虾青素对小鼠肝脏原代细胞氧化应激的影响

【目的】研究虾青素对过氧化氢(H_2O_2)诱导小鼠肝脏原代细胞产生氧化应激的影响。【方法】原位二步灌流法提取ICR小鼠的肝脏原代细胞,用丙二醛(Malondialdehyde,MDA)作为指标、采用H_2O_2处理建立氧化应激模型。采用流式细胞仪测定细胞中活性氧(Reative oxygen species,ROS)含量及凋亡水平变化,生物化学法测定细胞中MDA和谷胱甘肽(Glutathione,GSH)的含量、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)的活性,用荧光定量PCR检测抗氧化酶SOD、GSH-px mRNA的相对表达量,Western-blot检测细胞核中Nrf2蛋白相对表达量。【结果】使用5μg·mL~(–1)虾青素预保护细胞3 h,10μmol·L–1H_2O_2刺激3 h的情况下氧化应激模型效果最好。虾青素降低了H_2O_2诱导后小鼠肝脏原代细胞的细胞凋亡率以及ROS、MDA和GSH含量,提升了SOD、GSH-px的活性以及SOD、GSH-px的mRNA相对表达量,抑制了Nrf2蛋白的核转移。【结论】虾青素对H_2O_2诱导产生氧化应激的肝脏原代细胞具有保护作用。     

虾青素对脂多糖诱导的RAW264.7细胞炎症反应的影响及机制

【目的】研究虾青素(AST)对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞炎症反应的影响及作用机制,为将虾青素应用于炎症治疗奠定理论基础。【方法】采用不同浓度梯度的脂多糖及虾青素对RAW264.7细胞进行不同时间段的处理,通过MTT法确定最佳处理浓度和时间,对细胞进行最佳处理后,用ELISA法、荧光定量PCR技术和Western blot法分别检测细胞炎症因子的分泌量、mRNA相对表达量和蛋白相对表达量。【结果】100μmol/L虾青素和2μg/mL脂多糖处理3 h的RAW264.7细胞活力处于峰值。与对照组相比,脂多糖组RAW264.7细胞中TNF-α、IL-6和Caspase-1的分泌量分别降低了12.83%、9.66%和20.80%(P0.05),脂多糖对于TLR4/MyD88/NF-кB通路相关蛋白表达有促进作用,其中,TLR4和NF-кB p65蛋白相对表达量分别提高了195.40%和226.95%(P0.05);与LPS组相比,AST+LPS组中虾青素对炎性因子的分泌及mRNA表达有抑制作用,TLR4、MyD88和NF-кB p65蛋白相对表达量降低了54.99%、45.70%和28.20%(P0.05)。【结论】虾青素预保护能抑制TLR4/MyD88/NF-кB通路相关蛋白的表达,进而缓解脂多糖刺激RAW264.7细胞产生的炎症反应。     

虾青素对脂多糖(LPS)诱导奶牛子宫内膜细胞凋亡的影响

子宫内膜炎是奶牛养殖业常见的一种繁殖疾病,目前主要利用抗生素进行治疗.本试验利用已成功构建的子宫内膜细胞炎症模型,研究添加1μmol/L虾青素对脂多糖(LPS)诱导奶牛子宫内膜细胞调亡的影响,处理24 h后利用流式细胞仪检测细胞的凋亡比例,利用荧光定量RT-PCR和Western Blot分别检测Bax、Bcl-2、F...     

地鳖肽对四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤的保护作用

【目的】探明地鳖肽对四氯化碳(CCl_4)诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用。【方法】取60只小鼠分溶剂组、模型组(CCl_4)、地鳖肽组、阳性药物组,灌服不同剂量地鳖肽提取液和生理盐水及保肝药,每天1次连续7d,末次给药2h后除溶剂组小鼠外都腹腔注射0.1%CCl_4,制备血清和肝组织匀浆,ELISA和PCR等方法检测血清中ALT和AST活力,肝组织中SOD、GSH-Px、CAT活力和MDA含量,组织中TNF-α、IL-6和iNOS含量及mRNA表达;显微镜观察肝组织结构。【结果】与模型组比较,地鳖肽组小鼠血清中ALT和AST活力极明显降低,肝组织中抗氧化酶SOD、CAT、GSH-Px活力显著提高,但其MDA含量明显降低;肝组织中TNF-α、IL-6和iNOS含量极显著降低及mRNA表达量明显下调;模型组小鼠肝组织结构损伤明显,而地鳖肽组小鼠肝组织结构损伤明显缓解。【结论】地鳖肽对CCl_4诱导的小鼠急性肝损伤有保护作用。     

