牛樟芝菌丝体培养条件筛选

以牛樟芝为试验材料，采用单因素和正交试验的设计方案，研究不同碳源(乳糖、蔗糖、葡萄糖、可溶性淀粉、甘露醇)和氮源(黄豆粉、酵母粉、牛肉膏、蛋白胨、麦芽浸膏)对菌丝体生长的影响。通过观测其菌落大小、菌落长势、菌丝生长速度及生长指数，筛选出最适宜牛樟芝菌丝体生长的培养条件。结果显示，在单因素试验中葡萄糖是牛樟芝菌种的最适碳源，酵母粉是最适氮源，该条件下其菌丝密度高，颜色呈橘红色，生长速度快。以菌丝生长速度和生长指数作为评价指标的正交试验中，当培养基配方为马铃薯(煮汁) 200 g·L^-1、葡萄糖20 g·L^-1、酵母粉15 g·L^-1、KH₂PO₄ 1 g·L^-1、MgSO₄ 0.5 g·L^-1、维生素B₁ 0.1 g·L^-1时，牛樟芝菌丝生长速度达2.47 mm·d^-1，生长指数为12.35，明显优于其他试验组。     

枣77个品种果肉愈伤组织诱导培养研究

果肉愈伤组织的大量培养可为悬浮细胞体系的建立、原生质体的分离与培养、遗传转化体系的建立及次生代谢产物的研究提供物质基础。以5个发育阶段的枣果肉为试材,共计77个枣品种,选用10种培养基进行枣果肉愈伤组织诱导研究。结果表明,基因型、果实发育阶段、培养基种类及其植物生长调节剂配比对枣果肉愈伤组织诱导效果均具有显著影响。在启动培养阶段,有42个品种分别筛选出1～6种可诱导出愈伤组织的培养基;有8种培养基可以成功诱导出愈伤组织,其中G1(4.41 g·L^-1 MS+6 g·L^-1琼脂+20 g·L^-1蔗糖+0.5 mg·L^-1 6-BA+2.5 mg·L^-1 2,4-D)和G7(4.41 g·L^-1 MS+6 g·L^-1琼脂+20 g·L^-1蔗糖+0.8 mg·L^-1 6-BA+1.5 mg·L^-1 2,4-D)培养基的适用性最高,达60%,其次为G5(4.41 g·L     

1株野生亚侧耳的分离鉴定及其生物学特性分析

从西藏林芝市觉木沟采集到一株野生蘑菇,编号为HGHZ01。为明确该菌株的分类学地位及生物学特性,结合形态特征及ITS序列聚类分析对其进行了鉴定,通过单因素和正交试验探讨了不同因素对该菌株菌丝生长的影响。结果表明,该菌株的形态特征与灰白亚侧耳相符,与灰白亚侧耳ITS序列一致性达99%以上,并在系统发育树上聚为一支,确定该菌株为灰白亚侧耳(Hohenbuehelia grisea),是西藏新纪录种。生物学特性研究表明,该菌株菌丝生长的最佳碳源为果糖,最佳氮源为酵母膏,最适pH为9,最适温度为25℃。正交试验表明,该菌株最佳生长条件组合为果糖20 g·L^-1、酵母膏2 g·L^-1、pH 9、温度25℃。     

报春石斛组培快繁技术体系的建立

以报春石斛蒴果为外植体,通过对种子无菌萌发和原球茎诱导、原球茎增殖及丛生芽诱导、生根壮苗以及移栽驯化的研究,以期建立报春石斛的组培快繁技术体系。结果表明:培养基MS+6-BA 1.0mg·L^-1+NAA 0.1mg·L^-1+蔗糖20g·L^-1最适报春石斛种子无菌萌发和原球茎的诱导;原球茎增殖及丛生芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg·L^-1+NAA 0.1mg·L^-1+香蕉泥100g·L^-1+蔗糖20g·L^-1,继代培养45d,增殖系数达8.2;最佳生根壮苗培养基为MS+6-BA 1.0mg·L^-1+KT 0.5mg·L^-1+NAA 0.2mg·L^-1+香蕉泥100g·L^-1+蔗糖30g·L^-1+活性碳1.0g·L^-1,培养3个月,生根率达100%,根系较长,苗壮;3—4月是桂林地区移栽报春石斛组培苗的最佳季节,生根苗在栽培基质Ⅰ(树皮∶水苔∶珍珠岩∶蛭石=10∶2∶1∶1,体积比)的长势好于栽培基质Ⅱ(树皮∶珍珠岩∶蛭石=10∶1∶1,体积比),成活率为92.3%。     

