布鲁氏菌病三种诊断方法的比较

采集太原市周边县区4个规模场的牛血清样品400份,用虎红平板凝集试验（RBPT）、试管凝集试验（SAT）、iELISA进行抗体检测,比较三种检测方法的敏感性和特异性差异。结果表明三种方法检测结果一致率较高,但是RBPT和SAT均有较高的假阳性和假阴性,三种方法中iELISA的敏感性和特异性最好。结论是在布病检测时可选择操作简便的RBPT进行初筛,阳性结果用iELISA进行确诊。     

布鲁氏菌病补体结合酶联免疫吸附试验抗体检测试剂盒敏感性和特异性评价

为评价布鲁氏菌病补体结合酶联免疫吸附试验抗体检测试剂盒（ CF-ELISA试剂盒）的敏感性、特异性及与其他试剂盒的符合率,用CF-ELISA试剂盒对布病感染地区牛、羊血清各200份,布病净化地区牛、羊群血清各100份进行抗体检测,同时与其他商品化检测试剂进行了比较。结果表明,感染地区牛、羊血清抗体的McNemar检验结果表明CF-ELISA试剂盒与间接酶联免疫吸附试验（ iELISA）试剂盒和CGS的敏感性和特异性差异均不显著（ P＞0．05）,Kappa一致性检验分析结果表明,CF-ELISA试剂盒与iELISA试剂盒检测结果有高度的符合性。检测净化地区牛、羊群血清抗体产品间的特异性和符合率均为100％。     

应用荧光偏振检测方法对出口牛进行布氏杆菌病检测

荧光偏振试验(FPA)是一种新的试验方法。本文应用荧光偏振检测方法对出口哈萨克斯坦的321份牛进行布氏杆菌病检测,结果有25份牛血清样品检测为抗体阳性。同时对321份血清进行虎红平板凝集试验(RBPT)、试管凝集试验(SAT)、补体结合试验(CFT)、间接ELISA试验(I-ELISA)、竞争ELISA试验(C-ELISA)等比对试验,结果是FPA从敏感性和特异性上都优于或等于目前主要采用的RBPT、SAT、CFT、ELISA检测方法。FPA方法简便、快速、通量大,不需洗板,可在15分钟内完成92份样品的布氏杆菌病检测,极适合于大批量牛布氏杆菌病的检疫、筛查和疫病监控。     

虎红平板凝集试验和胶体金免疫层析法诊断布鲁氏菌病效果的比较

为了比较虎红平板凝集试验(RBPT)和胶体金免疫层析法(GICA)诊断布鲁氏菌病的效果,658份牛血清和365份羊血清进行了检测,并通过试管凝集试验(SAT)对两种方法筛选到的阳性样品进行了确证。RBPT法检测出103份阳性牛血清,44份阳性羊血清;GICA法检测出129份阳性牛血清,65份阳性羊血清。通过SAT法验证结果显示牛血清有84份为阳性,羊血清有44份为阳性。GICA法的敏感性要高于RBPT法,可以作为家畜布病初筛试验的一种比较理想的检测方法。     

牛γ-干扰素EIA与TST检测牛结核病的比较

采用牛γ-干扰素EIA（酶免疫分析）与结核菌素皮内试验（TST）两种方法对某奶牛场中182头奶牛进行牛结核病的检测,并对牛γ-干扰素EIA与TST两种检测方法进行比较。结果：TST检出阳性123份、可疑20份、阴性39份,牛γ-干扰素EIA检出阳性58份、阴性124份,TST的阳性率大于牛γ-干扰素EIA,EIA与TST相比,敏感性为30.30%、特异性为82.05%、符合率为39.56%。     

