基于大鼠脑缺血再灌注损伤模型建立芍药内酯苷的PK-PD模型

[目的]建立芍药内酯苷的药动学-药效学(PK-PD)模型。[方法]首先采用液质联用法测定大鼠脑缺血再灌注损伤模型给予辛芍组方后的不同时间点所得血浆样本中芍药内酯苷的药物浓度,获得药时曲线;同时采用试剂盒测定不同时间点所得血浆样本中的超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)含量,获得时效曲线。然后用Win Non Lin软件采用房室模型的分析方法对芍药内酯苷的药代动力学参数进行拟合,获得PK参数。在此基础之上,固定相关的药代动力学参数,对时效关系进行拟合,得到相关的PD参数,根据PD参数,建立辛芍组方中芍药内酯苷的PK-PD模型。[结果]当以SOD为药效指标时,可得辛芍组方中芍药内酯苷的PK-PD模型为E=21.04+(7.16×Ce)/(Ce+372.4);当以LDH为药效指标时,可得辛芍组方中代表成分芍药内酯苷的PK-PD模型为E=216.83-(37.31×Ce)/(Ce+0.04)。[结论]SOD和LDH的浓度与芍药内酯苷的浓度存在一定的相关性。芍药内酯苷可通过提高SOD、降低LDH发挥抗氧化作用来实现保护脑缺血再灌注损伤。     

迷迭香水提液对大鼠脑缺血再灌注后SOD和·OH的影响

[目的]研究迷迭香水提液对大鼠脑缺血再灌注损伤后超氧化物歧化酶(SOD)活力和羟自由基(.OH)抑制能力的影响。[方法]取健康SD雌性大鼠50只,采用4-血管阻断(4-VO)方法建立全脑缺血再灌注动物模型,造模前灌胃给药7 d,造模后3 h取材,利用分光光度法检测大鼠肝、脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力和羟自由基(.OH)抑制能力。[结果]与模型组比较,迷迭香水提液各剂量组均能显著提高大鼠各组织中SOD活力(P0.01)和.OH抑制能力(P0.05或P0.01),并存在一定的量效关系,以高剂量组(50 g/kg)效果最佳。[结论]迷迭香水提液对脑缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能与改善氧化应激状态有关。     

黄芪多糖对脑缺血再灌注大鼠脑组织Caspase-3表达及形态学的影响

为了探讨黄芪多糖(Astragalus polysaccharide,APS)对大鼠脑缺血再灌注损伤脑组织Caspase-3表达及形态学的影响.选取SPF级Wistar大鼠72只,随机分为假手术组、模型对照组、阳性药物对照组、黄芪高剂量组、黄芪中剂量组、黄芪低剂量组,每组12只;采用改良线栓法建立大鼠脑缺血再灌注模型,各药物组分别给予相应药物15d,后处死检测,HE染色观察各组大鼠脑组织形态学变化,免疫组化法检测各组大鼠脑组织中Caspase-3蛋白的表达水平.结果表明:假手术组大鼠Caspase-3表达较弱,模型组较假手术组明显增多(P0.01);与模型组比较,其余各组大鼠的Caspase-3表达均有显著减少(P0.05),以黄芪多糖高剂量组大鼠尤为明显.形态学试验结果表明模型组大鼠可见神经元大片消失,间质疏松,残余细胞胞核固缩、染色质凝聚,其余各组神经元细胞发生凋亡的程度较模型组轻,以黄芪高剂量组效果明显.说明黄芪多糖能显著抑制脑缺血再灌注损伤后的神经细胞凋亡,其作用可能是通过降低Caspase-3的表达实现的,且作用效果呈剂量依赖性.     

