兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病、产气荚膜梭菌病(A型)三联浓缩灭活疫苗的研制

通过对抗原的浓缩 ,试制成功兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病、产气荚膜梭菌病 (A型 )三联氢氧化铝浓缩灭活疫苗。将该三联疫苗按每只 1ml的剂量免疫家兔 ,2 1d后效力试验结果表明 ,对兔病毒性出血症的保护率为 10 0 % ;对兔巴氏杆菌病、产气荚膜梭菌病 (A型 )的保护率均达 80 %以上 ,且对上述 3种病的免疫期为 180～2 10d(即 6～ 7个月 )。该疫苗 4～ 8℃保存 15 0d(5个月 )后保护力几乎没有下降     

兔巴氏杆菌菌株WD92的分离及菌苗研制

武汉市郊等地１９９３年度兔巴氏杆菌病有不同程度流行，调查８个单位，１０７１０只家兔，平均发病率为８．６％，从病兔体内分离出巴氏杆菌ＷＤ９２（暂定名），经镜检与动物接种试验，证明ＷＤ９２毒株能使家兔感染巴氏杆菌病而发病致死。用此毒株制成甲醛灭活菌苗，使用安全有效，其预防率在８０％以上。     

应用微量凝集法检测家兔大肠杆菌抗体水平的试验

本试验应用兔源致病性大肠杆菌 E1、E2、E7株的培养物经 12 1℃高温处理 2 h,制成含 0 .5 %石炭酸生理盐水的大肠杆菌“O”抗原悬液 ,抗原凝集效果呈现出最佳的检测工作浓度为 12亿细菌 / m l,应用该方法检测免疫过兔大肠杆菌疫苗的家兔血清抗体峰值达 1∶ 12 8,而从非免疫兔和免疫过兔瘟、多杀性巴氏杆菌病、魏氏梭菌病疫苗的兔血清中未能检测出兔大肠杆菌抗体     

牛场常用疫(菌)苗的使用方法

病名疫苗名称接种方法及剂量免疫期炭疽无毒炭疽芽孢苗1岁以上牛1mL/头;1岁以下0.5mL/头,均为皮下注射1年Ⅱ号炭疽芽孢苗1mL/头,皮下注射1年牛巴氏杆菌牛出血性败血症氢氧化铝菌苗体重100kg以下5mL/头;100~200kg,10mL/头;200kg以上20mL/头,均为皮下注射9个月布氏杆菌病布氏杆菌19号活菌苗6~8月龄,皮下注射5mL/头1年牛肺疫牛肺疫兔化弱毒菌苗(氢氧化铝菌苗)1岁以上牛2mL/头;6~12月龄1mL/头,臀肌注射1年气肿疽气肿疽甲醛菌苗5mL/头,皮下注射6个月牛瘟牛瘟兔化弱毒疫苗按瓶签规定方法稀释肌注1年以上口蹄疫口蹄疫弱毒疫苗按瓶签规定方法使…     

实验性禽巴氏杆菌病细菌在体内分布观察

禽巴氏杆菌病是禽类养殖业危害较大的传染病之一.自发现该病一百多年来,各国兽医科技工作者对该病的病原学、菌苗研制、免疫机制的探讨作了大量的工作.本实验通过人工感染巴氏杆菌后,应用免疫酶染色对体内各组织器官中的细菌分布及定位进行观察,为本病预防和治疗提供依据.1 材料和方法1.1 材料1.1.1 动物 选用禽霍乱平板凝集阴性鸡26羽饲养1个月后无异常分组实验1.1.2 细菌 C48—1强毒株(购自中监所),改良马丁琼脂24小时培养3～5个菌能致死2月龄以上的试验鸡.在马丁琼脂平板上,菌落光滑致密.在瑞氏在染色涂片中,见大小不一呈两极着色的卵园形或短杆状细菌.血琼脂斜面上保存菌种,每半月移植一次,4℃冰箱保存备用使用期不超过2个月,正式攻毒用细菌经马丁肉汤培养,鸡体复状,分离培养.     

兔鸡两用多杀性巴氏杆菌灭活疫苗的研制及野外应用

从近２００份兔源禽源巴氏杆菌中分离到荚膜Ａ型多杀性巴氏杆菌兔１株，其血清型抗式为０７：Ａ，可抗血清型０５：Ａ、０７：Ａ、０８：、０９：Ａ菌株的攻击，将其作为制菌株制成的疫苗，对兔鸡均获得满意的免疫效果，兔３个月的保护率为９０．３８％，６个月为７３．０７％；鸡３个月的保护率为８４．６１％，４个月７１．１５％。疫苗在４－１５℃保存期为１年。已在国内９个省，自治区野外应用２００余万头剂，反馈资料证明疫苗     

