猪精液冷冻保存的初步研究

采用液氮熏蒸法制作猪冻精颗粒 ,对稀释液及冷冻保护剂进行优化筛选。结果表明 ,在 5种稀释液中 ,5号稀释液优于其他 4种 (P<0 .0 5 ) ;甘油的冷冻保护性能优于乙二醇和二甲基亚砜 (P<0 .0 1) ,其适宜浓度为2 m L/ L;稀释液中添加安钠咖可有效延长精子的冻后存活时间 (P<0 .0 1)。猪精液冷冻效果的关键因素是冷冻温度、冷冻速度和解冻温度 ,通过对不同温度情况的研究 ,初步制定了猪精液冷冻温度曲线。     

茶多酚对猪精液低温保存的影响

为了寻找一种可较好保护精子的低温保护剂,改善猪精液低温保存方法,通过在改进的猪精液低温稀释液中添加0、0.50、1.00、1.50、2.00 mg/m L茶多酚,对比7 d内4℃下低温保存猪精子的活率、活力、畸形率、质膜和顶体完整性等参数,探讨茶多酚在猪精液低温保存中应用的效果。结果表明,在猪精液低温保存后7 d,仅0.50、1.00 mg/m L组5个质量指标均显著好于对照组(P0.05),其中1.00 mg/m L组效果最好。总之,在本试验条件下,适宜浓度的茶多酚可以明显改善4℃低温条件下猪精液的保存效果,其中最佳添加浓度是1.00 mg/m L。     

猪精液冷冻保存研究进展

总结了国内外猪冷冻精液的研究成果,对冷冻保存机理进行了简要阐述,并从稀释液和冷冻保护剂、冷冻前处理、冷冻剂型、冷冻速率、解冻等方面阐述了影响猪精液冷冻的因素。     

圆筒形贮存管对猪精液冷冻保存效果的影响

试验研究了用圆筒形贮存管冷冻猪精液时不同漂浮时间和解冻时不同解冻温度、时间对冷冻保存效果的影响。猪精液冷冻时,圆筒形贮存管在放入液氮罐前,先置液氮面上3 cm处,分别漂浮熏蒸5、10、15、20 min后投入液氮中保存。精液解冻时,分别在37℃＋1.5 min、52℃＋1.0 min、70℃＋0.5 min解冻处理。结果表明,漂浮15 min处理可显著提高猪精液冷冻后的精子活率、质膜完整率和顶体完整率。52℃＋1.0 min处理组的猪精液冷冻后精子活率、质膜完整率和顶体完整率显著高于其它2个处理组。试验结果还证实,用圆筒形贮存管冷冻猪精液是可行的,所获得的冷冻后最高精子活率与用0.25 mL麦管获得精子活率无显著差异。     

不同抗氧化剂对金华猪精液冷冻保存效果的影响

为了观察冷冻稀释液中添加不同浓度的抗氧化剂谷胱甘肽(GSH)、绿茶多酚(GTPs)、维生素E(VE)和超氧化物歧化酶(SOD)对金华猪精液冷冻保存效果的影响,分别在冷冻稀释液中添加0.125、0.25、0.5 mmol.L-1的GSH,10、15、20 mmol.L-1的GTPs,1、2、4 mg.mL-1的VE和1 000、2 000、4 000 I U的SOD,采集活率较高的金华猪精液,用上述含抗氧化剂的冷冻稀释液稀释后进行冷冻保存,分别检测4个处理组精子4℃平衡后的活率和解冻后精子活率、质膜完整性、顶体完整率。结果表明,在金华猪精液的冷冻稀释液中分别添加15 mmol.L-1GTPs、2 mg.mL-1VE、4 000 I U SOD可显著提高猪精子4℃平衡后的活率、解冻后精子活率和质膜完整率(P0.05)。     

不同冷源对民猪精液冷冻保存效果的影响

用干冰和液氮作为冻源对民猪精液冷冻效果进行研究,包括对精子活率及顶体完整率的影响.结果表明,以干冰为冻源进行民猪精液冷冻,解冻后精子活率为43.5％,顶体完整率为52.2％;以液氮为冻源进行民猪精液冷冻,解冻后精子活率为41.8％,顶体完整率为51.5％,二者差异不显著.     

猪精液冷冻保存技术研究进展

综述了猪冷冻精液的发展简史,对冷冻保存机理进行了简要阐述,并从冷冻保存稀释前处理、稀释液性能、冷冻保护剂、冷冻剂型、冷冻速率、精子浓度和解冻等方面阐述了影响猪冷冻精液的因素,指出了目前在猪精液冷冻中存在的问题,并提出了相应的解决办法.     

