茄子组织培养与基因工程研究进展

本文综述了茄子组织培养与基因工程技术所取得的进展,并对茄子基因工程的发展进行了展望。迄今已利用茄子幼苗子叶、胚轴、叶片、胚、茎等外植体获得再生植株,是茄子离体再生研究最多的一个领域。其再生的关键取决于材料基因型、外植体类型、培养基类型等因素,不同基因型材料的再生能力差异很大,也影响再生的途径。原生质体是比较理想的进行遗传操作的受体,所以在其来源、培养液组成和成苗途径方面都有研究。花药和小孢子离体培养可以获得单倍体植株,节省获得纯系的时间,并有利于获得重组家系,为生产商用F1杂种开辟了一条重要途径。通过幼苗外植体器官再生、花粉(花药)培养、原生质体和小孢子培养已成功地建立了茄子受体再生系统。茄子基因工程技术在提高现有品质和创新种质方面发挥了积极的作用,农杆菌介化法是茄子转基因常用方法,已在外植体选择及再生、选择压筛选、农杆菌株系和转化浓度、预培养和共培养时间等影响因子方面做了大量的优化工作。转基因技术主要应用于茄子抗虫和单性结实基因工程方面并分别获得了一系列成果。在其他领域如抗病、抗逆等方面应用还很不足。因此作者认为未来的研究工作应集中于：目的基因的标记与克隆、高效受体再生系统的探索、更有效遗传转化方法的应用、扩大遗传转化范围,以提高实际应用水平。     

玉米自交系高频率再生因素研究

以玉米自交系幼胚为外植体，就不同基因型、不同激素对其愈伤组织诱导和植株再生的影响进行了研究，并建立了玉米自交系高频率再生系统。方差分析表明：玉米自交系的高频率再生受基因型、激素以及二者间的互作影响。其中基因型是最重要的影响因素。同时，再生植株的分化还受到诱愈培养基、分化培养基、诱愈培养基与分化培养基     

基因型效应对甘蓝型油菜核不育系组织培养再生植株的影响

采用B5附加物培养基，利用10个隐性核不育系材料的初花期茎段为起始外植体，试验了植株再生能力与基因型之间的关系。结果表明，不同基因型材料之间，其再生植株效率的差异达极显著水平。最高的“SS”不育系可达60．7％，最低的是杂87029不育系，仅为4．7％。     

魔芋不同外植体组培快繁及其再生体系的研究

本研究以魔芋不同外植体为实验材料,建立了魔芋离体培养快速繁殖的再生体系,为以后魔芋基因工程进行品质改良奠定了基础。以不同基因型魔芋为实验材料,研究魔芋不同外植体在不同的培养基中诱导不定芽再生的频率。魔芋不同基因型外植体在含适宜6BA、NAA等激素的培养基中形成愈伤组织的难易程度不同,愈伤组织诱导形成不定芽的能力强弱也不一样;不同基因型魔芋外植体的不定芽诱导率最高的是块茎幼叶茎段;对魔芋的块茎、茎段和幼叶来说最适合的培养基配方是MS+6-BA 2.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L,不同培养基诱导不定芽的能力是块茎茎段幼叶,其中,魔芋块茎和茎段的再生能力较强。最合适的生根培养基是MS+1.0 NAA。本研究成功的建立了魔芋不同外植体离体培养再生途径,并获得再生植株。     

大白菜再生体系影响因子的方差分析

用生物统计的方法对大白菜不定芽再生的影响因子进行分析。研究了基因型、激素和AgNO3对17种白菜子叶（带1－2mm子叶柄）外植体不定芽再生率的影响。三组方差分析说明，基因型、激素和AgNO3都在大白菜再生体系中起着重要的作用。基因型是大白菜高频再生的限制因素，它决定了相应的最适合的激素组成和AgNO3浓度；而对某一种基因型而言，激素组成和AgNO3浓度是建立高频再生体系的关键因素。     

草莓组培快繁及叶片诱导植株再生的研究

以4个草莓品种的匍匐茎尖为起始材料，试验以MS为基本培养基附加不同激素草莓茎尖诱导植株再生、增殖、生根的培养基，确立了草莓组培快繁技术方法；又以4个草莓品种的组培苗叶片为外植体，探讨了不同激素配比、基因型对诱导草莓不定芽再生的影响；通过进一步试验，以MS＋B5有机为基本培养基附加6－BA2．253mg/L、IAA1．752mg/L，探讨草莓不同基因型及不同外植体对诱导不定芽再生的影响，初步建立了一个有效的、较高频率的芽再生系统，也为基因的转化找到一个较好的受体材料。     

