六月鲜枣愈伤组织诱导及胚状体发生

采用5因素4水平的正交试验设计,对六月鲜枣的幼叶、嫩茎、冷藏5d后的花药、花后48～50d的胚乳,利用3因素3水平的正交试验设计,对花后58～60d的幼胚及子叶,进行愈伤组织诱导再分化试验。探讨了不同激素、碳源和基本培养基对产生愈伤组织的影响。结果表明:碳源对胚乳、花药器官,基本培养基对嫩茎、幼叶、花药愈伤组织的诱导有显著影响,而且生长素种类和浓度对不同外植体的愈伤组织诱导作用不同;嫩茎、子叶及幼胚较易诱导产生愈伤组织,但只有子叶及幼胚产生的愈伤组织具较强的再生能力,并可诱导出不定芽,不定芽分化率分别为51.1%和9.5%,ZT较BA易诱导愈伤组织产生不定芽,不定芽转移生根成苗获得了完整植株。另外,用子叶及幼胚培养获得了大量胚状体,且胚状体最终可发育成苗。     

欧洲甜樱桃幼胚子叶离体培养再生植株研究

 以欧洲甜樱桃（Prunus avium L.）幼胚子叶为试材,研究了子叶不同发育时期、BA和NAA配比、品种基因型和培养条件等对幼胚子叶离体再生不定芽的影响。结果表明,以MS为基本培养基,附加BA 2.0 mg·L^-1＋NAA 0.2 mg·L^-1,用PF（子叶的长度/胚的长度×100）﹦50～80发育阶段的子叶,那翁幼胚子叶再生不定芽效果最好,再生率最高可达79.2﹪。暗培养2周后再转入光照下培养,对欧洲甜樱桃子叶再生不定芽具有一定的促进作用。欧洲甜樱桃其他品种的子叶再生率,雷尼尔为72.2﹪,先锋为61.1﹪,拉宾斯为33.3﹪。子叶再生不定芽全部发生于子叶的正面近胚芽端切口处,表现出明显的极性效应。     

朝天椒子叶离体培养与植株再生体系的建立

以贵州黎平朝天椒地方种为试材,取其无菌苗子叶作外植体,采用植物固体培养基组织培养法,研究了培养基激素配比、无菌苗生理年龄、子叶部位等对朝天椒子叶的离体接种、诱导愈伤、不定芽分化、芽茎伸长、诱导生根、驯化移栽、成苗等离体培养及植株再生阶段的影响。结果表明:朝天椒子叶适宜芽诱导分化的培养基为MS+6-BA 2mg/L+NAA 0.1mg/L,芽分化率达100%;适宜芽伸长的培养基为MS+KT 2mg/L,芽伸长率可达50%;适宜生根的培养基为MS无激素培养基,生根率可达44%。单个外植体平均分化含15~18个不定芽的芽丛(14~16个芽茎),出苗6~7株。从子叶外植体接种至再生苗出瓶需50~55d,再生苗移栽成活率达98%。该研究构建了贵州朝天椒的高效离体培养植株再生体系,为朝天椒的组织快繁和遗传转化奠定了重要的基础。     

桃幼胚离体培养再生植株的研究

 以中晚熟桃品种‘京艳’、‘绿化9 号’、‘ 晚蜜’和‘大久保’为试材, 初步建立了桃体细胞胚发生和增殖的三阶段程序, 即胚性愈伤组织诱导、体细胞胚发生和发育、体胚萌发成株以及次级体细胞胚的增殖。各品种体细胞胚的萌发成株率分别为73. 5 %、38. 6 %、5. 4 %和58. 2 %。用苯脲类细胞分裂素TDZ有效诱导‘京艳’的幼胚子叶直接再生植株, 再生率70 % , 平均每外植体不定芽数13. 8 个, 再生不定芽生根后获得完整植株。     

