采收期对宝兴县华重楼皂苷含量的影响

[目的]通过对华重楼不同生长发育期有效成分(重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ)含量的研究,为华重楼适宜采收期的确定提供试验依据。[方法]采用高效液相色谱法。[结果]不同生长期华重楼中4种皂苷总含量发生明显变化。从不同月份采集看,4—9月重楼皂苷含量呈升高趋势,8—9月含量最高,10月后开始下降。不同生长年份看,前期华重楼皂苷积累较慢,第5~6年重楼皂苷达到最高,之后有下降趋势。[结论]明确了华重楼重楼皂苷含量高的最佳采收期,即一年中8—9月是最佳采收期,以生长年限第5~6年采收最佳。     

大理重楼和独龙重楼的野生资源分布和皂苷类成分评价

评价大理重楼和独龙重楼的野生资源分布情况和皂苷类成分.采用实地调研考察,并根据《中国药典》2015年版重楼项下3种重楼皂苷,增加重楼皂苷Ⅰ、纤细薯蓣皂苷、重楼皂苷H为指标,以课题组已经建立的ELSD-UPLC法测定大理重楼和独龙重楼中6种皂苷成分含量.结果表明:1)大理重楼除模式产地云南大理,在保山市腾冲市和贵州赫章县也发现了大理重楼的新分布,野生资源蕴藏量较少;独龙重楼只发现分布在云南省怒江州贡山县独龙江乡,野生资源蕴藏量更少; 2)二者尚未被《中国药典》2015年版收载或者各省级药材标准中,但是其根茎在云南、贵州等各地民间也作为重楼药材使用; 3) 10批大理重楼根茎皂苷类成分总含量平均值高于药典规定标准1倍多,主要含有重楼皂苷Ⅶ和重楼皂苷H; 4)在仅采集到的7批独龙重楼皂苷类成分总含量平均值达到药典规定标准,主要含有重楼皂苷Ⅰ和纤细偏诺皂苷,得出大理重楼和独龙重楼资源均稀少结论,建议高度重视开展人工繁育与资源保护工作;大理重楼根茎主要成分为偏诺皂苷("宫血宁"有效成分),独龙重楼根茎主要成分为薯蓣皂苷("抗病毒颗粒"消炎、抗菌、抗病毒有效成分),可为大理重楼和独龙重楼的省级药材标准建立和临床用药新药资源开发提供参考依据.     

南重楼中4种重楼皂苷超声提取工艺

[目的]优化南重楼中4种重楼皂苷提取的最佳工艺。[方法]采用L9(34)正交试验,对提取溶剂的单次料液比、单次提取时间、初始提取温度、提取次数4因素进行优化考察,HPLC法测定4种重楼皂苷含量并作为考察指标。[结果]最佳提取工艺单次料液比为15倍的甲醇,每次提取20 min,初始提取温度为40℃,提取次数为3次。[结论]该提取工艺操作简单、合理、可行、重复性好、稳定可靠,可用于南重楼中4种重楼皂苷的提取。     

HPLC测定不同生长年限滇重楼中薯蓣皂苷元含量

[目的]探讨滇重楼（RHIZOMA POLYGONATI）中薯蓣皂苷元的含量与生长年限的关系,为确定其最佳采收年限提供参考依据。[方法]采用HPLC测定不同生长年限滇重楼中薯蓣皂苷元的含量。色谱柱为Agilent zorbax SB-C18柱（4.6mm×150.0mm,5μm）,流动相为乙腈-水（90∶10,V/V）,流速为1.0 ml/min,检测波长为203 nm,柱温为35℃。[结果]不同生长年限的滇重楼中薯蓣皂苷元含量明显不同。其中,3、4年生滇重楼中薯蓣皂苷元含量较低;5、6年生滇重楼中薯蓣皂苷元含量明显升高,但6年生的含量略低于5年生;7年生滇重楼中薯蓣皂苷元含量骤升,且升幅最大。[结论]不同生长年限滇重楼中薯蓣皂苷元的含量不同,在实际应用时应根据不同需要适时采收。     

