转Bt 基因早熟春甘蓝抗虫材料的获得

采用农杆菌介导法，将Bt cry1Ia8 抗虫基因转入早熟春甘蓝自交系F2011 中，共获得37 株卡那霉素抗性植株，其中23 株经PCR 检测呈阳性；Southern blot 检测结果表明，cry1Ia8 基因已成功整合到甘蓝基因组中；RT-PCR 和Western blot 检测结果表明，cry1Ia8 基因在RNA 水平和蛋白质水平均得到表达；对转基因植株进行ELISA 检测，其Bt 毒蛋白含量在201.9～241.3 ng·g-1（FW）之间；离体饲虫试验结果表明，转基因植株对敏感小菜蛾和Cry1Ac 抗性小菜蛾均具有较好的抗
性，且Bt 毒蛋白表达量越大，植株抗性越强。     

转Cry1Ac青花菜回交后代鉴定方法研究

转Bt基因青花菜在遗传分离后代中的鉴定方法,对于准确筛选阳性单株和抗虫材料具有重要影响。利用5份青花菜材料、1份阳性对照（转Cry1Ac基因纯合材料）和5份回交父本（阴性对照）为试验对象,在基因水平上对Cry1Ac进行普通PCR扩增,蛋白水平上采用Bt-Cry1Ab/1Ac转基因检测试纸条测定,表观上采用小菜蛾离体饲虫试验进行抗性鉴定,比较阐明了3种方法的鉴定效果和优缺点。结果表明,3种方法分别从5份青花菜回交材料的159个分离单株中检测到82、77和75份阳性株,经卡方显著性检验,各材料阳性单株与非阳性单株分离后代均符合孟德尔遗传规律。分析表明,小菜蛾离体饲虫试验对于鉴定转Cry1Ac后代抗虫效果准确可靠,但需要很好地控制实验条件;Bt-Cry1Ab/1Ac转基因检测试纸条灵敏度高,可快速观察到Bt毒蛋白的实际表达量,基本不受条件限制,但必须控制人为误差;普通PCR扩增能够鉴定阳性株,但不能反映实际抗虫效果,必须结合小菜蛾饲虫试验或Bt毒蛋白水平上的检测才能实现精准鉴定。     

几种苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白对黑龙江省主要蔬菜害虫小菜蛾活性分析

利用已克隆的3种Bt cry基因cry1Ca、cry1Ia、cry2Ab和1种野生菌株HD-73(cry1Ac)表达的4种Bt Cry杀虫晶体蛋白,对小菜蛾进行生物活性分析,并将Cry1Ac杀虫晶体蛋白分别与其它3种蛋白按1:1的比例组合,对小菜蛾进行生物活性测定.结果表明:单独使用Cry1Ac的活性最高,LC50为2.39 μg/mL,Cry1Ac与Cry2Ab混合对小菜蛾的具有较高的毒力,LC50为48.91,高于其它组合.     

农杆菌介导Cry1Ac基因转化菊花

 用农杆菌介导法, 以茎段(节间) 为外植体, 将含有苏云金芽孢杆菌(Bt) 毒蛋白Cry1Ac基因的植物遗传载体导入菊花(切花菊) 品种‘日本黄’中, 得到126株抗性植株, PCR检测及基因组DNA的Southern杂交分析表明Cry1Ac基因已整合到菊花总DNA中, 共获得6株转基因植株。利用棉铃虫做转基因植株的盆栽和叶片平皿试验, 发现其中2株对棉铃虫具有很高抗性, 校正死亡率达90%以上; 1株对棉铃虫具有高抗性, 校正死亡率达80%以上; 3株对棉铃虫抗性较明显, 校正死亡率44.7%～60.9%。     

