番茄子叶再生体系的建立

以番茄栽培品种甲农年丰为实验材料,以10 d的无菌苗子叶为外植体,通过对不同激素、不同浓度等培养条件的研究,建立了一套优化的适于番茄遗传转化的组织培养与再生体系,总结了诱导番茄再生体系的有效方法及其注意事项。     

甜瓜自交系离体子叶节再生体系的建立

以4个不同甜瓜自交系为试材,研究基因型,激素(6-BA、IAA)组合、浓度对甜瓜离体子叶节再生的影响。结果表明:不同基因型甜瓜之间的再生频率差异较大,CM-15甜瓜自交系为最佳基因型,在培养基M8(MS+1.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA)上再生频率最高,达96.7%,平均每个外植体再生芽数为4;6-BA是甜瓜子叶节再生的必要激素,而IAA是促进子叶节高效再生的激素;MS培养基中添加0.05 mg/L 6-BA能显著促进再生不定芽的伸长。     

大豆子叶节离体再生体系优化研究

为获得大豆子叶节高效离体再生体系的优化方案,选用5个大豆品种的子叶节作为外植体,研究了种子萌发天数、外植体大小、不同激素浓度对大豆子叶节再生的影响。结果显示,大豆苗龄以5—7d最佳;外植体以保留全部子叶为宜;外植体的萌发和诱导均存在基因型差异,292黄豆的最佳萌发培养基为1／2MS＋1mg／L6-BA,而鄂8157、湘春豆18号、湘春豆13号、湘春豆15号的最佳萌发培养基为1／2MS＋2mg／L6-BA,292黄豆、鄂8157、湘春豆18号、湘春豆13号、湘春豆15号的最佳诱导培养擎组合分另0为MS＋2mg／L6-BA、MS＋2mg／L6-BA、MS＋1mg／L6-BA、1／2MS＋2mg／L6一BA＋0．05mg／LIBA,MS＋2Ing／L6—1;^、丛生芽诱导率分别为60％、62．5％、81．25％、77．27％和47．5％;子叶节丛生芽生根时IBA浓度以2mg／L为宜。     

江蔬1号番茄子叶离体再生体系的建立

以番茄品种江蔬1号和金陵之星101F1为试材,MS为基本培养基,研究70%酒精和20%次氯酸钠溶液不同时间处理对种子表面的消毒效果和对种子萌发的影响,并研究不同基因型、不同植物生长调节物质及浓度对番茄子叶再生的影响。结果表明,70%酒精处理50 s后,再用20%次氯酸钠溶液浸泡30 min,江蔬1号和金陵之星101F1种子萌芽率分别为98%、63.2%,而污染率分别为0、2.2%;不同的番茄品种在相同的培养基上愈伤组织诱导率和不定芽的分化率存在着显著差异,江蔬1号优于金陵之星101F1。适于江蔬1号子叶再生的培养基为MS ZT0.5 mg/L IAA0.3 mg/L,再生频率可达49.14%;适宜的生根培养基为MS NAA 0.5 mg/L,生根率为100%。     

油葵叶片离体再生体系的建立

以油葵自交种7B7的无菌苗子叶为诱导不定芽材料,MS培养基为基本培养基,研究油葵子叶组织培养有关影响因子.比较了不同培养基成分、不同碳源、不同附加物对不定芽分化的影响,确定出油葵自交种子叶离体诱导再生芽的最佳培养基:改良MS(MS大量、微量、铁盐、B5有机)+0.5; KNO3+0.05; CH+0.01; 肌醇+3; 葡萄糖+4 mg/L 6-BAP+6～9 mg/L AgNO3+2.6 g/L Phytagel,建立了油葵相对高效的再生体系.为油葵基因转化的研究奠定了基础.     

荞麦子叶节再生体系的建立

实验以荞麦子叶节为研究对象,摸索其再生所需的最适条件,建立荞麦的再生体系,为荞麦的转基因研究奠定基础.实验结果表明：种子萌发条件为去掉外种皮的种子用0.1％升汞灭菌1min,30g/L蔗糖＋7.5g/L琼脂粉的固体培养基培养.子叶节诱导生芽最适培养基为MS＋2.5mg/L6-BA＋0.05mg/LNAA＋30g/L蔗糖＋7.5g/L琼脂粉,芽诱导生根的培养基为1/4MS ＋6-BA （2.0mg/L） ＋NAA （0.05mg/L） ＋30g/L蔗糖＋7.5g/L琼脂粉.     