兔三联灭活疫苗的研究

从患兔瘟的肝、脾、肾中采取含毒病料，从患急性巴氏杆菌病和魏氏梭菌性肠炎的病例中分离细菌，研制成氢氧化铝甲醛灭活疫苗。经试用，免疫后７ｄ至８个月内不同时期均能有效地控制疾病。对免疫兔进行免疫效力及免疫期的测定，结果表明，在７ｄ，５０ｄ，１００ｄ和１８０ｄ内均能抵抗致死量兔瘟强毒的攻击；在免疫后２０ｄ时全部能抵抗１０个最小致死量的兔巴氏杆菌培养的攻击，经７５ｄ后也有１００％的保护率；     

兔源多杀性巴氏杆菌C51-17株ompA基因表达与免疫原性鉴定

[目的]研究兔源多杀性巴氏杆菌C51-17株ompA基因表达与蛋白免疫原性鉴定.[方法]根据GenBank公布的多杀性巴氏杆菌序列AE004439设计引物,经PCR扩增出兔源多杀性巴氏杆菌外膜蛋白ompA基因,开放阅读框包含l 062 bp碱基,插入到pGEX-6p-1质粒,构建成功重组表达载体pGEX-dompA,转入大肠杆菌BL21,经IPTG诱导高效表达出多杀性巴氏杆菌成熟重组外膜蛋白ompA.[结果]表达产物经SDS-PAGE分析,重组多杀性巴氏杆菌外膜蛋白ompA分子量在63 ku,Western blot分析显示,重组蛋白能与兔抗多杀性巴氏杆菌高免血清呈现免疫反应,表明表达的重组蛋白具有较好的免疫活性.[结论]获得的重组蛋白为家兔多杀性巴氏杆菌病诊断试剂盒和疫苗的进一步研究奠定基础.     

兔病毒性出血症和巴氏杆菌病灭活二联苗的研究与应用

用感染ＲＶＨＤ病兔的肝，脾，肾以及从鸡，兔混养暴发氏杆菌病兔体分离的细菌研制的甲醛灭活二联苗，免疫健康易感兔，于免疫后对ＲＶＨＤ强毒攻击第３天保护率达５０％，第５天达１００％，持续保护６个月以上，抗体动态测定与玫毒结果一致 ，对巴氏杆菌攻击第７、１５天的保护率分别达７５％、９１．７％，６个月保护率仍达７２．２％。     

兔病毒性出血症和巴氏杆菌病二联苗的研制——Ⅱ.二联苗的免疫产生期和保存期的测定

本文报告兔病毒性出血症(兔瘟)和巴氏杆菌病二联苗的免疫产生期,以及疫苗保存在不同条件下,经不同时间后的免疫效果。 一、免疫产生期的测定 前已测定,兔瘟灭活苗和巴氏杆菌灭活苗的单苗免疫产生期分别为5～7天和10～15天。本试验用二联苗测免疫产生期,方法是用3批二联苗,每批免疫兔24只,每兔皮下注射联苗2毫升,于免疫后7、10、15天,分别攻击强毒,测定其免疫力产生期。     

鸡大肠杆菌多价复合佐剂灭活苗的研制

鸡大肠杆菌多价复合佐剂灭活苗是采用山西省优势鸡致病性大肠杆菌的菌体碎片作为抗原物质,矿物油和黄芪多糖组成复合免疫增效佐剂研制而成的。通过免疫效果试验、免疫保护期试验及疫苗保存期试验等,结果表明,免疫后7 d,该疫苗即可产生坚强的免疫力,而常规疫苗(对照Ⅱ组)则需14 d;血清抗体滴度于接种后约6周时,O78达到1∶32(最高可达1∶53),并且维持6周以上,而常规疫苗的最高值为1∶18;该疫苗的免疫保护期为5个多月,常规疫苗为4个月;4～8℃贮藏,保存期不低于14个月。实验室和区域试验结果说明该疫苗具有产生循环抗体时间早、安全、免疫保护率高等特点。     

天津地区4株禽多杀性巴氏杆菌的交互免疫分析

用禽多杀性巴氏杆菌４ 株分离菌和标准菌株分别制备油乳剂灭活苗免疫鸡,接种３ 周后分别用强毒菌攻击,观察５ 株菌之间的交互保护作用。结果分离菌 Ｔ Ｊ８ 株交互免疫效力优于标准菌株和其它３ 株分离菌。     

禽霍乱-新城疫二联油乳剂灭活疫苗研究（Ⅳ报）——疫苗的田间试验

1材料与方法 1．1二联营的制备与质量检验 1．1．1毒株来源与二联苗的制备。禽A型为杀性巴氏杆菌（APM）效力检验用强毒为C48．1株,鸡新城疫病毒（NDV）效力检验用强毒为北京株、APM1502株和NDVLaSota株,均购自中国兽药监察所。将APM强毒1502株培养菌液与NDV弱毒LaSota株感染鸡胚尿囊液混合,经甲醛溶液灭活后,按马闻天等的方法制备5批二联油乳剂灭活疫苗（批号05-1—05-5）。     

