妊娠后期营养限制对母羊胃肠道葡萄糖转运载体相关基因表达的影响

本研究旨在研究妊娠后期营养限制对母羊胃肠道葡萄糖转运载体相关基因表达的影响。选取20只同期受孕的湘东黑山羊,随机分为2组,即对照组(自由采食)和限饲组(40%采食量限制),每组10只。预试期15 d(妊娠81~95 d),正试期39 d(妊娠96~135 d)。正试期结束后,屠宰并采取瘤胃、十二指肠、空肠、回肠以及盲肠的黏膜样品,利用实时定量PCR技术,检测Na+-葡萄糖共转运载体1(SGLT1)、Na+-葡萄糖共转运载体3(SGLT3)、易化葡萄糖转运载体2(GLUT2)和易化葡萄糖转运载体5(GLUT5)基因表达量。结果表明:限饲组与对照组相比,SGLT1基因表达量在瘤胃显著降低(P0.05),在空肠和回肠中有降低趋势(0.05≤P0.10);GLUT5基因表达量在盲肠显著降低(P0.05);而其他葡萄糖转运载体基因胃肠道表达量在限饲组和对照组差异均不显著(P0.05)。由此可见,母羊妊娠后期营养限制对胃肠道中葡萄糖转运载体基因表达有不同程度的影响,进而引起母羊机体内葡萄糖转运的改变。     

冷季补饲对藏羊小肠形态发育及营养物质转运载体基因表达量的影响

本试验旨在研究冷季补饲精料或尿素-糖蜜型舔砖对藏羊小肠组织形态发育及营养物质转运载体基因表达量的影响。选择1.5岁、体重((29.4±1.79)kg)相近的健康藏系绵羊母羊18头,随机分为对照组(CON组)、尿素-糖蜜型舔砖补饲组(BS组)和精料补饲组(CS组)。CON组自由采食燕麦干草,BS组在CON组基础上自由舔食尿素-糖蜜型舔砖,CS组在CON组基础上补饲精料200g·只-1·d-1。进行60d的饲养试验后,对全部试验藏羊进行屠宰,采集小肠各段组织,通过制作组织切片及荧光定量PCR,测定小肠组织形态发育和营养物质转运载体基因表达量。结果表明:(1)补饲精料或舔砖均显著提高了藏羊消化能和粗蛋白质摄入量(P0.05),且CS组显著高于BS组(P0.05);(2)补饲精料或舔砖均显著提高了藏羊十二指肠、空肠及回肠绒毛宽度(P0.05),且CS组均显著大于BS组(P0.05),补饲精料还显著提高了十二指肠和回肠绒毛高度(P0.05),显著降低了空肠和回肠隐窝深度(P0.05);(3)胰岛素样生长因子结合蛋白5(Insulin-like growth factor binding protein,IGFBP5)mRNA表达量在十二指肠和空肠黏膜中CS和BS组均显著高于CON组(P0.05),且CS组显著高于BS组(P0.05),在回肠黏膜中CS组显著高于BS和CON组(P0.05);(4)十二指肠黏膜中L型氨基酸转运载体1(L-type amino acid transporter 1,LAT1)、阳离子氨基酸转运载体1(Cationic amino acid transporters 1,CAT1)、小肽转运载体1(Peptides transporter 1,pepT1)、钠依赖型葡萄糖转运载体1(Na+-dependent glucose co-transporter 1,SGLT1)及促葡萄糖转运载体2(Facilitative glucose transporter 2,GLUT2)mRNA表达量CS组显著高于BS和CON组(P0.05),空肠黏膜中CAT1、pepT1mRNA表达量和回肠黏膜中CAT1、LAT1、SGLT1及GLUT2mRNA表达量,BS组显著高于CS和CON组(P0.05)。以上结果表明,冷季补饲精料或尿素-糖蜜型舔砖均增加了藏羊对能量和蛋白质等营养物质的摄入量,促进了小肠组织形态发育,补饲精料提高了十二指肠黏膜中氨基酸、小肽及葡萄糖转运载体基因mRNA的表达量,而补饲尿素-糖蜜型舔砖提高了其在空肠和回肠黏膜中的表达量。     

