伊维菌素微乳中伊维菌素的含量测定方法研究

为建立伊维菌素微乳中伊维菌素含量的高效液相色谱（HPLC）测定方法,选用Hypersil ODS2 （5 μm,4.6 mm×250 mm）色谱柱,流动相为甲醇∶乙腈∶水为35∶60∶5（V/V/V）,检测波长为244 nm,柱温为30 ℃,流速为1 mL/min进行测定。结果显示,伊维菌素在该色谱条件下,系统适应性良好,在80~320 μg/mL浓度范围内线性关系良好,回归方程为：Y=22 700X+2 510,R²=0.9998,总平均回收率为101.90%±2.94%,RSD为2.88%,对中试生产的3批伊维菌素微乳进行含量测定,RSD为1.86%。表明该含量测定方法准确可靠,重现性好,可用于伊维菌素微乳中伊维菌素含量的测定,并为该新型制剂的质量标准的制定和质量评价提供依据,也为后期的临床安全应用提供可靠的参考。     

HPLC法测定微乳中伊维菌素的含量

建立了HPLC测定伊维菌素微乳中伊维菌素含量的方法。色谱柱为ZirchromC18(4.6mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇∶水(85∶15),测定波长为245 nm,流速为1.0 mL/min,柱温为40℃。伊维菌素与辅料及溶剂峰分离良好,在2.22~111.0μg/mL时线性关系良好(R2=0.999 9)。HPLC测定伊维菌素方法便捷、准确、重复性好,可用于伊维菌素微乳含量的测定。     

Study on Sterility Test Method of Ivermectin Microemulsion

The assay was aimed to study the sterility test and validation test of ivermectin microemulsion preparation and establish a sterility test method for ivermectin microemulsion preparation.The test method was carried out according to the method in volumeⅠ, Chinese Veterinary Pharmacopoeia Edition 2005.By choosing positive control bacteria and defining washing volumes in sterility test, the membrane-filter method was used to test the quantity of 10 bottles of test samples, and the sterility test was established.The result of method validation test showed that the test and all of positive control bacteria and microorganism growth after each filter being washed with 400 mL 0.1% peptone solution.It illustrated that the samples had no antimicrobial activity under the sample quantity and test condition.This method was available for sterility test of ivermectin microemulsion preparation.Using this method to test three lots test samples, the results showed that the positive control bacteria grew well within 24 h.The negative control bacteria and three lots test samples were sterile.It indicated that sterility test results met the requirements.     

伊维菌素微乳制剂的过敏性研究

本试验旨在观察伊维菌素微乳制剂对动物的过敏性反应。以《化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则》为指导,选用豚鼠及Wistar大鼠为试验动物,采用全身主动过敏试验和被动皮肤过敏试验观察伊维菌素微乳制剂对动物的致敏作用。结果显示伊维菌素微乳制剂对豚鼠和Wistar大鼠的过敏性反应均为阴性。本试验为伊维菌素微乳制剂的安全性评价提供了试验依据。     

微乳技术在伊维菌素剂型制备中的应用及展望

为了解决药物难溶解或不溶解的问题,并进一步提高药物生物浓度,简化药物的制备及使用方法,应用微乳技术研发新型药物载体,制备伊维菌素微乳,可有效提升伊维菌素的载药量,提高机体对伊维菌素的吸收速率,对伊维菌素的发展和应用起到推动作用.     

微乳技术对伊维菌素治疗动物寄生虫病的推动作用

为了更好的发挥伊维菌素对牛、羊等动物寄生虫疾病的预防和治疗作用,应用微乳(ME)技术研制新型药物载体,解决了寄生虫药物伊维菌素不溶于水的难题,并提升了溶解浓度,有效的提高动物机体对伊维菌素有效成分的吸收速率,从而提高了生物利用度,充分发挥伊维菌素预防和治疗寄生虫病的作用,降低或杜绝动物罹患寄生虫疾病的风险,避免寄生虫病对动物造成的伤害。     