番茄品种“红吉星“子叶离体再生体系建立研究

本文以番茄品种"红吉星"子叶为对象,进行了离体培养再生体系建立研究.结果表明,番茄子叶离体培养过程中,影响不定芽发生的因素主要有培养基中细胞分裂素种类与浓度、培养基维生素组分、实生苗苗龄、暗培养时间等.试验结果表明番茄品种"红吉星"子叶不定芽发生率达95%以上的条件是实生苗苗龄10-25天,BA浓度1.0mg/L附加IAA0.2mg/L,子叶暗培养10-13天.卡那霉素抗性水平为75mg/L,300mg/L以下的头孢霉素加入量对子叶分化无不良影响.     

加工番茄离体再生体系的建立

以加工番茄B04子叶盘和下胚轴切段为外植体,研究了不同种类和浓度的细胞分裂素(ZT、6-BA和KT)和生长素(IAAI、BA和NAA)组合及附加物AgNO3对外植体不定芽诱导的影响。结果表明,细胞分裂素ZT的不定芽诱导效果明显优于6-BA和KT,KT诱导效果最差;生长素IAA的不定芽诱导效果优于IBA和NAA;在不同的激素组合中,不定芽诱导率最高的培养基为MS 2.0 mg/L ZT 0.2 mg/L IAA。再生芽在MS 0.1mg/L IAA生根培养基上能正常生根,并发育成完整的小植株。     

黄瓜子叶节离体再生体系的研究

以6个品系的欧洲温室型全雌系黄瓜子叶节为材料,比较了不同激素组合,苗龄,切割方式和基因型,从而建立了简单快速高效的黄瓜离体再生体系。结果表明:在MS+BA1.5mg·L-1+IAA0.2mg·L-1上启动培养3d为最佳芽启动培养方式,再转入最佳芽诱导培养基MS+TDZ0.02mg·L-1。10d苗龄的子叶节出芽率最高,保留两片子叶各切除1/3为最佳切割处理方式,六种基因型均能生芽,且每外植体出芽数均较高达1.93～3.15。整个过程从种子萌发到驯化移栽,仅需8周。     

不结球白菜苏州青子叶离体分化

以不结球白菜品种苏州青的子叶为外植体 ,研究了苗龄、培养基、生长调节剂与硝酸银浓度等因子对其不定芽分化频率的影响。结果表明 ,在MN +TDZ (2mg·L-1) +NAA (0 5mg·L-1)条件下 ,苏州青的子叶分化率最高 ,达36 7% ;最佳苗龄为 7d ;硝酸银的最佳质量浓度为 7 5mg·L-1。     

结球白菜高效离体子叶不定芽再生的研究

以 2个日本优质结球白菜爱知结球白菜 (C1 ) 和新理想白菜 (C2 ) 的子叶为外植体, 研究了不同激素配比、AgNO3浓度和苗龄对不定芽再生的影响。结果表明, 与 6 BA相比, TDZ对子叶不定芽再生的效果更好。在MS 0 5mg·L-1 NAA 1mg·L-1 TDZ培养基中, 2个品种的子叶不定芽再生率分别达到 75 0%和 55 0%。在此基础上, 添加 5mg·L-1 AgNO3 时, C1 和C2 子叶不定芽再生率分别达到 96 7%和 80 0%, 并以 5~8d为子叶不定芽再生的最佳苗龄。     

不结球白菜BcGAPDH的生物信息学分析

采用生物信息学方法对克隆测序的不结球白菜(Brassica campestris ssp.chinensis)Bc GAPDH(3-磷酸甘油醛脱氢酶)蛋白质的理化性质、跨膜区、亲水性、亚细胞定位、所含模体及蛋白质结构进行了预测。理化性质分析表明,该酶含有328个氨基酸,相对分子量为35 161.2,p I值为9.03。TMpred跨膜分析表明,该酶没有跨膜螺旋区,这与Prot Scale预测的该酶为亲水性蛋白质相吻合。用Target P server程序预测该酶定位于线粒体上,结构域分析表明该酶含有多种磷酸化位点,二级结构以α-螺旋和随机卷曲为主。借助SWISS-MODEL软件对该酶进行了三维同源建模。     

镉对小白菜光合作用特性影响的研究

研究表明,微量镉(Cd)(0.01、0.1 mg/L)促进小白菜(Brassica campestris ssp.chinensis)生长,对苏州青的促进作用更明显;高浓度Cd显著抑制地上部生长,对根系生长影响相对较小.Cd降低小白菜叶绿素含量,特别是苏州青降低幅度较大.低浓度Cd对小白菜净光合速率Pn影响不大,高浓度Cd可能是由于非气孔限制而引起Pn降低.Cd降低气孔导度,但高浓度Cd增加胞间CO2浓度.叶绿素荧光测定表明,Cd对小白菜叶片光化学效率Fv/Fm影响不大,而高浓度Cd明显降低光合电子传递量子效率ΦPSⅡ、光化学淬灭系数qP和电子传递速率ETR.Cd增加沪青一号非光化学淬灭系数qNP,而苏州青在高Cd浓度下qNP下降.     

