罗伊氏乳杆菌调节仔猪肠道黏膜免疫功能的研究进展

罗伊氏乳杆菌是一种天然存在于人和动物肠道内的优势乳酸菌,具有较强的耐受性和黏附能力,在抑制病原菌生长、调节肠道微生态平衡、增强肠黏膜免疫力等方面具有重要的功能。本文将重点阐述罗伊氏乳杆菌在胃肠道内的定植及其对仔猪肠道黏膜免疫功能的调控作用,为罗伊氏乳杆菌的合理开发与科学使用提供参考。     

一株罗伊氏乳杆菌的分离鉴定及其益生性能研究

研究从健康猪盲肠黏膜中分离获得一株抑菌性能较强的乳酸菌,并通过形态学、生理生化和16S rDNA分析对该菌株进行鉴定,最终确定菌株A4为罗伊氏乳杆菌。试验罗伊氏乳杆菌A4进行益生性研究,为其在动物养殖中的应用提供依据。     

新疆乌鲁木齐传统酸奶中乳酸菌的多样性分析

本研究对新疆乌鲁木齐传统酸奶中乳酸菌进行分离鉴定,通过传统生理生化鉴定结合16S rDNA序列同源性分析,从6份样品中共分离出14种乳酸菌。乳杆菌属有干酪乳杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、发酵乳杆菌、格氏乳杆菌、弯曲乳杆菌;肠球菌属有屎肠球菌、坚强肠球菌、肠道肠球菌、乳酸肠球菌;链球菌属有嗜热链球菌和黄连链球菌。     

猪源乳酸杆菌的安全性及抗逆性评价

对本实验室自行分离自猪肠道的3株乳酸杆菌进行安全性和抗逆性检测,采用体外法对分离自不同生理阶段猪(仔猪、生长肥育猪、母猪)肠黏膜和食糜的罗伊乳杆菌(Lactobacillus reuteri)LA5、植物乳杆菌(L.plantarum)L47和约氏乳杆菌(Ljohnsonii)L63进行生长特性、溶血性、有害代谢产物、...     

罗伊氏乳杆菌肽聚糖对蛋雏鸡生长性能、免疫功能和抗氧化能力的影响

本试验旨在研究饲粮中添加罗伊氏乳杆菌肽聚糖对蛋雏鸡生长性能、免疫功能和抗氧化能力的影响。试验选取1日龄健康的海兰褐蛋雏鸡96只,随机分为4个组,每组4个重复,每个重复6只。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别在基础饲粮中添加250、500、1 000 mg/kg罗伊氏乳杆菌肽聚糖。试验期42 d。结果表明：1）试验第21、42天,1 000 mg/kg罗伊氏乳杆菌肽聚糖组平均日增重显著高于其他各组（P<0.05）,1 000 mg/kg罗伊氏乳杆菌肽聚糖组料重比显著低于对照组（P<0.05）。2）试验第42天,500、1 000 mg/kg罗伊氏乳杆菌肽聚糖组血液白细胞总数显著高于对照组和250 mg/kg罗伊氏乳杆菌肽聚糖组（P <0.05）。3）试验第21、42天,1 000 mg/kg罗伊氏乳杆菌肽聚糖组血浆谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）活性显著高于对照组（P<0.05）,500、1 000 mg/kg罗伊氏乳杆菌肽聚糖组血浆总抗氧化能力（T-AOC）显著高于对照组和250 mg/kg罗伊氏乳杆菌肽聚糖组（P<0.05）。4）...     

