黄曲霉毒素的生物脱毒研究进展

黄曲霉毒素是一种真菌次级代谢产物,广泛存在于霉变的食品或饲料中,具有极强的肝脏毒性,是诱发肝脏癌变的毒素之一。本文介绍了微生物对黄曲霉毒素B₁的吸附和降解作用,综述了近年来食品和饲料中黄曲霉毒素B₁的微生物脱毒研究及应用进展。     

黄曲霉毒素对家禽的危害与脱毒技术

黄曲霉毒素是由某些曲霉真菌产生的次级代谢产物,具有较强的致畸、致癌、致突变作用。其中黄曲霉毒素B1的毒性最强,能严重损害动物机体的消化机能和免疫系统,导致动物饲料转化率等生产性能降低,并能够在肝脏、肾脏、肌肉等组织中蓄积,严重危害动物健康以及人类的食品安全。黄曲霉毒素中毒常见于幼龄的鸡、鸭和火鸡,特别是以2~6周龄的雏鸡和雏鸭敏感性最高。目前黄曲霉毒素脱毒技术主要有物理脱毒法、化学脱毒法、吸附剂法和生物脱毒法。本文阐述了黄曲霉毒素对家禽的危害,分析了各种脱毒技术的脱毒原理与研究现状,并对其应用前景进行了展望。     

黄曲霉毒素脱毒方法的研究进展

黄曲霉毒素(Aflatoxin简称AFT)是一类结构相似的衍生物的总称.目前已发现的AFT及其衍生物有20多种,除了AFT B1、B2、G1、G2是天然产生的毒素外,其余的都为它们的衍生物.在上述4种天然毒素中,以B1的毒性最强,在食品和动物饲料的AFT检测中,一般以B1作为主要检测指标.     

霉菌毒素吸附剂对牛奶中黄曲霉毒素M_1含量的影响

奶牛饲料中霉菌毒素的污染严重影响着奶牛生长性能的发挥以及人类的健康。试验从体外和动物体内试验两方面,依次考察了两种不同霉菌毒素吸附剂对黄曲霉毒素的吸附脱毒效果。结果表明,两种霉菌毒素吸附剂在体外对黄曲霉毒素B1均有较好的吸附脱毒能力;在体内均能有效降低奶牛乳中黄曲霉毒素M1的含量,并能提高奶牛产奶量(P<0.05),对乳品质无明显影响。     

禽类黄曲霉毒素的中毒机理研究

本研究从组织学、病理学和种属差异方面探讨黄曲霉中毒的规律性和特点     

含硫氨基酸对黄曲霉毒素B1的解毒机理

口服黄曲霉毒素Ｂ１（２ｍｇ／ｋｇ）能引起雏鸡肝细胞明显损伤，表现肝脏谷胱甘肽（ＧＳＨ）含量降低，肝糖原减少，谷丙转氨酶活性升高。口服蛋氨酸、Ｎ－乙酰半光氨酸能够提高肝脏细胞ＧＳＨ水平。ＧＳＨ能与ＡＦＢ１结合而解毒。其作用机理是通过谷胱甘肽－硫－转移酶的作用。口服亚硒酸钠能提高谷胱甘肽过氧化物酶的活性，也能对抗ＡＦＢ１的毒性。     

1株降解黄曲霉毒素B1的解淀粉芽胞杆菌的分离鉴定及其体外脱毒效果

旨在筛选出能够高效降解黄曲霉毒素B1 (AFB1)的菌株,并对其脱毒活性组分的脱毒效果进行研究,本研究以香豆素为唯一碳源对目标细菌进行初筛,以对AFB1的降解率为指标进行复筛,并从形态学、生理生化试验和16S rDNA序列分析对筛选菌株进行鉴定;通过测定该菌株不同发酵组分对AFB1的降解率,来定位其脱毒活性组分,同时采...     

