鸡胚免疫器官发育中肥大细胞的观察

为了探讨肥大细胞(MC)在鸡胚免疫器官中的作用,并提供组织形态学依据,对不同日龄鸡胚胸腺、法氏囊、脾脏采用Carony's液固定,阿尔新兰染色-藏红O复染(alcian blue-safrianin O,AB/SO)并对其肥大细胞(Mast cell,MC)的形态、分布及数量变化进行观察.结果表明,Carnoy's液固定,AB/SO染色可以清晰地显示MC的组织结构,MC呈圆形、椭圆形和不规则形,大小不一;胸腺中MC主要分布在髓质,并有少量分布于血管和小叶间结缔组织;法氏囊中MC在淋巴小结周围的组织中分布;脾脏中MC分布在淋巴小结周围,血窦、血管中偶见.18日龄前脾脏、19日龄前法氏囊、20日龄前胸腺中MC的数量与器官发育呈正相关,其后MC的数量下降是否与MC的排出有关尚不清楚.     

不同日龄鸡呼吸道黏膜中IgA分泌细胞的分布规律

目的 了解鸡呼吸道黏膜不同时期的免疫状态。方法 选择海兰白鸡鸡胚(18、20 日龄)及不同日龄(1、4、7、14、21、35和56 日龄)雏鸡的鼻、喉、气管和肺脏样品,利用免疫组织化学方法研究IgA⁺分泌细胞的出现、定位分布及数量变化过程。结果 呼吸道各个器官黏膜中胚胎时期均没有IgA⁺细胞出现,鼻和肺脏中1日龄时出现,喉黏膜中4日龄时出现,而气管黏膜中7日龄时才出现。随着日龄增长,各器官呼吸道黏膜中IgA⁺细胞数量均逐渐增加。鼻黏膜以及肺脏初级支气管和次级支气管交叉处4日龄时较早地形成淋巴聚集物,喉黏膜中7日龄时形成,气管黏膜中35日龄时形成。在这些淋巴聚集物中IgA⁺细胞均主要分布于淋巴聚集物的外周。35日龄时,在鼻、喉和气管黏膜固有层以及上皮内均存在较多的IgA⁺细胞,从而能够更有效和直接地分泌SIgA,执行黏膜免疫功能。56日龄时,4种器官的呼吸道黏膜中IgA⁺细胞的数量达到峰值,并在黏膜底部形成生发中心,具有了黏膜相关性淋巴组织的典型特征,从而更有效地执行黏膜免疫功能。结论 鸡呼吸道黏膜中IgA⁺细胞的分布和数量均呈现日龄相关性变化,并且在35日龄时,鼻、喉、气管和肺脏中IgA⁺细胞数量和分布部位均达到一定规模,能够为呼吸道黏膜提供免疫保护。     

幼鸡发育阶段中肺脏肥大细胞的定量研究

[目的]对幼鸡发育阶段中肺脏肥大细胞组织结构和分布进行研究。[方法]选用1日龄贵州矮脚黄按免疫程序进行主要传染病预防接种,剖取肺脏用改良甲苯胺蓝染色,高倍镜下观察。[结果]对不同日龄幼鸡肺脏肥大细胞数量变化的研究表明,35日龄组比30日龄组和25日龄组肥大细胞数量极显著增加(P<0.01),30日龄组比25日龄组数量略有上升,差异不显著(P>0.05)。[结论]随幼年鸡日龄增长,肺脏肥大细胞的数量呈上升趋势。     

鸡胚消化器官组织学发育过程观察

通过对孵化1~8日龄的鸡胚进行连续切片,HE染色,对鸡胚消化器官胃、肠、肝脏、胰腺进行组织学连续性观察,详细描述鸡胚消化器官组织发育过程。试验结果表明,在4日龄鸡胚消化器官胃、肝脏、胰腺均开始发育;在6日龄时腺胃和肌胃开始分化;至8日龄肝脏已有肝小管和肝小叶结构,腺胃壁开始出现腺管,未出现腺泡。胃功能的发育完善较肝脏、胰腺、肠的发育晚,可能与鸡胚早期主要消化吸收卵黄等脂类物质有关。     

鸡胚体外培养影响因素的研究

以种鸡蛋为实验材料 ,分别在孵化 0、3和 6d后 ,抽取 1mL蛋清 ,用石蜡或自配封口胶封闭针孔 ,以探索抽蛋清和不同封口方法对不同日龄鸡胚发育的影响。实验结果表明 ,抽取蛋清对 3日龄鸡胚的发育和孵出的影响较小 (P <0 .0 1) ,孵化率达 76 .3% ,而对 0日龄、6日龄鸡胚发育和孵出的影响较大 ,孵化率只有 30 .6 %和 4 1.2 %。与石蜡封口相比 ,自配封口胶封口组的鸡胚孵化率明显提高 (P <0 .0 1) ,自配封口胶封口组的鸡胚孵化率为 76 .3% ,石蜡封口组的鸡胚孵化率只有 2 1.4 %。     