狐源罗伊氏乳杆菌ZJF036益生特性研究

本试验旨在研究狐源罗伊氏乳杆菌ZJF036发酵特性、黏附能力及动物安全性,探究罗伊氏乳杆菌ZJF036的益生特性。试验检测了罗伊氏乳杆菌ZJF036的生长特性、产酸性能、药物敏感性,对人工胃液、人工肠液和胆盐的耐受性,细菌的疏水率和自凝聚率,对狐狸小肠上皮细胞的黏附能力以及对小鼠血液生理生化指标的影响。结果表明:罗伊氏乳杆菌ZJF036培养4～10 h进入对数生长期;培养菌液的最低pH为3.80;罗伊氏乳杆菌ZJF036对麦迪霉素、头孢曲松和素氯霉敏感,对万古霉素、环丙沙星、丁胺卡那和氨苄西林不敏感;细菌培养上清液对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌有良好的抑菌作用;罗伊氏乳杆菌ZJF036在人工胃液和人工肠液中3 h存活率可达90%以上,能够耐受0.4%的胆盐环境;罗伊氏乳杆菌ZJF036的疏水率为82.27%,在2和4 h自凝聚率分别为32.47%和41.70%;罗伊氏乳杆菌ZJF036对狐狸小肠上皮细胞的黏附数为(77.0±8.0) CFU/细胞,明显高于鸡源鼠李糖乳杆菌GG;此外,小鼠安全性试验表明,血液生理生化指标均未见异常。综上所述,罗伊氏乳杆菌ZJF036生长迅速,具有良好产酸性能和抑菌能力,可以耐受人工胃液、人工肠液和胆盐,对狐狸小肠上皮细胞具有很强的黏附能力,对小鼠安全可靠。罗伊氏乳杆菌ZJF036可作为犬科动物益生菌制剂的备选菌株。     

奶牛阴道乳杆菌抗菌物质的体外特性

采用牛津杯法测定4株乳杆菌(罗伊乳杆菌、格氏乳杆菌、约氏乳杆菌和唾液乳杆菌)对致病菌的抑菌活性,使用含有3,3,5,5-四甲基联苯胺和辣根过氧化物酶的MRS琼脂培养基测定乳杆菌产过氧化氢能力,最后通过蛋白类排除试验、抑菌物质热稳定性试验、有机酸排除试验和过氧化氢(H_2O_2)排除试验分析4株乳杆菌主要的抗菌物质。结果显示:4株菌株均具有良好的抗菌活性,约氏乳杆菌和唾液乳杆菌能够产生H_2O_2;约氏乳杆菌主要的抗菌物质为有机酸,罗伊乳杆菌、格氏乳杆菌和唾液乳杆菌主要抗菌物质除了有机酸外,仍可以产生细菌素。结果表明:罗伊乳杆菌、格氏乳杆菌和唾液乳杆菌可以作为防治奶牛子宫内膜炎的益生菌使用。     

猪源罗伊氏乳杆菌GL001的分离与益生特性研究

为了给猪源益生菌制剂的研究与开发提供更多理论依据,从小型巴马猪粪便中分离获得罗伊氏乳杆菌GL001,对该分离菌株的生长特性、产酸性能、模拟胃肠道环境下的耐受能力、药物敏感性及动物安全性进行检测。结果显示：罗伊氏乳杆菌GL001能迅速进入对数生长期,在16 h达到最高生长点后,pH值也相应变平稳;罗伊氏乳杆菌GL001在模拟的胃液环境中,1.5 h的存活率为93.84%,3 h后为88.41%;对0.3%的胆盐环境耐受性强;罗伊氏乳杆菌GL001对阿莫西林、链霉素、多西环素、氧氟沙星敏感,但对青霉素不敏感;细菌的上清液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有较好的抑制作用;大鼠安全性试验表明,分离的罗伊氏乳杆菌GL001对雌鼠、雄鼠的生长和脏器指数均无影响,大鼠脏器没有细菌异位情况。研究表明,分离得到的罗伊氏乳杆菌GL001可作为潜在饲用益生菌进一步研究。     

内蒙古锡林郭勒牧区自然放养家畜肠道中乳酸菌的分离鉴定与潜在益生特性的筛选

乳酸菌是动物肠道内重要的生理性菌群,本研究以内蒙古锡林郭勒盟牧区自然放养的牛、马、山羊和绵羊为研究对象,对其肠道中的乳酸菌进行分离和16S rRNA鉴定,并对38株罗伊氏乳杆菌进行耐酸性、模拟胃肠液转运和胆盐耐受性试验。乳酸菌分离鉴定结果显示共分离到乳酸菌纯培养物96株,包括双歧杆菌属、肠球菌属、乳杆菌属和链球菌属四个菌属,其中乳杆菌属数量最多,为所有分离株的82.29%;乳杆菌属中罗伊氏乳杆菌所占比例最大,为48.10%。益生特性筛选试验结果显示菌株IMAU10240、IMAU10230和IMAU10256具有良好的耐酸、耐胃肠液和胆盐特性,可作为潜在益生菌进行进一步的益生功能研究。     