牛羊布鲁氏菌病四种血清学检测方法对比分析

[目的]对布鲁氏菌病的几种检测方法进行比对分析,为国家标准修订提供参考。[方法]对收集到的669份血清样本用虎红平板凝集试验（RBT）、试管凝集试验（SAT）、补体结合试验（CFT）和酶联免疫吸附试验（ELISA）方法进行检测,比较四种检测方法的一致性、敏感性与特异性。[结果]RBT、SAT、CFT、ELISA四种牛羊布鲁菌病的血清学检测方法一致率较高,Kappa值均大于或等于0.75。RBT敏感性较高,CFT特异性好,而SAT有一定的假阳性和假阴性,ELISA的敏感性和特异性都比较理想。[结论]用RBT初筛,用CFT和ELISA联合诊断结果较为理想。     

牛布鲁氏菌四种血清学检测方法的比较

[目的 ]为在布鲁氏菌病临床检疫中选择可靠的血清学检测方法提供参考。[方法 ]对采集的294份牛血清样品用虎红平板凝集试验(RBT)、试管凝集试验(SAT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和补体结合试验(CFT)进行布鲁氏菌病抗体检测,比较RBT与ELISA,SAT与CFT的符合率及Kappa值,以CFT作为判定标准,比较四种检测方法的敏感性和特异性。[结果 ]RBT与ELISA、SAT与CFT检测方法的符合率高达到95%以上,且Kappa值均大于0.75。以CFT作为判定标准,RBT和ELISA的敏感性较好,但有假阳性;SAT的特异性较好,但有假阴性。综合比较认为ELISA的敏感性和特异性都比较理想。[结论 ]临床工作中使用RBT或ELISA对布鲁氏菌病进行初筛,用CFT进行复核确诊,通过两种或两种以上的血清学检测方法联合诊断,结果较为理想。     

布鲁氏菌4种高通量抗体检测方法的比较研究

旨在科学选择和使用布鲁氏菌抗体检测方法,推动布病诊断试剂标准化。本研究用布病阳性血清标准品测定了国家/OIE布鲁氏菌病参考实验室开发的布鲁氏菌荧光偏振（FPA）抗体检测试剂盒、动物布鲁氏菌病竞争ELSIA （cELISA）抗体检测试剂盒、牛布鲁氏菌病间接ELISA （iELISA）抗体检测试剂盒和改进的微量补体结合试验（mCFT）等4种方法的灵敏度。通过对已知阴、阳性血清样品的检测,比较了各检测方法的敏感性和特异性,并用临床样本进一步比较了各种方法检测结果的吻合性。结果表明,4种方法检测的灵敏度基本一致,当布病阳性血清标准品按1∶20稀释（即50 IU·mL^-1）时均检测为阳性,1∶40稀释（即25 IU·mL^-1）时均检测为阴性。FPA、cELISA、iELISA和mCFT方法的敏感性分别为97.14%、100.00%、100.00%、98.57%,特异性分别为96.34%、95.12%、97.56%、100.00%。对315份临床样本的检测结果显示,各方法之间的符合率均高于90.00%,其中iELISA、FPA、cELISA与mCFT符合率分别为97.14%、96.83%、92.70%;FPA、cELISA与iELISA符合率分别为95.24%、93.65%;FPA与cELISA符合率为91.43%。iELISA、FPA、mCFT 3种方法之间吻合性最高,cELISA与其他3种方法之间的吻合性略低。     

奶牛布氏杆菌病3种血清学检测方法的临床应用比较

旨在比较奶牛布氏杆菌病3种血清学检测方法,为临床根据实际检测情况选择不同检测方法提供参考。对420头奶牛血清样品用虎红平板凝集试验(RBT)、试管凝集试验(SAT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)3种方法进行布病抗体检测,比较总符合率、假阴性、阳性率及敏感性和特异性。结果:RBT、SAT、ELISA 3种检测方法的总符合率高达到90%以上;以SAT作为判定标准,ELISA检测结果的假阴性率(7.1%)和假阳性率(1.3%)均低于RBT检测结果的假阴性率(14.3%)和假阳性率(3.1%),而ELISA的敏感性(92.3%)和特异性(98.7%)均高于RBT的敏感性(85.7%)和特异性(96.9%)。临床工作中使用RBT或者ELISA进行初步筛选,SAT进行复核确诊,2种或2种以上的检测方法联合运用结果较为理想。     