猪冷冻精液受胎率试验

1990～1991年,利用本项研究确定的冷冻、解冻稀释液及成套冷冻技术程序生产的冻精,以杂交母猪和本地母猪为主进行配种试验,受胎率由30％提高到50％,1991年中间试验情期受胎率提高到70.59％,窝产仔8.34～9.73头。     

不同稀释液对猪精液4℃保存效果的影响研究

[目的]利用改进的BF-5稀释液（命名为naBF5）,开发一种4℃液态保存猪精子的方法。[方法]把猪精子在LEN、BF5和mBF5这3种稀释液中4℃条件下保存5d,按照保存天数分别检测精子的活力、顶体形态、活率和ATP浓度并进行比较。[结果]在4℃条件下保存的1～2d,精子的活率在3种稀释液中没有显著的差异;但是第3天开始,3种稀释液中的精子活率有显著差异,在mBF5中保存的精子活率显著地高于在LEN和BF5中保存的精子。第1～5天,在mBF5和B巧稀释液中保存的精子正常顶体的百分率高于LEN稀释液中保存的精予;并且,在4℃保存5d后,在mBF5稀释液中保存的精子正常顶体的百分率要高于在BF5中保存的精子。在4℃条件下保存的第1～5天,mBF5稀释液中的精子活力百分率高于LEN和BF5稀释液保存的精子活力。在3种稀释液中,保存的第1～5天,精子活力的百分率都持续地降低。保存的第1～5天,mBF5稀释液中保存的精子ATP浓度比LEN和BF5稀释液中保存的高。保存5d之后3种稀释液中精子ATP浓度都迅速下降。[结论]在4℃条件下保存5d,与LEN和BF5稀释液相比,保存在mBF5稀释液中的精子表现出较高的活力、正常的顶体百分率、活率和ATP浓度。     

家兔精液冷冻保存的研究

以家兔为试验动物,通过精液在4℃保存时间来筛选合适的基础液,并从精液解冻后的精子活率和活力2个指标筛选出最佳的平衡时间和抗冻剂（甘油）浓度．冷冻保护液中渗透性抗冻剂（甘油）的3种浓度为3％,4％和5％．4℃平衡时间分别为2,3,4h．将3种甘油浓度的冷冻保护液与3种平衡时间相配伍,共9组进行冷冻试验,筛选出稀释液为：Tris3．03g,柠檬酸1．30g,果糖1．50g,卵黄20%,青、链霉素各1×10^5U,双蒸水100mL．冷冻后结果表明,3％的甘油浓度平衡3h,解冻后精子活力在0．3以上,达到人工授精的要求．     

藏獒精液冷冻技术的研究

以藏獒为试验材料,对藏獒精液冷冻过程中的几个主要技术环节进行研究,旨在确定适合于藏獒精液冷冻保存的方法.对藏獒精液冷冻过程中降温平衡时间、不同液氮面高度和解冻温度进行研究,结果表明精液用200 Ml水进行降温平衡,距液氮面3 am熏蒸,用40℃解冻时精液的冷冻效果最好.     

犬精液冷冻与人工授精的进展

详述了国内外大精液冷冻与人工授精（AI）技术的研究及利用现状,针对大精液的采集、稀释、平衡、冷冻、解冻和输精等主要技术环节进行了总结分析,试图概括本领域已有的成果和经验,找出存在的问题,以利该技术在我国的进一步研究和推广。     

猪精液冷冻保存的剂型及品种效应

为了评价细管类型在不同品种公猪精液冷冻中的效果,为猪精液冷冻的实际生产中冷冻细管的选择提供理论依据,试验将长白、大约克与杜洛克3种美系公猪(每品种7头次)精液进行不同细管类型(5.00、0.50、0.25 mL)的分装冷冻,比较各种细管类型下不同品种公猪之间和同一品种公猪不同细管类型精液冻后质量(冻后精子活力、畸形率及顶体完整率).结果表明,①相同剂型下,除了0.25 mL细管分装时杜洛克公猪冻后精子顶体完整率显著(P＜0.05)高于长白公猪外,3种公猪之间在3个指标上差异均不显著(P＞0.05);②3种公猪冻后精子活力最高的剂型均为0.50 mL细管,冻后精子畸形率及顶体完整率最好的剂型均为5.00 mL细管.总之,3种细管类型中,仅0.25 mL剂型存在品种效应,而3个品种公猪却存在着基本类似的剂型效应.     

丙氨酸、半胱氨酸及精氨酸对牛精液冷冻效果的影响

在常用的果糖-柠檬酸钠-卵黄-甘油组合稀释液的基础上,分别添加不同浓度的丙氨酸(0.25、0.50、0.75、1.00 mmol·L-1)、半胱氨酸(0.25、0.50、0.75、1.00 mmol·L-1)和精氨酸(2.50、5.00、7.50、10.00mmol·L-1),以观察3种氨基酸在牛精液冷冻中应用的最佳浓度.再以最佳浓度的3种氨基酸进行两两或三重组合,与3种氨基酸单一应用进行效果对比,检测这些氨基酸对牛精液冷冻后质量是否有协同作用.结果表明,无论单一或合并应用丙氨酸、半胱氨酸及精氨酸,均未能显著提高精液的冻后质量.但相同的处理应用于不同的公牛可能会有显著不同的效果.     

