1株鸭源棒状杆菌的分离及鉴定

从四川某鸭场发病种鸭的肝脏组织中分离到1株革兰阳性杆菌,通过形态特征、培养特性、生化特性进行鉴定,并进行药敏试验,应用通用引物对其16S r RNA基因进行克隆与序列分析。结果显示,分离细菌在血琼脂平板生长良好,能发酵部分糖类。系统进化分析显示,分离菌株与棒状杆菌属细菌遗传进化关系较密切,其16S r RNA基因序列与棒状杆菌代表菌株的同源性在87.1%~98.9%之间,分离菌鉴定为棒状杆菌。     

1株鸭源污染棒状杆菌的分离鉴定与致病性分析

为查明某养殖场肉鸭皮肤损伤的病因,采集病鸭的脏器进行病原分离鉴定,测定了细菌的耐药情况,并进行动物回归试验.结果表明,分离菌株JS01在血琼脂培养基上呈现淡黄色透明光滑菌落,生化特性与棒状杆菌属细菌相似;16S rDNA基因序列与污染棒状杆菌(Corynebacterium pollutisoli)的同源性为100％;...     

一例山羊巴氏杆菌病的病原分离及鉴定

2011年12月福建省德化县某饲养场发生一种以发病急、病死率高、出血性败血症为主要特征的传染病。无菌采集濒死羊的肝、脾和心血等组织,分离到一株病原菌,通过涂片、镜检、分离培养、生化试验、动物致病性试验及16S rRNA的鉴定。结果表明,该株分离菌为羊巴氏杆菌。     

仔猪李斯特杆菌的分离与鉴定

为了对某猪场病死仔猪的死亡病因进行调查,本试验采集病料进行研究,采用鉴别培养基分离、生化特性鉴定、PCR扩增细菌16S rRNA基因及测序分析等方法对样品中存在的细菌进行分离鉴定,结果显示分离菌为李斯特杆菌。采用标准K-B纸片法对分离菌株进行20种抗菌药物的药敏试验,并对其生长曲线进行测定。结果显示,此菌株对青霉素G、磷霉素、阿莫西林等药物高敏,而对呋喃唑酮等药物耐药。37 ℃培养6~14 h后细菌处于增殖期。本研究为中国仔猪李斯特杆菌病细菌学检测及治疗提供了科学依据。     

副猪嗜血杆菌的分离鉴定及16S rRNA序列分析

从云南某规模化养猪场病猪肺脏分离到1株革兰氏阴性小杆菌,经细菌生化鉴定、PCR鉴定和16S rRNA序列比对鉴定为副猪嗜血杆菌。抗生素药物敏感试验结果表明,分离菌株对四环素、红霉素、氯霉素、头孢噻吩高敏;对庆大霉素、氧氟沙星、诺氟沙星中敏;对磺胺甲唑耐药。16S rRNA分析结果表明,该分离株与GenBank中的Hps参考株AB078973(基因登录号)同源性为100%,将分离菌株鉴定为副猪嗜血杆菌。16S rRNA遗传进化关系表明,分离株与副猪嗜血杆菌3株血清5型参考株AB078972、AB078973、AB078974的16S rRNA序列位于一个分支上,遗传进化关系最近,它们之间的核苷酸同源性在99.0%~99.4%之间,初步鉴定为血清5型副猪嗜血杆菌,致病性试验结果表明,分离菌株对小白鼠有强致病性,命名为YN-1株。     

1株奶牛源约翰逊不动杆菌的分离鉴定

旨在了解从奶牛垫料中分离得到1株革兰阴性菌的病原特征,本研究通过形态学观察、生化试验、染色镜检、16S rDNA同源性分析等方法对分离菌进行鉴定,并采用药敏试验测定药物敏感性,小鼠攻毒试验确定分离菌株毒力情况.结果 表明,分离菌为革兰阴性菌;扩增的16S rDNA序列长度为1283 bp,与约翰逊不动杆菌的核苷酸相似性...     