罗伊氏乳杆菌LR1对断奶仔猪血清生化指标和肠道营养物质转运载体mRNA表达的影响

本试验旨在研究罗伊氏乳杆菌LR1对断奶仔猪血清生化指标和肠道营养物质转运载体mRNA表达的影响。选取144头初始体重为(6.49±0.01) kg的21日龄杜×长×大断奶仔猪,随机分为3组,每组8个重复,每个重复6头。对照组饲喂基础饲粮,抗生素组饲喂基础饲粮+100 mg/kg喹乙醇+75 mg/kg金霉素,罗伊氏乳杆菌组饲喂基础饲粮+5×1010CFU/kg罗伊氏乳杆菌LR1。试验期为14 d。结果显示:1)与对照组相比,饲粮添加抗生素显著提高了血清葡萄糖(GLU)的含量(P0.05),且显著降低了血清尿素氮(UN)的含量(P0.05)。2)与对照组相比,饲粮添加罗伊氏乳杆菌LR1显著提高了十二指肠胃动素(MLN)和空肠胆囊收缩素(CCK)的mRNA表达量(P0.05);饲粮添加抗生素显著提高了十二指肠MLN的mRNA表达量(P0.05)。3)与对照组相比,饲粮添加罗伊氏乳杆菌LR1显著提高了十二指肠Na+依赖性谷氨酰胺载体2(ASCT2)、阳离子氨基酸运载体1(CAT1)、小肽转运体1(PepT1)和空肠中性和碱性氨基酸转运载体(rBAT)以及空肠与回肠y+L氨基酸转运体1 (y+LAT1)的mRNA表达量(P 0.05);饲粮添加抗生素显著提高了空肠y+LAT1、CAT1、PepT1和空肠与回肠哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的mRNA表达量(P0.05)。4)与对照组相比,饲粮添加罗伊氏乳杆菌LR1显著提高了十二指肠小肠脂肪酸结合蛋白(I-FABP)、乙酰辅酶A羧化酶α(ACCα)、脂肪酸合成酶(FASN)和十二指肠与空肠脂肪酸结合蛋白3(FABP3)以及十二指肠、空肠与回肠过氧化物体增殖物激活受体γ(PPARγ)的mRNA表达量(P0.05);饲粮添加抗生素显著提高了空肠ACCα的mRNA表达量(P0.05)。5)与对照组相比,饲粮添加罗伊氏乳杆菌LR1显著提高了空肠和回肠钠-葡萄糖协同转运蛋白1(SGLT1)的mRNA表达量(P0.05);饲粮添加抗生素显著提高了十二指肠SGLT1、钠-葡萄糖协同转运蛋白3(SGLT3)的mRNA表达量(P0.05)。综上所述,饲粮中添加5×1010CFU/kg罗伊氏乳杆菌LR1对断奶仔猪的肠道营养物质转运具有良好的促进作用,表现为促进断奶仔猪肠道物理消化和化学消化,促进小肽、氨基酸及脂肪酸吸收转运,增强脂肪酸的合成。罗伊氏乳杆菌LR1在替代猪饲用抗生素方面具有巨大潜力,可用于开发新型猪饲料抗生素替代物。     

马齿苋水提物对热应激小鼠空肠结构及吸收功能的影响

旨在探讨马齿苋水提物(aqueous extract of Portulaca oleracea L.)对热应激小鼠空肠结构及吸收功能的影响。将40只昆明种小鼠随机分为4组(n=10):空白对照组(C)、热应激组(HS)、马齿苋水提物组(AEP)、维生素C组(Vc),HS、AEP和Vc组每天于(40±1)℃环境下处理0.5 h,连续热应激6 d后将小鼠转置于室温下给药治疗。给药7 d后眶窦采血,并采集小鼠空肠;测定小鼠血清中D-木糖、葡萄糖含量;HE染色观察空肠组织病理学变化;qRT-PCR法检测空肠黏膜ZO-1、SGLT1及GLUT2 mRNA的相对转录水平。结果显示,与C组比较,HS组小鼠空肠黏膜绒毛高度极显著降低(P0.01);血清中D-木糖的含量极显著降低(P0.01);空肠黏膜中ZO-1、SGLT1和GLUT2 mRNA的相对转录水平均极显著降低(P0.01);与HS组相比,AEP组小鼠空肠绒毛高度极显著提高(P0.01);血清中D-木糖及葡萄糖的含量均显著升高(P0.01或P0.05);空肠黏膜中ZO-1、SGLT1和GLUT2 mRNA的相对转录水平均显著升高(P0.05或P0.01)。高温处理可导致小鼠空肠黏膜脱落及吸收功能下降,而在给予马齿苋水提物治疗后可通过提高空肠ZO-1 mRNA表达量修复空肠黏膜结构,通过促进空肠黏膜SGLT1和GLUT2 mRNA的转录量改善吸收功能。马齿苋水提物能在一定程度上修复热应激导致小鼠空肠黏膜结构损伤,改善热应激小鼠肠道的吸收能力。     

日粮中添加姜黄素对免疫应激断奶仔猪肠道抗氧化能力及糖代谢的影响

旨在研究姜黄素对免疫应激断奶仔猪肠道抗氧化能力、二糖酶活性及葡萄糖转运载体的影响。选择28日龄"杜×长×大"三元杂交断奶仔猪24头,随机分为3个处理组,即对照组(基础日粮组),脂多糖(LPS)组(基础日粮+LPS)和姜黄素(Cur L)组(基础日粮+200 mg/kg姜黄素+LPS),每组8头。试验周期为28 d。于试验第18和28天,LPS组和Cur L组仔猪每千克体重腹腔注射100μg LPS,对照组仔猪注射相同体积的生理盐水。结果表明:添加200 mg/kg姜黄素可以显著降低空肠和回肠黏膜中丙二醛(MDA)含量(P0.05),增加回肠黏膜中麦芽糖酶活性(P0.05)以及上调空肠黏膜中钠/葡萄糖协同转运蛋白1(SGLT1)mRNA表达量和回肠黏膜中葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)mRNA表达量(P0.05)。因此,添加姜黄素可以通过降低过氧化产物的堆积缓解免疫应激对仔猪肠道的损伤,同时增加麦芽糖酶活性以及葡萄糖转运载体mRNA的表达而加强肠道对糖的消化吸收。     