布拉迪酵母菌的生物学功能、作用机制及其应用

布拉迪酵母是酿酒酵母的亚种,具有耐高温和耐胆盐的特性,通过改变病原菌的表面减少肠道致病菌。其分泌物能提高动物体内的酶活,从而促进营养物质的消化吸收;还能通过干扰促炎因子来提高机体抗炎作用。布拉迪酵母临床上可用于防治抗生素相关性腹泻、艰难梭菌感染、旅行者腹泻、肠易激综合征、克罗恩病等疾病。此外,布拉迪酵母作为一种饲料添加剂通过了欧洲、北美等认证。在畜禽应用中,布拉迪酵母可降低畜禽料重比、改善生产性能、降低腹泻,同时可以通过促进肠道有益菌的增殖,产生乳酸降低肠道致病菌的含量、调节肠道菌群平衡,促进机体免疫因子的释放和免疫器官的发育,进而增强机体免疫力。作者针对布拉迪酵母生物学功能及其作用机制、在畜禽养殖及人临床上的应用进行综述,以期为其进一步的研究和广泛应用提供参考。     

布拉酵母菌海藻糖提取方法的比较研究

本试验对布拉酵母菌海藻糖提取方法做了初步研究,通过3种提取剂,采用单一及复合处理方法,摸索出布拉酵母菌海藻糖提取的最佳方法是以5%的三氯乙酸做提取剂,超声破碎10 min后100℃水浴30 min。提取后用5%盐酸水解提取液,然后用生物传感器测定葡萄糖含量,计算海藻糖含量。     

AFB1降解剂对肉鸡生长性能、养分代谢及AFB1在体内残留的影响

通过在含有黄曲霉毒素B₁（aflatoxin B₁,AFB₁）的肉鸡日粮中添加AFB₁降解剂,测定其对肉鸡生长性能、养分代谢及AFB₁在血液、肝脏及肌肉中残留的影响。试验选择42日龄健康AA肉鸡75只随机分为5组,每组设5个重复。A组为对照组,饲喂基础日粮,B、C、D和E组在基础日粮中分别添加400、200、400和800 μg/kg AFB₁。B组为负对照组,C、D和E组分别添加0.15% AFB₁降解剂,试验期为30 d。试验结束时,测定肉鸡的生长性能、营养物质代谢率、体内AFB₁含量及抗氧化酶活性。结果表明：与AFB₁含量相同的B组相比,D组的平均日采食量和末重分别提高了32.45%、42.46%（P < 0.05）;与B组相比,其余各组的有机物、粗蛋白质、钙和磷的代谢率均有显著提高（P < 0.05）,D组的有机物和粗蛋白质消化率分别提高了9.50%和178.75%（P < 0.05）。血液、组织中AFB₁的测定结果表明,停喂AFB₁前,C组肝脏中AFB₁含量显著低于B组（P < 0.05）,停喂AFB₁24 h后,A和C组胸肌中AFB₁含量显著低于B、D和E组（P < 0.05）,停喂AFB₁48 h后,C、D组胸肌中AFB₁含量恢复到与对照组相同的水平。与B组相比,添加0.15% AFB₁降解剂的C、D和E组,血清和肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶和超氧化物歧化酶活力显著提高（P < 0.05）。由此可见,在含有AFB₁的日粮中添加AFB₁降解剂,可缓解AFB₁对生长的抑制,提高养分消化率,加速AFB₁在肉鸡体内的代谢,减少AFB₁对机体的损伤。     

不同吸附剂对黄曲霉毒素B_1吸附效果的研究

作者通过体外试验和动物饲养试验,研究3种吸附剂对黄曲霉毒素B1(AFB1)的吸附效果.3种吸附剂分别是吸附剂A(主成分为酵母培养物提取物)、吸附剂B(主成分为水合铝硅酸盐)、吸附剂C(为复合物,主成分为酵母培养物及水合铝硅酸盐).体外试验研究pH为2.0、6.0、8.0的磷酸盐缓冲液(PBS溶液)、人工胃液和肠液环境下3种吸附剂对AFB1的吸附能力,比较pH 8.0条件下3种吸附剂对AFB1的结合速率.结果表明,各种条件下吸附剂B的吸附能力最强.pH 8.0条件下,吸附剂B在10 min内对AFB1吸附率达到97.69%,且60 min内吸附率一直处在96.03%以上.吸附剂A和吸附剂C对AF BI的作用效果较吸附剂B弱.动物饲养试验选择240只1日龄健康雄性AA肉仔鸡,随机分为8个处理,每个处理3个重复,每个重复10只鸡,饲养周期21 d.结果表明,与基础组相比较,AFB1组(污染水平为98.8 μg/kg)肉仔鸡生长性能和肝脏功能发生显著变化,吸附剂A、B、C均能不同程度地缓解AFB1对肉仔鸡生长性能和肝脏损伤方面的毒性作用,与吸附剂A、C相比,吸附剂B能更有效的防止肉仔鸡黄曲霉毒素B1中毒.结果提示,使用吸附剂B能很好的降低AFB1对肉仔鸡的危害程度.     

