甘薯糖蛋白的免疫调节作用研究

初步研究了经ＤＥＡＥ５２和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ１００柱层析纯化的北京２号薯糖蛋白的免疫的免疫调节作用。结果表明甘薯糖蛋白浓度达５０μｇ／ｍｌ时可促进ＰＨＡ人外周血淋巴细胞转化,１００μｇ／ｍｌ或者１５０μｇ／ｍｌ时间可显著提高ＰＨＡ刺激的人外周血淋巴细胞转化,刺激指数分别达到６．５和４．５（Ｐ〈０．０５）。腹腔注射甘薯糖蛋白８０ｍｇ／ｋｇ．ｄ可促进小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能,吞噬指数和吞噬百分数均高     

草莓伪温和黄边病毒抗血清制备及血清学检测技术研究

将提纯的草莓伪温和黄边病毒（ＳｔｒａｗｂｅｒｒｙｐｓｅｕｄｏｍｉｌｄｙｅｌｌｏｗｅｄｇｅｖｉｒｕｓＳＰＭＹＥＶ）作抗原免疫家兔，获得效价较高的抗血清，经ＳＤＳ－对流免疫电泳测其效价为１：１２８．四点疫吸附固定法检测ＳＰＭＹＥＶ效果甚理想，可检测到微量病素，提纯病毒浓度低至０．０５μｇ／ｍｌ仍有效果．酶联免疫吸附测定法检出灵敏度也相当高，当病毒浓度为０．１μｇ／ｍｌ时及病叶汁液稀释至１０２４倍时，仍呈阳性反应．免疫电镜技术检视，ＳＰＭＹＥＶ抗血清能清晰地”捕获”同源病毒，并且有装饰作用，抗血清以稀释为１：５００时“捕获”病毒粒子最多．     

树脂法提取农抗S—921研究

本文研究了不同树脂对Ｓ－９２１抗生素的吸附性能，并对吸附性能优良的树脂进行了洗脱性能比较，结果为：Ｚ１树脂对Ｓ－９２１抗生素具有较好的吸附及洗脱性能，对发酵液中Ｓ－９２１抗生素的吸附最量大为８．９×１０＾４μｇ／ｍｌ，Ｚ１树脂最佳的洗脱剂为洗脱剂７，以洗脱剂７进行动态洗脱，流速为４．４ｍｌ．ｃｍ＾－２．ｍｉｎ＾－１，洗脱液浓度最高达８×１０＾４μｇ／ｍｌ，洗脱液体积为树脂用量的３倍，其洗脱率达９８     

ME 49株弓形虫速殖子对昆明小鼠的致病性

【目的】通过ME 49株弓形虫速殖子对小鼠致病性的研究,了解该虫株速殖子的毒力特点,为深入研究弓形虫弱毒株的致病特征提供研究基础。【方法】以ME 49株弓形虫速殖子为研究对象,用血球计数板将速殖子梯度浓度稀释为10~0,10~0-10~6个/mL,腹腔注射昆明小鼠,死亡小鼠的组织直接涂片检测肺脏及肠系膜淋巴结速殖子或大脑组织中弓形虫包囊数量,肺脏常规石蜡切片进行H.E及IHC染色,统计涂片和MAT方法的结果分析弓形虫的感染情况,并统计小鼠的感染率和生存率。【结果】0-60 DPI,死亡小鼠组织涂片显微镜检查和MAT法检测小鼠血清中弓形虫IgG抗体结果显示,10~0、10~0、10~1及≥10~2速殖子浓度组小鼠的弓形虫感染率分别为0、20%、60%及100%。10~4速殖子浓度组小鼠有3只分别在12、16、19 DPI死亡;10~5速殖子浓度组小鼠有2只在11 DPI死亡,1只在8 DPI死亡;10~6速殖子浓度组小鼠有2只在9 DPI死亡,在7、8、10 DPI各死亡1只,感染弓形虫的小鼠生存率为62.07%(18/29)。对死亡小鼠的肺脏和肠系膜淋巴结直接涂片,显微镜镜检可见弓形虫速殖子;H.E及IHC染色,肺脏可以观察到弓形虫包囊及弓形虫抗原。对10~0、10~0、10~1及10~2处死小鼠的大脑组织研磨镜检,结果显示10~0和10~0感染组阳性小鼠大脑中弓形虫包囊数均为0;10~1感染组阳性小鼠大脑中弓形虫包囊数分别为60、100和0;10~2感染组阳性小鼠大脑中弓形虫包囊数量分别为20、40、40、60和0。60-600 DPI,10~3速殖子浓度组小鼠在184、435和569 DPI各有1只死亡,大脑中未检测到弓形虫包囊;10~5速殖子浓度组小鼠1只在188 DPI死亡,大脑包囊数量为20,其余小鼠存活时间为590 DPI。【结论】本研究探讨了ME 49株弓形虫速殖子对昆明小鼠的致病性,≥10~2速殖子浓度可引起小鼠100%感染,10~6速殖子浓度可引起小鼠100%死亡,小鼠死亡的时间为7-19 DPI,感染小鼠生存率为62.07%(18/29),大脑包囊成囊率为53.85%(7/13),平均包囊量为0-53个包囊/小鼠大脑,最长存活时间590 DPI。ME 49株弓形虫速殖子对小鼠致病性较弱,大脑可见弓形虫包囊,高浓度速殖子可引起小鼠死亡。     

