鸡传染性鼻炎和新城疫二联油佐剂灭活疫苗的研究（Ⅱ）

在（Ⅰ）报的基础上，又进行了鸡传染性鼻炎和新城疫二联油佐剂灭活疫苗的最小免疫剂量、保存期，免疫持续期及中试疫苗效力检验。结果表明，二联苗中ＮＤ和ＩＣ的最小免疫剂量分别为０．０２ｍｌ和０．２ｍｌ。疫苗在４－８℃下保期期为１年；一次，两次免疫的免疫持续期分别为１６０天和整个说卵期。     

鸡传染性法氏囊病Vero细胞弱毒疫苗免疫效果的研究

鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）Ｖｅｒｏ细胞弱毒疫苗（ＶＣＶ９０１）病毒滴度为１０￣（７．３）～１０￣（８．３）ＴＣＩＤ＿（５０）／０．０５ｍｌ．疫苗经皮下、肌内、点眼－滴鼻和口服途径免疫接种雏鸡，均表现出良好的免疫原性。皮下接种１４日龄雏鸡，免疫后８、１４和２１天攻毒，保护数分别为２／６、６／６５／６，如在３５日龄再加强免疫一次，于二免后７０天和１１５天攻毒．其保护数分别为６／６和５／６．疫苗的最小免疫剂量为１０￣５ＴＣＩＤ＿（５０）／只，用１０、５０和１００培免疫剂量免疫雏鸡，临床表现均安全，不影响雏鸡增重．经易感雏鸡连传５代，疫苗毒力不返强．温苗在－２０℃～－２５℃至少保存一年，在０℃可保存一周，疫苗对鸡无致瘤性．     

猪巴氏杆菌病二价（A、B群）灭活疫苗的研究──Ⅱ、疫苗安全、效力及保存期试验

以７、８和５批多杀性巴氏杆菌二价灭活疫苗样品接种小鼠、兔和仔猪分别测定疫苗的安全性、效力和保存期。结果表明，用于测定安全性的动物全部健活；用于检测疫苗效力的７１．８％的兔子和７５％的仔猪获得保护抵抗多杀性巴氏杆菌Ａ群菌株的攻击；９３．７％的兔子和８３．３％的仔猪能抵抗Ｂ群菌株的攻击。在０－８℃中保存１５个月的疫苗效力不下降。     

用单克隆抗体进行副鸡嗜血杆菌定型

抗副鸡嗜血杆菌血清A和C型株所制备的两个血清型单克隆抗体（MAbs），分别对副鸡嗜血杆菌血清型A、B、C中的各型参考株作HI和dot－blotting试验。一种MAb（E5C12D10）为抗血清型A代表株221，另一种MAb（F2E6）为抗血清型C代表株S1。在两种试验中，不同血清型的MAbs可与对应的血清型中的副鸡嗜血杆菌株血凝（HA）抗原反应，而与血清型B代表株91、147均无反应。故这些MAbs可用于dot－blotting或HI试验进行副鸡嗜血杆菌定型。     

鸡减蛋综合症蜂胶灭活疫苗的研究与应用

用纯化的天然免疫增强剂蜂胶研制成功鸡减蛋综合症蜂胶灭活疫苗。疫苗中蜂胶干物质含量为１０ｍｇ／ｍＬ。用该苗０．５ｍｌ免疫开产或临开产母鸡，接种后７ｄ ＨＩ抗体效为７￣１０（ｌｏｇ２），９０ｄ为９￣１２（ｌｏｇ２），１８０ｄ为８．７（ｌｏｇ２），３００￣３６０ｄ为６．５￣８．０（ｌｏｇ２）。免疫期为一年。－１５℃保存不冻结，保存期为１８个月，０￣８℃为１５个月，１０￣１５℃为１２个月，２５￣３０℃为３     

间接法Dot—ELISA检测副鸡嗜血杆菌的研究

本文首次成功地建立了检测副鸡嗜血杆菌抗原的间接法Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ，Ｈｐｇ抗原的最低检出量为３．９１×１０＾５ＣＦＵ／ｍｌ。Ｈｐｇ人工感染样本的抗原阳性检出率为：口咽试子９５．５％；鼻窦及眶下分泌物拭子９０．９％。经统计分析，二者在５％显著水平无显著水平无显著差异。人工感染后４天及８天口咽拭子的抗原阳性检出率分别为１００％和９５．５％。经统计学分析，二者在５％显著水平无显著差异，Ｈｐｇ自然感染样本     

