栝楼性别的分化与鉴定研究进展

栝楼是常用的大宗药用植物,其性别分化一直是研究的重点。本文对栝楼雌、雄性别分化的组织形态鉴别、生理生化鉴别、性别相关基因的分子标记鉴别等进行综述,并对今后栝楼性别研究的发展趋势进行了展望,最后提出了相关建议。     

苦瓜性别分化程序表达的研究（英文）

苦瓜的性别分化过程要先经过一个两性期,再分别向雄性或雌性的方向发育. 对两性期和雄,雌花早期发育的3个典型时期的花蕾进行毛细管电泳分析,结果表明,一种分子量为11 kD的蛋白质在雌花发育的3个时期都存在,并且含量变化很小,很可能是雌花程序表达中的一种"关键蛋白";类似地,一种分子量为30 kD的蛋白质很可能是雄花程序表达中的一种"关键蛋白".此外,蛋白质合成抑制剂亚胺环己酮抑制离体两性花的体外性别分化,而核酸合成抑制剂3-脱氧腺苷则不影响两性花的体外性别分化.     

苦瓜性别分化程度表达的研究

苦瓜的性别分化过程要先经过一个两性期，再分别向雄性或雌性的方向发育。对两性期和雄，雌花早期发育的3个典型时期的花蕾进行毛细管电泳分析，结果表明，一种分子量为11kD的蛋白质在雌花发育的3个时期都存在，并且含量变化很小，很可能是雌花程序表达中的一种“关键蛋白”；类似地，一种分子量为30kD的蛋白质很可能是雄花程序表达中的一种“关键蛋白”。此外，蛋白质合成抑制剂亚胺环己酮抑制离体两性花的体外性别分化，而核酸合成抑制剂3－脱氧腺苷则不影响两性花的体外性别分化。     

用过氧化物酶同工酶酶谱鉴定芦笋(Asparagus officinalis L.)植株性别的研究初报

本试验用聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳分析方法进行过氧化物酶同工酶的测定,以期鉴定芦笋植株的性别。供试的三个品种无论以真叶还是以拟叶为材料,过氧化物酶同工酶酶谱其雌株酶带均比雄林多一条。此结果表明过氧化物酶同工酶谱可以作为芦笋植株性别鉴定的一项指标。值得深入研究。     

黄瓜性别分化研究

概述了黄瓜性别分化的遗传、生理生化基础研究现状,并提出有待解决的问题,以期对黄瓜的基础研究工作提供可靠材料。     

植物生殖发育及环境胁迫相关特异蛋白质的研究进展

主要综述了特异蛋白质在性别分化、育性、成花、胚胎发育及环境胁迫方面的国内外研究进展。     

食用栝楼种苗雌雄性别的DNA鉴定技术初步研究

应用ISSR分子标记构建食用栝楼雌雄植株的DNA指纹图谱,获得与食用栝楼雌雄性别相关的分子标记,可准确、有效地鉴定食用栝楼种苗雌雄性别,为栝楼产业的可持续发展提供技术支撑。     

猕猴桃不同性别过氧化物酶及酯酶同工酶分析

本实验采用聚丙烯酰胺梯度垂直平板电泳技术，分析了猕猴桃6个品种的雌雄株和3个品种雄株的过氧化物酶及酯酶同工酶。实验结果表明：同一个品种的雌雄株之间的过氧化物酶及酯酶同工酶有一定的差异；不同品种的雌和雄株之间的过氧化物酶及酯酶同工酶酶谱差异明显：雌和雄株之间的酶谱分析没有发现特征带，说明此法用于鉴别猕猴桃品种的性别仍有较大难度。     