蛋白激酶C抑制剂Staurosporine对血小板聚集,蛋白磷酸化和？…

目的：进一步研究蛋白激酶Ｃ抑制剂Ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ在血小板聚集，肌动蛋白聚合中的作用，方法：以＾３２Ｐ－Ｎ２ＨＰＯ４标记血小板；以血小板集仪测定血小板聚集，以ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分离蛋白质，进行放射自显影，以Ｔｒｉｔｏｎ－Ｘ－１００抽提法沉淀骨架蛋白，结果：（１）１μｍｏｌ／ＬＳｔａｕｏｐｓｏｒｉｎｅ完全抑制０．５Ｕ／ｍｌ凝血酶成１０μｍｏｌ／ＬＰＭＡ诱导的血小板聚集，大部分抑制２０μｍｏｌ／     

黄瓜花叶病毒（CMV）高效价抗血清的制备及其在ELISA中的应用

以提纯的ＣＭＶ作为抗原，经静脉注射，肌肉注射和足垫注射等对家兔进行免疫，获得高效价的抗血清（琼脂双扩散效价为１／２５６），在间接ＥＬＩＳＡ试验过程中，用ＰＢＳ＋０．０５％，ＴｒｉｔｏｎＸ－１００作为样本研磨液，用１：１６０００稀释度的ＣＭＶ抗血清或２μｇ／ｍｌＣＭＶ抗血清的ＩｇＧ作为第一抗体，用１：１０００稀释度的冻干辣根过氧化物酶标记的羊抗兔的ＩｇＧ作为第二抗体，以待测样本光密度值与阴性对照光密     

诸葛菜基因启动子的分离

利用启动子探针型载体ｐＳＵＰＶ２首次从诸葛菜总ＤＮＡ中克隆了７个具有启动功能的ＤＮＡ片段，转化Ｅ．ｃｏｌｉ表明最高卡那霉素（ｋｎａ）抗性为１４０μｇ／ｍｌ，最低为２０μｇ／ｍｌ。含启动子片段的７个重组质粒子分别命名为ｐＳＵＰＺ１－７，Ｓｏｕｔｈｒｅｎ印迹表明ｐＳＵＰＺ６对Ｋｎａ的抗性功能来源于诸葛菜的１０ｋｂ，５ｋｂ和３．９ｋｂ片段。     

不同理化处理对苏云金芽胞杆菌质粒稳定性的影响

研究了用溴化乙锭诱变、升温和添加ＳＤＳ等３种处理对苏云金芽胞杆菌质粒稳定性的影响。结果表明,用４．５μｇ／ｍｌ的溴化乙锭处理野生菌株ＹＢＴ－１５２０和ＨＤ－５６７,对其携带ＩＣＰｓ基因的质粒的稳定性无影响。升温至４２℃时,野生菌株ＹＢＴ－１４６３和ＹＢＴ－９６０３的携带ＩＣＰｓ基因的质粒分别有０．４１％和０．３７％发生丢失,一些小质粒（〈２ｋｂ）也发生丢失。继续升温至４４℃和４６℃培养变株ＢＭＢ１     