利用均匀设计法优化鸡(土从)母种培养基

鸡(土从)菌丝生长缓慢,在培养过程中极易被污染,为了提高鸡地从菌丝生长速度,减少被污染的机率,在前期单因素试验筛选鸡(土从)母种培养基中的碳源、氮源、氨基酸、维生素、无机盐、蚁穴浸提物、抑菌剂等结果的基础上,选取马铃薯汁、麦芽糖、酵母膏、VB_9、脯氨酸、可溶性碳酸钙清液、磷酸二氢钾、硫酸镁、蚁穴浸液、链霉素等10个因子,每个因子设12个水平,采用U₁₂(12¹⁰)均匀设计表设计试验方案,对鸡(土从)母种培养基进行优化。最优母种培养基配方为马铃薯汁126.20 mL·L^-1、麦芽糖11.63 g·L^-1、酵母膏5.50 g·L^-1、VB_9 47.90μg·L^-1、脯氨酸23.37μg·L^-1、可溶性碳酸钙清液0、磷酸二氢钾0.07 g·L^-1、硫酸镁4.19 g·L^-1、蚁穴浸提物61.82 mL·L^-1、链霉素2.33 mg·L^-1。利用该优化配方的培养基培养的鸡(土从)母种,其菌丝生长速度快,长势强。     

北美红杉组培快繁体系的建立与优化

以北美红杉1年生带芽茎段为外植体,通过基本培养基筛选和不同植物生长调节剂水平对比试验得到北美红杉组织培养的不定芽诱导、增殖、生根等生长阶段的优化配比培养基,以期建立北美红杉高效的快繁体系。结果表明:确定最佳消毒方法为75%乙醇消毒30 s,无菌水冲洗2次,再用0.1%氯化汞消毒处理10 min,无菌水冲洗4次;最佳不定芽诱导培养基配方为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.10 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂6 g·L^-1,不定芽诱导效果最好,诱导芽率高达2 153.3%,且芽生长健壮;最佳不定芽增殖培养基配方为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.10 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂6 g·L^-1,增殖系数高达15.8;最佳生根培养基配方为1/2MS+KT 1.5 mg·L^-1+IBA 1.0 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂6 g·L^-1,其生根率达90.0%,根多且粗长,植株高大健壮;最佳移栽基质为V_炉渣∶V_原土∶V_腐殖土=1∶1∶1,植株成活率达91.7%。     

桑黄液体发酵培养基优化的初步研究

实验研究了桑黄液体发酵培养基中不同营养组成对桑黄菌丝生长的影响。以菌丝生物量和多糖产量为主要指标,对桑黄液体发酵培养基进行了优化。通过单因素试验和正交试验筛选出了桑黄液体发酵的最佳培养基。单因素试验结果表明最适氮源为麦麸,最佳碳氮比为20:1;正交试验结果表明,优化培养基配方为玉米粉50g·L-1、麦麸50g·L-1、KH2PO42g·L-1、MgSO41g·L-1、VB1300μg·L-1、VB2400μg·L-1。     

响应面法优化六妹羊肚菌液体种培养基配方

以六妹羊肚菌(Morchella sextelata)GZCC0287菌株为试材,采用单因素试验、Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验、响应面法,研究了碳源、氮源、无机盐、CMC-Na对六妹羊肚菌丝生物量及菌丝球浓度的影响,以期为羊肚菌液体菌种生产、栽培种、工业化生产提供参考依据。结果表明:红糖、酵母粉、KH₂PO₄、MgCl₂·6H₂O为最佳碳源、氮源和无机盐,最佳培养基配方为红糖50.49g·L^-1、酵母粉10g·L^-1、KH₂PO₄1g·L^-1、MgCl₂·6H₂O 2.37g·L^-1、CMC-Na 10.11g·L^-1,菌丝生物量达到(5.21±0.45)g,菌丝球浓度达到(2567±127)个·mL^-1,以1000个·mL^-1浓度接种栽培种,发菌快,长势好,满袋时间10~15d。     