广西猪丹毒杆菌分离鉴定及生物学特性研究

试验收集2013年6月至2014年2月广西南宁、桂林、柳州、玉林、贵港、钦州等6个市送检的疑似猪丹毒发病的材料,用鲜血琼脂平板对病料进行细菌分离,37℃恒温箱培养24~48 h,观察分离细菌的菌落形态,并进行革兰氏染色观察,初步确定其为革兰氏阳性的细小杆菌。为进一步确定分离出的是否为猪丹毒杆菌,试验进一步纯化细菌,提取细菌DNA用16S rRNA随机引物进行扩增,将扩增出来的目的片段连接到p MD18-T载体上,进行克隆、酶切鉴定及序列测定;最终将测序获得16S rRNA序列在NCBI上进行BLAST,结果表明试验最终分离出5株猪丹毒杆菌,为进一步确定分离出来猪丹毒杆菌的生物学特性,试验做了进一步深入研究：药物敏感性试验、小白鼠攻毒试验、耐药基因的检测、免疫攻毒保护性试验。     

鸡约氏乳杆菌的分离鉴定及进化分析

从3日龄健康小鸡肠道中分离到1株乳杆菌,用PCR方法从分离菌株扩增16S rRNA基因,获得大小为1340 bp的DNA片段,该片段的核酸序列已提交GenBank,登录号为EU290749。将分离株的16S rRNA基因核苷酸序列与GenBank上其它乳杆菌进行同源性分析并建立进化树。结果表明,分离株的16S rRNA基因核苷酸序列与NCBI公布的鼠约氏乳杆菌分离株(AB295648)的同源性为99.6%,因此该分离菌株被鉴定为鸡约氏乳杆菌(chicken Lactobacillus johnsonii),命名为HN/0711。     

鹅源栗褐芽胞杆菌的分离和鉴定

为了鉴定从狮头鹅心血中分离到的芽胞杆菌.本研究进行了一系列生理生化试验和动物致病性试验,根据试验结果可鉴定该芽胞杆菌为栗褐芽胞杆茵.同时,提取了该芽胞杆菌的基因组DNA,用细菌16SrRNA基因的通用引物,经PCR方法成功扩增出其部分16S rRNA基因,克隆后测序表明其全长1 516 bp,G+C含量为55%.该序列GenBank登录号为EU717967.BLAST在线分析显示其与栗褐芽胞杆菌的16S rRNA基因序列一致性>99.5%,从分子水平进一步证实了该菌为栗褐芽胞杆菌.将其回归动物试验结果表明:以1×10~8CFU/只的接种剂量对鹧鸪、鹌鹑的致死率为60%,对狮头鹅的致死率70%.     

新疆某牛场大肠杆菌的分离鉴定及16S rRNA序列分析

为了调查新疆某规模化奶牛场犊牛腹泻的原因并确定病原,无菌采集15份腹泻犊牛粪样进行病原的分离培养,采用形态学观察、生化试验、血清学和致病性分析等方法鉴定分离菌株,利用大肠杆菌16SrRNA通用引物进行基因序列扩增并测序,使用DNAStar软件将分离菌株测序结果与GenBank中的其他菌株序列进行同源性比对,采用Mega...     

副猪嗜血杆菌黑龙江株的分离与鉴定

为确定黑龙江某猪场发病猪群的病原,本研究从疑似浆膜炎的病料中分离到一株革兰氏阴性细小杆菌,通过对其进行细菌形态学、培养特征、生化特性和16S rRNA基因PCR鉴定,结果表明该分离菌株为副猪嗜血杆菌(HLJ-1分离株)。16S rRNA基因序列分析结果显示:该分离菌株与参考株的基因同源性达99%;药敏试验结果表明HLJ-1分离株对头孢曲松、头孢噻肟等β-内酰胺类抗生素高度敏感;小白鼠致病性试验结果显示,该分离株具有较强致病性。     