水牛卵母细胞孤雌激活方法研究

对体外成熟（ＩＶＭ）２７￣２８ｈ的水牛卵母细胞经７％酒精（ＥＨ）激活处理５ｍｉｎ后,置入不同浓度的（０,０．６２５μｇ／ｍｌ,１．２５μｇ／ｍｌ,２．５μｇ／ｍｌ,５μｇ／ｍｌ）放线功酮（ＣＨＸ）培养１０ｈ,而后固定染色或在胚胎培养液（ＣＭ）中继续培养检查激活分裂率。结果培养在０．６２５μｇ／ｍｌ和１．２５μｇ／ｍｌ ＣＨＸ的卵母细胞的激活分裂率和总原核形成率明显高于对照组（Ｐ〈０．０５）,而培养     

几种不同免疫程序制备抗弓形虫高免血清的比较

用弓形虫血清抗体阴性的健康家兔,以4种不同的免疫程序皮下接种弓形虫速殖子裂解抗原制备高免血清.研究结果表明,先以完全弗氏佐剂和不完全弗氏佐剂分别进行一免和二免,然后再以抗原进行三免或四免制备高免血清,其抗体效价高达1:4096(IHA),与每次都使用抗原的传统免疫程序制备的抗体效价相当,但所用抗原剂量减半,该法优于另外2种免疫程序.     

口服富硒蛋对人血清抗氧化活性影响分析

本文报道通过口服富硒蛋后，人血清硒（Ｓｅ）、发硒（Ｓｅ）、血清谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ—Ｐｘ）、过氧化脂质（ＬＰＯ）等指标的变化，以进一步探讨Ｓｅ对人体抗氧化、清除自由基作用的影响。实验结果表明：所有观察对象服硒蛋３个月后，血清Ｓｅ、发Ｓｅ、ＧＳＨ—Ｐｘ均明显升高，血清硒平均值由原来０．０８８μｇ／ｍｌ上升至０．１４４μｇ／ｍｌ，发硒由０．１９５ｍｇ／ｋｇ至０．５１４ｍｇ／ｋｇ，ＧＳＨ—ＰＸ活力由１４７．１Ｕ／Ｌ升至１８８．５Ｕ／Ｌ，前后比较有极明显差异（Ｐ＜０．０１），ＧＳＨ—Ｐｘ／ＬＰＯ前后比较亦有极明显差异异（Ｐ＜０．０１），硒对脂代谢调节规律得以肯定。     

电穿孔法用于大肠杆菌和苏云金杆菌的转化及质粒消除

利用电脉冲交质粒ｐＨＴ３１０１和ｐＨＥ－４Ｄ分别转入大肠杆菌和苏云金杆菌,结果显示大肠杆菌ＤＮＡ的转化率为１０＾４－１０＾５．μｇ＾－１,苏云金杆菌的ＤＮＡ的转化率为１０＾２－１０＾３．μｇ＾－１,同时利用该法消除Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ菌株ＴＧ１和Ｂｔ菌株ＩＳＰ７８／１１中的ｐＨＴ３１０１质粒,消除率分别为８８．６％和６６．４％。比较了转化和质粒消除的条件并构建了一个工程菌。     

夹心ELISA法检测小鼠单克隆抗体试验

本试验用羊抗鼠抗体包被酶标板，建立一种用于多种含鼠抗成分的ＭｃＡｂ的检测方法。用１：１０００（２３．３μｇ／ｍｌ）的羊抗鼠抗体包被４０孔酶标板做夹心ＥＬＩＳＡ试验，检测抗沙门氏菌Ｈ抗原杂交瘤上清，其结果与用抗原包板的间接ＥＬＩＳＡ测得的阳性具有很高的符合率，可用于单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的初步检测。     

双峰驼类人乙型肝炎的检测

用放射免疫分析方法测定了４５峰双峰驼血清样品中类人乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）、乙型肝炎表面抗体（抗－ＨＢｓ）、乙型肝炎核心抗原（ＨＢｃＡｇ）、乙型肝炎核心抗体（抗－ＨＢｃ．ＩｇＭ）、乙型肝炎ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）和乙型肝炎ｅ抗体（抗－ＨＢｅ）,结果仅检测到１例抗－ＨＢｓ阳性样品,总阳性率为２．１１％,其ＳＸ／ＮｃＸ＝１２．２３３。     

山羊小腔卵泡卵母细胞的体外受精试验

抽吸法采集２￣６ｍｍ山羊卵巢大腔卵泡卵母细胞后，以１．５ｍｍ间距纵横切割卵巢，回收（２ｍｍ小腔卵泡卵母细胞。随机测量其直径为１２９．８６±１８．８４μｍ。将２１８枚卵丘细胞层致密完整的卵母细胞分别培养于含颗粒细胞并用２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ缓冲的①ＴＣＭ１９９＋１％ＧＳ，②①＋ＦＳＨ，ＬＨ（１０μｇ／ｍＬ）＋１７β－Ｅ２（１μｇ／ｍＬ），③②＋ＩＴＳ（５μｇ／ｍＬ Ｉｎｓｕｌｉｎ，Ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉ     

