气肿疽梭菌致弱培育的研究(气肿疽弱毒菌苗研究第一报)

批林整风运动推动了兽医生物药品战线上科学研究工作的蓬勃发展,本刊前两期刊登的《羊链球菌弱毒菌苗的研究》《干燥猪瘟、丹毒二价苗的试验,试产及试用》和这一期刊登的《气肿疽弱毒菌苗研究》《深层培养无毒炭疽芽胞试验》等试验报告,都展示了我国兽医生物药品生产和科研工作的大好形势。我们热情支持这些工作。但同时也要看到这些新成果,还有一定的不完整性,需要进一步进行试验研究。如这一篇试验研究报告,说明了气肿疽弱毒铝苗对海猪及羊的免疫力很好,但对牛的试验结果很不规律,有的1毫升免疫攻10或20个致死量可以保护,有的攻1.5个致死量,仅保护3/4,似应用牛多作试验,以肯定对牛的最合适免疫量。并进一步试验如何保证菌苗效力的稳定。又该菌种通过动物后的稳定性问题,似亦应进行一些试验。     

气肿疽弱毒氢氧化铝活菌苗安全性试验

新疆生药厂自建厂以来,曾先后生产用于予防牛、羊气肿疽病的菌苗有气肿疽甲醛菌苗、气肿疽明矾菌苗,几年来此两种菌苗在予防自治区境内气肿疽病的发生收到了显著的效果。但从我们实践中来看,尚存在一些不足之处,如免疫力较差、使用剂量大,保存及免疫持续期较短的弱点,尤以免疫力较差最为明显,几年来制造的甲醛及明矾两种灭活菌苗中,先后就有六批因效力不合格而报废,损失百余万毫升,造成人力和物力极大的浪费。     

气肿疽明矾菌苗研究(第一报)

前言自1949年开始,我国各地,特别是华北地区,气肿疽疾病流行甚广,死亡耕牛甚多。我们为了寻找有效的预防药品,曾进行菌苗制造研究。这些工作,虽历时已有数年,但到目前为止,它对菌苗的生产上,仍不失其意义。兹整理成文,就正于同道。     

牦牛副伤寒弱毒冻干苗的安全及效力试验

我们采用醋酸铊肉汤培养基传代致弱培育出一株STM8002—550弱毒菌株。在此基础上同成都兽药厂联合试制了4批冻干苗,进行了牦牛副伤寒冻干苗的本动物安全及效力试验、免疫期试验、保存期试验、小区域等试验。现报告如下: 一、菌苗制造1.菌种选都柏林沙门氏菌STM8002—550弱毒菌株的典型菌落,接种于琼脂斜面上作菌苗制造用。2.种子培养①培养基为1.5%蛋白胨肉汤,pH7.4—7.6,分     

气肿疽梭菌延边样的分离鉴定

牛、羊等反刍动物的气肿疽病是由气肿疽梭菌感染引起的严重危害畜牧业发展的一种疾病,本研究从延边州延吉市采集疑似气肿疽梭菌感染的牛肝脏、脾脏、肌肉等组织进行气肿疽梭菌的分离鉴定。结果表明:经病原学检查、生化鉴定、动物试验及分子生物学鉴定,本试验成功对气肿疽梭菌进行了分离,该菌株细胞毒素、cct A基因与Gen Bank上已发表的气肿疽梭菌ATCC 10092菌株的同源性达到99.0%,此结果为该地区气肿疽病的免疫和微生态防治提供了重要的参考依据。     

气肿疽梭菌C54-1株的制备与检定

为研究气肿疽梭菌C54-1株(CVCC60001)的菌种特性,制备了1批气肿疽梭菌C54-1株,并对菌种的形态及生化特性、培养特性、血清学特性、真空度、纯粹、剩余水分、毒力及免疫原性、16S rDNA等进行检定,以及对于该菌的适宜培养基促生长能力等方面进行了比较。实验结果表明,该冻干菌种的形态及生化特性、培养特性、血清学特性、真空度、纯粹、剩余水分、毒力及免疫原性均符合《中华人民共和国兽用生物制品规程》二〇〇〇版质量标准的规定。16S rDNA鉴定为气肿疽梭菌,相似度为99.93%。在免疫原性检定中,使用致死剂量攻毒时,免疫组能够4/4被保护,证明该菌明矾苗免疫效果良好。使用商品化梭菌培养基对于该菌培养进行了比对,证实商品化培养基替代厌气肉肝汤的可能性。本研究为气肿疽梭菌的制备和检定提供参考依据,并使用不同培养基进行比对研究,为该菌的稳定培养和疫苗工艺改进提供了研究基础。     

