沙冬青种子总黄酮对小鼠急性毒性作用研究

研究沙冬青种子总黄酮对小鼠的急性毒性作用,并测定沙冬青种子总黄酮单次给药的半数致死剂量(LD50)或最大耐受剂量(MTD).将70只体质量为(20±2)g的SPF级KM小鼠随机分成7组,雌雄各半,每组每只小鼠分别灌胃0.4mL的无菌生理盐水(对照组)及相同体积、不同浓度沙冬青种子总黄酮溶液,灌胃后7d内仔细观察小鼠的反应,观察并记录小鼠中毒症状和死亡数,利用改良寇氏法测定该总黄酮的LD50.试验结束后记录各组小鼠的体质量变化,进行病理剖检,同时每组随机取2只小鼠(雌雄各1只),分别采取心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏等进行病理组织学检查.结果表明:沙冬青种子总黄酮对小鼠的半数致死量LD50为2 004.47mg/kg,LD50的95%可信限为1 693.78～2 372.47mg/kg.死亡小鼠急性毒性主要表现为安静少动,即而出现走路不稳、腹卧昏睡、呼吸急促、连续性抽搐而死亡.说明小鼠在沙冬青种子总黄酮中毒后,心脏、肝脏、脾脏和肾脏等主要器官都受到一定程度的损害,但对小鼠的持续影响较小;沙冬青种子总黄酮毒性较低,符合低毒化合物标准(500～5 000mg/kg为低毒化合物).     

沙冬青种子总生物碱对小鼠急性毒性试验研究

用酸水法提取沙冬青种子总生物碱,采用小鼠口腔灌服的方法对该生物碱进行了急性毒性试验,利用改良寇氏法测定该生物碱的LD50.结果表明:沙冬青种子总生物碱对小鼠口服的LD50为588.71mg/kg,LD50的95%可信限为513.93～674.37mg/kg.剖检变化为心脏色泽暗淡,肝脏和肾脏肿大,其它脏器无眼观病变.组织学变化呈现心肌纤维肿胀,肌浆内出现大量红色细小颗粒,间质血管充血;肝细胞肿大,胞浆内出现大小不等、多少不一的空泡,部分肝细胞坏死崩解;脾小体萎缩,淋巴细胞减少;肺脏血管充血;肾小管上皮细胞肿胀变性,部分肾小管上皮细胞坏死崩解.沙冬青种子总生物碱为低毒化合物,小鼠在沙冬青种子总生物碱中毒后,心脏、肝脏、脾脏和肾脏等主要器官都受到一定程度的损害,但对小鼠的持续影响较小.     

赤霉素浸种对沙冬青种子萌发的影响

赤霉素是植物生长发育过程中一类重要的调节激素,在植物生长发育中起着重要作用。试验以沙冬青种子为材料,在培养箱内对种子进行发芽试验,研究外源赤霉素对种子发芽率、生理生化活性、种子浸提液的电导率等方面的影响变化差异。结果表明,在各处理中,最佳浸种浓度为200mg/L。经过赤霉素浸种催芽后,种子发芽率和幼苗活力指数提高,种子TTC还原力增强,丙二醛含量、过氧化物酶活性提高,种子浸提液的电导率降低,表明赤霉素对种子的膜有一定的修复作用,且在研究浓度范围内随着赤霉素浓度增加其对细胞膜的修复能力增加。     

沙冬青种子总生物碱对小鼠的亚急性毒性试验

为了检测沙冬青种子总生物碱的毒性,进行了小鼠亚急性毒性试验.试验设高、中、低3个剂量组和1个空白对照组,试验组每天按照剂量用金属胃导管灌服沙冬青生物碱提取物,连续28d,空白对照组自由采食饮水.每天观察各组小鼠的饮水、食欲、精神状态,测定小鼠体质量、生理生化指标的变化.试验结束后进行剖检,观察组织器官及其组织学变化.结果显示:沙冬青总生物碱低剂量组对小鼠的行为、饮水、采食、主要组织器官形态结构及血液生化指标等均无明显影响,沙冬青种子总生物碱对小鼠安全无毒副用的剂量为14.72mg/kg.     

