白头翁皂苷体外抗肿瘤试验研究

为研究白头翁皂苷体外抗肿瘤活性,从白头翁中提取有效成分皂苷,对大肠癌HT29细胞和人胃癌细胞株BGC823进行体外培养,用MTT法测定白头翁皂苷对2种肿瘤细胞增殖反应的影响.结果表明:白头翁皂苷对两种肿瘤细胞增殖有较强的抑制作用,并表现一定的剂量关系,白头翁皂苷浓度为6 μg·mL-1时,对人胃癌细胞株BGC823细胞生长的抑制率达到了80.71％,效果较好.因此,白头翁皂苷作为抗肿瘤药物有效成分的开发和利用有待于进一步深入研究.     

白头翁皂苷及次生物的研究

中药材白头翁中所含皂苷主要为五糖基白头翁皂苷B4,即3-O-[α-L-鼠李糖基(1→2)-α-L-阿拉伯糖基]-3β,23-二烃基-Δ20(29)-羽扇豆烯-28-O-[α-L鼠李糖基(1→4)-β-D-葡萄糖基(1→6)]-β-D-葡萄糖酯苷,其含量约为8.57%。白头翁粗皂苷可经硅胶柱层析法分离纯化,白头翁皂苷B4的收得率约为60.33%。五糖基白头翁皂苷B4经酸水解后可得到白头翁皂苷元,即3β,23-二烃基-Δ20(29)-羽扇豆烯-28-酸;而白头翁皂苷B4经碱水解后可得到含两个糖基的白头翁皂苷A,即3-O-[α-L-鼠李糖基(1→2)-α-L-阿拉伯糖基]-3β,23-二烃基-Δ20(29)-羽扇豆烯-28-酸。     

超声造影分析评估血吸虫病肝纤维化程度的初步探讨

目的：：利用超声造影分析评价血吸虫肝纤维化程度。方法：对临床诊断的血吸虫病患者40例进行超声造影,根据超声造影剂到达肝动脉、门静脉、肝实质及肝静脉的时间,计算肝动静脉渡越时间(HA-HVTT),门静脉肝静脉渡越时间(PV-HVTT)及肝实质肝静脉渡越时间(PA-HVTT),分析其差异及相关性。结果：造影剂到达 HA-HVTT、PV-HVTT 和 PA-HVTT 随血吸虫病的肝纤维化严重程度的增加而缩短,与肝纤维化程度呈负相关。结论：超声造影对评估血吸虫病肝纤维化程度有重要临床意义。     

鲈鱼和小鼠肝组织几种功能指标的比较

为探索处于不同进化地位的两种动物（鲈鱼和小鼠）肝功能指标的异同，分别采用Lowry法、CO还原差示光谱法和比色法，对鲈鱼和小鼠肝组织重要细胞器（线粒体和微粒体）蛋白、药物代谢酶（细胞色素P450）和反映肝功能的重要指标（血清中天冬氨酸转氨酶和丙氨酸氨基转移酶含量）进行了比较。结果显示，鲈鱼肝脏线粒体蛋白、细胞色素P450和丙氨酸氨基转移酶均明显低于小鼠，而微粒体蛋白和天冬氨酸氨基转移酶与小鼠差异不明显。这些结果提示，肝功能指标在不同进化地位的动物（鲈鱼和小鼠）间存在着差异，其中肝脏细胞色素P450和丙氧酸氨基转移酶的含量可能与肝功能尊异密切相关。     

生三七对肝纤维化小鼠血液流变学的影响

目的观察生三七对肝纤维化小鼠血液流变学的影响.方法复制小鼠中毒性肝纤维化模型,生三七粉灌胃6周,检测全血粘度、血浆粘度、红细胞压积等血液流变学参数,并行肝脏病理组织切片检测.结果与空白对照组比较,肝纤维化模型组小鼠全血粘度、血浆粘度、红细胞压积明显增高(P＜0.05,P＜0.01),生三七治疗后小鼠全血粘度、血浆粘度、红细胞压积明显降低(P＜0.05,P＜0.01);肝脏病理组织切片显示使用生三七后,肝纤维化程度有明显改善.结论生三七可降低血液粘度,延缓肝纤维化的发展.     