水氮处理对青花菜产量及水肥利用效率的影响

采用大田试验方法,研究了不同灌水量和不同施氮量对西北高原青花菜产量、水分利用效
率和根际土壤速效养分含量的影响。结果表明：青花菜产量以中水高氮（W2N1）处理最高,达2 035
kg·（667 m²）^-1,较产量最低的低水低氮（W3N3）处理高36.30%;而水分利用效率随灌水量的减少而显
著提高,低水高氮（W3N1）处理的水分利用效率最高。青花菜各器官的干物质积累量随着水氮施用量的
增加大体呈增加的趋势,但超过一定量后则表现为下降的趋势,以中水高氮（W2N1）处理最高。不同水
氮处理下0～20 cm 土层碱解氮、有效磷、速效钾含量都呈先上升后下降的变化趋势,且磷钾肥的施用量
远大于吸收量,土壤残留较多。综合评价,西北高原青花菜种植以中水高氮（W2N1）处理效果最佳,即
施氮量为27.6 kg·（667 m²）^-1、灌水量为83.52 m ³·（667 m²）^-1。     

Bt cry1Ia8抗虫基因对结球甘蓝的转化及其表达

 以结球甘蓝(Brassica oleracea L. var. capitata L. ) 的下胚轴和具柄子叶为外植体, 通过根癌农杆菌(Agrobacterium tum efaciens) 介导法将苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis) 杀虫晶体蛋白基因cry1Ia8导入结球甘蓝中, 共获得38株卡那霉素抗性植株。PCR和Southern blot检测证实cry1Ia8基因已经成功导入并整合到甘蓝的基因组中; RT2PCR和Western blot检测表明, cry1Ia8基因在转录和翻译水平有一定的表达; 转化植株叶片离体饲喂敏感小菜蛾( Plutella xylostella) 和对Cry1Ac蛋白表现抗性的小菜蛾的试验表明, 该基因不仅对敏感小菜蛾有很强的抗性, 对抗性小菜蛾也具有较强的抗性。     

小菜蛾类钙粘蛋白片段的原核融合表达载体 构建及其条件优化

构建了小菜蛾钙粘蛋白片段基因的重组载体,为提高其在大肠杆菌中的表达量,研究了时间、
温度、IPTG 浓度对融合蛋白表达量以及可溶性的影响。结果表明,使用LB 培养基37 ℃培养1.5 h 后,采
用终浓度为0.1 mmol·L-1 的IPTG,在25 ℃ 180 r·min-1 诱导培养36 h 融合蛋白的表达量最大,并且温
度的改变对融合蛋白的可溶性几乎没有影响,SDS-PAGE 电泳检测结果表明,融合蛋白的分子质量与预计
大小一致,约为16 kDa。

     

昆虫激素调控害虫对Bt杀虫蛋白的抗药性

正2020年6月12日,中国农业科学院蔬菜花卉研究所蔬菜虫害防控创新团队在Nature Communications上在线发表了题为"MAPKdependent Hormonal Signaling Plasticity Contributes to Overcoming Bacillus thuringiensis Toxin Action in an Insect Host"的研究论文。该研究发现昆虫激素水平升高可以激活MAPK信号途径反式调控多个中肠受体基因差异表达,从而导致小菜蛾对苏云金芽胞杆菌(Bt)杀虫蛋白Cry1Ac的高抗性。该研究首次揭示了昆虫激素可以参与害虫抗药性的新功能     

华南地区蔬菜钾肥推荐施肥技术体系建立

在华南地区不同地点、不同肥力水平的菜园上进行叶菜类、瓜类、豆类3 类主要蔬菜的钾肥
田间试验,并对138 个试验点的3 类蔬菜相对产量与土壤有效钾含量、土壤有效钾含量与施钾量的关系
进行相关分析,建立回归方程,以此分别建立适用于瓜类、豆类、叶菜类的土壤有效钾养分丰缺指标和各
等级土壤的推荐施钾肥指标。结果表明：蔬菜相对产量为＜ 75%、75%～95%、＞ 95% 的各肥力等级土
壤有效钾丰缺指标,苦瓜分别为＜ 50 mg·kg^-1、50～240 mg·kg^-1、＞ 240 mg·kg^-1;豇豆分别为＜ 45
mg·kg^-1、45～195 mg·kg^-1、＞ 195 mg·kg^-1;叶菜分别为＜ 20 mg·kg^-1、20～140 mg·kg^-1、＞ 140
mg·kg^-1。各有效钾等级对应的施钾量,苦瓜分别为15.0 kg·（667m²）^-1、7.5～15.0 kg·（667m²）^-1、＜ 7.5
kg·（667m²）^-1; 豇豆分别为12.5 kg·（667m²）^-1、7.0～12.5 kg·（667m²）^-1、＜ 7.0 kg·（667m²）^-1;
叶菜分别为9.5 kg·（667m²）^-1、5.5～9.5 kg·（667m²）^-1 、＜ 5.5 kg·（667m²）^-1 。     