罗伊氏乳杆菌诱导肠道上皮内CD4~+CD8α α~+双阳性T淋巴细胞产生

小肠组织包含CD4~+CD8αα~+双阳性上皮内T淋巴细胞(DP IELs),它们来源于低表达转录因子Th POK的肠道CD4~+T细胞并且具有调节功能。在无菌小鼠中缺乏DP IELs,提示它们的分化依赖于微生物。本研究发现,不同环境下的小鼠DP IELs数量不同,且与罗伊氏乳杆菌的存在有相关性。罗伊氏乳杆菌诱导无菌小鼠DP IELs的产生,而正常饲养小鼠缺乏DP IELs。罗伊氏乳杆菌没有改变DP-IEL-TCR的作用模式,但是产生内源性色氨酸激活CD4~+T细胞的芳烃受体,导致Th POK下调,进而分化成DP IELs。因此,罗伊氏乳杆菌配合色氨酸丰富的日粮,能够将肠道上皮内CD4~+T细胞重塑为免疫调节性T细胞。     

牦牛粪便中乳酸菌的分离与鉴定

为了解青海省共和县牦牛肠道内益生菌的分布种类,筛选出能够抑制犊牛腹泻的益生菌株,采集20份健康牦牛的粪便样品,对粪便中乳酸菌进行分离和纯化,再结合形态学、生化试验及分子生物学方法鉴定。结果表明,从牦牛粪便中成功分离出7株乳酸菌,包括罗伊氏乳杆菌、植物乳杆菌、保加利亚乳杆菌、乳酸乳球菌、坚强肠球菌、海氏肠球菌和屎肠球菌各1株。本研究分离的7株乳酸菌,为后期抗牦牛腹泻益生菌产品的研究奠定了基础。     

罗伊氏乳杆菌在畜禽生产中应用的研究进展

罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)是专性异型发酵乳酸杆菌,主要定植在人和动物肠道中,具有抑制病原菌、改善肠道环境、调节肠道菌群、降低血清胆固醇含量等诸多优良益生功能,是广泛应用于食品、药品和饲料添加剂的一类重要微生物。本篇综述主要介绍了罗伊氏乳杆菌的生物学特性、生理功能和其在畜禽生产中的应用及其作用机制,并对未来研究方向和发展前景进行了展望。     

罗伊氏乳杆菌发酵对酸乳营养价值的影响

本试验在脱脂牛乳中以德氏乳杆菌保加利亚亚种LD-02和嗜热链球菌LS-11为基础发酵菌株,当添加罗伊氏乳杆菌LA-02后,研究发酵过程中生长曲线和酸度曲线的变化,以及发酵前后游离氨基酸总量、硫胺素、核黄素和叶酸的变化。结果表明:当添加罗伊氏乳杆菌LA-02后,发酵体系生长更为旺盛,酸度变化先强后弱,游离氨基酸和核黄素提高幅度增大,硫胺素和叶酸提高幅度基本持平。     

含1,2-丙二醇青贮玉米微生物菌群分析

为了研究袋式青贮玉米与窖式青贮玉米微生物群集的差异,同时分析与发酵产物中1,2-丙二醇相关的微生物,试验采用全株玉米进行袋式青贮以及窖式青贮。袋式青贮在3,7,14,28,56,120天开封,采样;窖式青贮选择3个500 t级别的半地上式青贮窖,贮藏120 d后每个青贮窖选择8个采样点进行采样。使用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)方法检测微生物区系并进行聚类分析。结果表明:袋式青贮玉米发酵过程中微生物区系无变化,在其中检测到类肠膜魏斯氏菌(W.paramesenteroides)、魏斯氏菌(W.confusa)、肺炎克雷伯菌(K.pneumoniae)、植物乳杆菌(L.plantarum)、短乳杆菌(L.brevis)和乳酸乳杆菌(L.lactis)。青贮窖不同位置微生物菌群具有一定差异,耐酸乳杆菌(L.acetotolerans)、植物乳杆菌(L.plantarum)和布氏乳杆菌(L.buchneri)为3个青贮窖共通菌,同时还检测到了屎肠球菌(E.faecium)、巴氏醋杆菌(A.pasteurianus)、罗伊氏乳杆菌(L.reuteri)、面包乳杆菌(L.panis)、嗜麦芽窄食单胞菌(S.maltophilia)和类肠膜魏斯氏菌(W.Paramesenteroides)。说明袋式青贮微生物菌群与窖式青贮微生物菌群具有一定差异,窖式青贮中检测到了一些在袋式青贮中不常见的乳酸菌;青贮窖中1,2-丙二醇的生成可能与耐酸乳杆菌(L.acetotolerans)、巴氏醋杆菌(A.pasteurianus)、罗伊氏乳杆菌(L.reuteri)、面包乳杆菌(L.panis)和布氏乳杆菌(L.buchneri)有关。     