猪丹毒弱毒菌种 G4T(10)试验报告

一、本菌种的培育经过:本菌种的培育工作开始于1972年,原始菌种是哈尔滨兽医研究所的G370。初期用G370通过不同的方法进行诱变致弱,经经筛选的结果,初步确定以含有0.01%叮吮黄血斜面传10代(名为GT10),免疫原性较好,但安全性还不够理想。以后‘在GT(10)的基础上继续用0.01%叮吮黄血斜面传30代     

气肿疽梭菌PCR检测方法的建立及初步应用

为建立气肿疽梭菌(Clostridium chauvoei)的快速检测方法,根据Gen Bank中已发表的气肿疽梭菌ATCC10092细胞毒素Cct A基因序列(登陆号:JQ692583.1)设计了一对特异性引物,并以气肿疽梭菌标准株C54-1全基因组DNA为模板,对气肿疽梭菌细胞毒素Cct A基因进行PCR扩增,经过敏感性和特异性试验对该试验方法进行验证,并初步应用于临床检测。结果表明:建立的PCR检测方法具有快速、特异、敏感、高效等优点,与其他诊断方法相比更适用于气肿疽梭菌的诊断。     

二重PCR方法鉴别气肿疽梭菌和腐败梭菌

用包含16S～23S rDNA间隔区和23S rDNA的部分序列作为气肿疽梭菌特异性标志,以α毒素部分序列作为腐败梭菌特异性标志,建立了鉴别气肿疽梭菌和腐败梭菌的二重PCR方法。结果显示：气肿疽梭菌C54-1株扩增出大小为509 bp的条带,腐败梭菌C55-1株、C55-16株均扩增出大小为148 bp的条带,均与预期吻合;而产气荚膜梭菌C57-1株、C59-37株,肉毒梭菌C62-4株,诺维梭菌C61-4株均未扩增出任何条带。扩增产物的测序结果进一步证实了本方法的特异性。菌株的生物学特性试验结果也符合相应气肿疽梭菌和腐败梭菌的特点。本研究所建立的二重PCR方法可用于气肿疽梭菌和腐败梭菌的快速鉴定。     

鹿气肿疽的诊断与治疗

<正>鹿气肿疽又称黑腿病或鸣疽,是由气肿疽梭菌引起的一种急性热性传染病。以在肌肉丰满部位发生气性炎性肿胀,伴有捻发音和跛行为特征。1病原体气肿疽梭菌为两端钝圆的大杆菌,有周身鞭毛,能运动,但无荚膜。在体内外均可形成中立或近端芽胞,呈纺锤状或汤匙状。革兰氏染色阳性,用病鹿肝表面材料作涂片染色,可见菌体两端钝圈,多单在或成对排列,但不形成长链锁或长丝状。本菌为一种专性厌氧菌,在葡萄糖血液琼脂平板上生长的菌落具     

牛肺疫兔化弱毒菌苗现地制造和应用的观察

某县自1959年以后开始应用了牛肺疫兔化弱毒菌苗。三年来应用弱毒菌苗共注射牛只100,327头。效果良好,现已基本消灭了牛肺疫的威胁。兹介绍经验如下:菌苗的制造(一)菌种:1959年使用的菌种以222代胸水菌种,在现地共接种六代(223—228)接种家兔98只,采胸水533毫升。1960年以654代胸水菌种,共接种六代,98只家兔产胸水447毫升。1961年以3—14代胸水菌种,共接种三代,57只家兔,共产胸水173.5毫升。     

牦牛副伤寒弱毒苗的研究 STM8002-550菌株牛体安全效力试验

我们采用醋酸铊肉汤培养基传代致弱的方法,培养出一株对小白鼠安全且免疫原性良好的STM8002—550弱毒菌株。并在牛体进行了安全效力试验,结果较满意,简述于后: 一、试验材料 1.菌种①STM8002—550弱毒菌株:为本所培育,供制苗进行牛体免疫试验用。     

气肿疽干粉灭活疫苗试产品的检验报告

对 1997～ 1999年试制的 7批气肿疽干粉灭活苗用豚鼠测定最小免疫量 ,其免疫量结果是 :最小 2mg/头剂 ,最大 12mg/头剂。根据其出粉量和最小免疫量综合结果 ,每毫升菌液所出干粉的头剂数 ,完全可以达到湿苗的头剂数。同时对配合后分装的 6批干粉苗进行了各项检验 ,检验方法参照气肿疽灭活疫苗和梭菌多联干粉灭活苗检验方法和标准。经检验其安全性和效力在豚鼠体上均达到了气肿疽灭活苗的标准 ,无菌检验情况和水份测定情况均达到了梭菌多联干粉苗标准 ,并且在疫苗试用中用户反应良好     