苎麻性别分化与乙烯的关系研究

 【目的】探讨乙烯在苎麻性别分化过程中的作用。【方法】采用气相色谱对不同性别苎麻茎尖内源乙烯释放速率、二麻期不同性别苎麻材料不同节位花芽乙烯释放速率、雌雄同株苎麻材料不同性别单花序乙烯释放速率进行测定。同时喷施乙烯抑制剂（AVG和AgNO3）对苎麻性别进行控制。【结果】在苎麻生长过程中,茎尖乙烯的释放速率二麻期大于三麻期,雌性苎麻的茎尖乙烯释放速率大于雌雄同株苎麻。二麻性别决定后期雌性苎麻乙烯释放率随着节位的升高而升高,雌雄同株苎麻的乙烯释放速率表现为低节位和高节位相差不大,而中间节位乙烯释放速率较低。三麻性别决定后期雌性苎麻乙烯释放速率随节位升高呈现高－低－高的变化趋势,而雌雄同株苎麻的乙烯释放速率则呈现低－高－低的变化趋势。对于雌雄同株苎麻来说,乙烯释放速率表现为雌花序＞混合花序＞雄花序。AVG有极显著的诱雄效果。与对照比,AVG可以显著使苎麻的第一雄花节位,雌花比和雌雄比降低,AgNO3可以显著增加苎麻的混合花比,降低雌花比。【结论】苎麻性别分化与内源乙烯密切相关,高水平乙烯释放速率诱导雌性苎麻的产生。乙烯合成抑制剂AVG和作用抑制剂AgNO3均可以抑制雌性花的形成,其中以AVG处理的效果较好,浓度以300 mg•L-1最佳。     

苦瓜性别分化的形态与组织化学研究

以石蜡切片法研究苦瓜性别分化的开矿学。苦瓜的性别分化首先要经过两性期，然后再分别向雌或雄的方向发育。以显微分光光度法分析两性花及典型发育时期的雄、雌花中雄蕊和雌蕊组织的ＲＮＡ和蛋白质的相对含量，得出两性花的发育方向与相应组织中的ＲＮＡ和蛋白质合成能力的强弱有关。在苦瓜的性别分化与表达中，雄蕊组织和雌蕊组织的ＲＮＡ和蛋白质合成能力总是一强一弱，从而保证了性别分化的结果是某一性别的单性花。     

栝楼细胞悬浮系的建立

[目的]为了解决栝楼悬浮细胞系在继代培养中容易退化,生长速度减慢的问题。[方法]以栝楼的茎为外植体诱导出愈伤组织,筛选出质地疏松、生长迅速、易于分散、可以长期进行继代培养的淡黄色半透明状愈伤组织系,将该愈伤组织接种在液体培养基中进行振荡悬浮培养,建立起分散程度好的栝楼悬浮细胞系。同时对影响愈伤组织的诱导及细胞悬浮培养的条件进行研究,确定适合愈伤组织生长的条件及影响细胞悬浮培养的主要因素。[结果]看护培养可以使栝楼悬浮培养细胞长势良好,并在低密度下获得由单细胞形成的细胞系。[结论]该悬浮系的建立为栝楼细胞大规模培养,进而实现有效药物成分的工业化生产奠定了理论基础。     

栝楼的研究进展

栝楼是我国一种常用中药材,本文就栝楼的种质资源、品种选育、栽培技术、化学成分、天花粉蛋白的生物合成等研究的现状和存在的问题进行了概述,以期为今后的研究提供参考。目前有关栝楼种质资源的搜集评价、品种选育、系统的栽培技术等方面的研究较为欠缺,今后应加强研究,为生产适应质量管理规范要求的栝楼良种奠定基础;同时还需深入研究栝楼的化学成分及其药理,以助于探讨栝楼的有效成分及其作用机理;另外,栝楼中存在多种核糖体失活蛋白及其生理功能差异的现象也值得进一步研究。     

栝楼种子休眠特性分析

 【目的】通过从种皮及内源抑制物两个方面探索栝楼（Trichosathes kirilowii Maxim）种子休眠原因,找出其萌发难的症结所在,并有针对性地提出提高种子萌发率的可行措施。【方法】对照完整种皮,设置了刀割种皮和去除种皮的处理,以探究种皮对栝楼种子萌发率的影响;同时分种皮和种仁两部分分别用水、甲醇、乙醚提取其中萌发抑制物,并以白菜种子作为生物鉴定材料,测定其在各种提取物作为萌发基质下的萌发率、淀粉酶活性、苗高、根长及鲜重,以求确定抑制物的分布、极性并初步推测抑制物类型。另外,用GA3处理栝楼种子,并设置不同浓度和不同处理时间对比试验,以求探索栝楼促萌措施。【结果】去种皮处理组与对照吸水率基本持平,但却能显著增加栝楼种子的萌发率。种皮甲醇浸提液对白菜种子的萌发及淀粉酶活性抑制程度最强,而种仁的各种浸提液中,乙醚浸提液的抑制作用较强。200 mg?L-1 GA3对栝楼种子萌发率促进最大,对种子进行适宜浓度GA3的4 d浸泡,对萌发率促进较大。【结论】种皮所引起休眠的物理原因源于其机械阻碍,与其透水性和透气性无关。栝楼种皮中含有相当浓度的萌发抑制物,且主要成分为极性物质;种仁中包含非极性萌发抑制物。可通过机械破皮、流水冲滤、赤霉素处理等方法提高栝楼种子萌发率。     