虾青素的开发与应用

虾青素（ａｓｔａｘａｎｔｈｉｎ）化学名称为３,３′ 二羟基 β,β 胡萝卜素 ４,４′ 二酮,分子式为Ｃ４０Ｈ５２Ｏ４,广泛存在于生物界中,特别是水产动物的虾、蟹、鱼和鸟类的羽毛中。虾青素是动物界中分布最广泛的一种叶黄素,呈粉红色,具有独特的着色功能,也能够促进抗体的产生,增强动物的免疫力;在抗氧化性,清除自由基方面,其能力强于 β 胡萝卜素。具有水溶性和亲脂性,易溶于二硫化碳、丙酮、苯和氯仿等有机溶剂。虾青素是一种极具潜力的类胡萝卜素添加剂,在食品、饲料、化妆品、医药等领域有着广阔的前景。１虾青素的…     

中华管鞭虾中虾青素的肠吸收特性研究

对Sprague Dawley雄性大鼠进行单次大剂量灌胃皂化和未皂化虾青素,采用高效液相色谱法分析灌胃6 h和12 h后小肠不同部位内容物中虾青素含量,并检测连续灌胃14 d后大鼠新鲜粪便中虾青素总量、游离型和酯型虾青素含量。结果表明,灌胃6 h后,大鼠空肠、回肠和结肠内容物中均未检测到虾青素;灌胃12 h后,皂化和未皂化虾青素组在结肠内容物中均检测出虾青素,且皂化组虾青素总量(283.221±89.50)μg/g显著高于未皂化组(126.850±40.49)μg/g;连续灌胃14 d后,大鼠粪便中皂化组虾青素的残留量显著低于未皂化组,且主要为游离型虾青素(11.12±0.36)μg/g,而未皂化虾青素组大鼠粪便中游离型和酯型虾青素含量分别为(21.78±3.40)μg/g和(7.69±0.32)μg/g。因此,皂化后中华管鞭虾的虾青素提取物较未皂化的虾青素提取物有更好的肠吸收性。     

虾青素果汁饮料的研究

[目的]确定虾青素果汁饮料的最佳发酵条件。[方法]以果汁（西瓜汁、菠萝汁、混合果汁）为原料,法夫酵母为菌种发酵生产虾青素果汁饮料,研究果汁种类、菌体接种量和种龄等对虾青素产量的影响;在此基础上,以果汁加入量、糖浓度、（NH4）2SO4、酵母膏稀释液为考察因素进行正交试验,优化发酵条件。（结果]菌体最佳种龄为48h,最佳接种量为10％,最佳发酵液为西瓜汁。正交试验结果表明,虾青素果汁饮料的最佳发酵条件为：西瓜汁10％,糖浓度8％,（NH4）2SO4 3％,酵母膏0．1％;在最佳工艺条件下,虾青素的产量较工艺优化前提高了113．2％。[结论]该研究优化了虾青素果汁饮料的发酵条件。     

超声波诱变筛选虾青素高产菌株

以CTD004为出发菌株,经超声波诱变,获得一株高产虾青素菌株,结果显示:此菌株在用20 kHz,200 w,工作电压200 v条件下处理30 s,虾青素的产量明显提高,诱变后虾青素产量为190.6 mg/L,比出发菌株增加了126.0 mg/L。经5次传代培养,虾青素产量稳定。     

虾青素的应用及生产来源

综述了目前虾青素在水产养殖业、食品工业以及在药品、化妆品及营养保健品等领域的应用现状,并介绍了包括人工提取、化学合成、生物合成及代谢工程等在内的各种生产来源.     

天然虾青素的制备和功能研究进展

虾青素属于类胡萝卜素家族的重要成员,是一种天然抗氧化剂,具有良好的清除自由基和屏蔽紫外光的能力.综述了天然虾青素的制备方法,并对不同制备方法的优缺点进行比较与总结.近年研究发现,虾青素具有广泛的生物学效应,本文对天然虾青素在药用和营养方面的潜在应用进行了综述.     