鸡传染性鼻炎(三价)和新城疫二联灭活疫苗的研究

利用Page A型、B型、C型副鸡禽杆菌和新城疫病毒La Sota株,研制鸡传染性鼻炎(三价)和新城疫二联油乳剂灭活疫苗。用3个批次疫苗进行单剂量(0.5mL/次)3次接种和大剂量(2.0mL)单次接种的安全性试验、SPF鸡的免疫效力试验、商品鸡的免疫持续期试验和疫苗的保存期试验。结果表明,3批疫苗对试验鸡安全无副作用;免疫接种SPF鸡只30d后对A、B、C型副鸡禽杆菌攻毒的保护率≥80%,用20μL/只疫苗免疫接种SPF鸡21d后新城疫的平均HI抗体24;商品鸡42日龄首免,110日龄二免,二免后9个月对A、B、C型副鸡禽杆菌攻毒的保护率≥70%,对新城疫病毒强毒100%保护;用4℃~8℃保存12个月和15个月的3批疫苗进行了SPF鸡的近期免疫效力试验,结果对A、B、C型副鸡禽杆菌攻毒的保护率≥70%,用20μL/只疫苗免疫SPF鸡,免疫接种后21d新城疫病毒的平均HI抗体24,对新城疫病毒强毒的攻毒保护率70%。说明研制的疫苗安全有效。     

用PCR方法诊断鸡传染性鼻炎的研究Ⅱ.病料保存及治疗对诊断的影响

围绕副鸡嗜血杆菌（Ｈｐｇ）分离和ＰＣＲ检验中遇到的病料运输保存及药物治疗影响问题进行试验设计， 结果证明将棉拭子放在甘油ＰＢＳ中４℃或直接取病鸡头冷藏运输保存对Ｈｐｇ 分离和ＰＣＲ 检验是最为简便有效的方法，Ｈｐｇ 可存活３～７ｄ，ＰＣＲ 检验到９０或３０ｄ 仍很敏感。试验还表明，抗菌药物治疗不仅影响细菌分离，也影响ＰＣＲ 检测。     

一种A型魏氏梭状芽孢杆菌氢氧化铝灭活疫苗及其控制猪“猝死症”的效果

Ａ型魏氏梭状芽孢杆菌ＸＰ５株分离自典型猝死症病猪，将其制成氢氧化铝灭活疫苗。疫苗０．６ｍｌ、２ｍｌ和４ｍｌ的剂量可以分别保护小鼠、兔和猪抵抗标准Ａ型魏氏梭状芽孢杆菌毒素１ＭＬＤ的攻击。在两个疫病流行区应用了疫苗，１２１５头接种疫苗猪中死于猝死症的有１２头，死亡率０．９９％，８１５２头未接种疫苗的对照猪中，死于猝死症的有２８４头，死亡率３．４８％，二者显著差异（Ｘ２＝１２．２３，Ｐ＜０．０１）。     

预防B型变异株的一种新型传染性鼻炎四价疫苗的效力

传染性鼻炎是由副鸡嗜血杆菌引起的鸡的一种急性呼吸道疾病，目前在生产上主要使用含有代表A、B、C三种血清型（按Page分类（1962））的两种或多种菌株制成的灭活疫苗。到目前为止，这些疫苗对特定血清型菌株的合并感染提供了令人满意的免疫保护。免疫失败通常与某些商品疫苗中遗漏其中些分离株进行血清分型。结果发现了多     

鸡传染性法氏囊病Vero细胞弱毒疫苗免疫效果的研究

鸡传染性法氏囊病Ｖｅｒｏ细胞弱毒疫苗病毒滴度为１０＾７．３－１０＾８．３ＴＣＩＤ５０／０．０５ｍｌ。疫苗经皮下，肌肉，点眼－滴鼻和口服途径免疫接种雏鸡，均表现出良好的免疫原性。皮下接种１４日龄雏鸡，免疫后８，１４和２１天攻毒，保护数分别为２／６，６／６和５／６，如在３５日龄再加强免疫一次，于二免后７０天和１１５天攻毒，其保护数分别为６／６和５／６。疫苗的最小免疫剂量为１０＾５ＴＣＩＤ５０／只，用１     

鸡新城疫和传性鼻炎二联灭活疫苗的研制

选用新城疫Ｎ７９克隆病毒株及Ａ和Ｃ型副鸡嗜血杆菌为制苗毒株，以１０号白油为佐剂制成ＮＤ和传染性鼻炎二联灭活疫苗。３月龄以上产蛋鸡免疫后局部反应轻微，７－１４天内即可产生免疫力，免疫期达８个月。ＮＤ和传染性鼻炎不发生相互干扰。二联疫苗于４Ｃ可保存８个月以上，疫苗小批量区域性试验表明其安全性良好，可有效防制该两种疫病的发生。     