血吸虫病肝纤维化并发胆囊异位的B超诊断及分析

目的探讨血吸虫肝纤维化并发胆囊异位的声像图特征及发生机理.方法对323例血吸虫病肝纤维化病例的声像进行回顾性分析.结果有12例(3.7%)并发胆囊异位,其声像图有共同特征.结论这类胆囊异位是并发在血吸虫病肝纤维化的病理基础上的,对于这类胆囊异位的探查、诊断及分析在临床诊断中可以减少漏诊、误诊的发生.     

二氢杨梅素对肝纤维化小鼠肝功能的影响

试验旨在研究二氢杨梅素对肝纤维化小鼠肝功能的影响。试验选取小白鼠54只,随机分成空白组、模型组、扶正化瘀胶囊阳性对照组,二氢杨梅素低剂量组、二氢杨梅素中剂量组、二氢杨梅素高剂量组,测试不同剂量二氢杨梅素对肝纤维化小鼠肝功能的影响。结果表明:二氢杨梅素能缓解四氯化碳导致的肝损伤,低剂量二氢杨梅素对于ALT较佳,高剂量二氢杨梅素对于AST较佳;二氢杨梅素能够在一定程度缓解肝细胞纤维化,但是并不能完全防止肝纤维化。二氢杨梅素可以调节肝功能,能明细降低ALT、AST的水平,有显著的保肝护肝功效,同时,二氢杨梅素对于肝纤维化有一定的疗效。     

鲈鱼和小鼠肝组织几种功能指标的比较

为探索处于不同进化地位的两种动物（鲈鱼和小鼠）肝功能指标的异同,分别采用Lowry法、CO还原差示光谱法和比色法,对鲈鱼和小鼠肝组织重要细胞器（线粒体和微粒体）蛋白、药物代谢酶（细胞色素P450）和反映肝功能的重要指标（血清中天冬氨酸转氨酶和丙氨酸氨基转移酶含量）进行了比较。结果显示,鲈鱼肝脏线粒体蛋白、细胞色素P450和丙氨酸氨基转移酶均明显低于小鼠,而微粒体蛋白和天冬氨酸氨基转移酶与小鼠差异不明显。这些结果提示,肝功能指标在不同进化地位的动物（鲈鱼和小鼠）间存在着差异,其中肝脏细胞色素P450和丙氧酸氨基转移酶的含量可能与肝功能尊异密切相关。     

抗纤灵Ⅰ方对小鼠血吸虫病肝纤维化的干预及机制探讨

目的 观察抗纤灵Ⅰ方对小鼠血吸虫病肝纤维化的干预效果,探讨抗纤灵Ⅰ方干预血吸虫肝纤维化的可能分子机制,为抗纤灵Ⅰ方的临床应用提供实验依据。方法 采用日本血吸虫尾蚴经皮肤贴片感染昆明小鼠,建立血吸虫病早期肝纤维化动物模型,将建模成功的小鼠用吡喹酮药物连续杀虫治疗后分为抗纤灵Ⅰ方低、中、高剂量组,抗纤灵Ⅰ方的丹参加味方低、中、高剂量组,秋水仙素治疗对照组,蒸馏水灌胃对照组和未做任何处理的模型对照9组。以未感染血吸虫的正常小鼠为肝纤维化阴性对照组。各实验组连续灌胃治疗8周,收集各组小鼠肝脏,HE染色观察肝纤维化病理改变,测量肝组织虫卵肉芽肿平均面积;免疫组化染色方法检测肝组织内胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ、MMP-1蛋白酶以及TIMP-1蛋白的表达,比较各组间的蛋白表达差异。结果 HE染色显示,与模型组和正常对照组相比抗纤灵Ⅰ方及其丹参加味方高剂量组可显著减少肝组织虫卵肉芽肿面积（P<0.05）;免疫组化染色结果显示,与模型组比较,抗纤灵Ⅰ方及其丹参加味方中、高剂量组干预后小鼠肝组织内的胶原Ⅰ、Ⅲ蛋白以及TIMP-1蛋白表达显著减少（P<0.05）、MMP-1蛋白酶表达显著增加（P<0.05）,但抗纤灵Ⅰ方与丹参加味方之间差异无统计学意义（P>0.05）。结论 抗纤灵Ⅰ方及其丹参加味方对小鼠血吸虫病肝纤维化具有较好的干预效果,但两者在疗效上差异无统计学意义,丹参未能增强抗纤灵Ⅰ方的干预肝纤维化效果;抗纤灵Ⅰ方的干预机制可能是通过抑制肝组织内胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ和TIMP-1蛋白的表达,增加MMP-1蛋白酶的表达来发挥作用。     