四氯化碳致小鼠急性肝损伤动物模型建立方法的研究

通过对染毒途径、剂量和时间的研究,建立四氯化碳(CCl4)致小鼠急性肝损伤模型。采取腹腔注射和灌胃两种途径给予小鼠1%CCl4,染毒后24 h检测血清转氨酶含量,并观察肝脏病变。结果显示,灌胃组比腹腔注射组小鼠血清转氨酶变化个体差异小,肝脏病变明显,病灶分布均匀,且与实际中毒途径一致,故采用灌胃方法进行确定染毒剂量及时间试验。分别以0.125%、0.25%、0.35%、0.5%的CCl4给小鼠灌胃,染毒24 h后检测血清转氨酶含量,确定最佳染毒剂量。以该浓度给小鼠灌胃,分别于染毒后2、6、12、16、20、24、28、32、48 h检测小鼠血清转氨酶含量。结果表明,灌胃0.35%CCl4,小鼠血清转氨酶升高与对照组相比差异极显著(P<0.01),此浓度灌胃后,20 h血清转氨酶含量显著升高(P<0.01),24 h达到最高值,与对照组相比差异极显著(P<0.01)。因此,以0.35%四氯化碳,按0.1 mL.10 g-1体重灌胃,染毒24 h,可建立较理想的小鼠急性肝损伤模型。     

大枣多糖对小鼠化学性肝损伤的保护作用和抗疲劳作用

研究了100、200、400 mg.kg-1剂量大枣多糖对四氯化碳所致小鼠化学性肝损伤和运动导致小鼠疲劳的保护作用。结果表明:中剂量和高剂量大枣多糖组的丙氨酸转氨酶(ALT)活力较肝损伤模型组明显降低,大枣多糖各组的天冬氨酸转氨酶(AST)活力水平也显著降低,且可改善CC l4引起的肝脏组织的病理变化;3个剂量组大枣多糖均能显著提高小鼠体内肌糖原和肝糖原的储备量,高剂量组能提高运动后乳酸脱氢酶(LDH)活力,但对运动后血尿素氮(BUN)值无影响。结果提示,大枣多糖对CC l4所致小鼠急性肝损伤具有保护作用,并且具有抗疲劳作用。     

乳酸菌对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用

将前期体外筛选获得的具有良好抗氧化功能的鼠李糖乳杆菌LVg、嗜热链球菌grx02、屎肠球菌ST1、婴儿双歧杆菌BF以及普通菌株鼠李糖乳杆菌C8M（普通对照）进行急性酒精性肝损伤小鼠试验,各乳酸菌组按每千克体重胃管灌服含乳酸菌数为10^8、10^7、10^6cfu.mL^-1的脱脂乳发酵液10 mL,连续15 d,第15天时与模型组同时按每千克体重灌服50%酒精12 mL,对照组灌等量蒸馏水,禁食12 h后处死,检测血清中谷氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、白蛋白（ALB）、总蛋白（TP）及肝匀浆中丙二醛（MDA）、还原性谷胱甘肽（GSH）、超氧化物歧化酶（SOD）、乙醇脱氢酶（ADH）水平,观察肝脏病理学变化。结果表明：与模型组比较,乳酸菌组ALT、AST、MDA水平显著降低,ALB、TP、GSH、SOD、ADH水平显著升高。4株优选乳酸菌保肝效果明显优于对照组,且grx02组总体效果最佳,某些指标（MDA、SOD）上保护效果虽与空白组无显著差异,但优于药物组。     

鹿茸粉对小鼠酒精急性肝损伤的保护作用

利用酒精复制小鼠急性肝损伤模型,测定小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性,观察肝组织病理学形态及肝细胞的超微结构。结果表明,鹿茸粉大剂量组可显著降低血清中ALT、AST的水平(P0.01),小剂量组差异不显著(P0.05),中、高剂量组发生肝细胞坏死的动物例数减少,病变程度减轻,电镜检测结果表明,鹿茸粉能改善染色质边集、内质网扩张、线粒体肿胀、细胞质膜受损等病理改变,可见鹿茸粉对小鼠酒精急性肝损伤有明显的保护作用。     