大鼠全脑缺血前注射灯盏花素对再灌后海马神经元内钙离子浓度的影响

目的观察灯盏花素对大鼠脑缺血再灌后海马CA1区神经元内游离钙离子浓度的影响。方法采用钙离子成像系统检测海马CA1区神经元内钙离子浓度。实验分为(1)正常组:大鼠不做任何处理,直接断头取脑分离出神经元,观察神经元内钙离子浓度;(2)再灌注组:制作大鼠的全脑缺血模型,并以再灌后分1.5、3.0、4.5、6.0 h 4个时间点进行观察;(3)灯盏花素组:在制作全脑缺血模型前15 min腹腔注射灯盏花素50 mg/kg,并以再灌后分1.5、3.0、4.5、6.0 h 4个时间点进行观察。每组(时间点)均检测11个神经元。结果再灌注组再灌后1.5、3.0、4.5 h时间点与正常组比较,Ca2 浓度升高(P<0.05或P<0.01);再灌后6.0 h神经元内游离Ca2 浓度与正常组比较,差异无统计学意义。灯盏花素组再灌后1.5、4.5 h时间点Ca2 浓度比再灌组相同时间点低(P<0.01);而再灌后3.0、6.0 h Ca2 浓度与再灌组相应时间点比较,差异无统计学意义。结论全脑缺血前给予灯盏花素可降低全脑缺血再灌后大鼠海马CA1区神经元内游离Ca2 浓度。     

后内侧倒L型入路用于复杂胫骨近端和平台骨折的疗效观察

目的 观察后内侧倒L型入路用于复杂胫骨近端和平台骨折的疗效.方法 18例复杂胫骨近端和平台骨折患者采用后内侧倒L型入路治疗,记录术后并发症、骨折愈合及肢体功能评分情况.结果 18例患者平均随访16.7个月.所有患者骨折均达临床愈合,愈合时间为7～11个月(平均8.6个月).美国特种外科医院(HSS)膝关节功能评分显示优10例,良6例,中2例,优良率为88.9％.结论 后内侧倒L型入路用于复杂胫骨近端和平台骨折可在直视下复位,疗效满意.     

针刺对大鼠局灶性脑缺血后神经功能缺损及 梗死面积的影响

〔摘要〕目的探讨针刺大椎、百会、人中穴对脑缺血大鼠神经功能缺损评分、脑梗死面积比的影响、方法参照 ZeaLonga线拴法复制大脑中动脉缺血模型(MCAO), 40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺穴位组(即穴位 组,穴取大椎、百会、人中)、针刺对照点组(即对照点组,穴取大椎、百会、人中左侧旁开0.3 cm处),6次针刺后,观 察神经功能缺损评分及1`TC染色检测梗死面积比评价、结果与假手术组比较,模型组大鼠神经功能缺损评分、梗 死面积比明显增高,差异有统计学意义(P<0.01),而对穴位组、对照点组能不同程度地降低神经功能缺损评分,减少 梗死面积,差异有统计学意义(P<0.05 , P<0.01),且穴位组优于对照点组,差异有统计学意义(P<0.05 )〔结论针刺大 椎、百会、人中穴可通过改善神经功能的缺损,减少脑梗死面积从而对脑具有保护作用、     

魔芋多聚糖对改善2型糖尿病大鼠糖脂代谢异常的机制研究

研究了魔芋多聚糖对2型糖尿病大鼠的糖脂代谢水平,炎症因子和相关蛋白质表达及潜在的机制。结果表明:魔芋多聚糖组的血糖和胰岛素水平显著性降低,TG和TC水平也显著下降,TNF-α显著减少,骨骼肌IRS胰岛素信号通路蛋白表达有一定的改善。因此,KMG对HFD和STZ诱导T2DM大鼠,有降低血糖、血脂,改善胰岛素抵抗,同时有抗炎的效果,但关于骨骼肌内IRS信号通路的可能机制仍需进一步研究。     

魔芋多聚糖对改善2型糖尿病大鼠糖脂代谢异常的机制研究

研究了魔芋多聚糖对2型糖尿病大鼠的糖脂代谢水平,炎症因子和相关蛋白质表达及潜在的机制。结果表明:魔芋多聚糖组的血糖和胰岛素水平显著性降低,TG和TC水平也显著下降,TNF-α显著减少,骨骼肌IRS胰岛素信号通路蛋白表达有一定的改善。因此,KMG对HFD和STZ诱导T2DM大鼠,有降低血糖、血脂,改善胰岛素抵抗,同时有抗炎的效果,但关于骨骼肌内IRS信号通路的可能机制仍需进一步研究。     