布拉酵母菌对肠道菌群紊乱的调整作用研究

为了探讨布拉酵母菌对肠道菌群紊乱的调整作用,作者用盐酸林可霉素给小鼠灌胃,造成肠道菌群失调,然后采用不同剂量的布拉酵母菌冻干粉进行调整,结果表明,布拉酵母菌对肠道菌群紊乱有调整作用,且中、低剂量（1~5亿/g）比高剂量（10亿/g）作用效果好。     

降解AFB1的枯草芽孢杆菌S1分离与鉴定

【目的】筛选出能够高效降解黄曲霉毒素（aflatoxin,AF）的菌株,并对其降解活性及残留毒性进行检测,以期为黄曲霉毒素B₁（alflatoxin B₁,AFB₁）污染防治提供参考。【方法】采集耗牛、绵羊等草食性动物粪便和养殖场霉变饲料,以AFB₁的结构类似物香豆素为唯一碳源筛选降解AFB₁效率最高的菌株,并对其进行形态学、生理生化和16S rDNA鉴定。取AFB₁与适量筛选菌株的发酵液混合,使AFB₁的浓度为1 μg/mL,37℃、150 r/min培养,测定培养不同时间AFB₁降解率;应用差速离心法分别制取上清液、菌悬液和菌体,将菌体超声裂解后制得胞内液,测定不同组分对AFB₁的降解率;对上清液分别进行蛋白酶K、蛋白酶K+SDS和热处理,检测处理后上清液AFB₁降解率;分别用不同浓度的饱和硫酸铵沉淀处理上清液,检测AFB₁降解率;应用7 ku透析袋对上清液进行浓缩,检测AFB₁降解率,从而判断菌株活性成分的性质和分布。将鸡肝细胞分为AFB₁组、AFB₁-菌株组、菌株组和空白对照组,用实时荧光定量PCR检测各组鸡肝细胞中白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosisi factor alpha,TNF-α）和Bcl-2-associated X蛋白（Bax）基因的相对表达量。【结果】经初筛和复筛,从编号为S₁的绵羊粪便样品中分离出1株菌株,其降解AFB₁的活性最高,降解率可达60.36%。菌株S₁在LB固体培养基上培养12 h,可观察到淡黄色不透明菌落,表面光滑,有隆起,镜检革兰氏染色呈阳性,杆状。16S rDNA基因进行PCR扩增并进一步测序分析,其序列与LC55966.1的同源性为100%。综合16 S rDNA序列分析和生理生化结果鉴定该菌为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。该菌发酵液与AFB₁（1 μg/mL）反应4、12、24、48和72 h,降解率分别达到10.98%、25.36%、46.24%和52.65%和80.84%。上清液AFB₁降解率显著高于菌悬液和胞内液（P<0.05）。热处理后,上清液的AFB₁降解活性降低,而经蛋白酶K和SDS处理后降解活性基本丧失。用不同浓度饱和硫酸铵处理的上清液AFB₁降解率差异不显著（P>0.05）,而经透析浓缩后的上清液AFB₁降解率显著高于硫酸铵处理的上清液沉淀蛋白（P<0.05）。在鸡胚胎肝脏原代细胞上,与AFB₁组相比,AFB₁经枯草芽孢杆菌S₁降解后诱导IL-6、TNF-α以及Bax的表达量均显著降低（P<0.05）。【结论】筛选到1株枯草芽孢杆菌S₁,其具有较高的降解AFB₁的活性,其降解活性主要来自于培养液上清中的蛋白质;AFB₁经降解后其毒素显著降低。     