硫化氢通过氧化应激及细胞因子调控小鼠肝纤维化的进程

目的 观察硫化氢(H2S)通过氧化应激及细胞因子调控四氯化碳(CC14)诱导小鼠肝纤维化的抑制作用.方法 将20只雄性昆明小鼠随机分为4组,正常对照组、肝纤维化组、低剂量NaHS组和高剂量NaHS组,每组5只.采用化学发光试剂盒检测氧化应激酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)水平;ELISA检测炎性细胞因子TNF-α、IL-1α和IFN-γ水平;全自动生化检测仪检测各组小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和甘油三酯(TG)水平;Realtime-PCR检测参与氧化应激基因的表达调控.结果 与正常对照组比较,肝纤维化组的SOD、CAT和GSH-Px水平降低,细胞因子TNF-α、IL-1α和血清中ALT、AST、TG升高(P＜0.05或0.01);与肝纤维化组比较,NaHS高、低剂量组的ALT、AST降低,SOD、CAT和GSH-Px升高,且呈剂量依赖关系(P＜0.05或0.01),TG变化则无统计学意义(P＞0.05).结论 H2S可通过降低氧化应激水平,抑制细胞因子的释放和肝纤维化,改善肝功能.     

保健食品中总皂苷测定方法研究

[目的]找出一种准确、简捷的测定方法,应用于保健食品的日常检测。[方法]以香草醛-高氯酸为显色剂,采用紫外分光光度计标准曲线外标法测定。[结果]标准曲线法测定的线性范围为0.020~0.250 mg/m L,决定系数R2=0.998 9,在不同的保健食品中平均加标回收率均在95.8%~104.2%,RSD≤3.0(n=6)。[结论]该方法简便快捷、准确、灵敏度高、重复性好,达到检验分析的要求,具有实用推广价值。     

商陆总皂苷提取工艺研究

实验采用乙醇回流提取法提取商陆根中的总皂苷,用紫外分光光度法测定总皂苷含量,以人参皂苷为指标成分,测定波长为540nm,考察乙醇浓度、提取时间、提取温度、料液比对总皂苷提取液浓度的影响。结果表明,乙醇浓度80%,提取温度90℃,提取时间2h,料液比1∶20,商陆总皂苷提取液浓度分别达到最大值。以乙醇浓度(A)、提取温度(B)、提取时间(C)3个对皂苷提取影响较大的因素,以总皂苷提取率为指标设计正交实验,3个因素对商陆总皂苷提取液浓度的影响大小为:CBA,提取工艺条件A1B1C2,即乙醇浓度80%、提取温度80℃,提取时间2h,该条件下商陆总皂苷提取液浓度达到最大值0.141mg/g。     

酸浆宿萼总皂苷对小鼠胃癌细胞(MFC)生长的影响

为了解酸浆宿萼总皂苷(TPS)的抗肿瘤效果,研究了TPS对小鼠胃癌细胞(Murine foregastric carcinoma,MFC)的生长、增殖抑制和细胞凋亡的影响。结果表明,TPS能使小鼠胃癌细胞MFC的细胞数量减少、细胞形状发生改变、凋亡小体增加;TPS在浓度为80μmol·L-1,作用72h后,对MFC的增殖抑制率能达到50%以上,同时MFC的凋亡效果也最明显;TPS对MFC的增殖抑制率和细胞凋亡率都随浓度增大而增大,呈剂量依赖性。     