植物多糖对断奶仔猪小肠黏膜形态及肠黏膜屏障功能的影响

旨在探讨断奶仔猪饲粮中单独或联合添加黄芪多糖、牛膝多糖及白术多糖对其小肠黏膜形态及肠黏膜屏障功能的影响。选取256头35日龄的杜长大三元杂交断奶仔猪,随机分为8个组,每组4个重复,每个重复8头猪,采用三因素两水平(2×2×2)试验设计,饲粮中黄芪多糖、白术多糖和牛膝多糖的添加水平均为0,800mg/kg,试验共进行28d。结果显示:植物多糖能显著提高断奶仔猪十二指肠、空肠和回肠的黏膜绒毛高度,提高绒腺比(P0.05),3种多糖联用效果最适。与对照组相比,多糖组断奶仔猪回肠V/C比值显著提高(P0.05),各单一多糖组之间差异不显著(P0.05),3种多糖联合添加与两两添加及单一添加相比显著提高了V/C比值(P0.05)。多糖组断奶仔猪血清中二胺氧化酶(DAO)的活性、血清中内毒素(ET)含量及D-乳糖的含量均显著降低(P0.05),3种多糖联用效果最适。多糖能显著提高断奶仔猪肠道黏膜Occludin、Claudin和ZO-1的基因表达量(P0.05)。单一添加黄芪多糖、白术多糖及牛膝多糖能显著提高断奶仔猪肠道钠-葡萄糖共转运载体1(SGLT1)的mRNA相对表达量(P0.05),对葡萄糖转运载体2(GLUT2)mRNA相对表达量有提高的趋势,但差异不显著(P0.05)。多糖两两联用及3种多糖联合添加能显著提高断奶仔猪肠道SGLT1和GLUT2mRNA相对表达量(P0.05)。结果表明,在断奶仔猪饲粮中添加植物多糖可显著改善断奶仔猪肠道黏膜形态结构和肠道的通透性,其机制可能与植物多糖改善断奶仔猪肠黏膜屏障功能作用有关。     

实时荧光定量RT-PCR检测糖皮质激素对肉仔鸡空肠葡萄糖转运载体mRNA表达的影响

为探讨糖皮质激素对肉仔鸡空肠葡萄糖转运影响的机理,采用实时荧光定量方法研究了长期注射糖皮质激素类药物地塞米松对肉仔鸡空肠上皮细胞钠葡萄糖共转运载体(SGLT1)和葡萄糖易化转运载体(GLUT2)mRNA表达的影响.试验选取21日龄体重相近的AA肉仔鸡24只,随机分为4组,其中3个试验组每只腹部皮下注射地塞米松生理盐水注射液1mL(剂量分别为每1kg体重0.1mg,1mg和5mg),对照组注射等体积的生理盐水,连续7天.结果显示各地塞米松处理组间SGLT1 mRNA的表达量无显著差异(P＞0.05),但各处理组SGLT1 mRNA的表达量均显著低于对照组(P＜0.05);注射地塞米松显著影响了GLUT2 mRNA的表达量(P＜0.05).其中0.1和1 mg/kg体重地塞米松处理组的GLUT2 mRNA表达量均显著高于对照组(P＜0.05),5 mg/kg地塞米松处理组GLUT2 mRNA表达量略高于对照组(P＞0.05).结果表明糖皮质激素可能通过改变SGLT1和GLUT2转录水平的表达来实现对肉仔鸡空肠葡萄糖转运的调节.     

家兔小肠不同区段营养物质转运载体相关基因的分布规律

旨在研究家兔小肠不同区段营养物质转运载体相关基因的分布规律。本研究选取110日龄体重相近的健康白色獭兔10只,屠宰后采集十二指肠、空肠、回肠样品,采用real-time PCR研究家兔不同肠段小肽转运载体Pep T1,氨基酸转运载体CAT1、B~0AT、EAAT3、rBAT,葡萄糖转运载体SGLT1、GLUT2、GLUT5,以及脂肪酸转运载体FATP4的mRNA表达丰度。结果显示,小肽转运载体Pep T1 mRNA在十二指肠表达量最高,空肠略低;碱性氨基酸转运载体CAT1、兼性氨基酸转运载体rBAT和中性氨基酸转运载体B~0AT mRNA的表达量均在回肠最高,空肠次之;酸性氨基酸转运载体EAAT3 mRNA的表达量在空肠和回肠均较高;葡萄糖转运载体SGLT1和GLUT5 mRNA的表达量在十二指肠和空肠均较高;葡萄糖转运载体GLUT2和脂肪酸转运载体FATP4 mRNA的表达量则是空肠最高,十二指肠次之。结果表明,家兔肠道转运吸收小肽、葡萄糖和脂肪酸的主要部位是小肠前半段,转运吸收氨基酸的主要部位是小肠后半段。     

