油桃组织培养过程中防止褐变的研究

以油桃带芽茎段作外植体,培养于附加6BA0.5mg/L+GA31.0mg/L的MS培养基上。添加不同浓度的活性炭及维生素C附加物成分,研究油桃带芽茎段在芽诱导过程中,各种附加物成分对褐变的影响。试验结果表明:萌发率最高的达83.34%,即S1的防褐化效应最佳。     

库拉索芦荟组培中的褐变现象及防止

[目的]研究库拉索芦荟组培中的褐变现象,寻求防止褐变的有效措施。[方法]以库拉索芦荟茎尖、中部茎段和根茎为外植体,以MS为基本培养基,分别附加NAA0.1 mg/L和不同浓度的6-BA(1.0、1.5、2.0、3.0、4.0 mg/L),研究不同外植体类型、激素浓度以及培养温度、活性炭等因素对芦荟组培褐变的影响。[结果]用库拉索芦荟茎尖做外植体,MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.1 mg/L做培养基,芦荟组培褐化程度较轻;培养基中加入活性炭500.0 mg/L,环境温度控制在25℃有利于减轻褐变。[结论]茎尖是最佳的外植体,适宜的6-BA浓度(2.0 mg/L)可抑制褐变,添加活性炭和适宜的培养温度均能防止褐变死亡的发生。     

防褐剂对牡丹组培褐化发生、组培苗生长和增殖的作用

牡丹组培中褐化现象的发生,影响了组培苗的生长、增殖和组培过程的进行。该文研究了活性炭、硝酸银、PVPP和维生素C 4种防褐剂对牡丹品种‘乌龙捧盛’组培中褐化控制的作用及对组培苗生长和增殖的影响。结果表明:褐化集中发生在转接后4d内。活性炭能有效控制褐化,但长时间处理会抑制组培苗的生长和增殖;继代培养初期在含活性炭2.0 g/L的培养基中进行4 d短期处理,不仅能有效控制褐化,还在一定程度上促进了组培苗的生长和增殖。硝酸银1.0～8.0 mg/L能明显减轻褐化,其中2.0 mg/L的效果最好并能显著促进增殖;8.0 mg/L时组培苗生长量最大。PVPP能部分控制褐化,1.0 g/L效果较好;低浓度的PVPP促进组培苗生长,高浓度时促进增殖。维生素C控制褐化的效果不佳,且易导致组培苗玻璃化。综合分析认为:牡丹品种‘乌龙捧盛’继代转接时,先在添加活性炭2.0 g/L的培养基中培养4 d,然后转入不含活性炭的培养基中,能有效控制褐化和避免活性炭对生长和增殖的负面影响;在培养基中加入硝酸银2.0 mg/L,能在有效控制褐化的同时,促进组培苗生长与增殖,推荐在牡丹组培中应用。      

库拉索芦荟组织培养褐化现象的抑制研究

褐化是芦荟组织培养中的普遍现象,严重影响组织培养的效果。以库拉索芦荟的茎段和叶片为外植体,研究了5种防褐剂活性炭、硝酸银、维生素C、L-谷氨酰胺和聚乙烯吡咯烷酮对愈伤组织诱导中褐化现象的抑制作用。结果表明,5种防褐剂都具有抑制外植体褐化的作用,其中15mg/L的AgNO3是最合适的防褐剂,其外植体褐化程度最轻,愈伤组织诱导率较高且愈伤组织生长良好。     

蓖麻花药愈伤组织增殖及防褐化研究

褐化很大程度上限制了蓖麻花药增殖培养研究,本研究通过改变蓖麻花药愈伤组织的培养基成分、添加防褐剂来建立高效增殖体系,最终确定蓖麻花药愈伤增殖最佳培养基为1/2MS+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L+NAA 0.3 mg/L+ZT 5.0 mg/L+脯氨酸750 mg/L+酸性水解酪蛋白750 mg/L+6-BA 2.0 mg/L+维生素C 400 mg/L+活性炭0.6 mg/L,pH值=5.8。     

不同外源激素及活性炭的添加对白芨增殖的影响

[目的]研究不同外源激素配比以及不同量的活性炭添加对白芨丛生芽增殖的影响,以实现不同外源激素对白芨增殖的配比优化。[方法]以MS为基本培养基,通过细胞分裂素(6-BA)和生长素(NAA)的不同配比添加,研究其对白芨组培苗增殖的影响。[结果]当6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L时,白芨增殖系数最高,达4.00;另外,活性炭添加可防止白芨苗褐化,但当添加量为0.20 g/L时,不仅有效地抑制了白芨组培苗的褐化,而且对白芨的生长分化影响最小。[结论]适合白芨增殖的培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA0.2 mg/L,活性炭添加量为0.20 g/L。     