两种蓝舌病病毒ELISA抗体检测试剂盒的比较

为验证昆明海关检验检疫技术中心等单位联合研发的蓝舌病病毒B-ELISA抗体检测试剂盒(YN BTVB-ELISA)的临床适用性,将YN BTV B-ELISA检测试剂盒与法国ID.VET公司研制的蓝舌病病毒ELISA抗体检测试剂盒(ID.VET C-ELISA)进行比对检测试验。本试验对1 278份牛羊血清进行比对检测,另外对1份已知背景的阳性血清倍比稀释后进行检测,比较两种试剂盒的敏感性。结果显示:YN BTV B-ELISA检测试剂盒与ID.VET C-ELISA试剂盒的符合率、相对敏感性、相对特异性分别是99.92%、99.63%、100%;将两者一致性用Kappa值表示,Kappa=0. 998;YN BTV B-ELISA、ID.VET C-ELISA检测阳性血清效价的最低稀释倍数分别是1:128、1:16。试验表明,YN BTV B-ELISA检测试剂盒与ID.VET C-ELISA检测试剂盒的符合率、相对敏感性、相对特异性均较高,并且YN BTV B-ELISA检测试剂盒敏感性更高,在蓝舌病病毒抗体检测中具有良好的实用价值。     

两种虎红平板凝集试验检测羊布鲁氏菌病效果比较

为比较常规和改良虎红平板凝集试验（RBPT）的羊布鲁氏菌病检测效果,对239份免疫、非免疫场绵羊和阴性绵羊血清进行检测,并通过竞争ELISA试验（cELISA）和试管凝集试验（SAT）进行确诊。结果显示：常规RBPT检测非免疫血清的敏感性为68.85%,特异性为93.55%,与cELISA的符合率为77.17%;检测免疫羊血清的敏感性为75.81%,特异性为73.33%,与cELISA的符合率为75.00%。改良RBPT检测非免疫羊血清的敏感性为91.80%,特异性为70.97%,与cELISA的符合率为84.78%;检测免疫羊血清的敏感性为98.39%,特异性为10%,与cELISA的符合率为69.57%。两种RBPT和cELISA的阴性血清检测结果全部为阴性,符合率为100%。结果表明：改良RBPT法的敏感性要高于常规RBPT法,可以在阳性羊群中筛选到更多抗体效价较低的早期感染动物。但其特异性有一定程度的降低,必须结合SAT、cELISA等特异性高的方法进行确诊。本研究为羊布鲁氏菌病检测方法的选择提供了参考。     

奶牛群布鲁氏菌病感染情况调查与分析

采用虎红平板凝集试验（RBFF）与试管凝集试验（SAT）方法,对A、B两个规模牛群布鲁氏菌病进行检测,阳性率分别为0和6．8％,两种试验结果一致率平均91．3％。相隔25天后对阳性牛再用试管凝集试验方法进行复查,两次试验结果一致率93％。30天后对受威胁牛再次进行全群布病复检,阳性率为1．06％。通过调查,流产牛中的布病感染率45．1％。     

2种小反刍兽疫病毒C-ELISA抗体检测试剂盒的比较分析

小反刍兽疫YN PPRV C-ELISA抗体检测试剂盒由云南省出入境检验检疫技术中心自主研发,采用这一试剂盒与法国IDVET研制的小反刍兽疫病毒C-ELISA抗体检测试剂盒,分别对田间牛羊的661份血清样本进行对比检测试验,并使用YNPPRV C-ELISA抗体检测试剂盒对15份检出的已知背景血清进行批内和批间可重复性试验。结果显示自行研制试剂盒相对国际通用试剂盒ID VET PPRV C-ELISA的特异性、敏感性、符合率分别达到97.96%、97.82%和98.34%,两者一致性用Kappa值表示,Kappa=0.97。批内试验强阳性、弱阳性变异系数为0%～0.05%。结果表明,YN PPRV C-ELISA抗体检测试剂盒的敏感性、特异性、批内和批间重复性均较高,具有高度的可靠性,在小反刍兽疫的诊断检测中具有良好的实用价值。     