异丁酸对犊牛瘤胃及小肠黏膜基因表达的影响

本试验旨在研究饲粮补充异丁酸对断奶前后犊牛瘤胃及小肠发育相关基因表达的影响。选取平均体重(40.0±0.2)kg、发育正常、30日龄的中国荷斯坦公犊牛36头,随机分为4组,对照组饲喂基础饲粮,试验组分别在基础饲粮的基础上添加异丁酸3、6和9 g/d。分别于45、60(断奶)、90日龄每组屠宰3头并采集瘤胃及小肠黏膜组织样品,通过实时荧光定量PCR技术检测生长激素受体(GHR)、胰岛素受体(INSR)、3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合成酶1(HMGCS1)和钠-葡萄糖共转运载体1(SGLT1)的mRNA表达量。结果表明:犊牛体重和GHR、INSR、HMGCS1 mRNA的表达量均随着犊牛日龄的增长而出现显著增长(P0.05),而SGLT1mRNA的表达量在断奶前后随着日龄的增长先下降后增长,变化显著(P0.05)。45和60日龄时,犊牛体重在9 g/d异丁酸组显著高于对照组(P0.05),但与6 g/d异丁酸组差异不显著(P0.05)。各日龄6和9 g/d异丁酸组瘤胃和小肠各部位GHR、INSR、HMGCS1 mRNA的表达量均高于对照组,且这2组之间差异不显著(P0.05)。添加异丁酸对45日龄和90日龄犊牛小肠各部位SGLT1 mRNA的表达量没有显著影响(P0.05);60日龄6和9 g/d异丁酸组十二指肠SGLT1 mRNA表达量显著高于对照组和3 g/d异丁酸组(P0.05),9 g/d异丁酸组空肠近端、空肠远端和回肠SGLT1 mRNA表达量显著高于对照组(P0.05),但与6 g/d异丁酸组差异不显著(P0.05)。综合以上结果,饲粮中补充异丁酸能够促进犊牛生长和瘤胃及小肠黏膜的发育,本试验条件下其适宜添加量为6 g/d。     

不同淀粉类型日粮对育肥猪消化代谢的影响

旨在探讨不同淀粉类型日粮对育肥猪肠道消化吸收、血清生化指标和激素水平的影响。将90头((68±2.0)kg)阉公猪随机分配到3种日粮处理,每个处理5个重复,每个重复6头猪。采用纯的蜡质玉米淀粉(WMS)、非蜡质玉米淀粉(NMS)和豌豆淀粉(PS)作为淀粉来源来配合3种试验日粮,日粮的直链淀粉/支链淀粉比例分别为0.07、0.19和0.28。饲养28d后,每个重复选择2头猪(体重接近于每个重复的平均体重)称重,屠宰,取空肠黏膜和血液样品进行指标测定。结果表明:1)不同淀粉类型日粮对育肥猪空肠黏膜消化酶活性无显著影响(P0.05)。2)与WMS日粮相比,PS日粮显著下调感受甜味的味觉受体家族1的成员2和成员3(T1R2/T1R3)的mRNA表达水平(P0.05),而显著上调了可溶性载体家族1成员5(SLC1A5)的mRNA表达水平(P0.05);NMS日粮显著上调了可溶性载体家族7成员7(SLC7A7)的mRNA表达水平(P0.05);PS日粮和NMS日粮显著下调了钠/葡萄糖协同转运蛋白1(SGLT1)和葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)的mRNA表达水平(P0.05)。3)在血清生化指标上,不同淀粉类型日粮对血液葡萄糖(Glu)含量并无显著影响(P0.05);与WMS日粮相比,PS日粮和NMS日粮显著降低了游离脂肪酸(FFA)含量(P0.05)。4)不同淀粉类型日粮对血清激素水平并无显著影响(P0.05)。本试验结果揭示,育肥猪饲喂高直支链比例淀粉日粮会下调甜味感受体、葡萄糖转运载体的mRNA表达水平,上调部分氨基酸转运载体mRNA表达水平,从而减弱肠道对葡萄糖的吸收,有利于对氨基酸的吸收。     

N-氨甲酰谷氨酸、脯氨酸及腐胺对仔猪空肠和回肠Na+依赖性中性氨基酸转运载体2表达及营养感应信号的调控作用

本研究旨在探讨Na~+依赖性中性氨基酸转运载体2(SNAT2)介导多胺及其前体物质对仔猪肠黏膜营养感应信号的调控作用。试验选取32头哺乳仔猪,随机分为4组,每组8头猪,自出生当日开始,每日2次分别灌服生理盐水(对照组)、腐胺(5 mg/kg BW)、脯氨酸(25 mg/kg BW)和N-氨甲酰谷氨酸(NCG,8 mg/kg BW)。14日龄断奶,断奶第3天采血后屠宰,采集空肠和回肠样品。结果表明:与对照组相比,灌服腐胺、脯氨酸和NCG显著提高仔猪平均日增重(P0.05);灌服腐胺和NCG显著提高空肠和回肠黏膜SNAT2的蛋白表达水平(P0.05);灌服脯氨酸和NCG显著提高了空肠黏膜氨基酸转运感应相关基因[质子耦合氨基酸转运蛋白1(PAT1)、钙感应受体(CasR)、磷脂酶Cβ2(PLCβ2)和味觉受体1家族成员3(T1R3)]的mRNA相对表达量(P0.05),NCG还显著上调哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关基因[促分裂原活化蛋白激酶3(MAP4K3)和mTOR]的mRNA相对表达量(P0.05);灌服NCG显著提高了血清中胆囊收缩素(CCK)含量(P0.05)及空肠黏膜CCK受体mRNA相对表达量(P0.05)。综上所述,NCG可通过上调仔猪肠道氨基酸转运载体相关基因的表达,调节氨基酸感应途径信号分子的释放和基因表达。     