鸡胚胸腺的组织发育

连续观察孵化至１４～２１日龄的鸡胚胸腺,详细描述了早日龄鸡胚胸腺的组织学分化发育过程。结果显示,胸腺完整组织结构的形成约在１８日龄。２１日龄出现的非炎性异嗜性细胞在胸腺组织分化发育过程中所起的作用值得注意。     

空气对X期鸡胚原壳发育的影响

通过抽蛋清、延长空气与胚胎接触时间的方法,就空气对X期鸡胚原壳发育的影响进行了研究.种蛋开孔0.5 cm,用蛋壳皿立即封口后进行孵化,X期鸡胚和3日龄鸡胚的孵化率呈现出极显著的差异(P＜0.01),X期鸡胚的孵化率为0,而3日龄鸡胚的孵化率高达80.0%.种蛋抽取1.0 mL蛋清后,X期鸡胚和3日龄鸡胚的孵化率也呈现出极显著的差异(P＜0.01),X期鸡胚的孵化率为31.3%,3日龄鸡胚的孵化率为81.3%.开孔后在空气中暴露2 h,然后封口孵化,结果孵化鸡胚的死亡明显加快(P＜0.01),7日龄鸡胚的存活率立即封口组为51.6%,2 h后封口组为25%.上述实验表明,开孔与空气接触、抽蛋清使蛋内进入空气或延长空气与X期鸡胚接触的时间都可使鸡胚在孵化过程中的死亡加快,从鸡胚死亡的幅度来看,空气可能是影响鸡胚体外培养的最重要因素.     

海兰白蛋鸡法氏囊中T淋巴细胞的发育规律

为研究不同日龄海兰白蛋鸡法氏囊中T淋巴细胞发育规律,试验分别选择15,18,20胚龄和出生后1,4,7,10,14,21,35,56日龄海兰白鸡胚和雏鸡进行采样,将所采集到的法氏囊样本制备超薄冰冻切片,通过免疫组织化学方法结合生物显微图像分析技术,研究不同发育阶段鸡法氏囊中的CD3⁺、CD4⁺和CD8⁺ T淋巴细胞的出现、迁移、组织定位和分布。结果表明:15胚龄鸡法氏囊首次检测到CD3⁺和CD4⁺ T淋巴细胞,其散在的分布于法氏囊淋巴滤泡中,在4日龄以后同时分布于淋巴滤泡皮质和髓质交界的结缔组织和小梁中。18胚龄鸡法氏囊中首次检测到CD8⁺ T淋巴细胞,1日龄后CD8⁺T淋巴细胞分布规律与CD3⁺和CD4⁺ T淋巴细胞相似,开始为散在地分布于淋巴滤泡中,之后逐渐向皮质边缘和皮质间小梁处靠近,到56日龄时,CD8⁺ T淋巴细胞主要分布于皮质间小梁处。这说明,随着日龄增长,...     

鸡胚垂体生长激素细胞的发生及其变化

为研究鸡胚垂体中生长激素细胞的发生及其在发育过程中的变化 ,分别在鸡胚发育的第 3 5～ 2 0 5天采集鸡胚垂体 ,用免疫组织化学方法研究鸡胚垂体中生长激素细胞的发生和细胞形态、数量、在垂体中的分布特点和在发育过程中的变化。结果表明 ,鸡胚发育中期第 9 5天可观察到少量的生长激素阳性细胞散在分布于垂体后叶 ,细胞多排列成索状或团状 ,细胞之间边界不清 ,细胞核较大。在鸡胚发育的第 12 5天以后 ,生长激素细胞的细胞浆与细胞核比值逐渐变小 ,且均匀分布于腺垂体的后叶。生长激素细胞数在鸡胚发育的第 12 5天之后显著升高 (P <0 0 1) ,在鸡胚发育的第 16 5天 ,生长激素细胞占垂体细胞总数的 9 4 %。以上结果证明鸡胚垂体中生长激素细胞增殖和分化过程主要发生在发育的中期至出壳之前 ,而生长激素细胞的分泌功能在鸡胚发育的后期最为活跃。     