一株野生花脸香蘑的鉴定及其液体培养基的筛选

以1株分离自泰山的野生菌株ts916为供试材料,依据形态学和rDNA ITS序列分析进行分类鉴定。采用液体摇瓶培养法,以菌丝生物量为主要指标,从5种不同液体培养基中筛选出适宜菌丝生长的液体培养基。结果表明,该野生菌株为花脸香蘑(Lepista sordida),适宜其生长的液体培养基配方为马铃薯200 g、葡萄糖20 g、酵母膏3 g、玉米粉20 g、麸皮20 g、KH₂PO₄3 g、MgSO₄1.5 g,加水至1 L,pH自然。菌丝生物量达到2.209g·100^-1mL^-1。试验结果为该菌株的进一步驯化选育和综合开发利用提供参考。     

亚洲百合‘穿梭’组培快繁体系的建立

以亚洲百合‘穿梭’为试材,采用植物组织培养的方法,研究了不同浓度激素对百合鳞片诱导、不定芽增殖、小鳞茎生根培养的影响,并筛选出适宜百合组培苗生长的移栽基质,以期为亚洲百合‘穿梭’的组培快繁体系的建立提供参考依据。结果表明：百合鳞片最佳诱导培养基为MS+0.5 mg·L^-1 NAA+0.5 mg·L^-1 6-BA+30 g·L^-1蔗糖+6 g·L^-1琼脂,诱导率最高可达74.44%,显著高于其他处理;最佳增殖培养基为MS+0.1 mg·L^-1 NAA+1.0 mg·L^-1 6-BA+30 g·L^-1蔗糖+6 g·L^-1琼脂,不定芽增殖数量最多,增殖系数为3.27;适合小鳞茎生根培养基为1/2MS+0.1 mg·L^-1 NAA+0.3 mg·L^-1 IBA+40 g·L^-1蔗糖+6 g·L^-1琼脂,平均生根数量为14.33,是其他...     

赏食兼用百合京鹤高效组培再生体系的优化

百合是重要的高档蔬菜和观赏花卉,基于鳞片的高效组织培养再生体系是百合种球规模化生产繁育的基础。本试验首次使用草甘膦为诱导分化剂,优化赏食兼用百合品种京鹤鳞片外植体的组培再生体系。结果表明：京鹤鳞片不定芽最佳诱导培养基为MS + 1.0 mg · L^-16-BA + 0.1 mg · L^-1 NAA + 2.5 mg · L^-1草甘膦 + 30 g · L^-1蔗糖,诱导系数为6.46,显著高于常规诱导培养;最佳继代增殖培养基为MS + 0.5 mg · L^-16-BA + 0.1 mg · L^-1 NAA + 30 g · L^-1蔗糖,增殖系数为4.01;最佳鳞茎膨大培养基为MS + 90 g · L^-1蔗糖;最佳生根培养基为1/2MS + 0.3 mg · L^-1 NAA + 30 g · L^-1蔗糖,生根系数为23.59。     

梨花药愈伤组织诱导和悬浮培养体系的建立及应用

【目的】建立梨悬浮细胞体系，并利用悬浮细胞体系获得高质量悬浮细胞，进行遗传转化和原生质体的分离。【方法】以新梨7号花药为试材，诱导获得梨花药愈伤组织，研究了细胞悬浮系建立和影响悬浮细胞增殖的主要因子。【结果】花药在1/2 MS+1.0 mg·L^-12,4-D+0.4 mg·L^-1NAA+30 g·L^-1蔗糖+7 g·L^-1琼脂(pH值为5.8～6.0)培养基上诱导的愈伤组织，经4～5次继代得到了黄白色、颗粒状，状态相对较好的愈伤组织；将愈伤组织接种于液体培养基中，于28℃，200 r·min^-1的黑暗条件下悬浮振荡培养，经4～5次悬浮继代培养建立了悬浮细胞系，适宜的启动和增殖培养基为：MS+1.5 mg·L^-12,4-D+1.0 mg·L^-16-BA+30 g·L^-1蔗糖，细胞生长曲线呈“S”型，活细胞率达81.98%，近圆细胞率达83.66%，可作为遗传转化的受体，转化率为20.00%。也可直接用于原生质体的分...     