过瘤胃葡萄糖对围产期奶牛空肠微生物群落和黏膜代谢及免疫相关基因表达的影响

本试验旨在探究过瘤胃葡萄糖对围产期奶牛空肠微生物群落和黏膜代谢及免疫相关基因表达的影响。选择10头围产期荷斯坦奶牛[4~5岁、体重(515±42)kg]随机分为2组,每组5头。对照组和过瘤胃葡萄糖组奶牛饲喂相同的基础饲粮,同时对照组每头每日给予90 g过瘤胃脂肪,过瘤胃葡萄糖组每头每日给予200 g过瘤胃葡萄糖。预试期14 d(产前第21天到产前第8天),正试期21d(产前第7天到产后第14天)。正式期结束后,将所有奶牛(10头)屠宰并取空肠食糜样品,测定其中挥发性脂肪酸的含量和微生物群落;同时取空肠黏膜样品,进行代谢及免疫相关基因表达分析。结果显示:与对照组相比,添加过瘤胃葡萄糖有降低空肠食糜中总挥发性脂肪酸含量的趋势(P=0.094)。与对照组相比,添加过瘤胃葡萄糖有上调空肠黏膜中葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)表达量的趋势(P=0.063),有下调Toll样受体4(TLR4)(P=0.063)、白细胞介素-17A(IL 17A)(P=0.063)和白细胞介素-26(IL 26)(P=0.063)表达量的趋势,同时显著性地上调了丙酮酸羧化酶(PC)(P=0.016)、闭合蛋白(occludin)(P=0.016)和胰岛素生长因子结合蛋白5(IGFBP5)(P=0.032)的表达量,显著性地下调了白细胞介素-22(IL 22)(P=0.016)、基质金属蛋白酶1(MMP1)(P=0.016)和基质金属蛋白酶9(MMP9)(P=0.032)的表达量。此外,与对照组相比,添加过瘤胃葡萄糖显著性地增加了空肠食糜中梭菌属ⅪⅤ子集的数量(P=0.036)。由此可见,围产期奶牛饲粮中添加过瘤胃葡萄糖可以改善葡萄糖在机体的代谢以及提高免疫力,同时促进免疫相关有益菌梭菌属ⅪⅤ子集的定植,从而缓解围产期能量负平衡导致的不良影响。     

纤维分解酶与异丁酸对犊牛小肠消化酶活力和肝生长轴基因表达的影响

为探讨日粮添加纤维分解酶与异丁酸对犊牛小肠消化酶活性和肝生长轴激素受体基因表达的影响,试验选取30日龄健康、体重近似的荷斯坦公犊36头,随机分为4组,对照组饲喂基础日粮,纤维分解酶组(FE)、异丁酸组(IB)和混合添加组(IBFE)在基础日粮上分别添加1.83g纤维分解酶(FE,含160U纤维分解酶和4 000U木聚糖酶)、6.0g异丁酸(IB,浓度98.5%)和两者混合物。分别在45和90日龄从每组中抽取3头屠宰并采集各肠段小肠内容物、肝样品,测定小肠消化酶活性和肝生长轴激素受体基因表达。结果表明,45日龄,IBFE组空肠近端、空肠远端和回肠的淀粉酶活性显著高于对照组和FE组(P0.05);IBFE组十二指肠、空肠近端、空肠远端和回肠胰蛋白酶活性显著高于其他处理组(P0.05);IBFE、IB组空肠近端和空肠远端脂肪酶活性均显著高于对照组(P0.05);IBFE和IB组GHR mRNA、IGF-ⅠR mRNA表达量显著高于FE和对照组(P0.05),IBFE组IR mRNA表达量显著高于IB、FE和对照组(P0.05)。90日龄,IBFE组十二指肠和回肠的淀粉酶活性显著高于对照组和FE组(P0.05);IBFE组空肠近端、空肠远端和回肠胰蛋白酶显著高于其他处理组(P0.05);IBFE组十二指肠、空肠近端、空肠远端和回肠脂肪酶活性显著高于对照组和FE组(P0.05);IBFE、IB、FE组GHR mRNA表达量显著高于对照组(P0.05),IBFE组IR mRNA表达量显著高于其他处理组(P0.05),IBFE和IB组IGF-ⅠR mRNA表达量显著高于FE和对照组(P0.05)。结果提示,日粮中添加纤维分解酶和异丁酸混合物对提高犊牛小肠消化酶活、肝生长轴激素受体基因表达效果最佳。     