两种芦荟的组织培养研究

以中国芦荟和木立芦荟为试材,取其茎段和叶为外植体研究芦荟的组培快繁。结果表明：①外植体以茎段为佳。②适当浓度的NAA对荟出芽（0.2mg/L)和长根（0.5mg/L)都有明显的促进作用,而浓度过高则抑制出芽和根的分化。且培养基中加入NAA有利于壮苗。③初代培养和继代培养的培养基均以MS＋BA5mg/L NAA0.2mg/L 活性炭1.5‰最优,中国芦荟的繁殖系数大于木立芦荟。木立芦荟生根培养基以MS＋BA4mg/L NAA0.5mg/L 活性炭3‰为佳,中国芦荟生根培养基以1／2MS＋NAA0.5mg/L IBA0.5mg/L为佳。     

两种芦荟的组织培养研究

以中国芦荟和木立芦荟为试材,取其茎段和叶为外植体研究芦荟的组培快繁.结果表明:①外植体以茎段为佳.②适当浓度的NAA对芦荟出芽(0.2 mg/L)和长根(0.5 mg/L)都有明显的促进作用,而浓度过高则抑制出芽和根的分化.且培养基中加入NAA有利于壮苗.③初代培养和继代培养的培养基均以MS+BA 5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+活性炭1.5%最优,中国芦荟的繁殖系数大于木立芦荟.木立芦荟生根培养基以MS+BA4 mg/L+NAA 0.5 mg/L+活性炭3‰为佳,中国芦荟生根培养基以1/2MS+NAA 0.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L为佳.     

鸡树条荚蒾组培再生体系的建立

采用正交试验设计,研究不同激素配比对鸡树条荚蒾茎段和叶片组培再生的影响,建立鸡树条荚蒾组培再生体系。结果表明:适于茎段分化的培养基为:WPM+2 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA+20 g/L蔗糖,分化率为93.66%;适于叶片愈伤组织诱导的培养基为:WPM+2 mg/L6-BA+0.1 mg/L IBA+2 mg/L 2,4-D,诱导率为93.33%,添加50 mg/L维生素C、50 mg/L活性炭可使叶片的褐化现象减轻;适于生根的培养基为:WPM+1.5 mg/L IBA+1 g/L活性炭,生根率为94.62%。     

芦荟组织培养技术试验

以芦荟3个主栽品种的茎段，顶芽，花萼和叶片为外植体进行无菌培养，结果表明，（1）诱导愈伤组织；中国芦荟以顶芽，茎段的愈伤组织发生率最高，其适宜培养基为Ms 6-BA1.5mg/L IBA0.1mg/L；库拉索芦荟的顶芽，茎段和花萼均有较高的愈伤组织发生率。其适宜培养基为Ms Kt1.0mg/L NAA0.2mg/L；木立芦荟的茎段，顶芽以Ms 6-BA2.5mg/L NAA0.2mg/L培养为较佳。（2）芽的分化与继代培养基；中国芦荟以Ms 6-BA2.0mg/L NAA0.2mg/L较佳；库拉索芦荟以Ms 6-BA2.0mg/L IBA0.1mg/L为较适；本立芦荟以Ms 6-BA2.5mg/L NAA0.1mg/L为较好。（3）生根培养基；中国芦荟以Ms IBA2.5mg/L NAA0.2mg/L，库拉索芦荟以Ms IBA0.1mg/L NAA0.01mg/L，木立芦荟以Ms 6-BA0.5mg/L IBA0.2mg/L为较适。     

影响芦荟离体繁殖系数的几个因素研究

研究了基因型种类、接种方式以及外源激素对芦荟不定芽发生以及成苗率的影响。结果表明,库拉索芦荟不定芽发生率比木剑芦荟、中国芦荟低。若将其小苗采用1/2纵切方式接种于含2mg/mL 6-BA的MS培养基上,可以明显促进诱导不定芽的发生。在继代培养中,需降低6-BA的浓度至1 mg/mL。含0.3mg/mL NAA的1/2MS培养基最适于根的发生与生长。而采用草炭+蛭石(2∶1)混合基质可以明显提高试管苗的移栽成活率。     

微波法提取木立芦荟黄酮类化合物的工艺研究

[目的]研究木立芦荟中黄酮类化合物的微波法提取工艺。[方法]以黄酮类化合物提取率为指标,采用单因素试验和正交试验相结合的方法,对木立芦荟中黄酮类化合物的微波法提取工艺进行优化。[结果]微波法提取黄酮类化合物的最佳工艺条件为料液比1∶50,乙醇浓度80%,微波功率560 W,微波处理时间为40 s。在此条件下,测得的提取率为5.604%。[结论]与乙醇浸提法相比,微波法具有提取时间短、乙醇用量低、提取效率高的优点,是芦荟黄酮类化合物的理想提取方法。     

农杆菌介导法将bFGF基因转入木立芦荟的初步研究

利用农杆菌介导法将bFGF基因导入木立芦荟中,通过对农杆菌介导芦荟遗传转化影响因素的分析,建立了优化的芦荟转化体系.用继代培养获得的粗壮的芦荟单株茎段作为转化外植体,以OD=0.55～0.68的EHA105农杆菌工程菌液侵染25min,在MS+蔗糖10g/L+100～mol/L乙酰丁香酮的共体培养基上培养3d,在MS+...     

