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沙门氏菌检测方法研究进展 总被引:5,自引:0,他引:5
畜禽饲用含有沙门氏菌的饲料,如果菌量达到一定数目,就可引起疾病或带菌,因此准确、快速地检测饲料中的沙门氏菌,对于防止畜禽和人类沙门氏菌污染具有十分重要的意义。传统沙门氏菌检测方法,由于其检测周期长、漏检率高、程序复杂、所需试剂繁多等缺点已远远不能满足现代检测要求。随着现代科学技术的不断发展,特别是免疫学、生物化学、分子生物学的不断发展,人们已创建了不少快 相似文献
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沙门氏菌是一种重要的人畜共患病,建立一种快速而准确的检测方法一直是沙门氏菌检验研究的核心问题。本文综述了沙门氏菌的检测方法的最新研究进展,并展望了今后沙门氏菌检测方法的发展方向及实际应用前景。 相似文献
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沙门氏菌是常见的食源性病原菌之一,主要感染鸡和猪等禽畜,但可经动物源性肉制品等以食物链方式传播给人类,进而对人类健康和公共卫生构成巨大威胁。随着抗生素和疫苗的广泛使用以及检测技术的不断进步,沙门氏菌导致的大规模疫情已不多见。本文结合国内外相关报道,对多种沙门氏菌检测技术进行了总结。 相似文献
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畜产品中沙门氏菌的危害及检测方法概述 总被引:16,自引:0,他引:16
在经济全球化条件下,一国畜产品的质量安全问题不仅关系到本国人民的生活与生命安全,而且还关系到整个人类的生活与生命安全。人和动物的沙门氏菌病一直是一个世界性问题,在各种畜产品中,细菌性食物中毒最为常见,而由沙门氏菌引起的食物中毒病例在食物中毒中居于前列。沙门氏菌菌型繁多,分布广泛,是一种重要的人畜共患病的病原体。 相似文献
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为建立一种简单、快速、灵敏、准确的沙门菌检测方法,根据沙门菌fimY保守基因序列设计合成了1对引物,建立了快速检测沙门菌的PCR方法,并对反应条件进行优化,组装成快速检测试剂盒。结果显示,所有沙门菌均扩增出526bp的特异性条带,而非沙门菌均未扩增出任何条带。检测灵敏度达93CFU,还可检出含3CFU的样品用BP预增菌的菌液或用MM增菌后的菌液,而且稳定性良好,冷冻至少能保存12个月。采用直接菌体加入法、热裂解法、反复冻融法、CTAB碱裂解法和柱式试剂盒提取法分别提取核酸模板,结果CTAB法效果最好,但操作烦琐,而直接菌体加入法和热裂解法可以达到和柱式试剂盒提取法相同的效果,且操作简便、快速、经济、效果好。通过对临床样品的检测,证实该试剂盒具有操作简便、快速、灵敏度高、特异性强、重复性好、稳定性高等优点,值得推广应用。 相似文献
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荧光定量PCR快速检测食品中沙门氏菌方法的建立及初步应用 总被引:20,自引:0,他引:20
根据编码鼠伤寒沙门氏菌肠毒素stn基因的核苷酸序列设计1对引物和荧光探针,通过对荧光定量PCR反应体系和反应条件的摸索,建立了检测沙门氏菌的核酸荧光定量PCR方法。对该方法的特异性与敏感性研究结果显示,该方法检测沙门氏菌结果均为阳性,而非沙门氏菌均为阴性;对带有沙门氏菌肠毒素stn基因的阳性质粒的检测敏感性为4个/μL。用该方法对人工污染沙门氏菌的鲜猪肉和鲜鸡蛋进行检测,当检样中沙门氏菌初始含菌量分别为1CFU/g(鲜猪肉)和1CFU/g(鲜鸡蛋),经过12h的增菌后,检测结果均为阳性。该方法具有简便、快速、特异性强、敏感性高等特点。此研究为食品中沙门氏菌快速检测试剂盒的研制打下了良好的基础。 相似文献
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为建立沙门氏菌快速检测方法,本研究根据沙门氏菌Ⅰ型菌毛蛋白调控基因fimW设计一对引物,建立PCR检测方法,并对收集的A群~F群14个血清型40株沙门氏菌和5种12株非沙门氏菌菌株进行PCR扩增.结果显示所有沙门氏菌均扩增出与预期(477 bp)相符的特异性片段,而非沙门氏菌扩增结果均为阴性.另外,以肠炎沙门氏菌50336株DNA为模板,敏感性试验结果显示该方法可以检测出扩增体系中1pg DNA染色体和102cfu的沙门氏菌.表明本研究建立了检测沙门氏菌简洁、敏感、特异的PCR方法. 相似文献
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沙门菌实时荧光定量PCR检测试剂盒的研制与应用 总被引:1,自引:0,他引:1
根据沙门菌保守的fimY基因序列设计合成了引物和TaqMan探针,建立了快速检测沙门菌的实时荧光定量方法,并对反应条件进行了优化,组装成快速检测试剂盒。通过对临床样品的检测,该试剂盒的检测灵敏度达4.5CFU(25μL反应体系),比常规PCR高100倍,而且稳定性良好,至少可以冷冻保存9个月。结果表明,所建立的沙门菌实时荧光定量PCR检测试剂盒具有操作简便、快速、特异性强、灵敏度高、重复性好、稳定性强等优点,适于大量样品的检测。 相似文献
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鸡白痢沙门氏菌PCR检测技术的建立与应用 总被引:1,自引:0,他引:1
为鸡沙门氏菌的临床检测提供了一种更快速、敏感、特异的诊断,参照GeneBank中已公布的的鸡白痢沙门氏菌fliC基因序列,合成出了一对引物,使用PCR法对1株沙门氏标准菌株和其他3株非沙门氏菌标准菌株进行DNA抽提扩增并检测其敏感度。采用上述技术,对12份可疑病料及10份饲料进行PCR检测,同时与传统检测方法进行比较。结果表明1株沙门氏菌PCR产物出现600 bp的特异性DNA扩增带,而非沙门氏菌均未出现扩增条带,证明所设计引物具有沙门氏菌特异性;通过敏感度检测,此PCR体系能检出50 pg以上的细菌DNA,敏感性较高。运用PCR法阳性检出率及敏感性均高于常规检测方法。由此可见,沙门氏菌PCR检测是一种快速、敏感和高度特异的诊断方法。 相似文献
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沙门氏菌PCR检测方法的建立 总被引:3,自引:1,他引:2
根据GenBank沙门氏菌侵袭蛋白A(invA)基因序列设计引物,扩增特异的202 bp核苷酸片段,经过优化PCR扩增条件,建立了沙门氏菌特异、敏感和快速的PCR检测方法。特异性试验结果表明,从沙门氏菌参考菌株中均能扩增出特异性的核苷酸片段,大肠杆菌、巴氏杆菌、金黄色葡萄菌、志贺氏菌、蜡样芽孢杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌的扩增结果均为阴性。敏感性试验结果表明,采用简便的直接煮沸裂解法制备样品DNA,该方法的敏感性可达2.43×103CFU/mL。 相似文献
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减毒沙门氏菌能诱导粘膜、体液及细胞免疫,不仅其自身能够产生免疫效应,而且还能携带外源基因诱导宿主特异性应答,是具有广泛应用前景的疫苗载体。本文从减毒致弱菌株构建、外源基因高效表达等方面综述了减毒沙门氏菌载体构建策略的新进展,进而对减毒沙门氏菌活载体应用中待解决的科学问题进行了归纳。 相似文献