陕西省靖边县奶牛布鲁氏菌病血清学调查

为摸清靖边县奶牛布鲁氏菌病流行情况,2017年7—8月对该县全部存栏奶牛进行了布鲁氏菌病血清学调查。共采集98个奶牛养殖场户的1 227份血清样品,分别用虎红平板凝集试验(RBPT)、试管凝集试验(SAT)和竞争酶联免疫吸附试验(C-ELISA)3种血清学检测方法,对其进行布鲁氏菌血清抗体检测。结果显示:奶牛布鲁氏菌病群体阳性率为13.27%,个体阳性率为3.50%,其中散养户个体阳性率较高,为7.52%,远高于我国控制区标准,需重点加强防控。为探讨上述3种检测方法的一致性,对3种检测方法的检测结果进行了对比分析。结果显示:RBPT、SAT和C-ELISA 3种方法检测结果的一致率大于99%,Kappa值大于0.90,表明3种方法具有良好的一致性。因此,在奶牛布鲁氏菌病监测净化过程中,将3种血清学检测方法联合应用,能有效降低出现假阳性和假阴性的概率,准确识别野毒感染牛,从而减少阳性牛处理过程中的误杀和漏杀现象。     

流行性出血病多克隆抗体C-ELISA检测方法的建立

为能简便、快速地进行流行性出血病病毒(epizootic haemorrhagic disease virus,EHDV)抗体监测,采用纯化的6型EHDV抗原包被ELISA板,以豚鼠抗EHDV-2型多克隆抗体作为竞争抗体,建立了检测EHDV群特异性抗体的竞争ELISA(C-ELISA)方法。结果显示:抗原最佳包被浓度为5.12μg·mL-1(1∶10 000),竞争抗体最佳稀释倍数为1∶10 000;通过对各270份阴性和阳性的牛、羊血清检测,确定该检测方法临界值为50%;特异性试验表明该ELISA方法仅能检测出不同血清型EHDV抗体,具有较好的群特异性;对已知抗体效价的阳性血清检测表明,建立的C-ELISA方法敏感性好于血清中和试验(SNT)和琼脂扩散试验(AGID);分别用C-ELISA、SNT、RTPCR和病毒分离试验对监控动物采集的血清和抗凝血样品进行检测,ELISA结果与其他3种方法检测结果对应一致。结果表明本研究建立的C-ELISA为EHDV抗体的检测提供了一种快速、敏感、稳定的方法。     

布鲁氏菌病血清学检测方法优缺点对比

布鲁氏菌病(简称布病)严重危害畜牧养殖业安全和人类健康,而有效的检测方法能够为布病的预防、检测和净化提供技术支持。目前针对布病的血清学检测方法主要包括:布病虎红平板凝集试验(RBT)、试管凝集试验(SAT)、全乳环状实验(MRT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、荧光偏振测定法(FPA)、补体结合试验(CFT)以及琼脂扩散试验(NH-GD)等。不同的血清学检测方法各有优缺点:RBT操作简便,敏感性较高,但环境会对检测结果产生一定影响;ELISA敏感性较高,可一次性检测多个样本,但对仪器要求较高;FPA短时间内能够检测大量样品,操作简单,特异性和敏感性与ELISA相似,但需要专业的荧光偏振仪器;SAT特异性较强,但敏感性不高,操作步骤繁琐;CFT的特异性和敏感性都高于SAT,但试验较为繁琐,耗时长;MRT一般只用于牛奶样本检测,无需采血,特异性强,但对牛奶的质量有一定要求;NH-GD对疫苗免疫样本和野毒感染样本具有鉴别诊断能力,但抗原纯度要求高。因此,RBT、MRT、ELISA、FAP和NH-GD更适合用于布病初筛,而SAT和CFT更加适用于布病复核。未来应探索更多的血清学检测方法,如荧光微球法、半抗原鉴别诊断方法等,以便为布病检测提供更优选择。     