乌菜高效离体子叶再生体系的建立

通过组织培养建立乌菜离体再生体系,可使优良珍贵育种材料得到保存,并能为其快速繁殖提供有效途径。本研究以4种不同基因型乌菜为材料,从外植体类型、基本培养基类型、植物生长调节剂配比、基因型及无菌苗苗龄等方面,对影响乌菜不定芽诱导的因素进行了研究。研究表明,7-1基因型乌菜5 d苗龄的带柄子叶外植体,在以MS为基本培养基(3%蔗糖+0.8%琼脂)添加4 mg/L 6-BA与0.5 mg/Lα-NAA的诱导培养基上进行诱导,不定芽诱导率可达85.56%。本研究对影响乌菜植株再生的多个因素进行了优化,建立了高效离体再生技术体系,为乌菜育种研究及其他生物技术研究提供基础。     

黄瓜子叶节离体体细胞再生体系研究

以华北类型自交系L04-203为材料,通过对外植体类型、不定芽诱导培养基、芽伸长培养基等进行研究,建立了以子叶节为外植体通过器官发生方式的黄瓜离体体细胞再生体系.研究表明:附带短下胚轴子叶节为最适外植体；BA/NAA比例对愈伤形成和再生频率有直接影响,NAA为零或低浓度时,在外植体切口处直接形成再生芽,随着NAA浓度增...     

茄子高效离体再生体系的优化建立

为获得茄子高效再生体系,本试验以7份茄子材料的无菌苗子叶、下胚轴为外植体,研究了不同激素浓度配比以及不同基因型对茄子离体再生的影响。结果表明:子叶的再生效果优于下胚轴;下胚轴形态学上端再生能力显著高于形态学下端,下胚轴形态学上端出芽率为46%,出芽系数为1~3,下胚轴形态学下端出芽率为0;7份茄子子叶的最优愈伤和不定芽分化培养基均为MS+2 mg/L ZT+0.1 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂,出愈率和出芽率均为100%;最优不定芽伸长培养基为MS+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂,伸长率可达93%;7份材料中,徐州长茄和成都墨茄子叶的再生频率较高,分别为0.93和0.73。本研究获得了较高的茄子再生频率,成苗迅速,为利用组织培养技术进行茄子种质创新提供了科学依据。     

草莓再生及遗传转化研究进展

草莓再生与遗传转化体系的构建对草莓变异优株筛选、基因功能鉴定及品种改良具有重要意义。本研究结合国内外研究进展,从基因型、外植体、激素种类及配比、培养基类型以及暗培养时间等对影响草莓再生的关键因素,以及基因型、农杆菌类型、侵染方式和时间、共培养时间及抗生素等影响遗传转化的因素等方面进行综述,对导入草莓的抗逆相关、品质相关以及生长相关基因及功能进行归纳,结果表明其中有关草莓抗逆的相关基因最多,品质相关次之,并对未来的研究重点进行展望,以期为今后草莓种质创新和品种改良研究提供理论依据。     

人工合成甘蓝型油菜高频率再生研究初报

资源材料保存在作物遗传资源的研究与利用中起到非常重要的作用。该实验以不同来源的人工合成甘蓝型油菜KH106，KH109，KH111D为材料，以花序轴，子房，果柄为外植体研究其再生情况，结果表明，由芥蓝和小白菜人工合成的甘蓝型油菜KH106的再生频率极显著高于由羽衣甘蓝和白菜型油菜人工合成的甘蓝型油菜KH109和KH111；与花序轴和子房为外植体再生频率相比，以果柄为外植体平均再生频率最高，差异达到极显著水平；利用不同预处理培养基处理不同时间，结果显示不经过预处理直接接种到分化培养基上再生频率最高。     

我国部分主推小麦品种组织培养再生能力评价

小麦细胞工程育种和基因工程育种存在强烈的基因型特异性, 从目前推广的优良小麦品种中筛选不同外植体再生能力强的基因型, 对于提高小麦生物技术育种效率和加速育成品种的生产应用具有重要意义。本研究以全国大面积推广的24个优良小麦品种和抗白粉病优良品系CB037为材料, 连续2年进行花药培养、幼胚培养和成熟胚培养, 统计愈伤组织诱导率、愈伤组织分化率和植株再生率, 分析、评价这些小麦品种(系) 3种外植体的组织培养再生性能。结果表明, 25个小麦品种(系)花药、幼胚、成熟胚的植株再生率分别为0~41.75%、2.25%~531.92%和3.24%~84.34%, 基因型差异显著; 组织培养再生能力以幼胚最强(119.79%), 成熟胚其次(36.23%), 花药最弱(4.91%)。CB037的3种外植体组织培养再生效率均最高, 轮选987、扬麦16、内麦836、科农199、新春6号、郑麦366、郑麦9023、新冬20、烟农19和川麦42幼胚培养植株再生能力表现较强, 新春6号、京冬8号、石麦4185、科农199和轮选987成熟胚培养植株再生率较高, 石麦4185和邯6172花药培养绿苗诱导率较高。小麦组织培养效率与基因型和外植体类型密切相关, 不同品种同一外植体再生能力差异显著, 同一品种不同外植体再生能力也存在显著差异, 并且3种外植体的组织培养再生能力不存在相关性。本研究筛选到不同外植体再生能力较好的优良小麦基因型, 可进一步用于小麦转基因育种和单倍体育种。     