禽霍乱弱毒活菌苗饮水免疫试验

禽霍乱弱毒活菌苗饮水免疫试验,近几年只见过两篇报导。国外Rice等人(1979)应用美国克莱姆森大学[CU]株的禽霍乱弱毒活菌苗以1:133及1:50     

仔猪副伤寒弱毒菌苗的研究

采用醋酸铊为细菌减弱剂,对三株仔猪副伤寒菌种进行了培育试验,结果从一株菌种中选育出一株(C500)毒力弱而稳定,免疫原性良好的菌种。因此株菌种制的冻干活菌苗免疫仔猪109头,攻击强毒后获得保护99头(对照33头攻击强毒后死亡31头),解决了仔猪副伤寒死菌苗效力差的问题。为了使菌苗达到实用目的,曾对菌种的毒力、稳定性、小动物效力检验、佐剂选择、免疫剂量、菌苗保存期以及田间使用观察等做了一系列试验,给菌苗推广应用提供了数据。     

英国引进的牛副结核弱毒菌苗对绵羊免疫试验的组织学观察

英国引进的牛副结核弱毒菌苗,通过接种绵羊后攻毒,进行细菌学及病理组织学检查,认为此菌苗有一定的免疫性。兹将病理组织学观察结果汇报如下: 材料与方法 1.弱毒菌苗:由英国引进316F、2E、Ⅱ三种弱毒菌株混合而成,每毫升含5mg菌。     

一例羊气肿疽的诊疗

羊的气肿疽病的病原为气肿疽梭菌,是一种两端钝圆大杆菌,大小(0.5~1.7)μm×(1.6~9.7)μm革兰氏染色阳性。气肿疽病又称鸣疽、气性炭疽、黑腿病。组织坏死、产气和水肿为主要特征。病羊体温急剧升高(可达42℃),24h内体温逐渐下降。在股部、臀部、肩部或胸前肌肉丰满处发生气性炎性水肿,肿胀部热而疼痛,之后肿胀中心变冷,失去知觉,产生大量气体,有臭味。肿胀部皮肤干燥、紧张、呈黑紫色,触诊患部硬而有弹性,有捻发音。切开流出橘红色带泡沫酸臭液体。病程发展到最后病羊出现呼吸困难,直至败血死亡。剖检可见尸体迅速腐败,瘤胃膨胀,四肢张开。肝实质坏死,肾和膀胱出血。     

C型肉毒梭菌透析培养菌苗区域(安全性)试验

据Sterne等报导用透析培养法制备C型肉毒梭菌类毒素,其抗原效价比常法可提高500—1,000倍(结合力测定)。三年来青海兽医生物药品厂用“青透型培养器”制备C型肉毒梭菌透析菌液获得成功,在相同菌种与培养基的条件下,透析培养毒素毒力比常法提高30倍,毒素纯度提高115倍。以透析菌液制成的透析菌苗对绵羊最小免疫量为0.008ml(可耐10个MLD的C型毒素攻击);对豚鼠注射0.1ml作安全试验,其结果轻于常规法菌苗的反应。将本透析培养菌苗以生理盐水稀释,使每ml含菌苗0.02ml,每批四只绵羊作1ml皮下接种免疫。经六批效力检验为100％保护。本菌苗已于1984年4月     

猪丹毒弱毒冻干菌苗研究

目前国内外所用预防猪丹毒的菌苗,约有10余种,其中猪丹毒减弱菌苗,在我国、苏联、美国、波兰及日本等国家均已试制或应用。我们于1950年开始进行猪丹毒减弱菌苗的研究,其结果已有总结发表。这种菌苗的制造方法简单,使用方便,有其一定的优越性;但因其保存期较短(室温保存只有2个月),这就大大的限制了这种菌苗的应用价值,很难适应实际防疫上的需要。因此,怎样利用这种菌苗的优点,解决其存在的     

浅析牛巨噬细胞内气肿疽梭菌细胞内存活机制

气肿疽梭菌是黑腿病的病原体,气肿疽是国内反刍动物易感的一种严重性疾病,该病可引发肌肉坏死和毒血症,并伴随高死亡率.尽管众所周知预防该病暴发的重要性,但至今相关对黑腿病发病机制的研究却少之又少,并且很多研究基于未经证明的假设.其中一种假设认为转运气肿疽梭菌孢子从反刍动物的肠道到肌肉,是巨噬细胞起到主要作用的原因.因此,现在的研究目的在于检测气肿疽梭菌或者孢子在通过牛单细胞源的巨噬细胞的吞噬作用后是否能够保持活性,并展示出炎性反应以及由气肿疽活性细胞或者孢子感染牛巨噬细胞后产生相应的抗炎性细胞因子转录子.这些结果更能证实此典型的假设:在黑腿病的早期发病机制中,巨噬细胞可能起到十分重要的作用.