骨髓间充质干细胞对心梗大鼠Desmin和cTnT表达的影响

来源于Wistar大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)经淫羊藿苷(ICA)体外诱导处理,移植到心梗大鼠体内,研究心梗大鼠受损心肌的心肌结蛋白(Desmin)和心肌肌钙蛋白T(cTnT)的表达情况。把分别经ICA(10-7mol/L)和5-aza(10μmol/L)诱导24 h+1周的MSCs,按照4×106的密度植入心梗大鼠体内2周或4周,通过免疫组化检测心肌Desmin和cTnT的表达。与2周组比较,注射4周的心梗大鼠Desmin和cTnT表达更加理想。在体外经10-7mol/L浓度的ICA诱导24 h+1周的MSCs经尾静脉注射治疗4周,能更有效地修复急性心梗大鼠的受损心肌。     

兔骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的研究

旨在研究5-氮杂胞苷(5-Aza)诱导兔骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)向心肌细胞分化的作用及适宜浓度.取兔股骨骨髓,分离并培养骨髓间充质干细胞,用5-Aza定向诱导向心肌样细胞分化.用倒置显微镜、免疫细胞化学法鉴定诱导后的细胞是否能表达心肌特异性蛋白α-横纹肌肌动蛋白(α-actin)和肌钙蛋白T(Cardiac troponin T,cTnT),计算各组细胞向心肌样细胞的诱导分化率.结果,5-Aza诱导MSCs后,细胞明显变宽,诱导1个月后的MSCs呈长杆状,走向趋于一致,相邻细胞间连接较紧密,相互融合.心肌细胞特异性蛋白α-actin和cTnT呈阳性表达,不同浓度的5-Aza诱导的MSCs心肌细胞特异性蛋白的表达率不一样,其中以10 μmol·L-1组表达率最高.5-Aza作用兔MSCs体外培养可以诱导其向心肌样细胞分化,最佳浓度为10μmol· L-1.     

淫羊藿苷对小鼠骨髓树突状细胞分化及成熟的影响

研究淫羊藿苷(ICA)对小鼠髓源树突状细胞(DC)分化及成熟的影响。小鼠骨髓细胞用GM-NSF和IL-4培养5 d,然后用免疫磁珠法纯化DC细胞,试验组分别加入淫羊藿苷2、5、10和20 mg/m L,空白对照组加等量RPMI-1640,阳性对照组加脂多糖(LPS),6组分别同时作用48 h。流式细胞仪检测CDllc、主要组织相容性复合物(MHC)-Ⅱ类分子及协同刺激分子CD80、CD86表达水平和细胞摄取抗原的能力,ELISA检测产生的细胞因子(IL-2、IL-10、IL-12),混合淋巴细胞反应检测细胞提呈抗原的能力。结果表明:4个添加淫羊藿苷组的CD80、CD86、CDllc、MHC-Ⅱ类分子表达水平均明显高于空白对照组,分泌IL-2、IL-10、IL-12能力比空白对照组增加,吞噬FITC-dextran的能力下降,并可促进同种异基因T细胞的增殖。说明淫羊藿苷可以促进体外培养的小鼠髓源DC的成熟,促进DC诱导的免疫应答启动。     

小鼠ESCs诱导分化的研究

<正>胚胎干细胞(ESCs)作为一种全能性细胞,可体外培养无限增殖,并自我更新和向多种细胞分化。对于不能再生的心肌细胞,若能通过诱导ESCs分化为纯度高的心肌细胞,参与心肌的再生及修复,在加快其在临床上的应用及治疗心脏疾病方面具有极其重要意义。淫羊藿苷(ICA)作为一种生物活性较强的中药提取物,可改善心脑血管的血流量、改善心血管系统功能、诱导肿瘤细胞及干细胞分化     

鸡ES细胞体外定向诱导分化特性的研究

旨在探索鸡胚胎干细胞(ES细胞)体外定向诱导的多向分化潜能.分离鸡X期胚盘细胞,体外培养传代,经鉴定后,采用地塞米松(DEX)、β-甘油磷酸钠(β-GP)和维生素C(VitC)诱导ES细胞向成骨细胞分化;采用维甲酸(RA)、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)诱导ES细胞向神经元样细胞分化;采用DEX、胰岛素、IBMX诱导ES细胞向脂肪细胞分化,比较不同浓度组合诱导剂的诱导效果,分别用Von Kossa's染色法、甲苯胺蓝染色法、免疫组化法、油红O染色法和RT-PCR鉴定诱导产生的细胞.结果显示,ES细胞被诱导3～21 d后,分化为成骨细胞,诱导率为40％～72％;被诱导4～7 d后,分化为神经元样细胞,诱导率为71％～84％;被诱导2～21 d后,分化为脂肪细胞,油红O染色阳性,并表达PPARγ基因.结果表明,在体外条件下,ES细胞可被特异的化学物质定向诱导分化为成骨细胞、神经元样细胞和脂肪细胞,具有多向分化潜能.     

