胚胎干细胞的研究进展及其应用

胚胎干细胞 (ES细胞 )是一类从早期胚胎内细胞团或原始生殖细胞分离和克隆出的、具有发育全能性和多能性的细胞。ES细胞在动物克隆、转基因动物生产、细胞工程、组织工程、临床克隆治疗和发育生物学、遗传学以及制作动物疾病模型等的研究应用中起着重要的作用。文章介绍了胚胎干细胞及其生物学特性 ,国内外研究进展和新动态。阐述了建立干细胞系的技术要点、ES细胞的应用及发展前景     

胚胎干细胞及其应用

胚胎干细胞(ES细胞)是从动物早期胚胎的内细胞团或原始生殖细胞分离出来的具有发育全能性的一种未分化的无限增殖细胞系.ES细胞在动物克隆、转基因动物生产、细胞工程、组织工程、临床克隆治疗和发育生物学等方面的研究应用中起着重要的作用.文章介绍了胚胎干细胞的生物学特性,国内外研究进展和研究动态.阐明了建立ES细胞系的技术要点以及ES细胞的应用及发展前景.     

动物胚胎干细胞的研究概况

胚胎干细胞（ES细胞）是从早期胚胎内细胞团（ICM）或原始生殖细胞（PGCs）经体外分化抑制培养分离克隆的,ES细胞在动物克隆、转基因动物生产、细胞工程、组织工程、临床克隆治疗和发育生物学等的研究应用中起着重要的作用.为此,介绍胚胎干细胞的生物学特性,国内外研究进展和研究动态,阐明建立ES细胞系的技术要点以及ES细胞的应用及发展前景.     

胚胎干细胞体外诱导分化的研究进展

胚胎干细胞(Embryonic stemcells,ES细胞)是从附植前胚胎的内细胞团(ICM)或附植后胎儿的原始生殖细胞(PGCs)经体外抑制分化培养、分离和克隆得到的具有发育全能性的细胞。ES细胞体外诱导分化的研究自从20世纪90年代开始到现在,一直是生命科学和医药工程领域的研究热点,并且近年来这方面的研究也取得了一些突破性的进展。本文简述了胚胎干细胞的诱导原理、方法和定向分化的一些细胞种类以及目前研究存在的问题和困难。     

不同培养方式对昆明小鼠类ES细胞分离及培养的影响

胚胎干细胞（Embryonic stem cell,ES细胞）是从早期哺乳类动物胚胎或原始生殖细胞分离的具有全能性的细胞系。在体外分化抑制培养条件下,具有保持未分化的状态及无限增殖的能力。自Evans和Kaufman首次建立小鼠ES细胞系以来,各种动物ES细胞分离与克隆成为国际生物科学领域的热点课题之一。ES细胞可广泛应用于嵌合体的制备和克隆动物的生产。利用ES细胞遗传操作,可生产转基因动物,进行细胞基因结构与功能的关系以及细胞分化机制的研究。本研究采用不同培养方式对昆明小鼠类ES细胞进行分离及培养,供相关研究者参考。     

胚胎干细胞分离和克隆影响因素的研究进展

胚胎干细胞ES是从早期胚胎或原始生殖细胞中分离出来的能够在体外进行传代培养,而不分化的全能性细胞,ES细胞最主要的生物学特征是具有发育的全能性或多能性,ES细胞能在体外培养、增殖、传代、冻存和诱导分化,是研究生物发育、行为和建立人体疾病模型的理想工具,本文重点论述了影响胚胎干细胞分离和克隆的因素。并展望了胚胎干细胞的应用前景。     

ES细胞在遗传育种中的应用

胚胎干细胞(embryonic stem cell．ES细胞)是从早期胚胎内细胞团(inner cell mass．ICM)或原始生殖细胞(primordial germ cells．PGGs)分离和克隆的具有全能性的细胞。ES细胞作为一种新型的实验材料,广泛应用于动物克隆、转因动物的生产、真核细胞基因的表达与调控、人类遗传病动物模型的创建,人类器官移植材料的生产以及细胞分化机制的研究等领域。ES细胞分离、克隆技术与遗传工程和胚胎工程相结合,对于阐明动物生长发育的基本规律、抢救和保护濒危动物遗传资源、建立先进的动物育种技术体系具有重大的理论意义和实践价值。本文将结合胚胎干细胞的生物学特性,综述其在动物遗传育种中的应用及在当前技术水平下存在的问题。     

胚胎干细胞体外诱导分化的研究进展

胚胎干细胞(embryonic stem cell，ES细胞)是由早期胚胎内细胞团(ICM)或原始生殖(PGC)细胞经体外分离、抑制分化培养获得的多潜能细胞。ES细胞具有发育分化的多潜能性和无限的自我更新能力，能在体外长期培养并具有向机体各种组织细胞分化的潜能。由于ES细胞的全能性，在体外可以分化出包括3个胚层在内的所有细胞，     