沙冬青总黄酮体外抗BPIV-3的试验研究

【目的】研究沙冬青总黄酮体外抗牛副流感病毒Ⅲ型(BPIV-3)的作用,并对其抗病毒作用机制进行探讨.【方法】以细胞存活率和抑制率为指标,采用MTT比色法检测沙冬青总黄酮抗BPIV-3活性.分别以感染病毒同时给药、给药后接种病毒、先感染病毒后给药3种方式观察沙冬青总黄酮对BPIV-3病毒的抑制效果.【结果】沙冬青总黄酮的安全浓度为0.187mg/mL,病毒半数细胞感染量(TCID50)为10-7.733/0.1mL.在安全浓度范围内,沙冬青总黄酮具有良好的抗BPIV-3作用,且这种作用呈一定的量效关系.当浓度为0.187mg/mL时,BPIV-3抑制率达89.43%,细胞存活率高达96.66%;当浓度为0.187mg/mL时,阻断抑制率达68.36%,而细胞存活率达到86.98%;当浓度为0.187mg/mL时,对BPIV-3复制抑制效果最明显,达到50.55%,而细胞存活率达到78.81%.同时,在安全浓度范围内,沙冬青总黄酮直接杀灭BPIV-3病毒的效力较阻断作用和抑制作用更强.【结论】沙冬青总黄酮具有良好体外抗牛副流感病毒Ⅲ型(BPIV-3)的作用.     

盐分和贮藏对矮沙冬青种子萌发的影响

本文以濒危植物矮沙冬青(Ammmopiptanthus nanus(M.Pop.) Cheng f.)的种子为试材,研究不同贮藏条件和盐分胁迫对其发芽率、发芽指数和活力指数的影响,结果表明:矮沙冬青种子为正常型种子,室温贮藏18个月仍有较高的种子活力,5℃低温贮藏可明显提高矮沙冬青种子活力及萌发整齐度,加速种子萌发进程。矮沙冬青种子萌发期具有一定的耐盐性,耐盐极限浓度为0.3 mol/L,耐盐致死浓度为0.45 mol/L,其种子萌发率、下胚轴长、发芽指数、活力指数与盐浓度均呈极显著负相关。     

花棒和沙冬青种子催芽试验

采用不同方法对花棒和沙冬青的种子进行催芽处理.其中花棒种子设6种不同的催芽处理方法,分别为温水浸泡1、2、3、4 d、温水浸泡1 d后沙藏3 d和CK,结果表明,温水浸泡1 d后再沙藏3 d处理过的花棒种子发芽率最高,达到61.33%.沙冬青的种子分别设98%硫酸拌种30 min、用80～90℃的热水浸种并自然冷却反复两三次、机械破除种皮、用40～50℃的温水浸泡2 d和CK 5种不同的催芽处理方法,结果表明,用40～50℃的温水浸泡2 d的沙冬青种子发芽率最高可以达到82%.     

生长调节剂浸种对沙冬青种子萌发的影响

[目的]用不同生长调节剂浸种,对沙冬青种子进行了催芽研究。[方法]测定不同种类、不同浓度生长调节剂浸种后沙冬青种子的发芽率、发芽势、活力指数。[结果]在200~300 mg/L浓度范围内,不同浓度的生长调节剂(GA、NAA、IAA、IBA)对沙冬青种子发芽率、发芽势、活力指数均表现出促进作用。其中,200 mg/L GA能显著提高2种种源沙冬青种子的发芽率、发芽势、活力指数,宁夏银川种源分别较对照提高了28.0、46.7、10.1个百分点,内蒙呼和浩特种源分别较对照提高了26.0、48.0、11.4个百分点。[结论]内蒙古呼和浩特种源活力指数高于宁夏银川种源,生产上应首选。     

沙冬青种子萌发及幼苗出土对水分的响应

本文研究了沙冬青种子萌发对水分的响应.进行了2.5%、3%、4%、5%、7.5%、10%、12.5%、15%、17.5%、20%、22.5%和25%等12个水分梯度处理,每个处理3个重复.结果表明:当土壤含水量低于2.5%时,沙冬青的出苗率为0;当土壤含水量在4%～7.5%时,沙冬青出苗率没有显著差异(P<0.05),都可以达到80%以上;当土壤含水量超过12.5%时,随着含水量的增加,沙冬青出苗率呈降低趋势;土壤含水量在5%时沙冬青的出苗率最高.     

矮沙冬青种子的超干保存

采用硅胶干燥法对矮沙冬青种子进行超干保存的研究,结果表明将种子含水量降至5%以下,能显著提高抗老化能力。在同等老化处理条件下,对照种子发芽率和活力指数已大幅下降,而超干种子的发芽率和活力指数所受影响较小。对超干种子的电导率、脱氢酶活性的研究结果表明,含水量为3.35%的超干种子细胞膜通透性较低,脱氢酶活性较高。回湿处理是保证超干种子活力的关键因素,采用室内回湿24 h+饱和水蒸气回湿24 h可以显著提高矮沙冬青超干种子的活力。说明利用超干技术保存矮沙冬青种子是可行的。     

复方苦芩总黄酮对免疫抑制小鼠免疫功能的影响

为了观察复方苦芩总黄酮对免疫抑制小鼠的免疫增强作用,用环磷酰胺构建小鼠免疫抑制模型,给免疫抑制小鼠灌服复方苦芩总黄酮,检测碳粒廓清指数,脾脏指数,胸腺指数,血清溶血素水平及T,B淋巴细胞转化率.结果显示:复方苦芩总黄酮能够提高免疫抑制小鼠的碳粒廓清指数、脾脏指数、胸腺指数,同时也能够提高小鼠血清溶血素水平和增强T,B淋巴细胞转化率,与模型组比较差异极具有统计学意义(p0.01),且高剂量和中剂量组效果优于低剂量组,差异具有统计学意义(p0.05)或者极具有统计学意义(p0.01).表明复方苦芩总黄酮能增强机体的免疫功能.     