假单性结实型无核葡萄胚挽救影响因子研究

【目的】探究无核葡萄胚发育和胚萌发的影响因子,有利于优化无核葡萄胚挽救技术体系及提高其育种效率。【方法】以早黑宝盛花后100 d种胚为试材,采用剥种取胚进行胚离体培养,研究外源激素和营养添加物质对胚萌发成苗的影响,基于熵权TOPSIS(优劣解距离法)分析法筛选出最佳胚萌发培养基;以无核翠宝(盛花后28～38 d)、丽红宝(盛花后28～32 d)和晶红宝(盛花后28～32 d)未成熟幼果为试材,研究不同取样时间和不同培养时间对胚珠发育率的影响,基于熵权TOPSIS分析法综合评价不同形态胚的萌发成苗效果。【结果】在胚萌发培养基中添加0.1 mg·L-1IAA+0.2 mg·L-16-BA+0.5 g·L-1葡萄汁时,胚的萌发率和成苗率显著高于其他。取样时间接近(或达到)胚败育始期时,胚发育率最高。无核翠宝和丽红宝胚珠离体培养10周后的胚萌发率最高(≥50.00%)。不同形态胚的萌发成苗效果不同,子叶形胚的萌发成苗效果最好,其他排序为:鱼雷形胚﹥球形胚﹥心形胚﹥畸形胚。【结论】胚萌发培养基中添加外源物质有利于胚萌发成苗;离体培养败育时期的胚珠能获得更高的胚发育率和多胚率;子叶形胚和鱼雷形胚更易萌发成苗。     

TDZ对甜椒不定芽分化的影响

为了建立甜椒高频、高效离体培养再生体系,以甜椒子叶、真叶、下胚轴为外植体,采用了不同浓度的TDZ与IAA、6-BA的配比,研究了TDZ对甜椒不定芽分化的影响。结果表明:仅含有TDZ的培养基中芽分化率几乎为0,仅含有IAA、6-BA的培养基中芽分化率最高达80%,加入TDZ后,在0.5mg/L IAA+10.0mg/L 6-BA+0.5mg/L TDZ的激素组合培养条件下,可获得96%的丛生芽诱导频率。表明在甜椒芽诱导过程中添加TDZ能够很好地提高分化效率。     

''''翠妃''''苦瓜子叶不定芽诱导研究

以'翠妃'苦瓜的子叶作为外植体,研究了子叶苗龄、子叶的部位、暗培养、硝酸银浓度等影响子叶不定芽诱导的主要因素.结果表明:以9 d左右的苗龄诱导不定芽效果最好,适合不定芽诱导培养基是MS BA 1.0 mg·L-1 NAA 0.2 mg·L-1;子叶不同部位不定芽的再生率差异显著,在子叶基端外植体临近下胚轴的部位诱导效果最好,不定芽诱导率为54.21%;暗培养对子叶不定芽诱导有显著的促进效果,暗培养7 d可将不定芽再生率提高到77.44%;AgNO3对不定芽再生有明显的抑制作用,当浓度达到6 mg·L-1以上时,子叶块上就没有不定芽再生,只长有少量的根;不定芽在MS BA 0.5 mg·L-1 NAA0.1 mg·L-1上增值效果较好,增值倍数为5.40.     

中国李Nubiana胚性愈伤组织诱导及植株再生

以中国李Nubiana试管苗幼嫩叶片为外植体,探讨激素浓度配比、暗培养时间、琼脂浓度等对胚性愈伤组织诱导及TDZ浓度对胚性愈伤组织不定芽再生的影响,建立其愈伤组织诱导及不定芽再生体系。结果表明,外源激素对中国李Nubiana胚性愈伤组织诱导影响显著,TDZ不适合胚性愈伤组织的诱导;暗培养28 d,产生的愈伤组织质地较好,诱导愈伤组织的效果最佳。胚性愈伤组织在WPM+NAA 0.5 mg·L-1+6-BA 2.0 mg·L-1+TDZ 2.0 mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂6.0 g·L-1培养基上光培养可再生出不定芽,其再生率为6.7%。     

桃离体组织分化再生植株的研究

  以奉化‘玉露’桃叶片、幼茎、下胚轴、子房、胚珠、胚乳及花后45～50 d 和75 d 的未成熟胚、完全成熟的种胚为外植体, 进行离体培养再分化试验。结果表明只有花后45～50 d 和75 d 的未成熟胚产生白色致密节球状的愈伤组织, 并可诱导出不定芽, 不定芽分化率分别为73. 8 %和15. 5 %; 62BA 诱导愈伤组织不定芽的效果优于KT。不定梢转移生根成苗获得了完整的再生植株。探讨了不同激素和碳源等对不定芽诱导的影响。     