黄瓜脂氧合酶基因CsLOX2 的原核表达载体 的构建及表达分析

以先前克隆到的黄瓜脂氧合酶基因CsLOX2 全长的cDNA 为模板,用含有特异性酶切位点
的Yh1、Yh2 为引物,通过PCR 方法将黄瓜脂氧合酶基因CsLOX2 的ORF 区构建到大肠杆菌表达载体
pGEX-4T-1 上获得原核表达载体p4t-LOX2,将该表达载体p4t-LOX2 转化到大肠杆菌菌株BL21（DE3）
中,获得相应的重组工程菌。在IPTG 诱导下,通过SDS-PAGE 电泳,得到一条约115 kD 的融合蛋白条带,
除去pGEX-4T-1 自身诱导的约26 kD 大小的GST 标签蛋白后,CsLOX2 编码一个约89 kD 的蛋白。 经过
融合蛋白表达体系的优化分析,表明该融合蛋白在 37℃,0.80 mmol·L^-1 IPTG 诱导表达 10.5 h,可获得
融合蛋白的最大表达量。     

华中地区小菜蛾对9 种杀虫剂的抗药性测定

采用室内浸叶法，测定了华中地区5 个蔬菜产区（河南洛阳白马寺镇、湖南岳阳广兴洲镇、湖北武穴梅川镇、湖北宜昌当阳市、湖北云梦隔蒲镇）田间小菜蛾种群对2% 阿维菌素乳油（EC）、16 000 IU·mg^-1 Bt 工程菌WG-001 可湿性粉剂（WP）、20% 高效氯氰菊酯EC、5% 氯虫苯甲酰胺EC、2.5%多杀菌素悬浮剂（SC）、10% 溴虫腈EC、5% 氟啶脲EC、20% 丁醚脲EC、5% 茚虫威EC 等9 种常用杀虫剂的抗药性。结果表明：5 个小菜蛾种群对阿维菌素（抗药性倍数为44.5～92.0 倍）、Bt（抗药性倍数为66.5～202.1 倍）、高效氯氰菊酯（抗药性倍数为76.2～146.4 倍）已产生了高水平至极高水平抗性，对氟啶脲（抗药性倍数为32.5～82.5 倍）的抗药性达到中等至高水平抗性，对多杀菌素（抗药性倍数为6.5～19.4倍）、氯虫苯甲酰胺（抗药性倍数为3.1～23.1 倍）、溴虫腈（抗药性倍数为2.6～22.3 倍）和茚虫威（抗药性倍数为7.1～26.3 倍）表现为中等及以下水平抗性，对丁醚脲（抗药性倍数为2.3～7.7 倍）表现为敏感至低水平抗性。因此，华中地区的小菜蛾防治应注重氯虫苯甲酰胺、溴虫腈、丁醚脲与多杀菌素、茚虫威、氟啶脲交替、轮换使用，以便延缓抗药性的产生与发展，取得更好的防效。     

水果型萝卜新品种青脆50 的选育

青脆50 是以不育系6A 为母本、以异型保持系DR9321 为第一父本、以自交系W532 为第二
父本配制而成的水果型萝卜三交种。生育期50～55 d（天），植株生长势强，田间未发生病毒病和黑腐病。
肉质根长圆柱形，纵径22.4 cm，横径5.8 cm，单根质量460 g。外皮绿色，光泽度好，商品性优。肉质浅
绿色，脆嫩可口，甜味浓，品质优。每667 m² 产量3 000 kg 左右，适宜我国各萝卜产区秋露地和秋延后
大棚、温室栽培，现已在北京、河北、河南、山东、山西、陕西等地累计推广种植750 hm ²。     