恩施地区三种重楼属植物活性成分与抗氧化活性研究

对比分析恩施地区3种重楼5年生七叶一枝花[Paris polyphylla Smith var. chinensis（Franch）.Hara]、啟良重楼（Paris qiliangiana H.Li,J.Yang&Y.H.Wang）、黑籽重楼（Paris thibetica Franch.）中重楼皂苷Ⅱ活性成分含量,建立气相色谱法（GC）检测方法,检测3种重楼提取物DPPH自由基清除活性,研究其抗氧化能力。乙酸乙酯提取重楼皂苷Ⅱ,采用FID检测器,升温程序为0～3 min,60℃,3℃/min升至280℃,保持20 min;进样口温度310℃;载气为氮气（99.999%）;流速为1.0 mL/min;进样量为5μL,不分流。结果表明,GC检测得到重楼皂苷Ⅱ标准品的标准曲线为Y=0.845X+72.18,在浓度512.5～16 400.0 ng/μL范围内线性良好,R2>0.999 5。方法检出限为40.5 ng/μL,定量限为130.6 ng/μL。加标回收率为96.93%～98.33%,RSD为2.72%。GC检测发现七叶一枝花中重楼皂苷Ⅱ含量为0.104 mg/g,...     

滇重楼皂苷部位HPLC指纹图谱的研究

[目的]建立滇重楼皂苷有效部位HPLC指纹图谱分析方法,研究不同产地滇重楼药材的质量。[方法]采用HPLC等度洗脱的方法进行色谱分离,使用“相似度评价软件”进行数据处理,对不同产地的滇重楼药材皂苷部位进行指纹图谱的研究。[结果]确立了滇重楼药材皂苷部位指纹图谱的高效液相分析条件,确定8个共有峰。不同产地的滇重楼药材皂苷部位指纹图谱有一定差异。[结论]采用HPLC法制定滇重楼药材皂苷部位的指纹图谱,其皂苷类成分得到较好的分离,方法重现性好,可用于滇重棱的质量评价。     

滇重楼须根的化学成分研究

为了研究滇重楼须根的化学成分,通过D101大孔树脂、硅胶柱层析、反相(Rp-18)、Sephadex LH-20和半制备HPLC等多种分离方法,对滇重楼(Paris Polyphylla var.yunnanensis)干燥须根的乙醇提取物进行化学成分研究,从中分离得到2个甾体皂苷。根据现代波谱学(NMR)和质谱(MS)技术,2个甾体皂苷的结构分别鉴定为是重楼皂苷Ⅱ(1)、重楼皂苷Ⅶ(2),这2个化合物均为已知化合物。     

长药隔重楼分离化合物抗肿瘤活性研究

[目的]研究中药重楼分离化合物的抗肿瘤活性。[方法]采用提取及萃取过程制备长药隔重楼分离化合物,选取昆明种小白鼠为动物模型,通过体外作用,测定其对小鼠黑色素瘤的抑制作用。[结果]从长药隔重楼中所提取出的7种甾体皂苷类成分,均表现出较强的癌细胞抑制活性。[结论]中药重楼分离化合物是一种安全有效的抗肿瘤活性物质。     

黔产重楼的品质评价

为有效控制贵州产重楼的品质,促进重楼资源的有效保护和进一步合理开发利用奠定基础,采用高效液相色谱及微波消解-ICP-MS法对贵州产重楼的品质进行研究.结果表明:贵州产重楼中β-蜕皮激素、芦丁鉴别特征明显专属性强;6种重楼皂苷的标准曲线线性良好(r＞0.999 9),回收率均在99.73％～100.08％,RSD＜1.0％;未检测出有害重金属汞、镉,且铅、砷低于5‰.结论:该方法准确、可靠,可用于黔产重楼的质量控制;贵州产重楼的各项指标均符合《中国药典》中重楼的质量标准,有优良药理作用,可以进行更多的种植和开发.     

滇重楼内生真菌的分离及其对滇重楼种子胚发育的效应(英文)

[目的]本研究旨在分离滇重楼的内生真菌并探究其对内生真菌胚发育的效应。[方法]分离滇重楼的内生真菌并进行形态学鉴定,并用石蜡切片和显微照相术研究内生真菌并探究其对滇重楼种子胚发育的效应。[结果]从滇重楼根状茎中分离到9种属于3目、5科、7属的内生真菌,即PPYEF-1,PPYEF-2,PPYEF-3,PPYEF-4,PPYEF-5,PPYEF-6,PPYEF-7,PPYEF-8和PPYEF-9。除了PPYEF-4(枝孢霉属)外,其他真菌都能促进滇重楼种子的胚发育,大多数达到极显著或显著水平;PPYEF-9(木霉属)能导致滇重楼种子发育的最长胚长和最高胚率。[结论]本文可为滇重楼内生真菌在打破滇重楼种子休眠中的应用提供参考。     