运输应激对小鼠免疫器官结构及热休克蛋白表达的影响

采用苏木精–伊红(HE)染色、醋酸铀–枸橼酸铅染色和免疫组织化学染色,对模拟运输应激小鼠免疫器官(胸腺、淋巴结和脾脏)的结构和3种热休克蛋白(HSP27、HSP70和HSP90)的表达情况进行分析。结果表明：试验组小鼠的胸腺、淋巴结和脾脏结构均受到不同程度的损伤,胸腺髓质增大,皮质中血管充血,淋巴小结缩小,脾小结增大,中央动脉被破坏,细胞发生凋亡等;淋巴细胞核核膜呈锯齿状甚至碎裂,嗜酸性粒细胞胞核溶解消失,浆细胞破坏更为严重,线粒体肿胀,嵴断裂或消失等;HSP27在淋巴小结中的表达逐渐降低,在淋巴结髓质和脾脏中的表达有所增加,HSP70在淋巴结髓质中的表达逐渐降低,在淋巴小结和脾脏红髓中的表达升高,HSP90仅在淋巴结中有明显表达。综上可知,运输所引起的应激反应会对小鼠免疫器官的结构造成严重损伤,应激相关热休克蛋白HSP27、HSP70和HSP90的表达情况也会发生一定的变化,提示热休克蛋白与运输应激之间可能存在着某些调控关系。     

强光和水分胁迫对沙冬青光呼吸的影响

[目的]研究沙冬青在强光和水分胁迫下其光呼吸的变化.[方法]采用LI-6400光合-荧光测定仪于5月份和10月份分别测定了沙冬青的光呼吸响应曲线、光呼吸/总光合响应曲线、光呼吸-NPQ响应曲线及10月份时沙冬青光呼吸速率和NPQ的变化特征.[结果]低光胁迫时光呼吸速率和光呼吸速率/总光合速率迅速增加,高光胁迫时两者缓慢变化,10月份沙冬青光呼吸耗能强于5月份,但对强光的敏感程度不及5月份;沙冬青光呼吸速率随NPQ的增加而增加,两者呈正相关曲线关系.水分饱和亏缺条件下,光呼吸速率的初始饱和亏缺大于NPQ.[结论]光呼吸和NPQ都是沙冬青重要的光破坏防御机制;光呼吸在沙冬青抗脱水能力中发挥着重要作用.     

瞬时渗透胁迫对沙冬青细胞离子流的影响

采用非损伤微测技术,研究了沙冬青悬浮细胞经不同浓度的氯化钠、甘露醇处理后,细胞Ca2+、K+、H+3种离子流速、流向及流量的变化。结果表明:氯化钠与甘露醇处理均诱导Ca2+外流,氯化钠诱导的Ca2+外流与氯化钠浓度有关;氯化钠诱导K+外流,而甘露醇诱导K+内流;氯化钠诱导的H+流具有先内流后外流的两个阶段的特点。H+-ATP酶在氯化钠诱导的H+外流中具有重要作用。     

强光和水分胁迫对沙冬青光呼吸的影响

[目的]研究沙冬青在强光和水分胁迫下其光呼吸的变化。[方法]采用LI-6400光合-荧光测定仪于5月份和10月份分别测定了沙冬青的光呼吸响应曲线、光呼吸/总光合响应曲线、光呼吸-NPQ响应曲线及10月份时沙冬青光呼吸速率和NPQ的变化特征。[结果]低光胁迫时光呼吸速率和光呼吸速率/总光合速率迅速增加,高光胁迫时两者缓慢变化,10月份沙冬青光呼吸耗能强于5月份,但对强光的敏感程度不及5月份;沙冬青光呼吸速率随NPQ的增加而增加,两者呈正相关曲线关系。水分饱和亏缺条件下,光呼吸速率的初始饱和亏缺大于NPQ。[结论]光呼吸和NPQ都是沙冬青重要的光破坏防御机制;光呼吸在沙冬青抗脱水能力中发挥着重要作用。     