淫羊藿苷在猪卵泡体外培养过程中对颗粒细胞凋亡的抑制作用

本试验旨在研究淫羊藿苷(ICA)对猪卵泡体外培养过程中颗粒细胞凋亡的影响。设置不同浓度ICA(0、01、1、10μg/mL)添加组,体外培养猪3~5 mm健康有腔卵泡12 h和24 h后,分别收集各组卵泡颗粒细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡率,RT-PCR检测凋亡相关基因Caspase-3、Bcl-2和Bax mRNA相对表达水平。结果表明,猪卵泡体外培养12 h和24 h,添加1μg/mL ICA组颗粒细胞凋亡率较对照组显著降低(P005),1μg/mL组的Caspase-3、Bax mRNA表达量最低,Bcl-2 mRNA表达量最高,且显著高于对照组(P005)。研究结果提示,ICA在卵泡闭锁过程中可明显抑制颗粒细胞凋亡,这一作用可能主要是通过抑制线粒体凋亡途径而实现的。     

组织蛋白酶对成年绵羊卵母细胞体外发育能力的影响

本研究旨在观察绵羊卵丘细胞中组织蛋白酶( CTSS、CTSB)的mRNA在体外成熟过程中的表达规律,探明卵丘细胞中组织蛋白酶( CTSS、CTSB) mRNA的表达与卵母细胞体外发育能力之间的相关性.采用Real-time PCR方法检测绵羊在体外成熟0、8、16和24 h的卵丘细胞中组织蛋白酶(CTSB、CTSS)的mRNA表达水平,以及在成熟液中添加组织蛋白酶抑制剂(E-64)后卵丘细胞中CTSB和CTSS的mRNA表达量在体外成熟前及体外成熟后的表达水平,并测定在成熟液中添加1、5、10 μmol·L-1 E-64对卵母细胞成熟率、受精率及囊胚发育率的影响.结果,卵丘细胞中的CTSS和CTSB mRNA表达均随着体外成熟时间的增加(IVM 0 h、IVM 8 h和IVM 16 h)呈下降的趋势(P＜0.01).添加5和10 μmol· L-1 E-64组的卵丘细胞中CTSS和CTSB mRNA表达水平较对照组和1 μmol· L-1组均显著性降低(P＜0.01),而5和10μmol·L-1组间的CTSS和CTSB mRNA表达水平无显著差异(P＞0.05).成熟液中添加5和10 μmol·L-1的E-64组的囊胚发育率(26.82％和30.95％)显著高于1 μmol· L-1组和对照组(18.23％和15.63％,P＜0.05),但5和10 μmol·L-1组对卵母细胞的成熟率及卵裂率与1 μmol· L-1组和对照组间无显著性差异(P＞0.05).结果表明,绵羊卵丘细胞中CTSS和CTSB的mRNA表达水平在体外成熟过程中呈下降趋势,其mRNA表达水平与胚胎的发育能力呈负相关;组织蛋白酶特异性抑制剂E-64可下调绵羊卵丘细胞中CTSS和CTSB的mRNA表达水平,并提高卵母细胞随后的体外发育能力.     

补骨脂水提液及补骨脂素对体外培养成骨细胞的影响

为了探讨补骨脂水提液及补骨脂素对体外培养成骨细胞的影响,采用MTT法、PNPP(对硝基苯磷酸二钠盐)法及流式细胞术,分别检测不同浓度的补骨脂水提液(10-4～101 mol·L-1)及补骨脂素(10-8～10-4mol·L-1)对体外培养小鼠成骨细胞增殖、分化及细胞周期的影响.结果表明,10、10-8 mg·ml1补骨脂水提液对成骨细胞有明显的促增殖作用;高浓度(10-4、10-5 mol·L-1)补骨脂素抑制细胞增殖,而低浓度(10-7、10-8mol·L-1)补骨脂素能够促进增殖;10-4、10-6 、10-8 mol·L-1补骨脂素均能使成骨细胞碱性磷酸酶(ALP)活性明显上升;各浓度的补骨脂水提液及补骨脂素使细胞G1期百分比降低,而S期、G2期百分比显著增加.试验结果证实补骨脂水提液及补骨脂素具有植物雌激素样作用,可以促进成骨细胞增殖,促使细胞由G1期向S期、G2期转化;补骨脂素是促进成骨细胞分化的有效成分.     