葛花中总皂苷的含量测定

目的 研究葛花总皂苷的含量测定方法.方法 利用乙醇提取,乙醚脱脂,正丁醇萃取的方法提取纯化总皂苷,香草醛-硫酸分光光度法测定总皂苷.结果 以人参皂苷Re为对照品作校正曲线,C=40.955A 0.782 5,r=0.997 2,在2.84～30.12μg/ml范围内线性关系良好,回收率为97.81%,测得葛花中总皂昔含量为(2.36±0.15)%(a=0.05).结论 测定方法简便、快速、灵敏、准确,可作为葛花中总皂苷的含量测定方法.     

微波辅助提取白头翁皂苷研究

利用响应面法对白头翁(Pulsatilla chinensis)皂苷的微波提取条件进行了优化。在单因素试验基础上,利用Box-Behnken中心组合设计原理及响应面法分析并建立二次回归模型。以乙醇体积分数、微波功率、微波时间为考察因素,以白头翁皂苷提取率为响应值,研究了各因素对白头翁皂苷提取率的影响。确定最佳微波提取条件为乙醇体积分数50%、微波功率300 W、微波时间4 min,在此条件下,白头翁皂苷提取率达到5.33%。     

分光光度法测定藜麦中总皂苷的含量

[目的]建立一种测定藜麦中总皂苷的分光光度法,研究藜麦中总皂苷的含量。[方法]采用超声波提取、香草醛-高氯酸分光光度法,以藜麦皂苷A为对照品,检测波长482 nm,样品提取采用60%乙醇溶液,料液比1∶30(g∶mL),提取时间30 min,提取2次,回收乙醇后用水饱和的正丁醇萃取3次。[结果]藜麦中总皂苷浓度在0.021 12~0.063 36 mg/mL范围内具有良好的线性关系,线性方程为A=12.169C-0.071 4,相关系数0.999 9。[结论]建立了超声波提取-分光光度法测定藜麦中总皂苷含量的新方法,该方法简便、准确,可用于藜麦加工工艺的评价。     

白头翁不同提取液对大豆荚螟的触杀活性

应用均匀设计法研究了白头翁全草的不同提取液对大豆荚螟的触杀作用。结果表明:48 h内乙醇浸提液和水蒸汽蒸馏液均对大豆荚螟具有较高的触杀作用,72 h仅乙醇浸提液对大豆荚螟具有触杀作用,其致死中浓度(LC50)为8.627 3 mg/mL,触杀致死率为96.5%。乙酸乙酯浸提液对大豆荚螟的触杀作用不显著。     

人参总皂苷提取分离工艺的优选

为研究D-101型大孔吸附树脂富集纯化人参总皂苷的工艺条件，以人参总皂苷得率为考察指标。确定了D-101型大孔吸附树脂富集纯化人参总皂苷的性能和洗脱参数。结果表明；以50%乙醇为洗脱剂效果最佳。人参总皂苷洗脱率在85%以上。纯度约为60%。此工艺简便，无污染，成本低，利于推广。     

响应面法优化超声波辅助提取白头翁总皂苷

采用响应面法优化了超声波法辅助提取白头翁总皂苷(pulsatilla saponin)的条件。以白头翁皂苷B4提取率为评价指标,在单因素试验的基础上,利用Box-Behnken响应面分析法,确定最佳提取条件。结果表明,超声波辅助提取白头翁总皂苷的最佳工艺参数为超声功率240 W,乙醇体积分数60%,超声时间30 min。在此条件下白头翁皂苷提取得率为5.35%。响应面法优化得到的提取工艺稳定合理,准确可靠,是提取白头翁皂苷的可行方法。