光强对黑豆芽苗菜生长和营养品质的影响

采用发光二极管（light emitting diode，LED）精确调制光强，研究不同光强对黑豆芽苗菜生
长和营养品质的影响。结果表明：与黑暗培养相比，光强为3、9、15 μmol·m^-2·s^-1 时黑豆芽苗菜的下胚
轴直径显著增加；光强为3 μmol·m^-2·s^-1 时黑豆芽苗菜的VC 含量显著增加；光强为9 μmol·m^-2·s^-1
时黑豆芽苗菜的可溶性蛋白、可溶性糖和蔗糖含量显著增加， 并且POD 活性显著提高。在3～15
μmol·m^-2·s^-1 的光强范围内，黑豆芽苗菜的叶绿素a、叶绿素b、叶绿素a+b 及类胡萝卜素含量均显著
高于黑暗培养，并且各色素含量均随着光强的增大而显著增加。总体而言，3～9 μmol·m^-2·s^-1 的光强
培养有利于黑豆芽苗菜的生长和部分营养品质的改善。     

水果黄瓜新品种绿精灵5号的选育

绿精灵5号是以优良DH系09C38-5为母本、优良自交系08C10为父本配制而成的水果黄瓜一代杂种。全雌型,生长势中等,单性结实能力强,耐低温弱光,耐热,耐霜霉病、白粉病,高抗枯萎病,抗褐斑病。瓜长14~16cm,横径2.8cm,瓜色绿,无刺瘤,无瓜把。可溶性固形物含量4.19%,VC117.9mg·kg-1,可溶性糖17.98mg·g-1。特别适合长季节种植,生育期达7个月。每667m2产量为6700kg左右。适合全国大部分地区周年保护地种植。     

江苏中南部设施蔬菜盐渍化土壤盐分离子含 量及其垂直分布调查

为了解设施蔬菜土壤盐渍化状况,对江苏中南部设施蔬菜产区典型盐渍化土壤的0～40 cm
土层,以10 cm 为单位进行分层取样,并以相邻棚外的露地土壤为对照,测定了土壤EC 值及主要盐分离
子含量在土层间的垂直分布情况。结果表明：设施内各土层的EC 值和主要盐分离子含量均明显高于棚外
对照。阴离子以NO₃^- 为主,但SO₄^2- 含量也较高,阳离子则以Ca²⁺ 为主。设施土壤0～10 cm 土层的EC
值和主要盐分离子含量均较高,具有明显的表聚性;部分基地的土壤盐渍化已向深层发展。     

早春白萝卜新品种潍萝卜4 号的选育

潍萝卜4 号是以白萝卜雄性不育系VMS08-162 为母本, 以晚抽薹白萝卜自交不亲和系
VL03-163 为父本配制而成的早春白萝卜一代杂种。株高50 cm 左右,叶簇半直立,叶色深绿,羽状裂叶,
单株叶片数14～16 片。肉质根圆柱形,纵径32～36 cm,横径6～8 cm,2/5 入土,表皮光滑,尾根细小,
须根少,白皮白肉,肉质细嫩,口感脆嫩,风味好。单株肉质根质量1 kg 左右,根叶比为3。生长期60 d
（天）左右,每667 m² 种植4 000 株左右,平均每667m² 产量为6 000～7 000 kg。适合在全国各地种植白
萝卜的地区春季栽培。     

辣椒新品种桂椒7 号的选育

桂椒7 号是以优良自交系Ca1-6-8 为母本,以优良自交系Ca3-1-6 为父本选育而成的高产、
耐热辣椒一代杂种。植株生长势强,果实长线形,商品性好、耐贮运;果长17.8～22.0 cm,横径1.62 ～1.97
cm,肉厚0.21～0.26 cm,单果质量17.5～25.2 g,每667 m2 产量3 000 kg 以上;辣椒素、VC、蛋白质、
还原糖和干物质含量分别为127.0 mg·kg^-1、1 840 mg·kg^-1、2.67%、1.92%、15.2%。青熟果深绿色,老
熟果鲜红色,全国各地辣椒生产区域均可种植。