采用CTAB法快速提取植物DNA

<正> 植物 DNA 的提取是植物 DNA 分子生物学常用的技术手段,其提取效率和质量直接关系到分子测定的结果。本人在北京农业大学进修期间,参照 CTAB 法多次提取植物DNA,其快速简便值得从事植物分子生物学研究者借鉴。现介绍如下:     

改进的CTAB法提取胡杨（Populus euphratica）总DNA

以胡杨幼叶为材料,对影响胡杨DNA提取质量的主要因子进行研究,以期建立适宜胡杨DNA提取的优化反应体系,结果表明,在胡杨基因组DNA提取过程中,CTAB缓冲液中增加EDTA的用量及添加完异丙醇沉淀时间是影响胡杨基因组DNA提取的最主要因子。     

改进的CTAB法提取黄瓜DNA

DNA抽提是对生物体进行基因操作的基础性工作.经多次实验,我们对CTAB法提取黄瓜DNA进行了改进,并对所得DNA的质量和浓度进行了检测.结果表明,这是一种提取植物DNA的省时简单而高效的方法.通过很少量的样品即可以提到DNA.     

适于植物愈伤组织DNA提取的改良CTAB法

本文介绍了一种提取植物愈伤组织DNA的改良CTAB方法。这种方法根据植物愈伤组织的特点,通过在提取液中加入PVP、将提取液加入样品中研磨、以氯仿/异戊醇代替酚/氯仿/异戊醇等措施获得质量较高的基因组DNA,以此为模板进行PCR扩增可检测到清晰的目的片段,说明提取的DNA可以用于一般的分子生物学实验。     

提取植物和微生物DNA的SDS—CTAB改进法

该文介绍了一种简便快速地提取植物和微生物细胞总ＤＮＡ的方法，该法是对提取真菌ＤＮＡ的ＳＤＳ－ＣＴＡＢ法进行改进而成，经过修改后的ＳＤＳ－ＣＴＡＢ法可在数小时内高效地提取细胞总ＤＮＡ。制备物经琼脂糖凝胶电泳检测到大于２０ｋｂ的ＤＮＡ主带，基本无ＤＮＡ碎带；不用ＲＮａｓｅ处理，就已经无ＲＮＡ的干扰。ＯＤ２６０／２８０值显示产物纯度较高，无需任何纯化处理即可以用于ＰＣＲ扩增和ＲＡＰＤ分析。     

改良CTAB法提取菠萝DNA

采用改良CTAB法提取菠萝叶片叶基、叶尖和叶中部及幼根等部位的DNA,各个部位DNA的OD260／OD280比值为1．72～1．88;OD260／OD2301．45～2．11;提取产量为5．584—24．325μg／g（鲜重）;各个部位DNA提取产量大小排序为：叶基、心叶〉叶中部、叶尖〉幼根。本方法提取的菠萝DNA质量较高,可用作于SRAP分析。     

改良CTAB法提取野牡丹科7种植物DNA

以野牡丹科植物幼叶为材料,对影响野牡丹科植物DNA提取质量的主要因子进行研究,以期建立适宜野牡丹科植物DNA提取的优化反应体系.结果表明,当提取液中CTAB浓度为4％,沉淀时加入0.6体积的预冷异丙醇、1/2体积的5mol/L氯化钠及2倍体积的无水乙醇时,所提取到的DNA纯度较高,电泳条带清晰.且在此条件下,能提取出野牡丹科7种植物的DNA.     

改良CTAB法提取鸢尾属植物DNA

鸢尾属植物中酚类、多糖含量较高,DNA提取较为困难。在前人工作基础上,改进了提取植物DNA的CTAB方法,通过延长水浴时间、氯仿/异戊醇(24∶1)2次抽提、适当延长氯仿/异戊醇与提取液接触时间等一系列改进,简化了提取步骤,大大缩短了提取时间。所提取的DNA纯度高,可满足以PCR扩增为基础的试验需要。     

改良CTAB法提取薰衣草基因组DNA研究

[目的]寻找高效、快速的薰衣草（Lavandula pedunculata）基因组DNA提取方法。[方法]通过改良CTAB法提取薰衣草3个品种的基因组DNA。[结果]经检测,所提样品OD260/OD280值在1.85左右,得率为454.50～1 093.35μg/ml,电泳条带清晰,无明显的拖尾现象;Eco RI酶切基因组DNA图谱表明,提取的DNA能被限制性内切酶完全酶切;以提取的DNA为模板,用1对随机引物进行RAPD-PCR,发现检测条带清晰,说明获得的DNA质量较高,可以满足相关的分子生物学研究需要。[结论]该研究可以为薰衣草分子生物学的后续试验的开展奠定理论基础。     

用CTAB法提取苎麻总DNA试验

用CTAB法提取了苎麻总DNA ,考虑到苎麻中酚类、黄酮类等次生代谢物质多的特点 ,在提取液中加入了一定浓度的PVP和 β -巯基乙醇 ,从而获得了高分子量的DNA。经实验鉴定 ,其纯度符合分子遗传实验的要求     