动物胚胎干细胞在动物科学中的应用

自Ｅｖａｎｓ等从延迟着床胚胎中分离出小鼠胚胎干细胞 (ＥＳ)以来 ,包括小鼠在内的各种动物ＥＳ细胞的分离受到国内外科学家的关注[1] 。ＥＳ细胞在克隆动物 ,生产转基因动物 ,创建人类遗传疾病动物模型 ,研究细胞分化 ,细胞与细胞的相互关系以及用人类ＥＳ细胞定向分化制造用于器官移植的组织器官等领域具有广阔的应用前景。本文对动物ＥＳ细胞克隆及其遗传操作技术在动物遗传育种、胚胎学及发育生物学领域的应用前景作一评述和展望。1　生产克隆动物1 1　利用ＥＳ细胞生产克隆动物的优势　近年来的研究表明 ,动物早期胚胎细胞、动物胚胎…     

胚胎干细胞定向分化研究进展(上)

胚胎干细胞 (ES细胞 )是由哺乳动物早期胚胎分离克隆的一类未分化二倍体细胞 ,能在体外增殖 ,又能保持未分化状态。在一定条件下 ,ES细胞可向多个方向分化 ,并生成多种功能细胞。ES细胞在遗传上具有可操作性 ,即导入外源基因、标志基因和报告基因 ,诱导基因突变 ,基因打靶或导入额外原有基因使之过度表达等。利用该特性可制作各种实验模型并进行各种基因分析。ES细胞能被诱导分化为构成机体的任一种细胞类型 ,可用于临床细胞、组织和器官的修复和移植治疗 ,研究ES细胞的定向分化有着重要的理论和应用价值。1　ES细胞分化机制研究现状目…     

牛胚胎干细胞研究进展

牛胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ES)在畜牧业生产中具有重要的应用价值,可以用来研究早期胚胎的发育和培育新品种,对加速牛良种化进程具有重要理论意义和实践价值。国内外很多研究者为建立牛ES细胞系付出了巨大努力,并建立了一些牛类ES细胞系,但是迄今还未建立公认的牛ES细胞系。近年来,小鼠和人类干细胞体外培养及其功能研究取得了巨大进展,然而小鼠和人ES细胞体外培养的条件并不适合培养牛ES细胞。影响牛ES细胞建系过程中的诸多因素如细胞因子、多能性标记基因与表面标记、传代方式和饲养层等还有待深入研究。本文综述了国内外牛ES细胞研究进展和影响牛ES细胞建系的主要因素,以期为牛ES细胞研究提供参考。     

某些因素对牛和小鼠类胚胎干细胞分离与培养的影响

以荷斯坦牛胚胎和小鼠胚胎为材料 ,研究了犊牛血清、饲养层、培养液、添加物和消化液对牛胚胎干细胞和小鼠胚胎干细胞克隆效率的影响。结果表明 ,在 2 4h内使小鼠胚胎贴壁率达 86 %以上的犊牛血清可用于小鼠和牛胚胎干细胞的分离 ;在 ES细胞分离与克隆中 ,以 15 %～ 2 0 %犊牛血清为宜 ,在 DMEM(L)培养基中添加 0 .1μmol/LNa2 Se O3 0 .1mmol/Lβ-巯基乙醇 10 μg/L IGF 10 0 0 IU/m L L IF,能显著提高牛 ES细胞分离与克隆效率 ;在TCM199、DMEM(高糖 )和 DMEM(低糖 ) 3种培养基中 ,低糖 DMEM更适宜于牛 ES细胞的分离 ;优秀胚胎形成的团状 ICM更适宜于分离与克隆 ES细胞 ,在 37℃用低浓度消化液处理 ICM或 ES细胞集落 ,再以机械将其离散为细胞小块 ,ES细胞克隆效率最高。     

干细胞潜力的利用

从理论上讲 ,胚胎干细胞的分离 ,能使科学家在实验室培养出机体的任何组织 ,但实现这种潜能却不容易。多能干细胞是发育生物学研究最热和争论最多的话题之一。当研究人员报告首次分离到人 ES细胞系 ,其中一组 ES细胞从人胚胎中提取 ,而另一组 ES细胞从夭折的胎儿得到的 ,且在周密的实验条件控制下能继续维持其未分化状况的时候 ,这项工作引一些争论 ,可是 ES细胞最终可能为组织或器官修复开辟了广阔的前景。ES细胞不是研究人员培养出的唯一的干细胞种类 ,在过去几年里 ,科学家从动物和人的不同组织中分离出干细胞 ,包括骨髓干细胞 ,甚至…     