荞麦蜜对酒精诱导的小鼠肝损伤和肠道菌群失调的改善效果

为研究荞麦蜜对酒精引起的肝损伤和肠道菌群紊乱的改善效果,对酒精诱导形成的肝损伤小鼠饲喂荞麦蜜予以干预后,测定肝脏指数、血清转氨酶活力以及分析对肝脏脂代谢、氧化应激、肝脏组织的影响,并结合高通量测序分析小鼠的肠道菌群变化.结果显示,与酒精模型组相比,荞麦蜜能显著降低酒精性肝损伤小鼠的谷丙转氨酶(alanine amino...     

白花败酱草醇提物对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用

【目的】研究白花败酱草醇提物对四氯化碳(CCl_4)诱导小鼠急性肝损伤的保护作用,为白花败酱草醇提物的药用及作为保健野菜的开发利用提供参考。【方法】以40只洁净级昆明小鼠为研究对象,设空白对照组、模型组、白花败酱草醇提物低剂量组、中剂量组、高剂量组5个处理,用CCl_4腹腔注射诱导建立小鼠急性肝损伤模型,采用苏木精-伊红(HE)染色法对肝脏组织进行病理检测;采用原位末端转移酶标记技术(TUNEL)染色检测小鼠肝细胞凋亡情况;采用蛋白质免疫印迹(Western blot)检测小鼠肝组织细胞凋亡相关蛋白的表达水平。【结果】白花败酱草醇提物能显著改善肝组织病变情况,显著降低小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性及肝匀浆中丙二醛(MDA)含量和乳酸脱氢酶(LDH)活性,显著提高小鼠肝匀浆中超氧化物歧化酶(T-SOD)活性、总抗氧化能力(T-AOC)和谷胱甘肽(GSH)含量。TUNEL染色结果显示,白花败酱草醇提物能显著抑制CCl_4诱导的肝细胞凋亡。与模型组相比,白花败酱草醇提物使CCl_4刺激的小鼠肝组织Bcl-2蛋白表达显著升高,Bax蛋白表达显著降低,Bcl-2/Bax升高。【结论】白花败酱草醇提物通过抗氧化及抑制肝细胞凋亡而改善CCl_4诱导的小鼠急性肝损伤。     

虾青素在水产养殖上的应用

虾青素是一种酮式非维生素A源的类胡萝卜素,常被用作水产动物的饲料添加剂,具有多种生理功能。笔者主要就虾青素的理化性质、存在形式、抗氧化性、增强免疫力及在水产动物养殖中的着色作用等方面进行综述,说明虾青素具有很好的着色和增强水产动物免疫力的作用,在水产动物养殖中有良好的应用前景。     

虾壳中虾青素提取工艺条件的确定及优化

为探讨南美白对虾虾壳中天然虾青素的提取工艺,试验通过比较不同的前处理方式、溶剂类型及提取次数对提取率的影响,确定酸浸泡脱钙前处理、乙醇溶剂提取及二次浸提等工艺技术。进一步通过单因素试验和正交试验进行条件优化,获得乙醇提取虾青素的最佳工艺参数为料液比1：10、pH3.0、温度60℃、时间3.5 h。在此条件下,虾类加工副产物中的天然虾青素提取率为271.3 μg·g-1。     

丹栀逍遥散对D-氨基半乳糖所致大鼠急性肝损伤保护作用的研究

目的探讨丹栀逍遥散对D-氨基半乳糖(D-GaIN)所致大鼠急性肝损伤的保护作用机制。方法将60只SD雄性大鼠随机分为空白组,模型组,联苯双酯组,丹栀逍遥散高、中、低剂量组,每组10只。连续灌胃给药7 d后,除空白组腹腔注射等体积生理盐水外,其余大鼠均腹腔注射D-GaIN。24 h后,检测血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、肝匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)的含量。结果丹栀逍遥散能明显抑制由D-GaIN所致的血清中ALT、AST以及肝匀浆中MDA含量的升高,并提高肝匀浆中SOD和GSH-PX的含量,其中大部分差异有统计学意义(P<0.05)。结论丹栀逍遥散对D-GaIN所致的大鼠急性肝损伤具有保护作用。