血清7型副猪嗜血杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

为了对疑似副猪嗜血杆菌感染的仔猪病例进行诊治,对病死仔猪进行了细菌分离,用16S rRNA测序、套式PCR、血清型分型PCR、基因型分型PCR等方法对分离菌株进行鉴定,并对分离菌株进行药敏试验和小鼠致病性试验.结果显示,从发病仔猪的关节液中分离得到1株革兰氏阴性菌;16S rRNA测序和特异性套式PCR结果表明,该分离...     

1株副猪嗜血杆菌血清4型的分离鉴定及耐药性分析

【目的】阐明引起河南漯河某规模化猪场仔猪呼吸道症状的主要细菌性病原体及其生物学特性。【方法】无菌采集发病仔猪的口鼻拭子及病死猪的胸腔积液及肺脏、肝脏、脾脏等组织器官,进行病原的PCR检测,并通过细菌分离培养、形态学观察、卫星试验、16S rDNA基因PCR扩增、系统进化树构建、多重PCR鉴定分离菌的血清型、致病性试验和药敏试验等对分离菌株进行生物学特性分析。【结果】在含有V因子的BHI固体平板上生长出圆形、表面光滑湿润、无色透明的微小菌落,在不含V因子的培养基上不生长;分离菌株经革兰染色,镜下可见革兰阴性菌,多呈单个存在的球杆、长杆状;在金黄色葡萄球菌的培养物周围形成典型的“卫星菌落”;16S rDNA基因序列分析表明,分离菌株与副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)处于同一分支,相似性>97%,亚型鉴定结果判定分离菌为Hps血清4型;将分离的Hps腹腔注射感染小鼠,可导致感染小鼠多个器官不同程度出血,以肺脏最为明显;高剂量感染可导致小鼠死亡。药敏试验发现,该菌株对四环素、环丙沙星、复方新诺明具有较强抗性,合理用药后,取得了良好的治疗效果。【结论】试验成...     

副猪嗜血杆菌的分离与鉴定

在通过对上海一发病猪群临床流行病学研究和病理学观察的基础上 ,从发病仔猪肺脏、气管和脾脏检出并分离到 1株革兰氏阴性细小杆菌 ,兼性厌氧。生化试验为 :接触酶阳性 ,氧化酶阴性 ,鸟氨酸脱羧酶、吲哚和脲酶阴性 ;生长需要NAD ,发酵果糖、半乳糖、葡萄糖和蔗糖 ;不分解D 甘露醇、D 山梨醇和海藻糖。用副猪嗜血杆菌的 1 6S小亚单位rRNA和tbpA基因的特异性PCR引物 ,通过PCR技术分别从该分离菌株扩增出 82 2bp及 1 9kb的特异基因片段 ,表明该分离菌株为副猪嗜血杆菌     

副猪嗜血杆菌血清7型菌株的分离鉴定及生物学特性研究

为了掌握河南某规模化猪场保育猪发病猪群的感染病原,研究从濒死期病猪的肺脏、心血样品中分离获得一株细菌,通过对该株细菌分离鉴定、血清型分型、致病性试验、毒力基因检测和药敏试验等一系列研究工作。结果表明,该株细菌为副猪嗜血杆菌,血清型为7型,与副猪嗜血杆菌vHPS7株(GenBank登录号:CP049089)同源性为100%。该菌株同时携带有vta1、vta2、vta3、wza、ompP2、nanH、cdtA、cdtB、dtC、espP等毒力基因,结合豚鼠致病性试验结果和临床发病情况,该菌株具有较强的致病性;对头孢噻呋、头孢他啶、强力霉素、土霉素、四环素、阿奇霉素6种药物敏感;对青霉素G、阿莫西林、氨苄西林、复方新诺明、左氟沙星、氧氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星、壮观霉素、卡那霉素、阿米卡星11种药物耐药。该研究为今后副猪嗜血杆菌血清7型致病机制研究奠定了基础,为副猪嗜血杆菌血清7型的临床防控提供了理论基础。     

两株不同地区副猪嗜血杆菌的分离及分子生物学鉴定

本试验从浙江和河南部分地区的送检的疑似患多发浆膜炎与关节炎猪的病料中分离到2株疑似副猪嗜血杆菌,进行了细菌形态观察、培养特性和生化特性鉴定,根据已报道的副猪嗜血杆菌16SrRNA序列特异性引物进行PCR扩增,得到预期的822bp的基因片断,最终证实为副猪嗜血杆菌。     