从原始生殖细胞分离克隆绵羊胚胎干细胞

为了研究绵羊胚胎干细胞在体外培养过程中的生长行为,试验采用30～45日龄的绵羊胎儿生殖嵴及其周围组织共培养的方式分离克隆胚胎干细胞。结果表明:在不添加任何细胞生长因子的情况下,也能分离克隆到具ES细胞诸多特征的胚胎生殖细胞系,即具有连续传代能力、细胞集落有典型鸟巢状结构、AKP染色阳性等。说明该细胞具有多能性,类似ES细胞。     

分化抑制物对动物胚胎干细胞克隆率的影响

胚胎干细胞是从动物胚胎内细胞团或原始生殖细胞分离的具有全能性的细胞，在遗传学、发育生物学和细胞工程领域具有广阔的应用前景。抑制胚胎干细胞分化和促进胚胎干细胞增殖是克隆胚胎干细胞的关键，本文介绍了饲养层、条件培养基、分化抑制因子对哺乳动物胚胎干细胞分离与克隆的影响，并探讨了白血病抑制因子影响胚胎干细胞克隆的机理，认为在饲养层中添加分化抑制因子能有效提高胚胎干细胞克隆率。     

昆明小鼠胚胎干细胞培养体系的优化

为了更高效地分离昆明小鼠胚胎干细胞,本研究从饲养层、胚胎发育阶段和培养液方面进行优化。将3代以内的小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)用丝裂霉素C处理后,分别按1×104、1×105、1×106·mL-1密度接种,以H-DMEM+15%KSR+LIF为培养液,观察不同密度饲养层对昆明小鼠胚胎干细胞(ES细胞)生长的影响,并研究胚胎发育阶段和培养液中分别添加干细胞生长因子(SCF)、SCF+胰岛素对昆明小鼠ES细胞分离克隆的影响。结果显示,胚胎在密度为1×105·mL-1的饲养层上,F1代和F2代ES细胞克隆形成率均显著高于其他2组(P<0.05)。囊胚的F2代ES细胞克隆形成率显著高于桑椹胚(P<0.05),培养液中添加SCF显著提高昆明小鼠胚胎贴壁率(P<0.05),同时添加SCF和胰岛素得到昆明小鼠最高胚胎贴壁率及F1、F2代ES细胞克隆形成率。所分离的ES细胞显示AKP染色强阳性,Oct-4、SSEA-1的免疫荧光检测阳性,具有ES细胞的特点。由此认为,发育至囊胚的胚胎在MEF密度为1×105·mL-1上,培养液中同时添加SCF和胰岛素更适合昆明小鼠ES细胞的分离培养。     

哺乳动物的无性生殖

导言无性生殖亦称克隆（Clone），无需单倍体的精子和卵子受精发育产生新的个体，而是由正常的二倍体细胞通过无性系培养、发育和胚胎移植获得后代。现已研究成功的无性生殖技术有：胚胎分割、嵌合体、卵裂球纯系培养和细胞核移植。细胞核移植又包括胚胎细胞、胚胎干细胞、胎儿细胞和成年动物体细胞核的移植。近期在国内外开展大讨论的克隆技术是指通过细胞核移植产生克隆动物。研究此技术对发展畜牧业、医学和药学有重要意义。通过细胞核移植，可克隆出优质高产的畜群；加速品种改良，培育出生长快具抗病性的家畜；是保护动物资源和增加珍…     

胚胎干细胞定向分化研究进展

胚胎干细胞是一类从早期胚胎内细胞团或原始生殖细胞分离和克隆出的 ,具有自我更新和发育全能性并产生分化后代能力的早期细胞 ,可分化形成各种组织类型。在合适的条件下 ,胚胎干细胞可发育成造血细胞、神经细胞、肌细胞等各种细胞。探索胚胎干细胞分化机理及其体外定向诱导分化为其他组织细胞的条件 ,就可以通过改变体外培养条件来探索胚胎干细胞向不同组织细胞分化规律 ,对揭开动物个体发育之迷 ,具有极其重要的理论意义 ;也可为细胞替代治疗、器官移植、建立药物筛选模型以及进行发育及细胞生物学的研究奠定基础。本文仅就胚胎干细胞定向分化的理论基础 ,定向分化研究现状作一综述     

胚胎干细胞的生物学特性及其应用研究

胚胎干细胞（ES细胞）是一类具有多向分化潜能的，在适合的条件下能在体外抑制分化培养，并能复制增殖的细胞。综述了胚胎干细胞的主要生物学特性及其在基因诱捕、转基因动物、疾病治疗等研究中的新进展和应用前景。     

胚胎干细胞的体外培养及应用

来自着床前的囊胚和早期胚胎的胚胎干细胞(ES细胞)是一类具有发育多能性和全能性的细胞。它在生命科学的各个领域产生非同凡响的影响。文中就ES细胞的体外培养，诱导分化及其在畜牧业、生命科学的基础学科研究和医学领域的应用简要综述。