福建七叶一枝花组织培养及主效成分测定

本研究以福建七叶一枝花的小苗、根、带柄叶为外植体,采用组织培养和HPLC法,开展组织培养及主效成分测定研究。结果表明:(1)不同外植体类型,通过诱导培养基1/2MS+6-BA 2.0 mg•L^-1+2,4-D 1.0 mg•L^-1,均能成功诱导出愈伤或丛生芽,但不同外植体类型诱导率差异明显。以小苗诱导率显著最高,为58.33%;(2)不同增殖途径对组培的影响很大,愈伤组织途径的绝对生长速率、相对生长速率、增殖率均显著高于丛生芽途径;(3)福建七叶一枝花组培过程中,产生的根、块茎、愈伤组织均含有重楼皂苷成分,根部的总皂苷含量达0.342%,愈伤组织达0.339%,块茎的总皂苷含量最高,达0.497%。3个部位的4种皂苷成分中,以重楼皂苷Ⅶ占绝对优势,其余3种皂苷含量极低或未检出。通过对福建七叶一枝花组织培养及皂苷含量测定,初步建立了福建七叶一枝花组织培养体系,证实了通过组织培养获得次生代谢物的可行性,为生产福建七叶一枝花组培苗和次生代谢产物奠定了基础。     

正交试验优化滇重楼核苷提取工艺

[目的]优化滇重楼核苷的提取工艺条件,为滇重楼资源的开发和利用提供技术支持.[方法]以滇重楼根茎为试验材料,6种核苷类物质(胞苷、尿苷、鸟苷、胸苷、腺苷和2'-脱氧腺苷)总提取量为考察指标,采用高效液相色谱法测定其提取量,先分析超声波提取法和热水浸提法对滇重楼核苷提取效果的影响,然后在单因素试验的基础上,以甲醇体积分数、料液比、提取时间和提取次数为考察因素,采用L9(34)正交试验对滇重楼核苷类物质提取工艺进行优化,确定最佳工艺条件.[结果]超声波提取法得到的滇重楼根茎中6种核苷类物质总提取量高于热水浸提法;4个因素对滇重楼核苷总提取量的影响排序为甲醇体积分数>提取时间>提取次数>料液比,最佳提取工艺条件为:以纯净水(甲醇体积分数为0)为提取溶剂,在料液比1:10(g/mL)、30℃条件下超声波提取60 min,提取2次,得到滇重楼根茎中胞苷、尿苷、鸟苷、胸苷、腺苷和2'-脱氧腺苷的总提取量为1.4216±0.0198 mg/g,高于理论值1.3434 mg/g.[结论]正交试验优化得到的滇重楼核苷超声波提取工艺操作简便、稳定可靠,较热水浸透法的提取效率高,适合用于滇重楼核苷的提取.     

不同生长年限长柱重楼根茎中主要次生代谢产物的累积变化

为促进长柱重楼的合理采收和资源开发利用,采用紫外分光光度计测定长柱重楼中重楼总皂苷含量;同时采用HPLC法测定不同生长年限长柱重楼中重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的含量,色谱柱为AgilentC~(-1)8柱(4.6mm×250mm,5μm),检测波长203nm,柱温25℃,流动相为乙腈-水,流速0.9mL·min~(-1),进样量5μL;对所测数据进行主成分分析和相关性分析。结果表明:长柱重楼中主要次生代谢产物的累积量与生长年限呈非线性关系;主成分分析结果显示七年生的长柱重楼品质最佳;相关性分析结果表明总含量与重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷Ⅰ与重楼皂苷Ⅵ呈极显著正相关性。综上所述,不同生长年限长柱重楼中主要次生代谢产物的含量不同,其中重楼皂苷Ⅱ总体含量偏高,长柱重楼的采收期以七年生左右为佳。     

不同激素诱导对华重楼皂苷合成关键酶基因表达的影响

以华重楼的叶为实验材料，经不同外源激素诱导后，用UPLC测定延龄草苷、薯蓣次皂苷A、重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的含量，通过叶片RNA提取，并结合实时荧光定量PCR分析得到关键酶基因表达的规律。结果表明，7种不同的外源激素诱导后，重楼皂苷含量均有显著提高，得到茉莉酸甲酯(methyl jasmonate, MeJA)作为最适合促进叶片中甾体皂苷积累的植物激素，处理效果最佳；用不同浓度MeJA诱导不同时间后，测定CYP90B52、CYP72A616、CYP94D108、CYP94D109的相对表达量，均表现为随时间增长先上升后下降的趋势，且大部分在36 h达到峰值，72 h急速降低之后缓慢下降。CYP90B52基因的相对表达量是4个基因中最高的；可以通过喷洒MeJA增加叶片中甾体皂苷等有效成分的积累，实现华重楼资源的合理开发利用。     