副猪嗜血杆菌的分离鉴定

某猪场70日龄仔猪发生以呼吸困难、多发性关节炎和多发性浆膜炎为特征的传染病,从1头濒死猪心血和胸腔渗出液中各分离出1株有多形性趋势的革兰氏阴性小杆菌,生化试验和PCR鉴定为副猪嗜血杆菌;挑选心血分离株以1．5×10^10CFU／只腹腔接种,可引起成年豚鼠发病死亡（2／3）,剖检可见胸腔与腹腔积液、纤维素性心包炎、肝周炎,从心血、胸腔积液、腹腔积液、脑、肝脏及肺脏回收到该菌。     

副猪嗜血杆菌病病原菌的分离与鉴定

本试验从山西省长治市疑似副猪嗜血杆菌病感染的一个大型规模化猪场采集病料,进行细菌的分离,获得1株疑似分离株。通过改良的培养和保存技术、染色镜检、卫星现象及生化试验等方法对病原菌进行了研究,结果符合副猪嗜血杆菌的生化特性。     

广东地区副猪嗜血杆菌的分离鉴定

采用细菌分离的方法,结合PCR检测,生化鉴定,对广东地区2007年9月~2008年9月37个患病猪场送检的372份病料进行副猪嗜血杆菌分离鉴定,通过数据统计分析,显示副猪嗜血杆菌分离率达24.00%,副猪嗜血杆菌感染猪场阳性率达40.54%,表明副猪嗜血杆菌病在广东地区已普遍流行。     

副猪嗜血杆菌病病原菌的分离鉴定

更有效地控制和防治副猪嗜血杆菌病,本试验从山西省晋中市疑似猪嗜血杆菌病感染的一个大型规模化猪场采集病料,选择改良巧克力琼脂培养基,从9头有关节炎、胸膜炎、腹膜炎等症状的疑似副猪嗜血杆菌病的临床病例中分离到5株疑似副猪嗜血杆菌菌株。生长特性观察发现分离株为多形性、革兰氏阴性小杆菌,生长缓慢(24～48h)。菌落呈光滑露珠样,不溶血。葡萄糖、树胶醛糖、乳糖、甘露醇、蜜三糖发酵和脲酶实验呈阴性,过氧化氢酶实验阳性,该结果符合副猪嗜血杆菌的生化特性,表明该分离菌株为副猪嗜血杆菌。     

一株副猪嗜血杆菌的分离与鉴定

通过细菌分离,从安徽某规模化猪场分离到一株病原菌,通过分离纯化、生化鉴定和PCR鉴定,证实该分离菌为副猪嗜血杆菌,并通过间接血凝试验鉴定该株副猪嗜血杆菌的血清型为10型。     

副猪嗜血杆菌Shandong2007株的分离与鉴定

对1例临床症状、病理剖检变化疑似副猪嗜血杆菌病的仔猪病料进行实验室诊断,进行了细菌形态观察、培养特性和生化特性等鉴定,根据副猪嗜血杆菌的16 S rRNA基因设计特异性引物进行PCR扩增,将822 bp片段连入T-载体后测序,再通过GenBank进行比对分析.生化试验结果为接触酶阳性,氧化酶和H2S阴性;生长需要NAD,发酵果糖、半乳糖和蔗糖等,不分解D-甘露醇和D-山梨醇.药敏试验显示,对氨苄青霉素、丁胺卡那霉素等药物敏感.PCR鉴定结果与国外副猪嗜血杆菌菌株16 S rRNA序列的同源性为99%以上,初步鉴定该分离菌株为副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps).     

副猪嗜血杆菌分离与基因分型鉴定

本研究选择6个具有明显多发性浆膜炎等症状的猪场,从患猪肺支气管中分离获得6株副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPs),采用RFLP-PCR针对tbpA基因进行基因型鉴定。结果显示,6个分离株属于4种不同的HPs基因型,证明我国HPs流行株存在多种基因型,采用PCR-RFLP分析副猪嗜血杆菌流行病学规律,具有实用意义。     

副猪嗜血杆菌新疆株的分离及PCR鉴定

从新疆北疆6个规模化猪场的37例发病猪病料中分离到两株疑似副猪嗜血杆菌(HPs)。经形态染色镜检、培养特性、生化和部分生物学特性试验,初步鉴定为HPs。根据副猪嗜血杆菌特异性引物进行PCR扩增,结果均扩增出822 bp预期特异性条带,确定分离株为副猪嗜血杆菌。这是目前为止新疆地区首次分离到HPs。     