淫羊藿苷对Wistar大鼠血清中E2浓度的影响

淫羊藿是一味常用的补肾中药.淫羊藿苷(ICA)是淫羊藿的主要有效成分,具有补肾助阳、强健筋骨等作用,能提高动物性欲,增强性功能,但它的作用机理不是十分清楚.试验主要观察淫羊藿苷对成年大鼠不同发情阶段血清中雌二醇(E2)浓度的影响,为淫羊藿促进雌性动物生殖机能提供依据.     

不同方法从小鼠胚胎干细胞分化拟胚体

建立简便有效的胚胎干细胞体外分化研究中制备拟胚体的方法。本实验以3种方法形成拟胚体：滋养层过生长法、悬浮法和胶原酶处理法，并与传统的悬滴法进行了比较。在不同的分化培养体系中以最终分化出搏动的心肌细胞评价形成有分化发育能力的拟胚体的效率。以RT—PCR检测了拟胚体和心肌细胞形成中基因的表达。结果表明，4种方法分化出搏动心肌细胞的比例不同。滋养层过生长法形成拟胚体的比例接近悬滴法．而悬浮法和胶原酶处理形成拟胚体的比例显著低于滋养层过生长法和悬滴法。形态学研究显示，拟胚体发育经历了简单拟胚体阶段到囊状拟胚体或成熟拟胚体。在拟胚体成熟过程中特异性胚层分化发育分子标记HNF-4、Bmp-4与Otx-2表达上调，与心肌细胞分化相关的基因α—MHC、β-MHC、GATA-4及Nkx2．5同样表达上调。表明不同途径可获得不同比例的有发育能力的拟胚体，在体外分化研究中滋养层过生长法则是简便有效的获得正常发育拟胚体的方法。     

Resident Dendritic Cells in the Epidermis: Langerhans Cells, Merkel Cells and Melanocytes

Résumé— En plus des kératinocytes, l'épiderme contient des cellules résidentes de morphologie dendritique. Ce sont principalement la cellule de Langerhans, la cellule de Merkel et le mélanocyte. Ces cellules ont des fonctions diverses dans le tégument. Le mélanocyte assure la pigmentation cutanée et la protection contre les radiations U.V., et pourrait intervenir également dans la modulation de l'inflammation cutanée. La cellule de Langerhans intervient dans la surveillance immunologique des surfaces corporelles ecternes. La cellule de Merkel a des fonctions neuroendocrines. Cet article donne un aperçu de la structure et de la fonction de ces trois importantes populations cellulaires dans la peau. [Resident dentritic cells in the epidermis: Langerhans cells, Merkel cells and melanocytes (Cellules dentritiques résidentes de l'épiderme: cellules de Langerhans, cellules de Merkel et mélanocytes). Resumen— La epidermis contiene, además de los queratinocitos, células résidentes de morfologia dendria dendritica. Estas son principalmente las células de Langerhans, las células de Merkel y los melanocitos. Estas células tienen varias funciones en el integumento. Los melanocitos se encargan de la pigmentación y protección de la piel contra la radiación ultravioleta y tarrtbién participan en la regulación de la inflamación cutánea. Las células de Langerhans ayudan en la regulación inmunológica en la superficie externa. Las células de Merkel tienen funciones neuroendocrinas. Esta revisión da un repaso general a la estructura y función de tres importantes células de la piel. [Resident dendsuitic cells in the epidermis: Langerhans cells, Merkel cells and Melanocytes (Células résidentes en la epidermis: células de Langerhans, células de Merkel y melanocitos). Abstract— In addition to the keratinocytes, the epidermis contains resident cells of dendritic morphology. These are principally the Langerhans cell, Merkel cell and melanocyte. These cells have a number of different functions in the integument. The melanocyte is responsible for skin pigmentation and protection against UV radiation, and may also play a role in the modulation of cutaneous inflammation. The Langerhans cell aids in the immunological monitoring of the body's external surfaces. The Merkel cell has neuroendocrine functions. This review gives an overview of the structure and function of these three important cells of the skin.     

