哺乳动物原始卵泡生长启动的调控

哺乳动物卵泡发育是一个被众多内分泌、旁分泌和自分泌因素精确调控的生理过程。原始卵泡生长启动可能受卵巢内在因子，如生长因子等的调控，而不是通常认为的FSH(促卵泡素)；原始卵泡细胞连接和原始卵泡的细胞(卵母细胞和颗粒细胞)之间相互作用也参与调节原始卵泡的生长启动     

表皮生长因子对卵泡刺激素促进的小鼠胚胎卵巢卵泡发育和雌二醇分泌的影响

FSH、EGF是参与卵巢功能调节的重要因素，关于EGF对FSH促进的胚胎卵巢卵泡发育和类固醇激素发生的影响报道甚少。本实验经单个卵巢的总卵泡数、生长卵泡数和5个最大卵母细胞的平均直径为卵泡发育优劣的衡量指标，利用我们早期研究建立的无血清培养体系研究EGF对FSH促进的小鼠胚胎卵巢卵泡发育和分泌雌二醇的作用。结果发现：①EGF＋FSH＋雄烯二酮（A）处理组的胚胎卵巢总卵泡数在培养第7－9d显著高于FSH＋A处理组，而且生长卵泡数和卵巢内5个最大卵母细胞平均直径在培养后期也显著高于FSH＋A处理组（P＜0.05);②FSH＋A处理组的胚胎卵巢在培养第7－9d分泌大量雌二醇，而GF和FSH联合使用时胚胎卵巢的培养早期雌二醇分泌水平显著低于FSH＋A处理组（P＜0.05）。结果提示EGF协同FSH促进小鼠胚胎卵巢卵泡体外生长发育；同时EGF抑制SH诱导的雌二醇分泌，其促卵泡发育作用可能与雌二醇的合成不相关联。     

小鼠卵巢内细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶的发生

利用免疫组织化学技术探讨了细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶[P450（SCC）]在小鼠卵巢内的发生时相，研究发现15日龄的胎鼠卵巢内即存在P450（SCC）的免疫染色；出生前后卵巢内的基质细胞和前体颗粒细胞中均可检测到P450（SCC）的免疫染色，伴随卵泡发育，产后10d的小鼠卵巢次级卵泡膜细胞开始出现P450（SCC0的免疫染色，并随着日龄的增加而逐渐增强；临近性成熟小鼠卵巢内较大的有腔卵泡颗粒细胞也开始出现P450（SCC）的免疫染色。研究结果初步阐明了P450（SCC）在卵巢内的发生时相和表达模式；产后小鼠卵巢内P450（SCC）伴随次级卵泡膜细胞的形成而发生；优势卵泡排卵前的成熟发育进程中壁层颗粒细胞逐渐获得表达P450（SCC），进而分泌孕酮的能力。     

小鼠胚胎卵巢体外无血清培养体系的建立

调节原始卵泡形成、起始生长的信号目前仍知之甚少.一个重要的原因就是缺乏一个良好的研究模型.我们以妊娠13 d昆明白小鼠胚胎卵巢为研究对象,在5 d的贴壁培养后分别用FBS培养液和ITS培养液继续培养共计21 d,探讨在不同培养条件下胚胎卵巢卵泡发育和内分泌功能的差异.结果发现在以ITS、BSA和胎球蛋白为血清替代物的无血清培养体系中小鼠胚胎卵巢卵泡发育要优于其在含2 % FBS的培养体系中的发育状况.两种培养条件下胚胎卵巢睾酮的分泌水平相当(P>0.05),但在FBS处理组培养液中可以检测到少量雌二醇,而ITS处理组培养液中检测不到雌二醇.结果提示:①妊娠13 d的小鼠胚胎卵巢体外培养至一定阶段即具备了合成睾酮的能力,并且在血清中存在的某些未知刺激因素的作用下胚胎卵巢可以获得将睾酮转化成雌二醇的能力;②所建立的以ITS、BSA和胎球蛋白为血清替代物的无血清培养体系更适于小鼠胚胎卵巢卵泡的体外生长、发育.这为日后进一步研究促性腺激素、生长因子、细胞因子等对胚胎卵巢卵泡发育和类固醇激素发生的精确作用提供了一个良好的研究模型.     

水牛促卵泡素受体(FSHR)基因5''''端侧翼序列的克隆与分析

促卵泡素(FSH)是动物脑垂体分泌作用于卵巢卵泡生长、发育、分化、成熟和排卵的重要繁殖激素.由于是生物大分子,不能透过细胞膜,FSH必须与靶细胞膜上的促卵泡素受体(FSHR)结合,经过受体介导将信息传递到靶细胞内,才能发挥其生物学功能.目前国内外已对牛、山羊等多种动物的FSHR基因的Cdna序列进行了克隆测序,但是关于水牛FSHR基因5'端侧翼序列还未见报道.本研究对水牛FSHR基因5'端序列进行克隆和序列分析,其目的是寻找水牛FSH受体基因的SNP突变位点,从而为以后进行FSH受体基因的多态性分析和探索该受体基因在水牛繁殖中的可能作用打下基础.     