外源硒对鸡腿菇菌丝生长及合成主要营养素的影响

以1株鸡腿菇菌株Cc-900为试材,采用平板培养和液体发酵培养的方法,研究不同浓度的外源硒对鸡腿菇菌株Cc-900的生长、富硒效果和菌丝合成蛋白质和多糖的影响,以期为富硒鸡腿菇的栽培和产品的开发提供参考依据。结果表明：鸡腿菇菌丝可耐受10 mg·kg^-1硒浓度的固体培养基和最大硒浓度为3 mg·L^-1的液体培养基,高浓度硒对菌丝活性损伤较大;当液体培养基中硒浓度为3 mg·L^-1时,菌丝干质量可达1.97 g·L^-1,菌丝干粉的硒含量为38.24 mg·kg^-1,其硒富集系数可达12.75,菌丝中粗蛋白和多糖含量分别为2.58%和3 081.82μg·g^-1,发酵液中可溶性蛋白质和多糖含量分别为50.98μg·mL^-1和266.38μg·mL^-1。液体发酵培养中硒浓度在3 mg·L^-1以下可促进鸡腿菇菌丝的生长和硒的富集,同时促进菌丝中蛋白质的合成和释放,但会抑制菌丝中多糖的合成。     

桑黄菌株S-1培养条件研究

以桑黄菌株(Inonotus linteu)S-1为试材,采用人工栽培试验,研究了不同培养基、培养温度、初始pH、桑叶提取物浓度对菌丝生长特性的影响,以期为桑黄菌株S-1人工栽培及开发应用提供参考依据.结果 表明:桑黄菌株S-1最适斜面培养基为PDA,菌丝生长最适温度25℃、最适pH为5.0～5.5;优化条件下,在培养基中添加0.05％～0.30％的桑叶提取物,对试验菌株菌丝生长具有明显促进作用,其中以添加浓度为0.25％时促生长作用最为明显;在人工栽培培养基上,桑黄菌株S-1具有良好的子实体形成能力,其最适栽培培养基为木屑78％、麸皮18％、豆饼粉2％、磷酸二氢钾0.2％、硫酸镁0.1％、蔗糖0.2％,生石灰1％、石膏粉1％、桑叶提取物0.25％,含水量65％.     

裂褶菌的鉴定及液体发酵技术优化

以采集到的裂褶菌标本为试材,采用正交实验和响应面优化试验,研究了裂褶菌液体发酵工艺,以期获得适于工厂化生产的液体发酵工艺技术。结果表明：该菌PCR产物长度为615 bp,结合ITS序列比对确定该菌株为裂褶菌(Schizophyllum commune);以得到的菌种为研究对象进行液体发酵试验,以菌丝干质量为标准,通过正交实验确定了裂褶菌液体菌种发酵的最优培养基配方为可溶性淀粉30 g·L^-1,牛肉膏8 g·L^-1,KH₂PO₄ 0.75 g·L^-1,MgSO₄ 0.25 g·L^-1,pH自然;通过单因素筛选、Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验和Box-Behnken试验得出最佳培养条件为温度26℃,装液量109 mL,初始pH 6.3。结合正交实验和响应面优化试验后,培养的菌丝球密度大、大小适宜、活力强,适合作为菌种进行工厂化栽培。     

无刺刺梨茎段快繁体系的建立

以“无刺2号”当年生营养枝为外植体，采用不同浓度的植物生长调节剂进行组培试验，研究了不同消毒方式、激素浓度对外植体消毒效果、初代培养、增殖培养及生根培养的影响，以期建立较为成熟的无刺刺梨组织培养体系。结果表明：外植体经清水冲洗后用75%的酒精消毒15 s,以0.1%的升汞消毒8 min,存活率为85.28%;受污染后的植株在超声洗涤液中洗涤，洗涤液中添加多菌灵60 mg·L^-1和青霉素40 mg·L^-1,同时配置培养基时添加多菌灵60 mg·L^-1和青霉素40 mg·L^-1是最佳处理；适合“无刺2号”初代培养的培养基为MS+1 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 NAA,萌芽率达92.04%;增殖培养基为MS+0.2 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 NAA,增殖系数为3.9;在1/2MS+0.1 mg·L^-1 IBA+20 g·L^-1蔗糖+0.5...     