肝脏细胞和胰腺细胞的发育与再生

肝脏和胰腺前体细胞都是由胚胎前肠内胚层细胞发育而来的。脊椎动物中,在高度保守的诱导信号和遗传调节因子作用下,肝脏和胰腺前体细胞特化,并获得器官功能和再生能力。由于对肝脏疾病和Ⅰ型糖尿病有重要的临床价值,肝脏、胰腺的发育和再生机制成为了研究热点。通过对不同模式生物的研究,揭示了进化上保守的诱导信号和转录因子诱导肝脏、胰腺细胞的分化机制,这为干细胞和前体细胞如何诱导分化为肝实质细胞和胰腺β细胞提供了理论依据。     

牦牛输卵管上皮细胞和卵泡颗粒细胞的培养

分离培养牦牛输卵管上皮细胞和卵泡颗粒细胞的目的是克服体外受精中早期胚胎发育阻断,建立有利于牦牛早期胚胎体外发育的共培养体系.采集牦牛输卵管上皮细胞进行原代及传代培养,同时从卵泡液中获取颗粒细胞进行原代培养,培养过程中观察2种细胞的生长方式和形态特点.输卵管上皮细胞贴壁生长时,呈多边形,且呈单层成簇生长.培养144 h～216 h,可形成细胞单层.颗粒细胞贴壁生长时,呈现聚集生长特性,贴壁细胞形状不规则,呈放射状.培养72 h～96 h,形成颗粒细胞单层.     

体细胞重编程为诱导多能干细胞的研究进展

诱导多能干( induced pluripotent stem,iPS)细胞在维持多能的同时能够持续自我更新。由于诱导多能干细胞能够创造病人特异或者疾病特异的多能干细胞,这些细胞对于研究疾病的机理和药物的发现非常有用。作者主要从iPS细胞建立的优化、被重编程的细胞类型、iPS细胞的发育潜能、iPS细胞产生的2种模型及iPS细胞的应用等5个方面进行了综述。     

猪输卵管上皮细胞、颗粒细胞、耳上皮细胞及胎儿成纤维细胞的培养

本文培养了猪输卵管上皮细胞、颗粒细胞、耳上皮细胞、胎儿成纤维细胞等几种细胞 ,比较了几种细胞原代和传代培养的特点 ,发现原代培养时猪耳组织、胎儿组织消化后的单细胞和剩余细胞团块一起培养 ,其生长速度较单个细胞快。 4种细胞中颗粒细胞体积最大 ,生长速度最慢 ,传代密度须保持 2× 10 5 ml以上为宜。     

胰腺干细胞分化为胰岛细胞的诱导方法

糖尿病作为全球范围内的代谢性常见疾病,严重影响着患者的生命质量。常规的药物和胰岛素注射并不足以根治糖尿病。近年来,逐渐发展起来的干细胞的相关研究,有望从根本上治愈糖尿病及其并发症,因而成为治疗糖尿病的研究热点。而利用干细胞医治糖尿病的关键点是明确干细胞的来源及分化为胰岛细胞的诱导方法。论文针对胰腺干细胞存在部位及诱导方法的研究概况做一综述。     

鸡胚原始生殖细胞诱导分化为神经元样细胞的研究

原始生殖细胞（Primordial Germ Cells：PGCs）是指能够发育为性细胞的前体细胞,可作为胚胎干细胞（ES）分离与克隆的一种新型材料,其形态、表面标志、体内外分化潜能及体外培养条件均类似于胚胎干细胞.体外培养过程中,在培养液中加入一定的诱导分化剂,PGCs细胞将发生定向分化.长期以来神经系统损伤和神经退行性病变是临床上难以解决的问题,由于原始生殖细胞具有发育全能性,可以在体外通过对其进行定向诱导,得到特定类型的细胞,这将使原始生殖细胞成为今后细胞替代疗法和组织器官移植的来源.本试验采用不同的诱导剂对PGCs进行诱导,以探讨PGCs细胞向神经细胞分化的适宜条件.     

肥大细胞研究概述

肥大细胞(MC)是速发型变态反应的靶细胞,也是与IgE有关的免疫调节细胞,而且在某种程度上参与先天性和获得性免疫反应.肥大细胞起源于造血干细胞,它分布在人和动物的各个组织器官、脏器黏膜和结缔组织中.但是随着近年来人们对肥大细胞的深入研究发现,MC与肿瘤发生、神经系统功能、生殖系统的周期变化以及寄生虫的排除、高原低氧、血...