新疆树上干杏不定芽再生影响因子的研究

以新疆树上干杏茎段为材料,研究了外植体消毒、植物激素的种类及其浓度和取材时间等因素对茎段不定芽再生的影响。结果表明:75%酒精30 s+0.1%HgCl25 min+15%H2O220 min具有较好的灭菌效果,且不会较大影响茎段不定芽的再生;最适诱导不定芽再生的培养基为改良MS+TDZ 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,培养15 d后出芽率可达到90.8%;分裂素TDZ促进不定芽再生的效果优于6-BA;春季取材效果明显优于夏季取材。     

早熟油桃子叶和胚轴离体培养再生植株的研究

 以早熟油桃‘华光’和‘曙光’为试材, 对影响其子叶和胚轴再生的植物生长调节剂浓度及组合、培养基、胚发育时期等因素进行了研究。结果表明: 子叶培养中, 华光花后60 d为最佳取材时期,其子叶在MS + TDZ 2 mg/L +NAA 0.04 mg/L的培养基上再生率为75%; 曙光则要取花后68 d成熟期子叶,其在MS +BA 8 mg/L +NAA 0.04 mg/L培养基上再生率为66.7%。胚轴培养中, 上、下胚轴无显著差异,华光胚轴再生以G + TDZ 3.0 mg/L + KT 1.0 mg/L +NAA 3.0 mg/L 效果较好; 曙光胚轴再生以QL + TDZ2.0 mg/L +NAA 0.5 mg/L效果较好。     

葡萄二倍体与四倍体品种间杂交胚珠的离体培养

为了克服葡萄二倍体品种与四倍体品种之间的交配障碍,进行了杂交胚珠的离体培养研究。发芽胚珠的取样时期集中于授粉后35～75d,其中多数以二倍体作母本的组合在授粉后55d取样的发芽率最高,以四倍体作母本的组合授粉后70d取样的发芽率最高。基本培养模式为:发育培养基-(剥胚)萌发培养基-生长培养基。用二倍体品种作母本时,所有组合均获得了培养苗,在1号培养基上培养的胚珠发芽率高于2号培养基。反交对培养基的要求有相反趋势,其中2个组合未得到培养苗。授粉后60d,直接剥出杂种胚进行培养,得到了最高发芽率。综合分析初步认为,用二倍体品种作母本比用四倍体品种作母本容易获得杂交后代。     

桃幼胚下胚轴高频植株离体再生

以桃品种京艳和晚蜜不同发育阶段合子胚下胚轴为外植体进行离体培养,用6-BA、CPPU和TDZ等细胞分裂素诱导下胚轴直接再生不定芽试验。结果表明,花后70d下胚轴为诱导的最佳材料,供试细胞分裂素中,诱导活性为TDZ>CPPU>6-BA,苯脲类细胞分裂素TDZ5mg/L与NAA0.01mg/L配合对下胚轴再生具有极强的诱导作用,京艳诱导再生率高达95.2%,平均不定芽数达每外植体25.3个。京艳的诱导率显著高于晚蜜。IBA 0.5mg/L适于诱导再生幼茎的生根,生根率和移栽成活率分别达到92.6%和65.5%。组织学观察表明不定芽起源于皮层薄壁细胞,属直接再生方式。     