鸡马立克氏病的免疫形态学研究

为了比较马立克氏病(MD)弱毒苗814鸡胚免疫与雏鸡免疫的免疫保护力。检查其鸡胚免疫的安全性,探索MD的免疫性质和免疫发生规律。本实验应用组织学和组织化学的方法,分别对18只龄鸡胚免疫鸡。1日龄雏鸡免疫鸡和非免疫对照鸡不同时期MD强毒攻击后的病理变化进行了检查。并对各组未攻毒鸡的胸腺、法氏囊、脾脏、盲肠扁桃体、肺脏和肝脏进行了动态观察。对各组淋巴器官的T、B淋巴细胞和巨噬细胞进行了统计比较,实验结果表明:MD弱毒苗814鸡胚免疫与雏鸡免疫比较,能促进免疫器官的早期发育,提前获得免疫保护力,MD弱毒苗814鸡胚免疫不引起MD病变,是安全的:MD免疫以T淋巴细胞为主,同时B淋巴细胞和巨噬细胞积极参与。     

鸡胚大头开孔原壳体外培养方法的建立

通过原壳体外培养和抽蛋清的方法，研究了胚龄、蛋清抽取量对鸡胚发育的影响。结果表明：X期鸡胚抽取1mL、3mL和6mL蛋清后，其孵化率分别为38．6％、30．35％和8．6％。抽取蛋清1mL组（P〈0．01）和3mL组种蛋（P〈0．05）的孵化率明显优于抽取6mL组。对、3日龄鸡胚，抽取9mL蛋清后，鸡胚发育受到的影响最大，其孵化率仅为33．3％，明显低于3mL和6mL组（P〈0．01）；而抽取3mL和6mL蛋清对3日龄鸡胚的影响较小，其孵化率仍高达74．3％和76．5％。抽取6mL蛋清并在大头顶端开直径为110cm的圆孔进行鸡胚原壳体外培养获得成功，3日龄鸡胚的孵化率为18．5％。     

鸡胚液中蛋白质动态电泳分析

通过SDS-PACE对9,11,13,15,17日龄罗曼鸡胚尿囊液、羊水、房水中的蛋白质组成进行了初步研究,结果显示:鸡胚尿囊液中蛋白组分较少,含量低,不同日龄样品中组分基本一致.9日龄鸡胚羊水中含蛋白质极少,随日龄的增大,羊水中的蛋白质含量和种类呈递增趋势,13日龄后,羊水中蛋白质含量剧增;眼房水中蛋白质组分丰富,蛋白含量有随日龄增加而升高的趋势.     

鸡胚液中蛋白质动态电泳分析

通过SDS—PAGE对9,11,13,15,17日龄罗曼鸡胚尿囊液、羊水、房水中的蛋白质组成进行了初步研究,结果显示：鸡胚尿囊液中蛋白组分较少,含量低,不同日龄样品中组分基本一致。9日龄鸡胚羊水中含蛋白质极少,随日龄的增大,羊水中的蛋白质含量和种类呈递增趋势,13日龄后,羊水中蛋白质含量剧增;眼房水中蛋白质组分丰富,蛋白含量有随日龄增加而升高的趋势。     

鸡胚中枢免疫器官发育变化的观察

本文对69只,6—21日龄鸡胚的胸腺和腔上囊的位置、形态大小、分叶、重量进行观察。对14—21日龄鸡胚的胸腺作II.E染色切片进行组织学观察,主要结果:1,胸腺和腔上囊在胚胎期生长发育迅速,17日胚龄以后的胸腺生长发育更快。从生长倍数看,每日增重倍数为两倍以上,大于同期胚重的生长倍数,但在出壳前夕,胚重的生长发育相对的增高。2,15日胚龄鸡的胸腺小叶已出现,16—17日胚龄时,皮质和髓质能明显区分开,19日胚龄时,髓质中出现胸腺小体。     

鸡新城疫和传染性支气管炎母源抗体消长动态监测

逐日采集１－２５日龄雏鸡的血清和１－２０日胚龄鸡胚的卵黄提取液、胚体浸液，应用血凝抑制试验测定鸡新城疫和传染性支气管炎（气管炎、肾型）母源抗体消长动态。结果表明，雏鸡的鸡新城疫和传染性支气管炎的毒 源抗体的高峰期是随着日龄的增加而降低。鸡胚中卵黄内的新城疫抗体效价１－１５日胚龄持续在１：６４０：１６日龄抗体水平开始下降；传染性支气管炎的抗体效价１－１２日胚龄持续在１：８０以上，１３日胚龄抗体水平开     

鸡马立克氏病（MD）胚肿免疫组织学基础

本试验应用火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ）疫苗对孵化至１８日龄的鸡胚进行胚胎免疫注射，胚胎免疫后出壳雏鸡淋巴脏器的组织学、组织化学和超微结构显示，１８日龄胚胎免疫鸡对淋巴器官的早期发育具有明显的免疫促进作用；马立克氏病胚胎免疫是以细胞免疫为主，同时有体液免疫和巨噬细胞积极参与的联合免疫。另外，本试验对鸡胚淋巴器官的组织发育进行了较详细的描述。     