水貂肠道枯草芽孢杆菌的分离及16S rRNA鉴定

为了获得水貂的有益菌种,及研制毛皮动物益生菌制剂提供基础,并为进一步深入研究枯草芽孢杆菌提供参考,从健康水貂的肠道中分离纯化出1株枯草芽孢杆菌,编号为 P2,通过形态学观察、生理生化试验以及16S rRNA 序列分析及同源性比较进行综合鉴定,结果显示菌株 P2与菌株 Bacillus subtilis CICC 10023（GU980947.1）亲缘关系最近,同源性达到了99.9%,因此鉴定 P2菌株为枯草芽孢杆菌。     

地衣芽孢杆菌的分离鉴定及其抑菌活性分析

为了研究不同来源的地衣芽孢杆菌对常见致病菌的抑菌效果等生物学特性，试验采用细菌形态学、生理生化、16S rRNA基因测序、系统发育树分析、牛津杯抑菌试验等检测技术，对5株不同来源(鸡粪、羊粪、牛瘤胃内容物、猪肠内容物及土壤)的地衣芽孢杆菌进行了分离鉴定及体外抑菌活性检测。结果表明：5株分离株B₁₇(鸡粪)、B₃₀(羊粪)、B₃₂(牛瘤胃内容物)、B₃₅(猪肠内容物)和B₃₈(土壤)均可在LB固体培养基上生长，其中有3株不同来源的分离株B₃₀、B₃₅和B₃₈菌落形态相同；镜检可见分离株均为革兰氏阳性杆菌、均有近中生的孢子，符合芽孢杆菌的菌体特征；生理生化特性与芽孢杆菌相符；PCR扩增均得到约为1 500 bp的目的片段;所有分离株与GenBank中的地衣芽孢杆菌在同一簇，均鉴定为地衣芽孢杆菌；在5株地衣芽孢杆菌中，除猪源地衣芽孢杆菌B₃₅外，其余4株均有抑菌作用，羊源及牛源地衣芽孢杆菌B     

仔猪鲍曼不动杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

为鉴定陕西某规模化场猪场发酵床养殖圈舍仔猪发生严重腹泻症的病原,本研究对病死仔猪肝、脾等脏器进行细菌分离,对疑似致病菌进行生化试验鉴定和16S rDNA测序,并进行小鼠接种试验验证细菌毒力和药敏实验检测敏感药物.结果显示分离菌为鲍曼不动杆菌(Ab),对小鼠具有较强的致病性,对卡那霉素等少数抗生素敏感,对其它多种抗生素具有耐药性.本研究结果表明Ab对仔猪具有较大威胁,特别是对发酵床养殖模式下的仔猪具有更大威胁.     

鸭源多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及耐药性分析

为鉴定临床疑似鸭多杀性巴氏杆菌感染肉鸭的病原菌，本试验通过细菌分离培养、菌体形态观察、细菌生化鉴定、16S rRNA基因测序分析、细菌种特异性鉴定、荚膜分型鉴定和动物回归试验进行鉴定，并通过药敏试验和耐药基因检测进行耐药性分析。结果显示，从患病鸭肝脏组织分离到的细菌在鲜血琼脂培养基中呈现表面光滑凸起、灰白色菌落，为革兰氏阴性短小杆菌，瑞氏染色呈两极浓染；生化鉴定结果显示，分离菌能发酵葡萄糖、蔗糖和甘露醇，硫化氢、氧化酶和吲哚等试验阳性；16S rRNA基因序列系统进化树分析显示，该分离菌与多杀性巴氏杆菌聚为一支，同源性 > 99%；细菌种特异性鉴定结果与多杀性巴氏杆菌相符；荚膜分型鉴定结果仅扩增到约为1 050 bp的目的基因片段，与荚膜血清A型相符；动物回归试验显示，该分离菌有较强的致病性；药敏试验结果显示，该分离菌对羧苄西林、氨苄西林、复方新诺明和四环素等12种药物耐药；经耐药基因PCR检测显示，该分离菌携带Sul1、Sul3、tet（X）和Intl1 4种耐药基因，与药敏表型相符。本试验成功分离到1株鸭源荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌，为鸭多杀性巴氏杆菌病的防治提供参考依据。     