吸湿-回干处理对新疆沙冬青种子活力的影响

吸湿-回干处理为一种经济实用的提高种子活力、增加抗逆性的实验方法,同样能应用于新疆沙冬青种子的研究上,经吸湿-回干处理的新疆沙冬青种子无论在萌发率、苗长及活力指数上均高于对照,即使在低温吸胀24 h的冷害条件下也呈现同样的规律,甚至有更高的活力指数。     

沙冬青茎杆甲醇提取物对小菜蛾幼虫生长发育的影响

室内测定了沙冬青茎杆甲醇提取物对小菜蛾幼虫生长发育的影响。结果表明,沙冬青茎杆甲醇提取物对小菜蛾幼虫生长发育具有明显的抑制作用。幼虫取食处理叶片后,体重增加较缓慢。而且随浓度的升高,这种体重抑制作用越强,最终导致高浓度处理中幼虫死亡较多。幼虫取食量、排粪量、食物近似消化率(AD)、食物利用率(ECI)、食物转化率(ECD)、相对生长率(RGR)、相对日均体重增长率(MRGR)均随提取物浓度的增加而降低。沙冬青茎杆甲醇提取物对小菜蛾幼虫历期的影响不明显,但使蛹期延长,幼虫死亡率升高。     

水分胁迫对沙冬青气体交换和 叶绿素荧光的影响

使用LI-6400 光合测定系统及其配备的荧光叶室测定了不同水分状况下沙冬青气体交换及叶绿素荧 光变化特征。结果表明院沙冬青光合速率尧蒸腾速率和气孔导度与水势的关系均可模拟为y=a+b（1原e-kx）、叶绿素荧 光特征指标水势关系呈y=ae-bx^k曲线;沙冬青光合速率尧蒸腾速率尧气孔导度和叶绿素荧光特征指标值随着植物水 势下降均呈下降趋势、光合速率尧蒸腾速率尧气孔导度下降的初始水势（初始胁迫水势）明显小于叶绿素荧光特征 指标、光合速率水势补偿点尧蒸腾速率临界点水势和气孔导度临界点水势与叶绿素荧光特征指标NPQ尧qP 和ETR 初始胁迫水势基本相同、而明显小于荧光指标Fv/Fm 初始胁迫水势。研究指出、可用气孔导度水势临界值作为评 价光合作用气孔调节和非气孔调节的界限、Fv/Fm 水势临界值可作为植物水分胁迫临界值院当水势大于气孔导度 水势临界值时、属于气孔调节水势范围;当水势小于气孔导度水势临界值时、植物以非气孔调节为主。当水势大于 Fv/Fm 水势临界值时、植物处于轻度或中度水分胁迫;当水势小于Fv/Fm 水势临界值时、植物处于重度水分胁迫。 结果表明、沙冬青气孔调节水势临界值为-3.81~-5.26 MPa、重度水分胁迫水势临界值为-8.05~-14.53 MPa、临界 值具有生长季节差异。     

雌雄小鼠胸腺和脾脏的免疫比较

[目的]探讨雌雄小鼠之间存在的免疫差异。[方法]以8周龄的雌雄小鼠为研究对象,测量雌雄小鼠的胸腺和脾脏质量及其脏器指数的大小;通过HE染色观察雌雄小鼠胸腺和脾脏的组织形态学变化;利用流式细胞术分析胸腺和脾脏中CD3、CD4、CD8和CD19各淋巴细胞的百分含量。[结果]雌性小鼠的胸腺质量和胸腺指数均大于雄性小鼠（P〈0.05）;雌性小鼠的脾小体的形态结构比雄性小鼠更完整;雌性小鼠胸腺的CD4＋CD8＋双阳性细胞百分含量高于雄性小鼠（P〈0.01）,CD4-CD8-双阴性细胞百分含量低于雄性小鼠（P〈0.05）,CD4＋和CD8＋单阳性细胞百分含量明显低于雄性小鼠（P〈0.01）。[结论]雌雄小鼠之间存在着免疫差异,特别是胸腺方面差异更明显。     

抗旱植物沙冬青对植物激素反应特性的研究

以沙冬青为材料,选用茎尖、茎段、子叶和下胚轴为外植体进行组织培养,主要研究植物激素6-BA、KT在芽分化中的作用,结果表明 茎尖和茎段在含1mg/L和2mg/L 6-BA的培养基上,形成了玻璃化的丛芽而死亡,在含低浓度6-BA（0.5mg/L,0.1mg/L,0mg/L）的培养基上,能够产生一定比例、无玻璃化生长正常的芽,以6-BA含量为0.5 mg/L分化的芽率较高。在子叶和下胚轴的分化过程中,0.5 mg/L的6-BA,能够提高子叶不定芽的分化频率,作用较KT明显,相反0.5 mg/L KT提高了下胚轴不定芽的分化。