌培养基中和子实体中的农药残留消解两个方面。     

杏鲍菇漆酶基因DNA片段的克隆及序列分析

参照Genbank中发表的杏鲍菇漆酶基因序列(No.AY686700),并根据真菌漆酶氨基酸序列保守区设计特异性引物。以杏鲍菇基因组DNA为模板,PCR扩增出长2 606 bp的漆酶基因片段,DNA经纯化后克隆到pGM-T载体上,经筛选、PCR鉴定和序列分析,证明该片段为完整的杏鲍菇漆酶基因(Genbank注册号KC789846)。通过对基因序列的内含子/外显子进行预测分析,获得漆酶编码区的cDNA,该基因的开放阅读框由1 596个核苷酸组成,编码一个由531个氨基酸组成的多肽,分子量大小约为56 682.0,等电点pI为4.56;比对结果发现该基因氨基酸序列与其他真菌漆酶的同源性最高达93%;进一步对X22-12漆酶二级结构进行分析,并通过SWISS-MODEL预测了该酶的三维结构。     

真菌漆酶研究进展

综述了真菌漆酶尤其是食药用真菌漆酶的生物学性质、分子生物学及应用等方面的研究进展，指出今后在注重真菌漆酶理论研究的同时，尤其应侧重其应用研究。     

糙皮侧耳以果皮为基质固态发酵产漆酶及其酶学性质的研究

以漆酶活性为指标,利用不同果皮为基质对糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)固态发酵产漆酶的条件进行优化并对所产漆酶进行纯化,研究纯化后漆酶的酶学性质。结果表明:以柚皮为培养基质(5g柚皮、25mL水、20μL吐温-80),30℃固态发酵10d,糙皮侧耳产漆酶的活性最高,比活力为21800U/g;在该条件下将糙皮侧耳所产漆酶的粗酶液用硫酸铵沉淀、透析、浓缩、DEAE-纤维离子交换柱层析得到漆酶蛋白单一条带,SDS-PAGE检测蛋白相对分子质量约66000;该漆酶命名为Lac h2,其最适反应温度为60℃,最适反应pH值为4.5;在30～50℃,pH 4.5～6.0范围内稳定;金属离子Zn~(2+)、Mn~(2+)、Cu~(2+)和Mg~(2+)对纯化的漆酶Lac h2的酶活力有促进作用而Ca~(2+)、Ag~+和Fe~(2+)对Lac h2的酶活力有抑制作用。     

香菇漆酶的纯化及部分性质研究

对香菇漆酶进行了丙酮分级沉降、半透膜透析、DEAE一纤维素及Sephadex G100柱层析纯化,并研究了漆酶的产酶曲线及酶作用最适条件.,结果表明:在该培养条件下,香菇第10天达产酶高峰,峰值酶活为216 U/mL,酶作用的最适pH值为3.6,在pH值3.6～4.6有较强的稳定性.最适酶解温度为30℃,Ba2 、Cu2 对香菇漆酶有激活作用,而Ag 、Fe3 则能明显抑制漆酶活性,其它离子影响相对较小.以邻联甲苯胺为底物的表观Km值为1.68 mmol/L.     

不同食用菌品种产漆酶规律的研究

本研究对6种食用菌在液体和栽培料培养时产漆酶能力和产酶规律进行了比较分析。实验结果表明,在液体培养条件下,凤尾菇、秀珍菇和鸡腿菇均在第6天左右达到酶活性峰值,金针菇酶活性持续增加,在第10天达到峰值。在栽培料培养条件下,风尾菇、秀珍菇和鸡腿菇均在大试管中长至一半时达到酶活性峰值,金针菇酶活性持续增加,在原基形成时达到峰值。在2种培养条件下,生长速度较快的凤尾菇、秀珍菇、金针菇f198、鸡腿菇漆酶活性均较高,而生长速度慢的白玉HM03和滑菇漆酶活性较低,漆酶产生规律相同,产漆酶能力较强的菌种菌丝生长较快,产酶高峰多出现较早,而产漆酶能力较弱的菌种菌丝生长较慢。以上结果说明食用菌中漆酶在菌丝生长速度上起着重要的作用,可为以后食用菌提高其生长速度、定向育种提供重要的参考。     