滇重楼药材产品质量分级标准研究

测定不同类型的滇重楼[Paris polyphylla Smith var.Yunnanensis(Franch) Hand.-Mazz]药材产品根茎粗、根茎长、根茎鲜重、根茎干重和根茎有效成分(重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ)含量,使用SPSS和DPS统计分析软件,对所测数据进行K-均值聚类和灰色关联度分析.结果把滇重楼产品质量分成4个等级,并制定出了质量分级标准,具有生产实用性,可作为滇重楼产品质量控制标准.     

贵州省重楼属药用植物资源及分布状况调查

[目的]调查重楼属（Paris）药用植物在贵州省的分布情况,为贵州省合理开发利用该资源提供基础数据。[方法]进行标本查阅以及资料考证,并进行综合评价。[结果]基本弄清贵州重楼属药用植物资源共有9种9变种1变型,其中有2个变种为贵州特有。[结论]基本摸清了贵州省重楼属药用植物的资源状况。     

酿酒葡萄废弃物中白藜芦醇的提取及含量测定

[目的]充分开发利用酿酒葡萄废弃物中生物活性物质白藜芦醇.[方法]采用固相萃取法对酿酒葡萄废弃物(皮渣、籽)中的活性物质白藜芦醇进行提取及纯化,而后基于白藜芦醇对硫酸-甲醛-高锰酸钾体系化学发光的加强作用,采用流动注射化学发光分析法对其含量进行测定.[结果]酿酒葡萄废弃物中白藜芦醇浓度与化学发光强度在1.32×10-8～1.32×10-5 mol/L的范围内呈线性关系,计算方法的检测限为1.98×10-8mol/L,相对标准偏差RSD为3.5％.[结论]流动注射化学发光方法可用于酿酒葡萄的废弃物中白藜芦醇含量的测定,该方法简单、快速、灵敏.     

四川省具有子根茎重楼的资源调查及品质研究

[目的]摸清具有子根茎重楼在四川境内的适宜分布条件和品质情况,为子根茎重楼的进一步开发提供科学依据。[方法]采用走访调查并结合气象数据的方法、高相液相色谱法。[结果]具有子根茎重楼主要分布在四川省的彭州市和崇州市。[结论]具有子根茎的重楼具有开发价值。     

流动注射化学发光法检测卷烟主流烟气中的氮氧化物

[目的]探讨一种流动注射化学发光法间接测定卷烟主流烟气中氮氧化物（NOx）的方法。[方法]将NOx用氢氧化钠（NaOH）溶液吸收定量生成亚硝酸根（NO2-），在酸性条件下与过氧化氢（H2O2）反应，其产物与鲁米诺发生很强的化学发光反应，用流动注射化学发光分析仪根据化学发光强度测定卷烟主流烟气中的NO。含量。[结果]建立了一种新的卷烟主流烟气中的NOx鲁米诺一过氧化氢化学发光分析体系：H2O2浓度1．0×10^-3g/ml，硫酸浓度0．01mol／L，氢氧化钠浓度0．10mol／L溶液配制发光液，鲁米诺浓度为1．0×10^-3mol/L。方法的检出限为1．2×10^-5g/L，相对标准偏差〈3．00％。样品分析结果表明，烤烟型卷烟NOx含量普遍较混合型低，与烤烟型卷烟舍亚硝酸盐较低的规律比较吻合。[结论]流动注射化学发光法适用于卷烟主流烟气中的NOx的定量分析。     

中药材重楼研究进展

重楼为百合科重楼属(paris)植物的泛称,包括2个亚属,8个组,24个种类,主要分布在欧亚大陆的热带及温带地区,国内种类最多,有20种,其中15种为中国特有,其资源在全国大部分省区有分布。重楼作为稀有贵重药材,被广泛应用于民间。因具有显著的抗癌、止血等作用,故作为近年来研究的热点药材。笔者在查阅文献的基础上,对重楼的资源分布、化学成分、药理作用和临床用途、活性成分的提取分离、检测方法及质量控制等方面进行了文献综述。