奶牛布鲁氏菌病三种血清学检测方法的比较试验

采集440头奶牛血清,分别采用 RBPT、SAT 和 cELISA 检测布病非免疫抗体情况,结果采用 RBPT 和 SAT检测的阳性率为2.5%,两种方法的结果符合率为100%,采用 cELISA 检测的阳性率为4.1%,其 RBPT 的结果符合率为98.4%。本结果表明 cELISA 具有较高的敏感性。本研究可为本地区奶牛布病防控工作提供依据。     

加拿大诊断牛布病的标准血清学比较试验

作者对诊断牛布病的六种凝集试验和两种补体结合试验方法的特异性、敏感性与相对敏感性作了比较。根据无布病牛群1051份血清的特异性试验:缓冲平板抗原试验(BPAT)为98.9%,标准试管凝集试验(STAT)与平板凝集试验(SPAT)分别为99.2%与99.3%,二巯基乙醇试验(2—MET)为99.8%。在小样本中虎红平板试验(RBPT)、酸性平板抗原凝集反应(CARD)     

补体结合酶联免疫吸附试验方法的建立

为改进免疫学诊断技术的准确性,研究了一种基于补体结合的免疫学检测新技术———补体结合酶联免疫吸附试验（CF-ELISA）。CF-ELISA技术采用酶标记抗菊糖纯化豚鼠补体C3抗体及其酶显色系统作为补体参与反应的指示系统,用ELISA方法进行补体结合试验。经对布氏菌病抗体检测的初步试验结果显示,CF-ELISA技术可检测到0.01 IU的布氏菌病抗体,灵敏度与间接酶联免疫吸附试验（iELISA）相当,是虎红平板凝集试验（RBPT）试管凝集试验（SAT）的5 000倍、补体结合试验（CFT）的10 000倍。对349份确诊布氏菌病感染群牛、羊血清的检测结果显示,CF-ELISAi、ELISA、CFT、SAT、RBPT的阳性率分别为35.82%3、6.39%、31.81%、30.09%、36.1%,CF-ELISA与iELISA、CFT、SAT、RBPT的阳性符合率分别为：98.4%、88.8%、80.0%、90.6%。CF-ELISAi、ELISA、CFT、SAT、RBPT对490份布氏菌病阴性群牛、羊血清的阴性率分别为100%、99.6%、100%、99.4%、99.8%,CF-ELISA与iELISA、CFT、SAT、RBPT的阴性符合率分别为：99.6%1、00%、99.4%、99.8%。研究表明,CF-ELISA是具有高特异性和高敏感性的布氏菌病免疫学检测技术。     

2种蓝舌病ELISA抗体检测试剂盒的比较和分析

为了验证云南出入境检验检疫局检验检疫技术中心自主研发的蓝舌病病毒C-ELISA抗体检测试剂盒(YN BTV C-ELISA)的可应用性,将YN BTV C-ELISA抗体检测试剂盒与美国IDEXX公司研制的蓝舌病病毒VP7蛋白抗体ELISA检测试剂盒对田间牛羊的1 028份血清样本进行对比检测试验,并使用YN BTV C-ELISA抗体检测试剂盒对15份检出的已知背景血清进行批内和批间可重复性试验。YN BTV C-ELISA抗体检测试剂盒相对IDEXX公司蓝舌病病毒ELISA抗体试剂盒的符合率、敏感性、特异性分别是98.44%、98.03%、98.85%,两者一致性用Kappa值表示,Kappa=0.97。批内试验强阳性、弱阳性变异系数在0.23~1.81之间,阴性血清变异系数在3.94~6.64之间,批间试验强阳性、弱阳性变异系数在0.26~2.35之间,阴性血清变异系数在3.55~8.51之间。结果表明:YN BTV C-ELISA抗体检测试剂盒的符合率、敏感性、特异性均较高,具有高度的可靠性、一致性和真实性。YN BTV C-ELISA抗体检测试剂盒的批内和批间有高度的重复性,在蓝舌病的诊断中具有良好的实用价值。