秦岭石蝴蝶叶片离体组织培养技术

以秦岭石蝴蝶（Petrocosmea qinlingensis）幼嫩叶片为试材,采用离体组织培养方法,研究了外植体消毒、初代培养、愈伤组织继代分化、不定芽增殖、生根炼苗对秦岭石蝴蝶离体再生的影响,以期为建立秦岭石蝴蝶组织培养快繁体系提供参考依据。结果表明：0.1%氯化汞处理2 min+无菌水洗涤7～8次为最适灭菌方法;最适愈伤组织诱导与继代培养基为MS+2.0 mg·L^-1 IBA;愈伤组织分化的合适培养基为MS+0.1 mg·L^-1 6-BA+0.2 mg·L^-1 NAA+0.1 mg·L^-1 IBA;正交实验结果表明MS+0.1 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 IBA+0.1 mg·L^-1 ZT为最适增殖培养基,最大增殖系数达14.06;最适生根炼苗条件为珍珠岩、蛭石和泥炭（2∶1∶1）基质+MS营养液1 mL+200 mg·L^-1 IBA 0.5 mL。     

外源激素嘧啶醇与NAA对芦笋胚状体再生植株生长的影响

以芦笋花粉粒培养获得的胚状体为试材，在其形成的不定芽中，以MS+蔗糖30 g·L^-1+琼脂粉8 g·L^-1为基本培养基，添加不同质量浓度嘧啶醇(0、0.05、0.10、0.50、1.00、2.00 mg·L^-1)和NAA(0、0.05、0.10、0.20、0.50、1.00 mg·L^-1),研究了嘧啶醇和NAA浓度对不同基因型再生植株生长的影响，以期优化和提高芦笋植株体外扩繁效率。结果表明：培养基添加0.50 mg·L^-1嘧啶醇处理的再生植株净生长高度、茎数分别增加1.05 cm和1.0根，根系变长，侧根增多；MS培养基添加0.50 mg·L^-1嘧啶醇和0.20 mg·L^-1 NAA后再生植株净生长高度、茎数分别增加1.60 cm和2.0根，根系生长旺盛；并且0.50 mg·L^-1嘧啶醇和0.20 mg·L^-1 NAA对芦笋胚状体再生植株的促进作用无基因型的显著差异。综上，在MS培养基中添加...     

秦岭石蝴蝶叶片离体组织培养技术

以秦岭石蝴蝶（Petrocosmea qinlingensis）幼嫩叶片为试材，采用离体组织培养方法，研究了外植体消毒、初代培养、愈伤组织继代分化、不定芽增殖、生根炼苗对秦岭石蝴蝶离体再生的影响，以期为建立秦岭石蝴蝶组织培养快繁体系提供参考依据。结果表明：0.1%氯化汞处理2 min+无菌水洗涤7～8次为最适灭菌方法；最适愈伤组织诱导与继代培养基为MS+2.0 mg·L^-1 IBA;愈伤组织分化的合适培养基为MS+0.1 mg·L^-1 6-BA+0.2 mg·L^-1 NAA+0.1 mg·L^-1 IBA;正交实验结果表明MS+0.1 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 IBA+0.1 mg·L^-1 ZT为最适增殖培养基，最大增殖系数达14.06;最适生根炼苗条件为珍珠岩、蛭石和泥炭（2∶1∶1）基质+MS营养液1 mL+200 mg·L^-1 IBA 0.5 mL。     

湖北贝母灰霉病病原菌鉴定及防治药剂筛选

以湖北贝母病样为试材,采用组织分离法和菌丝生长速率法,明确了湖北贝母灰霉病病原菌的种类,研究了不同杀菌剂对该病原菌的影响,以期为病害的科学防控提供参考依据。结果表明：湖北贝母灰霉病的致病菌属葡萄孢属(Botrytis sp.),是一种尚未报道过的新种。病原菌BMXTX2菌丝生长的最适pH为4,最适温度为20℃,最适碳氮源分别为葡萄糖和牛肉浸膏。室内毒力测定结果表明,430 g·L^-1戊唑醇悬浮剂、8%氟硅唑微乳剂和500 g·L^-1氟啶胺悬浮剂3种化学杀菌剂的抑菌效果较好,EC₅₀值分别为0.15、0.48、0.98 mg·L^-1;1%蛇床子素水乳剂和80%乙蒜素乳油2种生物杀菌剂对病原菌的抑菌效果较好,EC₅₀值均小于10 mg·L^-1,也可作为备选药剂。该研究首次明确了湖北贝母灰霉病的病原菌,并筛选出5种有较好抑菌效果的杀菌剂,为湖北贝母灰霉病的田间防控提供了参考依据。