间接法Dot－ELISA检测副鸡嗜血杆菌的研究

本文首次成功地建立了检测副鸡嗜血杆菌（ｈｐｇ）抗原的间接法Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ。Ｈｐｇ抗原的最低检出量为３．９１×１０￣５ＣＦＵ／ｍｌ。Ｈｐｇ人工感染样本的抗原阳性检出率为：口咽试子９５．５％；鼻窦及眶下分泌物拭子９０．９％。经统计学分析，二者在５％显著水平无显著差异。人工感染后４天及８天口咽拭子的抗原阳性检出率分别为１００％和９５．５％。经统计学分析，二者在５％显著水平无显著差异。Ｈｐｇ自然感染样本的抗原检出率为：口咽拭子８１．７％，鼻分泌物拭子７７．８％，眶下窦分泌物拭子７６．９％。间接法Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测抗原经济、快速、操作简便，有较好的敏感性、特异性和重复性，能有效检出Ｈｐｇ人工及自然感染病鸡的带菌菌况，适合于大规模抗原样本的检测，可以用作疫病早期诊断和进行流行病学调查。     

副鸡嗜血杆菌种特异性的核酸探针

副鸡嗜血杆菌种特异性的核酸探针陈小玲Ｊ．Ｋ，Ｍｉｆｌｉｎ张培君Ｐ．Ｊ．Ｂｌｅｃｋａｌｌ（北京市农业科学院畜牧兽医研究所北京，１０００８１）鸡传染性鼻炎（ＩＣ）是由副鸡嗜血杆菌（Ｈｐｇ）引起的呼吸道传染病。其危害主要在于影响鸡的生长和使鸡产蛋率下降。诊...     

鸡新城疫和传性鼻炎二联灭活疫苗的研制

选用新城疫（ＮＤ）Ｎ７９克隆病毒株及Ａ和Ｃ型副鸡嗜血杆菌为制苗毒（菌）株，以１０号白油为佐剂制成ＮＤ和传染性鼻炎二联灭活疫苗。３月龄以上产蛋鸡免疫后局部反应轻微，７～１４天内即可产生免疫力，免疫期达８个月。ＮＤ和传染性鼻炎不发生相互干扰。二联疫苗于４℃可保存８个月以上。疫苗小批量区域性试验表明其安全性良好，可有效防制该两种疫病的发生。     

鸭肝炎病毒A_(66)弱毒的冻干试验

鸭病毒性肝炎Ａ６６鸡胚弱毒冻干疫苗的毒价为１０７．２４ＣＥＬＤ５０／０．１ｍｌ，冻干前同批鸡胚毒毒价为１０７．４０ＣＥＬＤ５０／０．１ｍｌ。冻干过程中损失的毒价在０．５个滴度之内。本冻干苗的免疫期与鸡胚混合毒相同，对雏鸡至少为４５天。冻干苗的有效保存期为：－２０℃，２年；０～４℃，８个月，２０～３０℃，１０天     

B型副鸡嗜血杆菌的分离鉴定

从辽宁某公司鸡场疑似鸡传染性鼻炎的病鸡眶下窦分离到一株副鸡嗜血杆菌，用Page程序和Kume程序对其进行血清型鉴定，确认为B型副鸡嗜血杆菌，这是首次在我国分离到B型副鸡嗜血杆菌。     

规模化猪场两种副猪嗜血杆菌疫苗的免疫效果比较

近年来随着规模化饲养技术的应用和饲养高度密集,猪繁殖与呼吸综合征病毒、圆环病毒2型等感染导致猪免疫功能下降,猪场容易暴发副猪嗜血杆菌病。抗生素的大量使用使猪体内的病原菌对部分药物产生了耐药性。而接种疫苗也由于副猪嗜血杆菌的血清型多达15种以上,各型之间毒力差异较大,若田间流行的致病菌株与疫苗株不同则导致缺乏交叉保护而造成免疫失败。     

新城疫V4株弱毒变种的选育

应用有限稀释法通过ＳＰＦ鸡胚传代，从新城疫Ｖ２弱毒中克隆出一个变各，即２０代以后的继代毒，命名为新城疫Ｖ４克隆２０弱毒株，（ＮＤ－Ｖ４Ｃ２０）。毒以１０＾－１－１０＾１３×０．１ｍｌ接种１０日龄ＳＰＦ鸡胚尿囊腔１５０小时内，鸡胚极少死亡。每个滴度５个胚有尿液均可凝集鸡红血球。第１０代和第２０代的每个滴度５个胚有的混合尿液以１０＾－６×０．５ｍｌ一次饮水免疫鸡，即能引起ＨＩ抗体反应，也能抵抗新城疫强     

鸡新城疫CS2实验疫苗的生产及鉴定

应用ＳＰＦ鸡胚生产出３批ＣＳ２实验疫苗，疫苗的病毒价≥１０８．５ＥＬＤ５０／ｍｌ。对２月龄小鸡的最低免疫量（ＭＩＤ）为３～３０ＥＬＤ５０。据此，作者们建议对此种小鸡的实用免疫剂量为１０５ＥＬＤ５０。对这３批疫苗的实验结果显示：１０倍的剂量（即１０６ＥＬＤ５０）对鸡不引起任何不正常现象。免疫持续期达１２个月以上。在２～８℃和－１５℃中分别保存９和２４个月效力不变。