伊维菌素毫微乳注射剂的研究及其临床药效

伊维菌素为新型大环内酯类抗生素类驱虫药,具有广谱、高效、低毒的药效学特点,对体内外寄生虫特别是线虫和节肢动物均有良好的驱虫杀虫应用。但对绦虫、吸虫及原生动物无效。自20世纪80年代上市后,广为农牧业应用。目前伊维菌素是世界上效果,最广泛的抗生素类驱虫药之一。     

伊维菌素微球在家兔体内的药动学

皮下注射伊维菌素 (IVM )微球悬液 (5 0mg/kg及 10 0mg/kg)和害获灭 (1%伊维菌素 ,0 5mg/kg) ,RP HPLC UV法定量 ,研究了IVM在家兔体内的药物动力学。害获灭皮下注射给药 ,药 时数据符合一级吸收一室开放模型 ,主要动力学参数为 :t1/2ka=7 2 4± 2 96h ;t1/2ke=36 38± 8 6 6h ;tmax=2 1 4 6± 4 82h ;Cmax=2 2 53± 2 32ng/ml;AUC =174 9± 318ng/1.h ,其动力学参数表现比较明显的个体差异 ,且与其它动物有明显差别。微球皮下注射一周后 ,血药浓度呈较稳定状态 ,到第 4 2天 (高剂量组 )和第 32天 (低剂量组 ) ,血浆中测不出H2 B1a(低于 2 5ng/ml)。以房室模型拟合 ,微球高低剂量组均符合有吸收二室开放模型 ,主要药动学参数均表现显著的个体差异。     

伊维菌素微乳制剂的溶血性试验

为了观察新型兽药制剂伊维菌素微乳是否具有溶血和红细胞凝聚等反应,试验以《化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则》为指导,取兔血,采用常规体外试管法,观察伊维菌素微乳制剂是否出现溶血现象。结果表明:伊维菌素微乳制剂未出现溶血和红细胞凝聚现象,可供注射使用。说明伊维菌素微乳制剂无溶血性,安全可靠。     

伊维菌素微球在山羊体内的药效学研究

探讨新型制剂伊维菌素微球在山羊体内的药效学。选取32只山羊〔平均体重(27.05±1.20)kg〕,随机分成4组(Ⅰ^Ⅳ),每组7Ⅳ),每组7⁹只。Ⅰ组0.3 mg/kg体重,皮下注射伊维菌素注射液;Ⅱ和Ⅲ组3 mg/kg体重,分别皮下注射伊维菌素PLA5微球和PLGA微球混悬液;Ⅳ组作为对照组,不给药,对山羊粪便虫卵数(EPG)进行检测。Ⅰ、Ⅱ组和Ⅲ组山羊在第14天虫卵减少率均为100%,虫卵全部转阴;在给药后91 d虫卵减少率分别为0、74.3%和80.0%、;在给药后123 d分别为0、61.8%和0。伊维菌素对山羊胃肠道线虫虫卵具有较好的驱除作用,PLGA微球和PLA5微球的药效维持长达120 d左右,表现出长效作用。     

Content Determination of Ivermectin in the Ivermectin Microemulsion Injection

In order to establish the determination method of ivermectin (IVM) in the ivermectin microemulsion injection by high performance liquid chromatography (HPLC), Hypersil ODS2 colunm (5 μm,4.6 mm×250 mm) was used in this study. The mobile phase composed of methanol, acetonitrile and water (35:60:5,V/V/V) at a flow rate of 1 mL/min. The detection wave length was set at 244 nm and the column temperature was 30 ℃. The results showed that the HPLC system suitability of IVM was good. A good linear correlation of IVM was observed within the concentration range 80 to 320 μg/mL, and the average recovery rate was 101.90%±2.94% with RSD was 2.88%, the regression equation was Y=22 700X+2 510 (R²=0.9998). The RSD of IVM content in ivermectin microemulsion injection was 1.86%. The method was accurate and reliable,reproducible,easy to operate, which could be used in new type of ivermectin microemulsion injection. The method could be used as the basis of quality control and establishing a quality standard, and to provide basis for quality evaluation, also can provide reliable reference for safe veterinary clinical application in the future.     