副猪嗜血杆菌分离株的分离鉴定及药敏试验

副猪嗜血杆菌病是由副猪嗜血杆菌(Hps)引起的一种细菌性传染病.从疑似发生副猪嗜血杆菌病的河南新乡某猪场采集病猪呼吸道分泌物和心包积液,并对样品进行细菌分离培养、形态观察、培养特性、生化试验鉴定和动物试验。结果表明,该试验成功分离到了副猪嗜血杆菌,药敏试验显示,分离菌株对庆大霉素、环丙沙星、氧氟沙星、诺氟沙星和头孢哌酮高敏,对复方新诺明中敏,对青霉素、链霉素、林可霉素耐药;对金银花及其组成的复方敏感,且复方作用效果优于单方。     

副猪嗜血杆菌黑龙江株的分离与鉴定

为确定黑龙江某猪场发病猪群的病原,本研究从疑似浆膜炎的病料中分离到一株革兰氏阴性细小杆菌,通过对其进行细菌形态学、培养特征、生化特性和16S rRNA基因PCR鉴定,结果表明该分离菌株为副猪嗜血杆菌(HLJ-1分离株)。16S rRNA基因序列分析结果显示:该分离菌株与参考株的基因同源性达99%;药敏试验结果表明HLJ-1分离株对头孢曲松、头孢噻肟等β-内酰胺类抗生素高度敏感;小白鼠致病性试验结果显示,该分离株具有较强致病性。     

广东省部分猪场副猪嗜血杆菌的分离与鉴定

从广东部分猪场发病猪的肺脏、气管和扁桃体分离细菌并培养,获得3株可疑菌株。根据发病猪的临床症状、剖检病理变化以及菌落的形态、菌体特征和生化试验结果,初步鉴定所分离的3株菌株为副猪嗜血杆菌。在细菌学鉴定的基础上,同时结合特异性PCR检测方法进行鉴定,结果3株菌株均扩增出822bp的特异性目的条带,进一步证实了所分离的3株菌株均为副猪嗜血杆菌。     

多重感染猪场副猪嗜血杆菌的分离与鉴定

本文通过临床观察、病理解剖和PCR方法诊断某猪场暴发的疑似断奶后多系统消耗综合征（PMWS）,同时分离到一株合并感染的病原菌。分离菌株经细菌培养特性、生化反应。16sRNA基因特异性片段PCR扩增产物的序列测定,鉴定为副猪嗜血杆菌。通过对玻板凝集试验抗体阴性猪的静脉攻毒试验,攻毒猪在11h死亡,表明分离茵属于强毒型嗜血杆菌。     

副猪嗜血杆菌河南分离株的分离鉴定及药敏试验

通过对河南省某规模化猪场出现疑似副猪嗜血杆菌感染的病猪进行病理剖检,及细菌分离培养、生化鉴定和药敏试验。结果表明,分离到的致病菌经形态特征和生化反应鉴定,有3株为副猪嗜血杆菌。药敏试验显示3株分离菌对左旋氧氟沙星均高敏,对恩诺沙星、磺胺间甲氧嘧啶、氟苯尼考、头孢噻呋钠为高度或中度敏感,而对替米考星、阿莫西林、氨苄西林等有耐药性。     

副猪嗜血杆菌新乡分离株的鉴定及药敏试验

副猪嗜血杆菌病是由副猪嗜血杆菌（H.Parasuis）引起的一种细菌性传染病。从疑似发生副猪嗜血杆菌病的新乡某猪场采集病猪的呼吸道分泌物和心包积液,并对样本进行细菌的分离培养、形态观察、培养特性、生化试验鉴定和动物试验,结果成功分离到副猪嗜血杆菌。药敏试验结果显示,分离菌株对庆大霉素、环丙沙星、氧氟沙星、诺氟沙星和头孢哌酮高敏,对复方新诺明中敏,而对青霉素、链霉素、林可霉素耐药;对金银花及其组成的复方敏感,且复方作用效果优于单方。     

副猪嗜血杆菌山东分离株的鉴定及药敏试验

对山东某猪场送检的40日龄的病猪分离病原菌,对分离出的细菌进行形态学观察、生化试验、PCR鉴定、小鼠致病性试验和药敏试验。染色镜检、生化试验结果及PCR试验证实成功分离到1株副猪嗜血杆菌,致病性试验结果表明,该菌株对Balb/c小鼠具有一定的致病性,药敏试验结果表明,该菌株具有多重耐药性,该菌株的分离鉴定为自家灭活菌苗的制备提供了候选菌株。