大豆组织和细胞培养研究进展

从大豆组织培养的培养基选择、基因型和外植体类型培养差异、器官和胚胎发生再生植株、花药和花粉及 原生的南体培养再生植株、体细胞无性系变异体选择和基因转化等方面综述了大豆作物组织和细胞培养所取得的进展，并对今后的研究提出了建议。     

不同黄瓜基因型子叶再生体系的建立

以6个不同黄瓜品种和自交系为试材,研究了基因型、激素(6-BA、ABA)对黄瓜离体子叶再生的影响。结果表明:不同基因型黄瓜之间的再生频率差异较大,吉林旱瓜为最佳基因型,在培养基M7(MS+1.5mg/L6-BA+0.5mg/LABA+2mg/LAgNO3)上再生频率最高达97%,平均每外植体再生芽数为5.2;与对照相比,6-BA、ABA和AgNO3组合能促进芽的再生,显著提高再生芽数,其中6-BA是黄瓜子叶再生的必要激素,而ABA是促进子叶高效再生的激素;此外,MS培养基添加0.1mg/L6-BA能显著促进再生不定芽的伸长。     

烟草叶片直接再生植株及抗生素耐受性研究

以烟草NC89叶片为材料,研究了叶片直接再生植株所需的IAA、6-BA浓度配比,并对叶片植株再生中卡那霉素和潮霉素的抑制浓度进行了探讨.结果显示:在MSB+0.1～0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IAA的MSB处理培养基上,外植体边缘细胞通过器官发生途径可以高频直接植株再生,抗生素对叶片直接再生芽的抑制浓度为卡那霉素30 mg/L,潮霉素30mg/L.     

油菜下胚轴高频率植株再生因素研究

有关油菜的组织培养已有许多报道,但多局限于采用不同外植体获得再生植株,对于影响外植体高频率再生的诸因素未作系统分析。在油菜的基因转化中外植体的来源和再生方式都直接影响着转化效果。根据Mukhopadlyay(1992)等人和Radke(1992)的工作,下胚轴是较好的外植体来源,而直接成苗的再生方式最大限度地保存了原种质的遗传特性。我们对芥菜型油菜下胚轴高频率植株再生的因素进行了研究,以期为油菜基因转化工作中高效外植体再生系统的建立提供依据。     

不同砧木嫁接茄子再生效果研究初报

利用三种砧木嫁接茄子,通过平茬使其再生,研究再生后成活率、黄萎病发病率和产量.结果表明,砧木不同,再生后成活率、黄萎病发病率和产量具有显著的差异,确定托鲁巴姆是嫁接茄子再生的最佳砧木.     

槭属(Acer L.)植物组织培养技术的研究进展

槭属植物具有较高的观赏价值、药用价值、食用价值与材用价值,离体组织培养可提高其繁殖效率,并保持优良性状,因而成为槭属植物快速繁育的重要途径.本研究从槭属植物组织培养的离体再生途径、外植体选择、基因型、基本培养基、植物生长调节剂、培养环境等方面,总结了历年来槭属植物组织培养技术的研究成果与最新进展,并对亟待解决的问题与发展方向进行探讨与展望.对于加强对槭属不同种类植物组织培养的深入研究,提高其利用价值及种质资源保护具有重要的意义.     

罗汉果遗传转化受体再生体系的建立及发根农杆菌转化初探

以罗汉果品种“青皮果”试管苗的茎段和叶片为外植体,研究适合于遗传转化的受体再生系统,并进行了发根农杆菌转化的初步研究。试验结果表明茎段的再生能力强于叶片,且对农杆菌敏感,是进行遗传转化合适的受体材料。在MS基本培养基附加BA 1mg/L、KT 1mg./L、NAA 0.2mg./L、蔗糖30 mg/L培养基中,20d龄的茎段不定芽诱导率为100%,平均每个外植体诱导的不定芽数达到9.7个,移苗成活率90%以上;外植体培养前的割伤处理有利于提高出芽数;发根农杆菌转化茎段诱导出毛状根。罗汉果毛状根的诱导和培养将为罗汉果药用成分的研究和开发提供新的途径。     

花椰菜高频离体再生体系的构建

以147花椰菜和庆农65天2个花椰菜品种为试材,研究了影响花椰菜不定芽再生的各个因素,建立花椰菜高效离体再生体系。结果表明:基因型、外植体类型、激素的类型和配比等是影响花椰菜再生的主要因子。品种对再生频率影响较大,庆农65天的外植体再生频率高于147花椰菜;不同外植体再生频率也存在差异,下胚轴的再生频率显著高于子叶。147花椰菜取用7 d龄无菌苗的子叶和下胚轴,培养在MS+6-BA1 mg/L+NAA 0.2 mg/L培养基上培养效果最佳,庆农65天则培养在MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L培养基上效果最佳;再生芽在MS培养基,生根率达100%。本研究为花椰菜基因遗传转化构建高效的再生体系奠定基础。