栝楼的化学成分研究进展

栝楼始载于《神农本草经》,其果实、果皮、种子及块根分别作瓜蒌、瓜蒌皮、瓜蒌子和天花粉入药,具有扩张冠状动脉、保护心肌缺血、降低胆固醇、抗癌和降血糖等多种药理作用,为治疗冠心病的常用中药。为了更好的利用栝楼资源,深化栝楼的化学成分和药效学研究,现对其化学研究进展进行综述,为今后的研究提供参考。     

栝蒌产几丁质酶菌株的多样性研究

[目的]探讨栝蒌产几丁质酶菌种的多样性。[方法]以绿色（未成熟）和黄色（已成熟）的栝蒌为材料,均以透明圈法筛选其产几丁质酶的菌株,并以DNS法测定酶活。[结果]从绿色果皮、绿色果肉、红色果皮、红色果肉中分别筛选得菌株91、6、71、4株,活性最高的是从绿色果皮中筛得的LP-1,其活性为0.450 U。[结论]该研究为栝蒌的开发和利用提供了理论依据,同时拓宽了高产几丁质酶菌种筛选材料选择的途径。     

湖南栝楼优质高产规范化栽培技术

栝楼是湖南一种重要药食兼用植物,全身是宝,经济效益相当明显。对湖南栝楼立地条件、整地、搭建棚架、种根培育、种根栽植、田间管理、病虫害防治、采收和贮存等方面进行了科学规范总结,初步制定了栝楼规范化栽培技术规程,规范了栝楼种植技术,对提高其产量和质量具有重要作用,为湖南栝楼产业的可持续发展提供技术支撑。     

栝楼组织培养与快繁研究

采用带腋芽或顶芽的茎段为外植体,调节培养基营养与激素,以微型扦插的组织培养快繁方法建立了栝楼无性繁殖体系及栝楼组培苗生产路线,成苗效率高,较适合初代诱导的培养基为MS+BA0.3mg/L+IBA0.06mg/L,增殖培养基为MS+BA0.15mg/L+IBA0.1mg/L,生根培养基为MS+IBA0.3～0.5mg/L;沙土混合移栽基质能有效提高组培苗移栽成活率,生成的栝楼组培苗整齐健壮,生长活性强。     

栝楼的RAPD-PCR体系建立与优化

[目的]建立栝楼的RAPD-PCR体系并对该体系进行优化。[方法]以栝楼叶片为材料,采用CTAB法提取栝楼叶片基因组DNA,利用正交设计对RAPD-PCR体系进行优化。[结果]各因素水平变化对PCR反应影响大小依次为：Mg2＋、TaqDNA聚合酶、引物和dNTPs。通过试验分析,优化的栝楼RAPD反应体系为：在25μl反应体系中,含10×buffer2.5μl,Mg2＋2.0mmol/L,Taq酶1U,引物0.8μmol/L,dNTPs0.1mmol/L。反应程序为94℃预变性2mim;94℃变性30s,37℃退火温度40s,72℃延伸1.5mim,36次循环;72℃延伸10mim,4℃保存。[结论]该研究建立的栝楼RAPD反应体系稳定可靠,为栝楼性别鉴定、遗传多样性分析、亲缘关系分析等方面的研究提供了有效的方法。     

栝楼的组织培养及快速繁殖

栝楼的种苗快速繁殖,宜采用多年生块根萌生幼苗的带芽茎段诱导丛生芽,适合的诱导培养基为MS BA 1.5 mg/L;2~3周后用相同培养基继代培养;当丛生芽长至3 cm时,将丛生芽切分为单芽转至生根培养基MS IBA 0.5 mg/L,4周后经驯化移栽即可育成幼苗。16~20周即可快速、大量、定向繁殖栝楼雌雄种苗,提高种植栝楼的产量和经济效益,为实现栝楼优质种苗组培快繁工厂化生产打下良好的基础。     

发根农杆菌对栝楼的遗传转化

利用5种发根农杆菌1.2556、A4、LBA9402、R1000、R1601对栝楼组培苗茎段和叶片进行感染,诱导出毛状根,PCR检测结果表明,发根农杆菌Ri质粒的rolB基因已经整合到栝楼的基因组中.