二种分离液对牛腔前卵泡卵母细胞体外培养效果观察

本实验通过２种无血清分离液,采用机械方法分离牛腔前卵泡卵母细胞,体外培养７ｄ,观察其体外培养效果结果表明,Ｍ１９９Ｈｅｐｅｓ组腔前卵泡卵母细胞发育率为６３．４％,ＰＢＳ组为３０．３％,二者差异极显著（Ｐ＜０,０１）;第７ｄ 卵泡平均增长直径以Ｍ１９９Ｈ＿组好于ＰＢＳ组,分别为（２８． ７± ２１． ２）μ和（２１． ６± ８． ０）μｍ,次级卵泡（Ｓｃ）增长速率大于初级卵泡（Ｐｍ）     

华威Ⅰ号消毒剂对鱼的急性毒性和杀菌试验

试验结果表明,华威Ⅰ号消毒剂对鲫鱼的半数致死浓度ＬＣ５０为１．３９μｇ／ｍｌ,９５％平均可信跟为１．２８￣１．５０μｇ／ｍｌ,最低致死浓度为０．６７μｇ／ｍｌ。对炭疽芽胞杆菌芽胞的最小杀菌浓度为２５０μｇ／ｍｌ（２０ｍｉｎ）。     

新显色剂meso—四（3—溴—4—羟基—5—甲氧基苯）卟啉分光光度法测定痕…

本研究了在混合表面活性剂ＳＤＢＳ和聚乙二醇辛基苯基醚（ＯＰ）共存下，ｍｅｓｏ－四（３－溴－４－羟基－５－甲氧基苯）卟啉Ｔ（ＢＨＭＯＰ）Ｐ与钯的湿色反应，并以该反应为基础建立了高灵敏度的痕量钯的光度分析法。钯与该显色剂形成１：２的配合物，其表观摩尔吸吸光系数在４２２ｎｍ处为１．２７×１０＾５Ｌ·ｍｏｌ＾－１·ｃｍ＾－１。钯量在０．０－１２μｇ／２５ｍｌ范围内服从比尔定律，本法用于合成样品中钯的测定     

正红菇菌丝液体培养及其与子实体成分分析

正红菇（ＲｕｓｓｕａｌｖｉｎｏｓａＬｉｎｄｂｌ）液体培养条件的筛选试验结果表明,选用１％葡萄糖,０．５％黄豆粉,０．１％ＫＨ２ＰＯ４,０．０５％ＭｇＳＯ４．７Ｈ２Ｏ配制培养基,在ｐＨ６．２的条件下发酵６ｄ,可达到最高菌线产量２．９８９ｇ／Ｌ,对正红菇子实本,液体培养所得菌丝体化学成分进行测定,结果表明,菌丝体的粗蛋白,氨基酸及微量元素的含量与子实体接近,但水溶性粗多糖的量只有子实体的１／１０。     

弓形虫棒状体蛋白15的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备

【目的】克隆弓形虫（Toxoplasma gondii）RH虫株速殖子的棒状体蛋白15(ROP15)基因,原核表达、纯化重组蛋白,并制备多克隆抗体。【方法】根据GenBank登录的弓形虫RH株ROP15(DQ096561.1)基因序列设计了1对引物,以提取的弓形虫RH虫株速殖子RNA为模板,通过RT-PCR获得该虫株的ROP15基因,将该基因连接至原核表达载体pGEX-4T-1上,获得重组质粒pGEX-4T-ROP15,测序结果与预期结果一致;转化BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导获得重组融合蛋白,运用亲和层析法纯化可溶性ROP15重组蛋白,SDS-PAGE对表达和纯化的目的蛋白进行分析。用纯化的ROP15重组蛋白免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,运用Western blot分析特异性。【结果】成功克隆了弓形虫RH虫株速殖子ROP15基因,大小为924 bp;菌液PCR和酶切鉴定表明重组质粒pGEX-4T-ROP15构建成功,获得了约59 ku的可溶性融合蛋白表达产物;以纯化的可溶性ROP15重组表达蛋白为抗原制备兔源性抗血清,Western blot显示该多克隆抗体与ROP...