木耳漆酶高产菌株筛选及其发酵条件的研究

通过运用不同检测方法对木耳属中的三个种的 2 7个菌株的产过氧化物酶、漆酶能力的检测 ,筛选得到一漆酶高产菌株毛木耳 (Auriculariapolytricha)AP4。并且对AP4的产漆酶的发酵条件进行了初步研究。摇瓶实验产漆酶的最佳培养基的成分为 :碳源羧甲基纤维素(CMC) 5g/L ,氮源NH4NO3 L -天冬酰胺 (L -As paragine) 2 4mmol/L ,培养基的初始pH4 0 ,培养温度2 5℃。     

桑黄漆酶的发酵条件研究初报

采用液体深层培养方法通过不同碳源、氮源、pH值、温度等因素对桑黄产酶量的影响,研究桑黄合成漆酶的最适发酵条件。采用L9(34)正交设计法对桑黄合成漆酶发酵培养基进行了优化,初步筛选出了桑黄合成漆酶发酵培养基。结果表明,培养基为玉米粉1%、麦麸1%、葡萄糖2%、蛋白胨0.5%、酵母膏0.5%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.05%、添加Cu2+浓度60μmol.L-1,维生素B1 1 mg.100-1.mL-1,漆酶产量最高,为7 666 U.L-1。     

不同茵龄银耳菌种的酶活力测定

同时取不同菌龄银耳菌种的白毛团和混合菌丝鲜样各5g,分别提取酶液,进行羧甲基纤维素酶（CMC酶）、木聚糖酶、淀粉酶、漆酶、多酚氧化酶的酶活力测定,并用相应菌龄的菌种进行出耳试验。结果显示,在上述5种酶中,只有漆酶和多酚氧化酶的酶活性变化与菌种活力呈正相关,其他酶的酶活性与银耳菌种活力无明显相关性。其中自毛团的多酚氧化酶活力较强,漆酶的活力较弱,但均与出耳情况相对应,在理论上讲可以通过测定自毛团多酚氧化酶的酶活力和漆酶的酶活力来判断银耳菌种的活力。     

食用菌漆酶的提取与应用技术研究进展

真菌漆酶广泛存在于真菌发酵液与食用菌菌渣中,具有优良的生物催化氧化活性,在食品、造纸、染整、生物电化学、生物转换、污水处理等领域极具发展前景。对真菌漆酶的来源、提取、生物化学特性、生物学功能和应用技术等方面的最新研究进展进行了综述,为食用菌漆酶的开发和利用提供参考。     

皱木耳漆酶生物信息学分析

漆酶是一种含铜的多酚氧化酶，漆酶主要参与真菌形态建成、色素合成、应激反应等多种重要的生长发育过程。利用生物信息学方法对皱木耳的漆酶进行筛选和定位分析，然后对其理化性质、二级结构、模体、结构域和三级结构进行预测和分析。结果表明，皱木耳8个漆酶分布在基因组的不同位置上，系统发育树上与木耳属物种聚为一枝，具有较近的亲缘关系。进一步分析发现，皱木耳漆酶蛋白的理化性质总体差异较小。同时，分析皱木耳漆酶基因结构，结果显示8个基因的外显子和内含子大小与位置不一致，表现出复杂的基因结构；而氨基酸序列的结构以随机卷曲为主，且8条氨基酸序列的三维结构十分相似。     

杏鲍菇漆酶的生物学特性

从杏鲍菇、双孢蘑菇、美味侧耳、茶薪菇、凤尾菇和香菇子实体中提取漆酶，用分光光度法测定酶活，发现杏鲍菇漆酶酶活最高，实验结果表明，杏鲍菇漆酶是一种较稳定的高温酶，其最适PH为3．0，最适温度60℃；Pb^2＋,K^ 对酶活有较大的激活使用，而Fe^3 ,Fe^2 则对酶活有较强的抑制作用。     