苄星氯唑西林乳房注入剂无菌检查方法研究

本试验旨在建立苄星氯唑西林乳房注入剂无菌检查法并进行验证.采用离心—薄膜过滤—酶中和相结合的方法,按照《中国兽药典》2010年版一部附录进行试验.结果显示采用离心—薄膜过滤—酶中和相结合的方法,以0.5%聚山梨酯-80 pH 7.0氯化钠—蛋白胨缓冲液冲洗,冲洗量400 mL/膜,在最后的培养基中加入不少于300万单位的青霉素酶可有效消除样品对各试验菌株的抗菌活性;验证试验结果显示各验证菌生长良好,各供试品管均未见菌生长.结果表明本试验成功建立了可靠、准确、可用于苄星氯唑西林乳房注入剂的无菌检查法.     

盐酸头孢噻呋无菌检查方法的建立

为建立盐酸头孢噻呋无菌原料的无菌检查方法,本试验按照方法适用性试验的有关要求,对前处理、冲洗总量等进行了考察。取供试品500mg,加10mL2.6%无菌碳酸钠溶液使溶解,再转移至490mL0.85%无菌氯化钠溶液中,作为供试液按照薄膜过滤法处理,用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液为冲洗液,每张滤膜每次冲洗量为100mL,冲洗5次。结果显示,方法适用性试验中,供试品6种阳性菌试验组与阳性菌对照组相比均生长良好,供试品组、阴性对照组均无菌生长,说明供试品在该条件下已消除其抑菌作用,方法合理,结果准确、可靠,可作常规无菌检查法。     

盐酸头孢噻呋乳房注入剂无菌检查方法的建立

为建立盐酸头孢噻呋乳房注入剂的无菌检查方法,本试验按照《中华人民共和国兽药典》2015年版一部附录1101无菌检查法中方法适用性试验的有关要求,对取样量、稀释液种类、冲洗方式、加酶量等进行了考察。取供试品置于无菌分液漏斗中,加300 mL无菌十四烷酸异丙酯,摇匀,再加200 mL含1%聚山梨酯80的0.1%无菌蛋白胨溶液,充分振摇,静置,取水层,按照薄膜过滤法处理,用pH 7.0无菌氯化钠－蛋白胨缓冲液为冲洗液,每张滤膜每次冲洗量为100 mL,冲洗4次,每管培养基中加入600万单位的青霉素酶溶液。结果显示,方法适用性试验中,供试品6种阳性菌试验组与阳性菌对照组相比均生长良好,供试品组、阴性对照组均无菌生长,说明供试品的检验量在该检验条件下已消除其抑菌作用。盐酸头孢噻呋具有较强的抑菌活性,本试验采用薄膜过滤法,建立了合理的无菌检查方法,能有效去除盐酸头孢噻呋乳房注入剂中的抑菌成分,使检验结果更准确、可靠,可作为该制剂的常规无菌检查方法。     

复方阿莫西林乳房注入剂无菌检查方法的确立

建立了复方阿莫西林乳房注入剂的无菌检查方法。根据《中国兽药典》2010年版一部附录要求,通过比较薄膜过滤法和直接加入法对本品的适用性,最终选用直接加入法作为无菌检查方法,即以每1 mg阿莫西林中加入9000单位的青霉素酶来消除供试品的抑菌活性,并通过无菌方法验证,证明该方法适用于对复方阿莫西林乳房注入剂进行无菌检查。     

阿莫西林、硫酸黏菌素混悬注射液无菌检查方法研究

目的建立阿莫西林、硫酸黏菌素混悬注射液的无菌检查方法。方法按《中国兽药典》2005年版一部附录进行试验。结果采用薄膜过滤法,每管培养基中加入不少于100万单位的青霉素酶,以1%聚山梨酯80的0.1%蛋白胨水溶液冲洗液,选择冲洗量为300mL,可消除样品对各菌株的抗菌活性。结论阿莫西林、硫酸黏菌素混悬注射液可用该方法进行无菌检查。