芦荟组织培养体系的建立

[目的]建立一个比较合理和完善的芦荟组织培养体系,为大规模快速生产芦荟组织培养苗提供依据。[方法]以木立芦荟和中国芦荟的叶、茎尖和根为外植体,接种于不同激素配比的MS和N6固体培养基上进行组织培养,研究不同培养基对芦荟组织培养的影响。[结果]在不定芽诱导过程中,茎尖在培养基MS＋6-BA 3.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L上的芽诱导率最高。在诱导生根过程中,以1/2MS为基本培养基,NAA浓度在0.2～0.3 mg/L时芦荟组织不定芽生根效果较好。[结论]芦荟组培效果受到遗传基因型和外在培养条件的双重制约。     

HPLC法测定芦荟中芦荟苷的含量及其色谱图特征分析

[目的]建立芦荟中芦荟苷含量的HPLC测定方法,测定几种芦荟中芦荟苷的含量,并分析这几种芦荟色谱图的特征,从而将5种芦荟区分开来。[方法]采用超声振荡提取法制备样品溶液,并用HPLC测定芦荟苷的含量,得到芦荟色谱图。[结果]芦荟苷的线性回归方程为Y=13.168 4X-2.855 4,R=0.999 8,表明在2.92～46.67μg/ml范围内,芦荟苷浓度与峰面积的线性关系良好,平均回收率为108.0%;5种芦荟苷的含量分别为:木立芦荟614.3μg/g、海虎兰212.5μg/g、库拉索芦荟135.3μg/g、华芦荟72.92μg/g和不夜城芦荟2.622μg/g。库拉索芦荟在3～5 min出现的双峰左边的峰高稍低,但相差不明显,双峰基本达到基线分离,在其后再没有明显的色谱峰。该特征仅与木立芦荟的色谱图相似,与华芦荟、不夜城芦荟和海虎兰色谱图相差较远,较易区分。[结论]不同品种芦荟中芦荟苷的含量不同;其中木立芦荟中芦荟苷的含量最高;所确立的检测方法简便,准确,快速。图谱分析可将这5种芦荟区分开来。     

木立芦荟的试管繁殖技术

探讨了木立芦荟的试管繁殖技术过程,从初代培养的建立、取材与消毒、培养条件、扩大繁殖、生根与壮苗、试管苗的移栽与管理几个方面进行了详细的论述,为进行木立芦荟的试管繁殖提供参考。     

微量元素铁对芦荟根系活力及活性物质含量的影响

[目的]研究微量元素Fe对库拉索芦荟根系活力及芦荟苷、芦荟大黄素含量的影响。[方法]采用砂培试验。[结果]Fe2＋对芦荟的根系活力及体内芦荟苷、芦荟大黄素含量均有影响。当Fe2＋浓度为1.0×10-3mol/L时,芦荟根系活力最高;Fe2＋浓度为5.0×10-4mol/L时,芦荟苷和芦荟大黄素含量最高。随着外源Fe2＋浓度的提高,芦荟体内Fe2＋含量不断升高。[结论]该研究可为生产出活性成分含量较高的芦荟品种提供科学依据。     

木立芦荟挥发油成分GC-MS分析

用气相色谱-质谱法对木立芦荟的挥发油进行化学成分分析.采用水蒸气蒸馏法从木立芦荟中提取挥发油,用归一化法测定其百分含量,并用气相色谱-质谱法对化学成分进行鉴定.共鉴定了19种成分,占挥发油总量的63.66％以上.本方法稳定可靠、重现性好,适用于中药挥发油的化学成分分析.     

日本芦荟试管快速繁殖研究

以日本芦荟的茎段为外植体进行试管培养,经试验筛选出各培养段最适宜的培养基为:(1)腋芽萌生,MS+6-BA 2.5 mg/L+IBA 0.3 mg/L;(2)丛生芽的分化与继代,MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA 0.3 mg/L;(3)生根,1/2MS+IBA2.0 mg/L.炼苗成活的关键是适宜的培养土、温度和较高湿度.本试验经炼苗阶段,成活率达100%.