猪精子冷冻技术的研究

 采用手握法采集健康成年的长白公猪猪精子，室温离心后，采用液氮熏蒸法细管冷冻猪精子。以精子活力为判定指标，比较了平衡时间和甘油浓度对猪精子冷冻的影响。结果表明:(1)Ⅱ组精子冷冻复苏后精子活力（35.83±5.38）%要高于其他组（P＜0.05）；(2)Ⅰ组和Ⅱ组冷冻复苏精子的活力［（29.75±4.38）%，（28.40±8.55）%］要高于其他组（P＜0.05），由此得出最佳平衡时间和甘油浓度。     

大鳞副泥鳅精液超低温冷冻保存方法的优化

【目的】优化大鳞副泥鳅精液超低温冷冻保存方法。【方法】以解冻后的精子活力为参数,调控试验条件,筛选最佳精液稀释液和最佳抗冻剂,优化抗冻剂体积分数和精液稀释比例。【结果】5种稀释液中,稀释液Ⅳ效果最好,冻精活力为35.5(±2.7)%;甘油(GLY)、甲醇(METH)、二甲基亚砜(DMSO)等3种抗冻剂中,5%(V/V)DMSO处理的冻精活力为40.7(±2.5)%,显著高于5%GLY和METH处理的冻精活力;优化DMSO的体积分数发现,10%终浓度的DMSO对精液保护效果较好,冻精活力为54.6(±1.5)%;优化稀释液Ⅳ与精液稀释比例发现,稀释液Ⅳ与精液以3∶1体积比稀释时能达到良好效果,冻精活力可达65.4(±2.3)%。【结论】精液稀释液Ⅳ与精液体积比为3∶1,终浓度10% DMSO为抗冻剂,对大鳞副泥鳅精液超低温冷冻保存的效果最佳。     

除去精浆、添加维生素E及水浴平衡对莎能奶山羊精液冷冻效果的影响

主要探讨精液离心、添加VE及平衡方法对山羊细管冻精冷冻-解冻后活力、顶体完整率等的影响,为提高山羊精液冷冻保存效果提供依据.试验1:将鲜精稀释后分为3组,第1组为稀释精液1 000 r/min离心6 min,去掉一半的上清液;第2组用相同的方法反复离心3次,完全去掉精浆;第3组不离心,做为对照.试验2:在稀释液中添加15 g/L VE,以不添加组作为对照.试验3:采用纱布包裹和水浴平衡两种方法.试验结果表明,离心去掉部分精浆组和离心去精浆组精子冷冻-解冻后的活力比不离心组高,差异显著(P＜0.05).精子顶体完整率和畸形率有所下降,但与对照组相比较差异不显著(P＞0.05).离心去掉部分精浆组和离心完全去精浆组相比,精子冷冻一解冻后的活力、顶体完整率和畸形率差异不显著(P＞0.05).冷冻稀释液中添加VE组的顶体完整率显著提高(P＜0.05),畸形率变化与对照组无差异(P＞0.05),精子活力提高效果也不明显(P＞0.05).精液冷冻前平衡方法以水浴法为好,与纱布包裹平衡组相比,水浴平衡组的活力和顶体完整率高(P＜0.05),精子畸形率较低(P＜0.05).可见,精液离心后去掉适量精浆可显著提高冷冻后精子的活力;添加VE可显著提高精液冷冻后精子的顶体完整率;与纱布包裹平衡法相比,水浴平衡法可显著提高精液冷冻后精子的品质.     

羊驼人工采精技术的研究与精液特性

羊驼的卧式交配姿势、交配时间长以及子宫角射精等特性给羊驼人工采精技术带来很大困难。结合羊驼生殖生理特性,建立和优化了假阴道法羊驼人工采精技术,建立了羊驼采精异性刺激持续辅助诱情法。在假阴道的设计中,用特殊的温控装置,保证了内胎温度保持长时间恒定;在内胎中放置一“仿宫颈结构”模拟了羊驼子宫角射精。运用试验所建立的方法多次成功采集了3只种用公羊驼的精液。对采集的羊驼精液进行了品质评价,羊驼人工采精交配时间为(22.88±4.64)min;一次性射精量为2.25±0.38ml;精液粘稠度为(2.4±0.6)cm;精子活率为82.55%±3.57%;精子密度为(276.11±37.64)×106/ml;pH值为7.51±0.15;精子畸形率为28.95%±1.80%。     

丙酮酸盐对牛精液冷冻效果的影响

在常用的果糖-柠檬酸钠-卵黄-甘油液的基础上,分别添加1.25 mmol/L或2.00mmol/L的丙酮酸钾、丙酮酸钠或丙酮酸钙,以观察丙酮酸盐在牛精液冷冻中的应用效果。冷冻前各组稀释液隔15min分2次加入,之后平衡4h。结果表明,各组精子的冻后活力、复苏率、畸形率和顶体完整率之间没有显著差异,但6个试验组的冻后活力、复苏率和对照组相比有提高趋势。