湖南省岳阳市鸡源性大肠杆菌血清型鉴定

从湖南省岳阳市周边8个养鸡场收集病料,从中分离出169株大肠埃希氏菌;血清型鉴定结果表明,岳阳市周边鸡源性大肠杆菌的主要血清型为：O78（41株）、O1（35株）、O2（22株）、O55（16株）,共占总待检菌株的67．4％,占定型菌株的80．9％。     

灭活蜂胶菌对种鸡大肠杆菌病的防治效果

河南某种鸡场饲养4.5万只种鸡,发生大肠杆菌病。从68只病死鸡脏器中分离到27株大肠杆菌,对其中10株大肠杆菌进行了鉴定和分型,结果表明:90.9%大肠杆菌为O78,9.1%大肠杆菌为O74。将O78、O74制成灭活蜂胶苗,免疫该场青年鸡,发现使用安全、效果好,免疫后的180 d保护率仍达到100%。免疫过的鸡群因大肠杆菌病的死亡率低于1%~5%,产蛋率平均高5%~10%。     

黄羽肉鸡大肠杆菌的分离鉴定和多价灭活苗的免疫效果

从患呼吸道病的黄羽肉鸡病料中分离到大肠杆菌,经血清学鉴定为O78血清型.选取10株菌种制备油佐剂灭活疫苗.安全试验结果证实,该疫苗对18日龄黄羽肉鸡安全.采用0.5 mL该疫苗免疫21日龄肉仔鸡(经颈背部皮下接种),定期采血检测,结果表明抗体滴度较高.区域试验结果表明,该疫苗对大肠杆菌感染鸡具有良好的免疫作用.     

火鸡新城疫免疫程序的研究

本实验使用950只美国尼古拉白羽健康火鸡,中间实验使用9616只,用新城疫疫苗免疫后,抽样监测其HI抗体滴度和观测其对新城疫强毒攻击的抵抗力的方法,研究了火鸡新城疫的免疫日龄、免疫途径、免疫剂量、免疫次数以及免疫期与保护率的关系。结果表明,对1日龄雏火鸡用新城疫Lasota疫苗(Ⅳ系苗),以鸡的倍量,通过滴鼻和点眼途径首次免疫,其免疫保护期可维持1个月;对21日龄的火鸡用新城疫Mukteswar苗(Ⅰ系苗)以鸡的倍量,通过肌肉注射2次免疫,其免疫保护期可维持6个月齿龄;对种用火鸡,于开始繁殖前3～4周,用新城疫Ⅰ系苗,以鸡的倍量肌肉注射进行第3次免疫,可在生产期抵抗新城疫的侵害。由此,提出商品火鸡和中用火鸡的新城疫免疫程序。     

兔病毒性出血症与A型魏氏梭菌二联苗的研究

将兔病毒性出血症疫苗与浓缩的A型魏氏梭菌菌苗按1：1混合制成联苗。试验证明，此苗安全有效。联苗2ml／只免疫，兔病毒性出血症第4天可产生免疫力，保护率为100％；A型魏氏梭菌21天产生免疫力，保护率为82．14％。     

鸡大肠杆菌多价灭活菌苗的研制和应用

从大肠杆菌血清型为O78标准株及O78、O119的34个地方分离株中筛选出3个强毒菌株,作为制苗基础菌株,并加入发病鸡场的自家分离株,一起作为制苗菌种。于酵母肉汤中培养18~24 h。甲醛灭活后,制成鸡大肠杆菌多价自家灭活铝胶苗。试验表明,该苗接种雏鸡0.5 ml,成鸡1 ml,无毒副作用;鸡只免疫后,对同型菌株近期攻毒后的保护率为100%;鸡只免疫后12周,血清中抗体平均凝集价为1∶33.6,高于免疫临界线1∶16,并且鸡群健康状况稳定,增重加快,饲料利用率和产蛋率增加。     

致病性大肠杆菌微胶囊口服疫苗的制备及对其免疫功能的评价

通过喷雾-界面配位改良法制备了大肠杆菌微胶囊口服疫苗,平均直径为10μm,包被率为65％;并通过体外试验证实了本疫苗能避免胃酸的破坏且肠溶性良好;利用淋巴细胞转化实验、玻板凝集试验、ELISA试验测定了其免疫效果,试验数据表明,大肠杆菌微胶囊口服疫苗能有效激活细胞免疫、体液免疫、黏膜免疫,可产生大量的IgA和IgG,并且使用方便,安全有效。