FTO基因在不同品种鸡胚胎与生长期骨骼肌中的表达

以清远麻鸡和隐陛白羽鸡为试验素材,研究脂肪和肥胖相关基因(fat mass and obesity-associated,FTO)在2个品种胚胎期与生长期胸肌和腿肌组织中的表达模式及差异。结果表明,在胸肌组织中,FTO在两品种不同发育时期呈现不同的表达模式。在清远麻鸡,16胚龄时FTO表达量显著高于其他胚龄,出雏后l周达最高,8周时显著下降(P0.05);在隐性白羽鸡,FTO在20胚龄时表达骤然升高,在l周龄时呈现表达高峰,但8周时仍维持高表达水平。在20胚龄、1周和8周时FTO在隐性白羽鸡胸肌组织中的表达显著高于清远麻鸡。在腿肌组织中,FTO在两品种胚胎期及生长期不同发育时期的表达模式也不同。FTO在清远麻鸡12胚龄时表达量显著高于其他胚龄,出雏1周后FTO的表达相对稳定,各周龄间无显著差异;在隐性白羽鸡中,腿肌中FTO在20胚龄时表达量显著升高,这一高表达状态持续至出雏后8周,但FTO只有在8周时隐性白羽鸡腿肌组织中的表达显著高于清远麻鸡。综合FTO在两品种的胸肌和腿肌组织中的发育模式研究表明,FTO在鸡胚胎期和生长期骨骼肌中的表达存在显著的品种和组织差异性。本研究将为进一步深入研究FTO对鸡肌肉发育的分子遗传机制奠定基础。     

鸡嗉囊中淋巴细胞发育的研究

【目的】研究鸡出壳后不同日龄嗉囊中T淋巴细胞及其亚群和B淋巴细胞的定位分布及数量变化规律等一系列的发育过程.【方法】采用单克隆抗体,通过免疫组织化学方法,观察并统计各取材日龄相应细胞的分布和数量.【结果和结论】1日龄时,CD3+、CD4+和CD8+细胞即已出现,Bu-1b+细胞于出壳后4日龄时出现.定位分布上,CD3+细胞主要分布于黏膜上皮基底层及固有层中,7日龄首次出现以CD3+细胞为中心的淋巴聚集物;CD4+细胞主要分布于固有层中;CD8+细胞最初主要分布在黏膜固有层中,随日龄增长逐渐向上皮方向突入,最终形成含有CD8+细胞浸润的淋巴上皮;Bu-1b+细胞主要分布于黏膜固有层中,特别是在小血管周围.于35日龄观察到以Bu-1b+细胞为中心的生发中心.在数量变化上,CD3+、CD4+、CD8+细胞数量整体呈逐渐增加趋势,部分阳性细胞数量在14和21日龄时稍有下降,35~56日龄时阳性细胞数量缓慢增加,基本达到成熟水平.Bu-1b+细胞数量随着日龄的增加持续增多,且后期的增长速率大于T细胞的增长速率.结果表明,嗉囊作为鸡消化系统的一部分,具有由淋巴细胞和淋巴聚集物构成的免疫防线,为肠相关淋巴组织中的一个重要组成部分.     

胚期接种IBD疫苗对雏鸡ND常规免疫效果之影响

为探明用IBD疫苗进行鸡胚免疫的可行性,探讨了胚期接种IBD疫苗对雏鸡ND常规免疫接种效果的影响．将IBD中等毒力疫苗接种18日龄鸡胚,出壳后按常规免疫方法进行ND免疫,检测抗体水平、免疫细胞数量及功能和免疫保护力等．结果表明,胚期接种IBD中等毒力疫苗对雏鸡ND常规免疫具有免疫抑制作用．     

鲻胚后发育过程中体表色素与鳍的变化特征

[目的]确定鲻胚后早期发育过程中体表色素的形成时间及各鳍的变化特点,为优化其种苗生产技术工艺流程奠定基础.[方法]采用常规的光学显微镜技术对鲻胚后早期发育过程中体表色素的分布与鳍条的形成过程进行连续观察和记录.[结果]鲻的体表色素发育需要依次经过6个阶段,初孵仔鱼就已经具有色素细胞,鱼体表面色素随着仔鱼发育进一步变化,至30日龄色素发育完全.在鲻的早期发育过程中,各鳍发育顺序依次为:胸鳍→尾鳍→臀鳍→第二背鳍→腹鳍→第一背鳍.鲻鳍的发育需要经过10个阶段,3日龄仔鱼便可观察到胸鳍芽,19日龄时尾鳍开始发育,21日龄时第二背鳍和臀鳍逐步发育,且臀鳍发育速度稍快于第二背鳍,腹鳍芽出现,26日龄时第一背鳍开始隆起,至38日龄鳍条发育完全.[结论]鲻胚后早期发育过程中的体表色素分布和鳍条发育与其形态发育及行为相适应,可作为早期发育的指示性标志.