一株棕熊源鲍曼不动杆菌的分离鉴定

1头10月龄圈养雌性棕熊,在无任何征兆情况下突然死亡,为查找死因,进行动物尸体剖检、细菌培养、细菌形态学观察、16SrDNA分析、药敏试验等.结果显示:肝、脾、肾病料组织接种于哥伦比亚血琼脂平板37℃培养24 h后,血平板上均见灰白色、黏稠、圆形、表面光滑的菌落,分离株革兰染色阴性,呈两端钝圆的短杆菌,无芽孢;分离株1...     

兔源不动杆菌的分离与鉴定

福建某兔场发生兔呼吸道感染,初步判断为细菌感染。为探明发病原因,采集患兔分泌物进行细菌分离,观察分离菌的形态特征和培养特征,进行生化试验、PCR检测、测序分析、药敏试验以及动物试验。结果表明,该分离菌革兰氏染色呈粉色短杆状,伊红美兰琼脂培养基呈蓝色菌落;氧化酶阴性,无动力,硝酸盐还原试验阴性;PCR产物测序结果表明该分离菌与不动杆菌属同一分支,同源性达97.3%,可见,所分离的菌为不动杆菌(Acinetobacter spp.)。动物试验表明,分离菌具有一定的致病性,是导致兔患病的病原菌。药敏试验结果表明,该菌对四环素、哌拉西林和美满霉素等抗生素敏感,对青霉素、头孢呋辛和氨苄西林等抗生素耐药。     

鸭源鸡杆菌的分离鉴定及耐药基因与质粒相关性分析

为了解我国江苏、广西、山东等地鸡、鸭、鹅等禽类鸭源鸡杆菌的耐药特点，试验采集以上地区病死禽肝脏、心脏、输卵管等组织进行鸭源鸡杆菌的分离，对分离株进行生化鉴定、16S rDNA基因的PCR鉴定与测序分析、药敏试验、耐药基因检测及18种不相容(Inc)质粒检测，并分析分离菌药敏表型与其携带耐药基因之间的相关性和分离菌携带耐药基因与Inc质粒之间的相关性。结果表明：共得到17株具有鸭源鸡杆菌特征的分离株。17株分离菌的生化鉴定结果均与鸭源鸡杆菌特征相符。17株分离菌16S rDNA基因序列与参考株的核苷酸相似性均达到97%以上，进一步确定17株分离菌均为鸭源鸡杆菌，并分别命名为2021GA01～2021GA17。17株分离菌对复方新诺明、多西环素、阿莫西林、诺氟沙星、左氧氟沙星、环丙沙星、卡那霉素的耐药率较高，分别为88%、82%、76%、76%、76%、71%和65%。在17株分离菌中，对3种及以上抗生素耐药的菌株有14株，占比为82.35%;对10种及以上抗生素耐药的菌株有7株，占比为41.18%;仅菌株2021GA10对头孢噻肟和头孢曲松钠同时耐药。在17株分离菌中，2021GA04、...     

家养野猪副猪嗜血杆菌的分离鉴定及16S rRNA序列分析

对江西省某家养野猪场临诊疑似副猪嗜血杆菌（Haemophilusparasuis,Hps）感染的病例进行细菌分离鉴定,PCR扩增分离菌株的16SrRNA并进行测序分析,并对分离菌进行细菌形态、生化鉴定和PCR鉴定及序列比对分析。结果显示,获得1株家养野猪源Hps分离株（命名为HPJXYZ01）,该分离株与国内外参考菌株序列之闻的同源性为93．1％～99．2％,与本实验室江西省家猪源分离株的同源性为84％～92．1％。结果表明,江西省家养野猪中存在Hps感染,分离株与国内外家猪源Hps间的16SrRNA序列差异不大,Hps16SrRNA核苷酸序列比较稳定,其进化不存在明显的地域相关性。