小鼠胎胚卵巢体外无血清培养体系的建立

调节原始卵泡形成、起始生长的信号目前仍知之甚少。一个重要的原因就是缺乏一个良好的研究模型。我们以妊娠１３ｄ昆明白小鼠胚胎卵巢为研究对象，在５ｄ的贴壁培养后分别用ＦＢＳ培养液继续培养共计２１ｄ，探讨在不同培养条件下胚胎卵巢泡发育和内分泌功能的差异。结果发现在以ＩＴＳ、ＢＳＡ和胎球蛋白为血清替代物的无血清培养体系中小鼠胚胎卵巢卵泡发育要优于其在含２％ＦＢＳ的培养体系中的发育状况。两种培养条件下胚胎卵巢     

日粮能量水平对蛋鸡性成熟过程中卵巢重和E_2及P_4水平的影响

本文以研究日粮能量水平对蛋鸡性成熟过程中卵巢重、E2及P4水平的影响为目的。结果表明:在性成熟过程中,卵巢重和卵巢表面卵泡数随着年龄和能量水平的提高而增多,22周龄时,除低能Ⅱ组外,其他各组卵巢质量和优势卵泡(10mm以上)明显增多,与低能Ⅱ组差异达显著水平;血清E2和P4含量持续上升,22周龄时均达较高水平;高能组E2和P4水平显著高于低能组,到22周龄,对照组E2水平显著高于其他各组,高能组又显著高于低能Ⅱ组;其他4组P4水平显著高于低能Ⅱ组,说明过低的能量水平通过影响E2和P4水平的分泌进而影响卵巢卵泡的发育。     

促性腺激素及卵泡液协同对牛腔前卵泡体外发育的影响

将100个φ100～150μm牛腔前卵泡,随机分成8组,每组12～13个卵泡,在McCoy's 5a无血清培养系统研究了促卵泡素(FSH)和促黄体素(LH)有、无两种情况下,添加0、10%、15%及20%牛卵泡液(BFF)对牛腔前卵泡的体外生长、发育、存活及雌二醇(E2)分泌的影响.结果显示,在无促性腺激素下,添加不同浓度BFF对牛腔前卵泡体外发育无明显促进作用(P>0.05),但可刺激体外培养腔前卵泡的E2分泌.当有10 ng/mL LH和50 ng/mL FSH存在下,培养不同时间腔前卵泡的发育率、存活率,各卵泡液组均高于对照组,其中10%BFF组腔前卵泡培养6 d时发育率为(78.52%)与对照组(49.28%)差异显著(P<0.05),培养12 d腔前卵泡φ增长值33.7±4.8μm,显著高于对照组及其它处理组(P<0.01),同时在培养9 d时,有一枚卵泡成腔;各添加卵泡液组的E2测定值更高,其中添加10%BFF组中φ>100μm腔前卵泡在培养6 d时其E2分泌量达最高值48.96±1 1.54 pg/mL.表明FSH、LH存在下,培养液中加入10%BFF可显著提高腔前卵泡在体外的生长、发育、存活和E2分泌及诱导卵泡腔的形成.     

家畜类腔前卵泡的体外分离方法和培养体系研究进展

摘要： 在哺乳动物体内，启动卵泡生长的机制还不完全清楚，卵泡的体外培养遇到较大困难；由于不同物种卵泡的成熟时间和调节机理有较大差异，因此它们的体外培养技术还不能通用。在过去的几年，不同动物的卵泡体外培养体系的建立均有一定程度的发展，而且对卵泡的发育过程也有了很好地了解，但是获得高质量的成熟卵母细胞还有相当的距离。在目前的技术条件下，啮齿类的腔前卵泡已能经体外培养发育至有腔卵泡期，而且从有腔卵泡分离的卵母细胞经体外成熟、体外受精后已能产生新的个体。但家畜类腔前卵泡的体外培养体系还处于早期研究阶段，探讨早期卵泡的发育特征，建立成功的体外分离方法和培养体系是开发家畜类卵巢资源的基础。     

血管紧张素II在小鼠卵巢上的定位与分布

应用免疫组织化学方法研究了ＡｎｇＩＩ在小鼠卵巢中的定位,结果表明：ＡｎｇＩＩ分布在不同发育阶段卵泡的内、外膜细胞,卵母细胞及其透明带上,颗粒细胞和卵丘细胞未见着色,卵巢黄体,基质和血管上亦见有ＡｎｇＩＩ强免疫反应物。在成年小鼠或ＰＭＳＧ处理４８ｈ的性未成熟小鼠卵巢上,少数有腔卵泡靠近卵泡腔侧的颗粒细胞中也检测到ＡｎｇＩＩ免疫阳性着色,推测ＡｎｇＩＩ在卵泡的发生、发育、卵泡退化和黄体的形成过程中起着