白菜核雄性不育两用系AFLP扩增特异片段的克隆及序列分析

利用AFLP技术从白菜核不育两用系"矮脚黄"可育系DNA中得到一个特异扩增片段MF-14.Southern杂交结果证实不育系也存在该片段的同源序列;回收该特异扩增片段并将其克隆到pGEM-T Easy载体进行序列测定.测序结果表明,该片段全长289 bp,其碱基组成为A+T=46.02% .与白菜RAPD特异片段S107及其他育性相关基因核苷酸序列比较,同源性均低于50% .表明该片段为一新的序列.     

不结球白菜BrCBF基因cDNA全序列克隆及结构特征分析

运用RT-PCR和RACE技术从不结球白菜中克隆到1个抗寒相关基因,命名为BrCBF,基因登陆号为DQ402470.其cDNA全长1 003 bp,含有648 bp的完整开放阅读框,编码216个氨基酸,该基因编码的蛋白序列与拟南芥、荠菜、甘蓝型油菜编码的氨基酸序列有极高的同源性,且具有CBF典型的保守结构域AP2.     

减氮施肥对白菜薹生长及氮素吸收的影响

摘要：针对深圳地区叶菜类蔬菜存在施氮量过多、氮肥利用效率过低的问题,基于测土配方施肥的前提下,设置3个施氮水平分别为不施氮肥处理、70%氮肥处理（纯N：105 kg/hm2）、100%氮肥处理（纯N：150 kg/hm2）,磷肥和钾肥均按统一标准施用,试验在深圳市农业科技促进中心试验示范场进行, 研究减氮施肥对“雄心一号”白菜薹的生长和氮素吸收的影响。结果表明：与100%氮肥处理相比,减氮30%对白菜薹的生物量、株高、薹长、薹粗均无显著差异;适当的减氮施肥不但可以提高氮肥农学利用效率、氮肥偏生产力、氮肥利用率,而且有利于农户增收,提高肥料的产投比。     

不结球白菜离体培养再生体系的优化

为了筛选较易再生的不结球白菜品种,为转基因工作建立良好的再生体系,以暑绿、苏州青、亮白叶和矮抗5号为材料,研究了基因型、外植体类型以及不同的激素配比对再生频率的影响.结果表明不同品种中,暑绿的再生频率最高.不同外植体类型中,子叶-子叶柄再生频率最高.种子发芽培养基中添加苯基噻二唑基脲(TDZ)使幼苗生长健壮,利于外植体分化,不定芽分化率均在60.00%以上,子叶-子叶柄在培养基MN 0.5 mg·L-1 TDZ 0.5 mg·L-1 NAA 7.5 mg·L-1 AgNO3中再生频率最高,达到80.00%,表明TDZ在诱导器官的发生中有较强的持续效应.     

农杆菌介导的薹菜遗传转化体系研究

以薹菜子叶-子叶柄为外植体,研究了根癌农杆菌介导的遗传转化技术。用含GUS和NPTⅡ基因的农杆菌侵染子叶-子叶柄,获得了具有卡那霉素抗性的再生植株。再生植株经GUS组织染色,证实外源基因转化到植物基因组中。卡那霉素敏感性测定结果表明,当培养基中含卡那霉素（Km）15 mg/L时,非转化再生植株全部白化。转基因抗性芽筛选的适宜的卡那霉素浓度为10 mg/L。     

不结球白菜抗根肿病遗传规律和分子标记

[目的]探讨不结球白菜根肿病抗性的遗传规律。[方法]该研究利用引进的结球白菜与不结球白菜进行杂交,以双亲、F1、F2和BC14个世代联合群体为试材,采用苗期接种鉴定法进行抗性鉴定,并进行 ISSR分子标记筛选。[结果]不结球白菜根肿病抗性受1对显性基因控制。利用ISSR分子标记结合 BSA法获得了与不结球白菜根肿病抗性连锁的分子标记,命名为CR-873。该标记与抗性基因间的连锁遗传距离为9.72 cM。[结论]研究结果可为不结球白菜分子标记辅助育种奠定基础。