针刺大椎、百会、人中穴对大鼠脑缺血再灌注损伤后ES蛋白表达的影响

目的 探讨针刺大椎、百会、人中穴对内皮抑素（Endostatin,ES）作用于大鼠脑缺血再灌注损伤后的表达变化及影响,研究ES作用于脑保护的部分机制。方法 将50只SD大鼠随机分为正常组、假手术组各10只,其余30只大鼠参照ZeaLonga线拴法制作大脑中动脉缺血模型,造模成功后再随机分为模型组、依达拉奉组、针刺组,10只/组。正常组、假手术组、模型组仅捆绑,依达拉奉组以3 mg/kg （稀释至1 mL）腹腔注射,针刺组行大椎、人中、百会穴针刺,每12 h行1次治疗,6次后行神经功能缺损评分,再行Western Blot法检测ES表达。结果 （1）神经功能缺损评分对比：治疗后,与正常组、假手术组比较,其余3组评分较高（P<0.01）;与模型组比较,依达拉奉组及针刺组评分下降,差异均有统计学意义（P<0.01）;治疗前后依达拉奉组及针刺组组内比较,差异有统计学意义（P<0.01）。（2） ES比较：治疗后与正常组及假手术组比较,其余3组差异均有统计学意义（P<0.01）;与模型组比较,依达拉奉组及针刺组差异均有统计学意义（P<0.01）。结论 大鼠脑缺血再灌注损伤后,针刺能使神经功能缺损评分下降,并能在一定程度上减少缺血区域海马组织ES的表达,达到减轻脑缺血再灌注损伤的作用机制,促进脑组织的修复。     

叶酸对2型糖尿病大鼠胸主动脉内皮功能的影响

目的探讨长期补充叶酸对2型糖尿病大鼠胸主动脉内皮功能的影响及其作用机制。方法将2型糖尿病大鼠37只分为模型组(12只)、小剂量叶酸组(12只)和大剂量叶酸组(13只),另11只正常大鼠为正常对照组,叶酸干预11周后,剪尾采血分别检测血清一氧化氮、超氧化物歧化酶及丙二醛水平,并取胸主动脉制备主动脉环进行离体血管环反应性测定。结果模型组大鼠血清一氧化氮和超氧化物歧化酶水平明显低于正常对照组(P<0.01),而血清丙二醛水平明显高于正常对照组(P<0.01);补充叶酸11周后,小剂量叶酸组及大剂量叶酸组血清一氧化氮及超氧化物歧化酶水平均较模型组有明显增高(P<0.05或P<0.01),而血清丙二醛水平较模型组明显降低(P<0.01)。在每一个乙酰胆碱累积浓度下,模型组大鼠胸主动脉环的舒张度均较正常对照组明显减低(P<0.05或P<0.01),而小剂量叶酸组和大剂量叶酸组大鼠胸主动脉环的舒张度则均较模型组明显增高(P<0.05或P<0.01),小剂量叶酸组大鼠胸主动脉环的舒张度与大剂量叶酸组相比差异无显著性。结论长期补充叶酸对2型糖尿病大鼠血管内皮功能损伤具有明显预防作用,叶酸可能通过增加机体一氧化氮合成从而提高血清一氧化氮活性和提高机体抗氧化能力来预防2型糖尿病大鼠血管内皮功能损伤的发生。     

大鼠大脑皮质神经元体外分离培养和纯化研究

为建立动物中枢神经疾病的细胞作用模型,根据大鼠大脑皮质神经元的生存特性。按照抑制筛选的原理,对大鼠大脑皮质神经元进行了体外培养、纯化和鉴定。结果表明:培养的大脑皮质神经元在体外发育良好,经神经元特异性的烯醇化酶(NSE)免疫组织化学染色证明其纯度较高,可以用于进一步细胞作用模型的建立。     

SHR大鼠心室肌细胞分离方法改进及其L-型钙电流的观察

文章探索建立简单可靠的SHR大鼠心室肌细胞的分离方法,提高细胞存活率和膜片钳试验成功率。采用Langendorff灌流装置,离体心脏逆向灌流,分离单个SHR大鼠心室肌细胞。使用膜片钳全细胞记录技术,记录大鼠心室肌细胞L-型钙电流。通过对细胞的观察发现,细胞呈长杆状,横纹清晰,细胞膜结构完整。膜片钳全细胞记录到典型的L-型钙电流,激活电位-40 mV,峰值电位0 mV,反转电位+50～+60 mV,呈现出电压依赖性。观察到的L-型钙电流可被钙通道阻滞剂维拉帕米抑制。结果表明,采用的大鼠心肌细胞分离方法可分离制备出适合膜片钳电生理观察的心肌细胞标本。     