虾源罗伊氏黏液乳杆菌的分离鉴定及其性质研究

本试验旨筛选一株防治水产致病菌能力强的虾源乳酸菌,并对其抑制水产致病菌的性质进行研究。以健康南美白对虾的不同肠段菌群为菌株分离来源,采用CaCO3-MRS固体培养基分离纯化乳酸菌,再通过抑菌能力试验和溶血试验复筛获得安全菌株。对筛选的乳酸菌菌株进行16S rRNA测序鉴定,并评价其生长特性、耐受性、抗生素敏感性及不同处理的发酵上清液对水产病原菌的抑菌能力。结果显示：对常见水产致病菌抑菌能力最强的安全菌株经16S rRNA测序鉴定为罗伊氏黏液乳杆菌SAMMRS-1G。在菌株的生长特性上,罗伊氏黏液乳杆菌SAMMRS-1G的最适培养pH为5.0,最适培养温度为39℃,4～14 h为其对数生长期;从耐受性上看,罗伊氏黏液乳杆菌SAMMRS-1G对人工胃肠液和渗透压均具有一定的耐受性,在pH 3.0条件下静置培养4 h存活率为90.7%,3.0 g/L的胆盐浓度下培养4 h存活率为85.3%,60‰高盐度条件下静置培养4 h存活率为98.7%;在不同处理对罗伊氏黏液乳杆菌SAMMRS-1G发酵上清液抑菌能力影响方面,发酵上清液对致病菌的抑菌能力为创伤弧菌>金黄色葡萄球菌>副溶血弧菌...     

云南猪源乳酸杆菌的分离鉴定

为了进一步挖掘猪源益生菌资源,从屠宰场采集猪小肠样品共分离到15株猪源乳酸菌,分别命名为LP1~LP15。根据培养特性、革兰染色、生理生化特性等鉴定为6个种。16S-rRNA同源性分析表明,LP1~LP8为约氏乳杆菌,与约氏乳杆菌同源性分别为98.1%,98.1%,97.9%,97.5%,98.6%,99.6%,98.7%和97.5%;LP9-LP11为罗伊氏乳杆菌,与罗伊氏乳杆菌同源性分别为98.2%,98.7%和98.0%;LP12-15分别为嗜酸乳杆菌、鼠乳杆菌、敏捷乳杆菌和嗜淀粉乳杆菌,其中LP12与嗜酸乳杆菌同源性为97.4%,LP13与鼠乳杆菌的同源性为97.8%,LP14与敏捷乳杆菌的同源性为98.1%,LP15与嗜淀粉乳杆菌的同源性为100%。     

罗伊氏乳杆菌所产细菌素的研究

试验对罗伊氏乳杆菌6126的发酵上清液进行了系统研究。结果表明:罗伊氏乳杆菌6126发酵上清液可以产生细菌素,并研究了6126发酵上清液中细菌素的部分特性。该细菌素抑菌谱广,可以抑制多种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌,对热(100℃,30min)和pH(2.0～10.0)稳定,胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、蛋白酶K等多种蛋白酶可使其部分失活。     