L-精氨酸和α-酮戊二酸对热应激肉鸡肠道吸收功能、抗氧化能力、能量代谢的影响

本试验旨在研究L-精氨酸(Arg)和α-酮戊二酸(AKG)对热应激肉鸡肠道功能的影响。选用200只1日龄Cobb肉鸡,随机分为4个处理组:对照组(基础日粮)、热应激组(基础日粮)、Arg组(基础日粮+0.5%Arg)、AKG组(基础日粮+0.5%AKG),每个组5个重复,每个重复10只鸡。试验为期5周,第1周各组室温控制在32~34℃,第2~5周热应激组、Arg组和AKG组控制在(36±2)℃,而对照组第2周开始慢慢降至(22±2)℃,并从第3周开始维持在(22±2)℃,湿度为50%~60%。结果表明:与对照组相比,热应激处理降低了肉鸡生长性能和血液三碘甲腺原氨酸(T3)含量(P0.05),同时也显著降低了空肠和回肠脂肪酶、回肠胰蛋白酶、空肠过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、回肠超氧化物歧化酶(SOD)和CAT的活力、十二指肠和回肠三磷酸腺苷(ATP)含量、空肠小肽转运载体(Pep T1)、紧密连接蛋白(Claudin-5)m RNA表达量(P0.05),显著提高了死亡率、血液皮质酮、十二指肠和回肠丙二醛(MDA)含量、空肠低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、AMP依赖的蛋白激酶α1(AMPK-α1)m RNA表达量(P0.05);与热应激组相比,日粮中添加0.5%Arg可显著提高热应激肉鸡饲料转化率、十二指肠脂肪酶和回肠胰蛋白酶活力、十二指肠和空肠DNA含量、空肠CAT活力和HMOX-1 m RNA表达量(P0.05),降低死亡率、十二指肠和空肠RNA/DNA比值、空肠TP/DNA比值、HIF-1α和AMPK-α1 m RNA表达量(P0.05),而日粮中添加0.5%AKG可显著提高热应激肉鸡血液T3、十二指肠和空肠DNA含量、十二指肠CAT和GSH-Px的活力、十二指肠和空肠及回肠ATP含量(P0.05),并显著降低死亡率、血液皮质酮含量、空肠RNA/DNA及TP/DNA比值、十二指肠MDA和回肠过氧化氢(H2O2)含量(P0.05)。因此,日粮中添加0.5%Arg可提高热应激肉鸡肠道消化能力和抗氧化功能,而添加0.5%AKG可促进热应激肉鸡肠道黏膜细胞生长,提高肠道抗氧化能力,并改善肠道能量代谢状况。     

绵羊胃肠道游离氨基酸与小肽分布及其转运载体相关基因表达的研究

旨在研究绵羊胃肠道内游离氨基酸(FAA)和小肽(PAA)的数量分布和碱性氨基酸转运载体CAT1、酸性氨基酸转运载体EAAT3、中性氨基酸转运载体y+LAT2和ASCT2、小肽转运载体PepT1、氨基肽酶APN、二肽酶DPEP2mRNA在胃肠道的表达规律。试验选取18月龄健康小尾寒羊6只,屠宰后收集瘤胃、十二指肠、空肠、回肠和盲肠的食糜及对应肠道组织,对食糜上清液的小肽和游离氨基酸进行测定,并用实时定量PCR对基因表达量进行测定。结果显示:1)绵羊食糜多数游离氨基酸浓度从高到低的分布为空肠、十二指肠、回肠、瘤胃和盲肠,前二者显著高于其他部位(P0.05);不同部位游离氨基酸组成比例不同;多数小肽浓度从高到低的分布为十二指肠、空肠、回肠、盲肠和瘤胃,除瘤胃和盲肠外各部位间差异显著(P0.05);不同部位小肽的组成比例不同;小肽占总氨基酸(TAA)的比例在空肠显著低于其他部位(P0.05)。2)CAT1mRNA在空肠表达量最高,但不同部位间差异不显著;EAAT3、y+LAT2、PepT1、APN mRNA表达规律相似,均在回肠表达量最高;ASCT2mRNA在十二指肠表达量最高,DPEP2mRNA在盲肠表达量最高。结果提示,胃肠道不同区段游离氨基酸和小肽的浓度和组成不同;游离氨基酸的主要释放部位是空肠,主要吸收部位是回肠;小肽的主要释放部位是十二指肠,主要消化部位是空肠,在肠系膜系统的主要吸收部位是回肠;瘤胃和小肠各区段吸收碱性氨基酸的能力基本相同;酸性和多数中性氨基酸主要吸收部位是回肠,少数中性氨基酸主要吸收部位是空肠。本研究为绵羊小肠氨基酸营养和蛋白质消化吸收规律的研究提供了理论依据。     