醋酸铅对体外培养大鼠大脑皮质神经细胞形态的影响

为了观察醋酸铅对神经细胞的形态学影响,通过建立体外培养大鼠大脑皮质神经细胞模型,应用不同浓度醋酸铅(0,50,100,200,400μmol/L)与神经细胞分别培养3、6、12、24 h,倒置相差显微镜观察细胞形态变化.结果显示,醋酸铅与神经细胞共同培养12~24 h,细胞密度降低,胞体变小,突起缩短;随醋酸铅浓度递增,细胞形态较对照组差异愈加显著(P<0.05).表明染铅浓度与神经细胞形态变化存在剂量效应与时间效应关系.     

大鼠大脑皮质神经元的分离及培养

为了给更好地研究神经元病理变化提供物质材料,对新生大鼠大脑皮质神经元进行体外分离和培养。无菌操作取新生大鼠的大脑皮质,采用机械法和胰蛋白酶消化法相结合的方法分离细胞,制备单层细胞悬液接种培养板;5-氟脱氧尿嘧啶处理等方法纯化神经元,甲苯胺蓝染色法及抗NSE单克隆抗体对纯化后的神经元进行鉴定。结果表明,培养的神经元生长良好,形态正常,纯度高达90%以上。采用本方法培养的神经元可作为深入研究中枢系统疾病的细胞模型材料。     

参附注射液对大鼠心肌缺血再灌注损伤心电图的影响

目的观察参附注射液对大鼠心肌缺血再灌注损伤时ST段和心律失常的影响。方法健康SD大鼠24只随机分为两组,缺血再灌注组（IR组）和参附注射液预处理组（SF组）,每组12只。采用夹闭左冠状动脉30 min,再灌注90min,复制心肌缺血再灌注模型。夹闭前SF组静脉注射参附注射液5 mL/100g进行预处理,观察各组大鼠在整个缺血再灌注期间心电图ST段和心律失常发生情况。结果SF组ST段变化均低于IR组各时间对应值,SF组心肌缺血再灌注后的室性心动过速及心室颤动的发生率均明显低于IR组,差异均有统计学意义（P＜0.01或0.05）。结论参附注射液能降低心肌缺血再灌注损伤程度和室性心律失常发生率。     

疏血通注射液对大鼠心肌缺血再灌注后心肌细胞凋亡和P53的影响

目的观察疏血通注射液(SXT)对大鼠心肌缺血再灌注后心肌细胞凋亡的影响。方法将18只大鼠随机分为假手术组、模型组和疏血通组,每组6只。通过结扎大鼠左冠状动脉前降支制成心肌缺血模型,疏血通组再灌注时即刻通过股静脉注射药物SXT(0.7mL/kg)24h。TUNEL免疫荧光染色观察心肌细胞凋亡,Westernblot检测P53表达。结果模型组心肌细胞凋亡显著,而疏血通组心肌细胞凋亡显著减少(P<0.01)。模型组P53表达显著高于假手术组、疏血通组(P<0.01)。结论 SXT可通过下调大鼠心肌缺血再灌注后心肌凋亡蛋白P53表达,从而减少心肌细胞凋亡。     

Ca处理对金针菇采后生理生化变化的影响

用 Ca Cl2 溶液对采后金针菇子实体进行真空浸渗处理 .结果表明 :0 .0 0 5、0 .0 1、0 .0 3、0 .0 6、0 .0 9mol· L-1的 Ca Cl2 处理能明显抑制金针菇采后呼吸和 C2 H4 释放 ,显著减少金针菇采后可溶性固形物、蛋白质、还原糖、淀粉、有机酸、维生素 C、粗纤维等含量的损耗 ,显著抑制金针菇采后细胞膜透性的增加 ,提高采后贮存品质 ,其中尤以 0 .0 1、0 .0 3、0 .0 6 mol· L-1Ca Cl2 处理效果最好 ;0 .12、0 .15mol· L-1Ca Cl2 处理对金针菇采后生理生化变化的影响与对照差异不显著 ;0 .0 0 5mol· L-1的 Ca抑制剂 EGTA处理能显著刺激金针菇采后生理生化变化进程