罗伊氏乳杆菌的抑菌能力及其对肉仔鸡盲肠内容物菌群的影响

试验随机选用体重、健康情况基本一致的1日龄AA白羽肉仔鸡720羽,按体重相近、性别比例相同原则随机分为空白组、抗生素组、菌粉组、上清液组、发酵液组,每组6个重复,每个重复24羽鸡,试验期42 d,以期研究罗伊氏乳杆菌的抑菌性能及其对肉仔鸡盲肠内容物菌群的影响。试验结果显示:罗伊氏乳杆菌DBN-JP发酵液对金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的抑菌能力与0.02%硫酸黏菌素差异不显著;80℃加热15 min对罗伊氏乳杆菌DBN-JP发酵液的抑菌能力影响不显著;与空白组相比,菌粉组、发酵液组或上清液可抑制肉仔鸡盲肠内容物中大肠杆菌和沙门氏菌,提高乳酸杆菌数量;与抗生素组相比,菌粉组和发酵液组盲肠内容物中乳酸杆菌数显著升高,发酵液组盲肠内容物中沙门氏菌数量与抗生素组相比差异不显著。综上所述,在肉仔鸡日粮中添加罗伊氏乳杆菌DBN-JP菌粉、发酵液、上清液可抑制病原菌生长、调节盲肠内容物菌群,具有替代抗生素的潜力。     

长顺绿壳蛋鸡粪便益生菌的分离与鉴定

为分离长顺绿壳蛋鸡肠道内优势益生菌,本研究通过对正常成年鸡粪便的分离纯化,对分离到的优势益生菌株进行形态学观察以及分子生物学鉴定。最终成功分离到3株益生菌罗伊乳杆菌、黏膜乳杆菌、植物乳杆菌,为鸡常见疾病的防治研究奠定了基础。     

罗伊氏乳杆菌LR1对断奶仔猪血清生化指标和肠道营养物质转运载体mRNA表达的影响

本试验旨在研究罗伊氏乳杆菌LR1对断奶仔猪血清生化指标和肠道营养物质转运载体mRNA表达的影响。选取144头初始体重为(6.49±0.01) kg的21日龄杜×长×大断奶仔猪,随机分为3组,每组8个重复,每个重复6头。对照组饲喂基础饲粮,抗生素组饲喂基础饲粮+100 mg/kg喹乙醇+75 mg/kg金霉素,罗伊氏乳杆菌组饲喂基础饲粮+5×1010CFU/kg罗伊氏乳杆菌LR1。试验期为14 d。结果显示:1)与对照组相比,饲粮添加抗生素显著提高了血清葡萄糖(GLU)的含量(P0.05),且显著降低了血清尿素氮(UN)的含量(P0.05)。2)与对照组相比,饲粮添加罗伊氏乳杆菌LR1显著提高了十二指肠胃动素(MLN)和空肠胆囊收缩素(CCK)的mRNA表达量(P0.05);饲粮添加抗生素显著提高了十二指肠MLN的mRNA表达量(P0.05)。3)与对照组相比,饲粮添加罗伊氏乳杆菌LR1显著提高了十二指肠Na+依赖性谷氨酰胺载体2(ASCT2)、阳离子氨基酸运载体1(CAT1)、小肽转运体1(PepT1)和空肠中性和碱性氨基酸转运载体(rBAT)以及空肠与回肠y+L氨基酸转运体1 (y+LAT1)的mRNA表达量(P 0.05);饲粮添加抗生素显著提高了空肠y+LAT1、CAT1、PepT1和空肠与回肠哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的mRNA表达量(P0.05)。4)与对照组相比,饲粮添加罗伊氏乳杆菌LR1显著提高了十二指肠小肠脂肪酸结合蛋白(I-FABP)、乙酰辅酶A羧化酶α(ACCα)、脂肪酸合成酶(FASN)和十二指肠与空肠脂肪酸结合蛋白3(FABP3)以及十二指肠、空肠与回肠过氧化物体增殖物激活受体γ(PPARγ)的mRNA表达量(P0.05);饲粮添加抗生素显著提高了空肠ACCα的mRNA表达量(P0.05)。5)与对照组相比,饲粮添加罗伊氏乳杆菌LR1显著提高了空肠和回肠钠-葡萄糖协同转运蛋白1(SGLT1)的mRNA表达量(P0.05);饲粮添加抗生素显著提高了十二指肠SGLT1、钠-葡萄糖协同转运蛋白3(SGLT3)的mRNA表达量(P0.05)。综上所述,饲粮中添加5×1010CFU/kg罗伊氏乳杆菌LR1对断奶仔猪的肠道营养物质转运具有良好的促进作用,表现为促进断奶仔猪肠道物理消化和化学消化,促进小肽、氨基酸及脂肪酸吸收转运,增强脂肪酸的合成。罗伊氏乳杆菌LR1在替代猪饲用抗生素方面具有巨大潜力,可用于开发新型猪饲料抗生素替代物。