绿原酸对仔猪生长性能、血清免疫球蛋白及肠道黏膜形态与消化吸收能力的影响

本试验旨在研究绿原酸(CA)对仔猪生长性能、血清免疫球蛋白及肠道黏膜形态与消化吸收能力的影响。试验选取24头初始体重相近[(9.45±0.20)kg]的健康"杜×长×大"三元断奶仔猪,随机分为4组:1)对照组,基础饲粮;2)CA250组,基础饲粮+250 mg/kg CA;3)CA500组,基础饲粮+500 mg/kg CA;4)CA1000组,基础饲粮+1 000 mg/kg CA。每组6个重复,每个重复1头猪。试验期为14 d。结果表明:1)各组间平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI)均无显著差异(P0.05),CA1000组料重比(F/G)显著低于对照组(P0.05)。2)各组间血清免疫球蛋白A和免疫球蛋白M含量均无显著差异(P0.05),CA1000组血清免疫球蛋白G含量较对照组和CA250组显著升高(P0.05)。3)CA1000组十二指肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度(V/C)值均显著高于对照组(P0.05),试验组十二指肠隐窝深度均显著低于对照组(P0.05);CA1000组空肠绒毛高度和绒毛宽度显著高于对照组(P0.05);各组间回肠绒毛高度、绒毛宽度、隐窝深度及V/C值均无显著差异(P0.05)。4)试验组十二指肠蔗糖酶活性均较对照组有所增加,但无显著差异(P0.05),麦芽糖酶活性均较对照组显著升高(P0.05);各组间空肠蔗糖酶活性无显著差异(P0.05),试验组空肠麦芽糖酶活性较对照组有所上升,但差异不显著(P0.05);各组间回肠蔗糖酶活性无显著差异(P0.05),CA1000组回肠麦芽糖酶活性显著高于对照组(P0.05)。5)各组间十二指肠钠-葡萄糖协同转运蛋白1(SGLT1)和葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)基因相对表达量均无显著差异(P0.05);各组间空肠SGLT1基因相对表达量也无显著差异(P0.05),CA1000组空肠GLUT2基因相对表达量显著高于对照组(P0.05);试验组回肠SG LT1基因相对表达量均较对照组有所增加,且CA1000组显著高于对照组(P0.05),但各组间回肠GLUT2基因相对表达量无显著差异(P0.05)。综上所述,断奶仔猪饲粮中CA的适宜添加量为1 000 mg/kg,添加该剂量CA能显著降低仔猪F/G,增强免疫功能,改善小肠形态与消化吸收能力,从而提高断奶仔猪生长性能。     

21日龄断奶对仔猪肠道形态、肠道通透性及肠黏膜屏障的影响

本试验旨在研究21日龄断奶对仔猪肠道形态、肠道通透性及肠黏膜屏障的影响。采用2×3双因子完全随机试验设计,组别(哺乳组、断奶组)和日龄(22、24和28日龄)为2个主效应。选取6窝体况相近的健康大白仔猪,每窝选取6头平均体重为(6.1±0.2)kg的仔猪,随机分为2组,分别为断奶组和哺乳组,每组18头,分别于22、24和28日龄时屠宰,测定其生长性能、肠道形态、肠道通透性及肠黏膜屏障。结果表明:1)28日龄时,断奶组仔猪的末重和平均日增重均极显著低于哺乳组(P0.01)。2)组别和日龄对仔猪的空肠隐窝深度和绒毛高度/隐窝深度、回肠绒毛高度有极显著交互作用(P0.01);断奶组的空肠、回肠隐窝深度极显著高于哺乳组(P0.01),空肠、回肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度极显著低于哺乳组(P0.01);哺乳组28日龄时的空肠绒毛高度/隐窝深度极显著高于22和24日龄时(P0.01),24日龄时的回肠绒毛高度极显著高于22日龄时(P0.01)。3)组别和日龄对仔猪的空肠黏膜二胺氧化酶(DAO)活性有显著交互作用(P0.05),断奶组的空肠、回肠黏膜DAO活性显著低于哺乳组(P0.05)。4)组别和日龄对仔猪空肠黏膜闭锁蛋白(occludin)的mRNA表达量有极显著交互作用(P0.01);空肠黏膜闭锁小带蛋白1(ZO-1)和哺乳组空肠黏膜occludin的mRNA表达量随着日龄的增加先升高后降低(P0.05);与哺乳组相比,断奶组回肠黏膜ZO-1、occludin和24日龄时空肠黏膜occludin的mRNA表达量显著降低(P0.05);24日龄时回肠黏膜ZO-1的mRNA表达量显著高于22日龄时(P0.05)。5)组别和日龄对仔猪空肠黏膜肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA表达量有显著交互作用(P0.05);断奶组24和28日龄时空肠黏膜TNF-α的mRNA表达量显著高于哺乳组(P0.05),空肠黏膜白细胞介素10(IL-10)的mRNA表达量显著低于哺乳组(P0.05)。回肠黏膜白细胞介素1β(IL-1β)的mRNA表达量随着日龄的增加而降低(P0.05)。综上所述,哺乳仔猪22~28日龄时肠道发育趋于成熟,而断奶会破坏仔猪肠道上皮细胞的结构和紧密连接蛋白的mRNA表达,引起肠道绒毛变短和脱落、肠道通透性增加和炎症反应,降低平均日增重。     