不同氨化处理黄曲霉毒素B_1脱毒效果及其对奶牛瘤胃体外发酵的影响

试验旨在研究不同氨化处理对黄曲霉毒素B_1(AFB_1)的脱毒效果及其对奶牛瘤胃体外发酵的影响。本研究分为两个试验。试验一:对人工感染2 550μg/kg AFB_1的玉米和大米混合物(1∶3)进行氨化处理,分为对照组(Ⅰ组,未处理)和试验组Ⅱ(0.1Mpa,1h)、Ⅲ(0.1 Mpa,2h)、Ⅳ(0.1 Mpa,3h)、Ⅴ(0.2 Mpa,1h)、Ⅵ(0.2 Mpa,2h)、Ⅶ(0.2Mpa,3h)、Ⅷ(0.3Mpa,1h)、Ⅸ(0.3Mpa,2h)、Ⅹ(0.3Mpa,3h)组,每组3个重复,测定不同氨化处理的AFB_1的脱毒效果及混合物的营养成分。试验二:研究氨化处理AFB_1对奶牛体外发酵指标的影响。试验设对照组(Ⅰ组,未处理)和试验组Ⅱ(0.3Mpa,1h)、Ⅲ(0.3Mpa,2h)、Ⅳ(0.3Mpa,3h)组,每组3个重复,测定体外发酵2、4、8、12、24和48h的产气量、发酵液pH、体外干物质降解率(IVDMD)、氨态氮(NH3-N)和挥发性脂肪酸(VFA)。结果显示:在试验一中,试验组粗蛋白质(CP)含量均显著高于对照组(P<0.05);Ⅹ组(0.3 Mpa,3h)AFB_1含量显著低于其他组(除Ⅶ组外)(P<0.05)。在试验二中,Ⅳ组(0.3 Mpa,3h)发酵液pH显著低于对照组(P<0.05),体外发酵产气量、挥发性脂肪酸、氨态氮含量和体外干物质降解率(除48h外)均显著高于对照组(P<0.05),而Ⅱ(0.3Mpa,1h)和Ⅲ组(0.3Mpa,2h)组效果不明显。综上所述,氨化处理能够显著降低样品中AFB_1含量,提高CP含量,改善瘤胃发酵,其中0.3Mpa、3h处理效果最佳。     

Oral administration of Saccharomyces boulardii alters duodenal morphology,enzymatic activity and cytokine production response in broiler chickens

The present study evaluated the effects of Saccharomyces boulardii on duodenal digestive enzymes, morphology and cytokine induction response in broiler chicken. A total of 200 birds were allotted into two groups (n = 100) and each group divided into five replications (n = 20). The control group was fed basal diet in addition to antibiotic (virginiamycin 20 mg/kg), and treatment group received (1 × 10⁸ colony‐forming units/kg feed) S. boulardii in addition to basal diet lasting for 72 days. The results compared to control group revealed that adenosine triphosphatase, gamma glutamyl transpeptidase, lipase and trypsin activities were higher, while, no significant improvement was observed in amylase activities in the duodenum of the treatment group. Moreover, morphological findings showed that villus height, width and number of goblet cells markedly increased. Additionally, transmission electron microscopy visualized that villus height, width and structural condensation significantly increased in the treatment group. The immunohistological observations showed increased numbers of immunoglobulin A (IgA)‐positive cells in the duodenum of the treatment group. Meanwhile, cytokine production levels of tumor necrosis factor‐α, interleukin (IL)‐10, transforming growth factor‐β and secretory IgA markedly increased, and IL‐6 statistically remained unchanged as compared to the control group. These findings illustrated that initial contact of S. boulardii to the duodenum has significant impact in improving enzymatic activity, intestinal morphology and cytokine response in broiler chicken.     

棉籽粕化学脱除棉酚的试验研究

本试验旨在探讨棉籽粕化学脱毒的最佳方法。试验1,通过研究不同水分、温度和作用时间对棉酚脱毒率的影响,确定棉籽粕的脱毒作用最佳水热条件。结果发现,在60~100℃、水分8%~16%和时间20 min~8 h条件范围内,随着温度、水分添加量、作用时间增加,棉籽粕脱毒率越高。试验2,比较10种常见单一化学脱毒剂的脱毒效果。研究发现,硫酸亚铁(Fe SO_4)、硫酸铜(Cu SO_4)和双氧水(H_2O_2)脱毒效果较佳,脱毒率均达到40%以上,然而,Fe SO_4脱毒棉籽粕颜色发黑并带有铁锈味,故Cu SO_4和H_2O_2为较优的单一棉酚脱毒剂。试验3,将Cu SO_4和H_2O_2制成混合脱毒剂,研究其最佳反应条件,并验证其脱毒效果。结果发现,80℃、16%脱毒剂添加量和烘1 h为最佳脱毒条件,且此混合脱毒剂的游离棉酚和结合棉酚的脱毒率均在84%以上;虽然脱毒后脱毒棉籽粕粗蛋白质含量稍微降低(P0.05),但粗蛋白质消化率显著提高(P0.05)。因此,水分、温度、作用时间都是影响棉籽粕化学脱毒的重要因素,在控制好这3个条件的情况下(80℃、16%脱毒剂添加量和密闭烘1 h时间),选用H_2O_2、Cu SO_4配制成一种混合脱毒剂,能有效脱除棉籽粕棉酚并且提高棉籽粕粗蛋白质消化率和仿生消化能,为棉籽粕脱毒加工提供良好的理论和技术支持。