改良CTAB法提取野牡丹科7种植物DNA

以野牡丹科植物幼叶为材料,对影响野牡丹科植物DNA提取质量的主要因子进行研究,以期建立适宜野牡丹科植物DNA提取的优化反应体系。结果表明,当提取液中CTAB浓度为4％,沉淀时加入0．6倍体积预冷异丙醇、1／2倍体积5mol／LNaCl、2倍体积无水乙醇时,所提取的DNA纯度较高,电泳条带清晰。且在此条件下,能提出野牡丹科7种植物的DNA。     

改良CTAB法提取核桃总RNA试验

从植物组织中提取高质量的RNA是进行基因克隆和基因表达分析的基础。不同植物的组织由于组成成分的差别,其RNA的提取有不同的难点。本试验针对核桃嫩叶内含物复杂的典型特点,在对比各种提取方法的特点及总结他人研究的基础上改良了CTAB法。此方法提取的核桃嫩叶总RNA的电泳结果可见清晰完整的条带,表明改良CTAB法能有效去除多糖和多酚以及色素等次生代谢物的污染,提取RNA纯度较高、完整性好,易于进行RT-PCR和cDNA文库的构建。此方法简单易行而且所用试剂成本较低。     

蕨类植物的DNA提取方法比较研究（摘要）

[目的]研究蕨类植物DNA提取的方法,为进一步的遗传多样性以及分类学的研究提供基础。[方法]通过改变试剂的用量以及操作方法对CTAB法提取DNA方法进行了改进。①取0.5～1.0 g新鲜叶片,加液氮充分研磨成粉末,置于1.5 ml离心管中,加2%CTAB600μl及10μl巯基乙醇;②65℃水浴15 min（期间取出振荡1次）,冷却;③加500μl氯仿/异戊醇（24：1）上下颠倒数次至液相深绿色;④12 000 r/min离心3 min;⑤取上清液至-1.5 ml离心管,重复步骤③、④;⑥取上清液至-1.5 ml离心管中,管内预装1 ml 95%乙醇。室温静置2 h;⑦12 000 r/min离心3 min;⑧弃上清,用70%乙醇（约4400μl）洗涤沉淀,真空干燥器干燥。干燥后加低温保存;⑨使用时加100μl超纯水溶解。-25℃保存。提取出的DNA样品中加超纯水50μl,混匀后,用石英比色杯于DU（R）800分光光度计中测定紫外消光值,根据其在260nm和280 nm波长处的光吸收值计算DNA产率,根据A_（260）/A_（280）判断DNA样品的纯度。DNA样品的浓度（μg/μl）为：在260 nm的紫外消光值×核酸稀释倍数×50/1 000。纯DNA样品A_（260）/A_（280）紫外消光值应为1.8,A_（260）/A_（230）值应大于2.0。A_（260）/A_（280）值大于1.9时,表明有RNA污染,小于1.6时,表明样品中存在蛋白质或酚污染。A_（260）/A_（230）值小于2.0时表明溶液中有残存盐和小分子杂质,如核甘酸、氨基酸、酚等。分别对常规CTAB法和改进CTAB法提取出的蕨类植物DNA进行琼脂糖凝胶电泳检测,以验证提取出DNA的质量。[结果]改进的CTAB法提取的蕨类DNA,其主带（基因组DNA）更加明亮,且与其他杂带区分明显,表明DNA的降解较少,DNA得率及纯度都有了很大提升。[结论]改良的CTAB提取法能够提取出高质量的蕨类植物DNA。     

提取蕨类植物DNA方法比较

[目的]研究蕨类植物DNA提取的方法,为进一步的遗传多样性以及分类学的研究提供基础。[方法]通过改变试剂的用量以及操作方法对CTAB法提取DNA方法进行了改进。[结果]改良的CTAB提取法能够提取出高质量的蕨类植物的DNA。[结论]改良了蕨类植物DNA提取的方法。     

乌头DNA的改良CTAB提取和ISSR检测

采用改良的CTAB法与常规CTAB法对23种不同来源的乌头基因组进行提取,通过紫外、电泳、PCR-ISSR等检测方法进行比较.结果表明,改良的CTAB方法得到的DNA浓度和纯度较高,无蛋白质和多糖等杂质影响,并且可以很好地应用于ISSR分子标记分析.     

CTAB法在金黄色葡萄球菌DNA提取中的应用

金黄色葡萄球菌Staphylococcus aures（以下简称金葡菌）是革兰氏阳性球状菌,直径0．8～1．0μm,呈葡萄状排列,有些菌株具有荚膜或黏层,广泛分布于空气、土壤、水、食具以及患有化脓性皮肤病人畜的皮肤上。金葡菌是引起食品污染和细菌性食物中毒的一种主要细菌,食品受其污染后,不仅腐败变质,