饲粮营养水平对绒山羊小肠感应因子mRNA相对表达量、血液理化指标及激素含量的影响

本试验旨在适当降低饲粮氮水平条件下,通过饲粮添加N-氨甲酰谷氨酸(NCG)及小肠灌注葡萄糖,研究其对绒山羊小肠感应因子mRNA相对表达量、血液理化指标及激素含量的影响。选用27只体况良好、装有永久性瘤胃和十二指肠瘘管的内蒙古白绒山羊羯羊,按年龄和体重相近原则随机分成9组,每组3只。饲粮分为3个处理:低氮[粗蛋白质(CP)10.5%]、低氮+NCG(0.20 g/d)和高氮(CP 13.5%);每个处理的山羊分别进行3个水平的十二指肠葡萄糖灌注:0、20和40 g/d。饲养试验(15 d预试期、15 d正试期)结束后,屠宰取空肠和十二指肠组织,通过实时定量PCR法测定营养感应因子mRNA相对表达量,测定血液理化指标、血清和空肠相关激素含量。结果表明:1)在基础饲粮条件(无葡萄糖灌注)下,随着饲粮氮水平的下降,空肠和十二指肠钠-葡萄糖共转运载体1(SGLT1)的mRNA相对表达量,血浆尿素氮、葡萄糖含量,血清瓜氨酸、胰岛素含量,血清和空肠胰高血糖素样肽1(GLP-1)、胰高血糖素样肽2(GLP-2)和促胰岛素肽(GIP)含量减少,而空肠和十二指肠溶质载体家族7成员9(SLC7A9)、溶质载体家族7成员1(SLC7A1)的mRNA相对表达量增加。2)增加适宜过瘤胃葡萄糖后,随着饲粮氮水平的下降,SGLT1、味觉受体1型1、味觉受体1型2、味觉受体1型3 mRNA相对表达量呈增加趋势。3)低氮饲粮条件下灌注20 g/d葡萄糖,额外饲喂NCG能够缓解饲粮氮水平降低引起的空肠和十二指肠SGLT1 mRNA相对表达量,血浆尿素氮、葡萄糖含量,血清瓜氨酸含量,血清和空肠GLP-1、GLP-2和GIP含量的下降。结果提示,适当降低饲粮氮水平,补饲NCG和增加过瘤胃葡萄糖(十二指肠灌注20 g/d)对绒山羊机体代谢及肠道营养物质感应均有促进作用。     

鸡肠道SGLT1和GLUT2 mRNA表达的组织特异性研究

运用相对定量RT-PCR方法，研究不同肠段Arbor Acre（AA）肉鸡肠道葡萄糖吸收转运主要载体SGLT1和GLUT2mRNA表达的组织特异性。结果发现。随着肠道空间位置的后移，SGLT1 mRNA的表达量逐步降低。十二指肠SGLT1 mRNA的丰度比结直肠高76．19Vo，差异极显著（P〈0．01）；而空肠和回肠SGLT1 mRNA的表达量分别比结直肠高42．86％和38．10％，差异不显著（P〉0．05），但有提高的趋势（P值分别为0．06和0．07）。十二指肠与空肠和回肠相比，SGLTlmRNA的表达量虽然分别高23．33％和27．59％，但差异不显著（P值分别为0．18和0．10）。相对定量分析表明，十二指肠和空肠GLUT2 mRNA丰度非常接近，差异不显著（P〉0．05）。定性研究显示，十二指肠与空肠GLUT2 mRNA丰度高于回肠和结直肠。鸡肠道SGLT1和GLUT2 mRNA表达的组织特异性之生理功能，有待于进一步研究。     

饲粮蛋白质水平对家兔食欲肽基因表达的影响

本试验旨在探讨饲粮蛋白质水平对家兔食欲肽基因表达的影响。选择体重相近的30日龄断奶伊拉肉兔30只,随机分为3组,分别饲喂蛋白质水平为12.8%、16.0%和19.2%的试验饲粮,每组10个重复,每个重复1只兔。预试期7d,正试期35d。试验结束后,采集弓形核、十二指肠、空肠和回肠,测定弓形核中阿片促黑色素原(POMC)、可卡因-苯丙胺调节转录物(CART)、神经肽Y(NPY)、刺鼠基因相关蛋白(AgRP)、胆囊收缩素(CCK)和肠道中CCK基因的相对表达量。结果显示:十二指肠CCK基因的相对表达量显著高于空肠、回肠和弓形核(P0.05);与16.0%和12.8%蛋白质饲粮组相比,19.2%蛋白质饲粮组十二指肠中CCK基因的相对表达量显著增加(P0.05),而其回肠中CCK基因的相对表达量无显著变化(P0.05);与16.0%和12.8%蛋白质饲粮组相比,19.2%蛋白质饲粮组弓形核中POMC和CART基因的相对表达量显著增加(P0.05),而其弓形核中NPY和AgRP基因的相对表达量无显著变化(P0.05)。由此得出,饲喂低蛋白质水平(12.8%~16.0%)饲粮家兔的食欲增加与肠道和中枢中脑肠肽有关。与低蛋白质水平饲粮相比,高蛋白质水平(19.2%)饲粮显著提高十二指肠中CCK和弓形核中CART和POMC基因的相对表达量,表明这些基因形成食欲网络共同参与饲粮蛋白质调控家兔食欲的过程。此外,回肠和弓形核中CCK、弓形核中NPY和AgRP基因对饲粮中蛋白质水平变化不敏感。