漆酶制剂及其在食用菌生产中的应用

漆酶是最先在漆树体内发现的一种含铜多酚氧化酶,后经研究发现许多植物和微生物体内也富含漆酶,属胞外酶类,并对这些生物体的生育起促进作用。关于漆酶在食、药用菌生产中的作用,本文作者已在《食用菌》92年增刊上作过讨论。那么如何生产漆酶制剂并应用于食用菌生产,将是一个十分诱人的课题。所谓酶制剂,按生物化学的观点,即从含某种酶的生产体中分离、提纯、精制并添加活性保护剂后而得到的粗品或结晶。生产酶制剂的品种多、用途广,有的品种生产规模很大。例如用于纤维脱浆的细菌α-淀粉酶制剂,1972年日本年消耗量就达千吨,价值600万日元。随科学技术的进步,生物酶制剂的商品生产已跨入高新技术产业之列。 (一)漆酶来源 据许多研究资料介绍,漆树、野漆树、芒果等漆树科植物和桃树、苹果、银杏、牛蒡、毒长春藤、马铃薯等植物体中富含漆酶,象香菇、平菇、蘑菇、灵芝、漆柄云芝等含漆酶或分泌漆酶的菌类就更     

一株高产漆酶野生金针菇菌株的鉴定及酶学性质研究

从野生食用菌中筛选出一株漆酶高产菌株F0027,依据形态学、生理生化特征以及r DNA ITS序列分析得出该菌株属于黄色金针菇。对子实体培养料中的酶学性质初步研究表明,其产漆酶的最适温度和最适p H分别是35℃和4.8。抗坏血酸可以完全抑制该漆酶的活性;Fe~(2+)、草酸和EDTA对漆酶活性有强烈的抑制作用,不同浓度的K+、Ca~(2+)、Mn~(2+)、Zn~(2+)、Mg~(2+)对漆酶活性几乎无影响,Cr~(2+)、Al3+对漆酶活性有不同程度的抑制作用;Cu~(2+)对漆酶活性的促进作用不明显。该漆酶对溴百里香酚蓝、依来铬黑和孔雀石绿3种实验室染料有不同程度的脱色作用,其中对依来铬黑染料的脱色率可达到30%以上。     

金针菇液体菌种活力检测的生物标记物研究

通过研究金针菇液体菌种培养过程中酶活力与菌丝活力之间的对应关系,寻找一种能快速确定菌种活力的生物标记物。试验检测了金针菇液体菌种在不同培养天数产生漆酶、淀粉酶、蛋白酶的酶活力与菌丝生长活力,结果表明漆酶可以作为金针菇液体菌种活力检测的生物标记物。     

改良壳聚糖固定化真菌漆酶的研究

以改良壳聚糖-壳聚糖铜为载体,戊二醛为交联剂对真菌漆酶进行了固定化研究,探讨了其固定化条件及固定化酶的部分性质.结果表明:戊二醛最适浓度为0.5%,交联最佳时间14 h,最佳给酶量约1.3 mg,固定时间12 h或0.5 h.在此条件下获得的固定化漆酶酶活回收率分别为56.4%与51.2%.与游离酶相比,固定化漆酶与作用底物邻联甲苯胺的亲和力降低,但固定化漆酶的稳定性有明显改善.最适温度分别为40℃和80℃,分别比游离酶提高10℃和50℃;90℃条件下保温5 h后固定化酶活保留率分别为57.4%和40%,而相同条件下游离酶酶活明显下降.     

响应面法优化金针菇漆酶产酶条件

高效获得金针菇闽金1号产漆酶条件,为实现漆酶大规模生产提供参考。采用单因素试验、P-B试验、响应面法（RSM）、中心组合试验（CCD）对闽金1号产漆酶的液体培养基组成进行优化。结果表明：最优碳源和氮源为蔗糖、蛋白胨+酵母粉,蔗糖、MgSO₄、KH₂PO₄对漆酶活性有显著影响,最优产漆酶培养基组成为蔗糖22.27 g/L、MgSO₄0.96 g/L、KH₂PO₄1.25 g/L,在此条件下,漆酶活性为945.981 U/L,是原始条件下（334.73U/L）的2.83倍。