金樱子(Rosa laevigata Michx.)叶片直接再生不定芽体系的建立

以金樱子组培苗的划伤叶片为外植体,研究了不同植物生长调节剂配比组合、暗培养时间、添加物L-脯氨酸、叶片不同部位对不定芽直接再生的影响。结果表明:当TDZ浓度为1.5 mg·L^-1、NAA浓度为0.000 5 mg·L^-1时,不定芽直接发生率最高,为9.5%;不同暗培养时间对不定芽直接诱导具有一定影响,暗培养时间为10 d时不定芽的直接发生率最高,为10.5%;添加了不同浓度的L-脯氨酸后不定芽的诱导率不增反降,所以以不添加L-脯氨酸为宜;叶片不同部位的再生率比较中,仅带叶叶柄可直接诱导出不定芽。综上所述,叶片直接再生不定芽的诱导方法是,以金樱子带叶叶柄为外植体,在直接诱导培养基上1/2MS+TDA 1.5 mg·L^-1+NAA 0.000 5 mg·L^-1+CH 100 mg·L^-1+AgNO3 10 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂7.5 g·L^-1,暗培养10 d后,转至正常光周期下培养3周左右,不定芽诱导率最高,为10.5%。所得不定芽在增殖培养基MS+NAA 0.1 mg·L^-1+6-BA 1.0 mg·L^-1生长3周后,增殖系数可达到3.5左右;将丛生芽切割成单芽后转入不含任何激素的MS培养基壮苗3周,幼苗可长高至3~5 cm;再转入MS+NAA 0.1 mg·L^-1培养基中生根,1个月后生根率达95%。     

In vitro propagation of GF677 hybrid rootstock (Prunus persica × Prunus amygdalus) from mature cotyledons

Adventitious shoot regeneration from mature cotyledons of GF677 rootstock (Prunus persica × Prunus amygdalus) was achieved in vitro. Thidiazuron (N-phenyl-N-1,2,3-thidiazol-5-yl-urea; TDZ) at 32 µM gave the highest percentage of cotyledons forming adventitious shoots (68.8%) and the highest number of shoots per cotyledon (4.8) on Quoirin and Lepoivre (QL) medium. On QL medium containing 32 µM TDZ, exposure of the proximal segments of cotyledons to darkness at the start of culture increased the percentage of cotyledons forming adventitious shoots (62.5%) when compared with those kept under light conditions (15%). A combination of 0.72 µM gibberellic acid and dark treatment resulted in at least 2.7-fold more elongated shoots than non-treated shoots. The highest rooting percentage (100%) occurred on 0.5× Murashige and Skoog medium supplemented with Gamborg (B5) vitamins and 2 mg l^?1 indole-3-butyric acid. Rooted plantlets were acclimatised under greenhouse conditions with a 70% survival rate.     

菠萝叶基愈伤组织诱导体细胞胚

以菠萝[Ananascomosus(L.)Merr.]吸芽上的叶基部组织为材料,研究了2,4-D、NAA、BA、TDZ在菠萝愈伤组织诱导体细胞胚过程中的影响。结果表明,2,4-D在体细胞胚诱导过程中起着极为重要的作用,其适宜浓度为5mg/L,适当浓度(1mg/L)的BA在降低畸形胚比例和增加体细胞胚发生率方面有重要作用,但BA也会促进愈伤组织分化不定芽;低浓度的TDZ与BA效果相似,在不同生长调节物质处理组合中,MS+0.01mg/LTDZ+5mg/L2,4-D培养基的体细胞胚发生率最高(97%)。低浓度NAA(2￣5mg/L)利于非胚性愈伤组织的增殖,而高浓度的NAA虽能促进体细胞胚发生,但这种体细胞胚很难继续增殖,在萌发时只生根不发芽。成熟体细胞胚在MS+0.2%活性炭上30d时的转株率为22.7%。     

甜樱桃砧木离体叶片愈伤组织诱导及不定芽再生

叶片再生效率的高低直接影响目的基因转化的成功率,为建立稳定、高效的樱桃不定芽离体再生体系,以30～40d苗龄的甜樱桃砧木ZY-1的组培继代苗为试材,取上部幼嫩叶片或不含腋芽的茎段,分别从培养基生长调节剂配比、接种材料类型、叶片接种部位、接种方式以及培养条件等方面进行了不定芽再生技术研究。结果表明,培养基中添加7.0mg/L的6-BA与0.5～1.0mg/L的IBA配比时不定芽再生率和出芽数均较高,TDZ和NAA不适于诱导ZY-1叶片再生不定芽;接种继代苗茎段比叶片再生率高;接种叶片以选择嫩叶横切2刀、远轴面向下接触培养基的方式为好;叶片不同部位处理以带叶柄的基部叶块最易再生;叶片接种后在25℃室温条件下,先暗培养3周再照光,利于不定芽的再生。