缺氧诱导因子和促红细胞生成素及其受体基因在绵羊各组织中表达量

【目的】研究缺氧诱导因子(HIF)及其下游靶基因促红细胞生成素(EPO)及其受体(EPOR)在绵羊正常生理状况下各组织的表达,为靶向调控或缓解绵羊缺氧应激的研究提供组织学依据。【方法】采用实时荧光定量PCR方法,检测4只新疆细毛羊14种组织中HIF、EPO和EPOR基因的相对表达量。【结果】HIF-1α和HIF-2α基因均在绵羊肺组织的相对表达量最高,且极显著高于其它组织(P<0.01);在肺脏HIF-2α基因的表达量约为HIF-1α表达量的5.2倍。EPO基因在绵羊肾脏的相对表达量最高且显著高于垂体、结肠、脾脏、盲肠、肝脏、肾上腺、瘤胃、下丘脑以及心脏(P<0.05)。EPOR基因在肺脏的表达量最高,肺脏和睾丸的相对表达量显著高于脾脏、下丘脑、肾脏、心脏等组织(P<0.05)。【结论】HIF-1α、HIF-2α和EPO及其受体基因在绵羊的肺部或肾脏的高表达,可能是绵羊缺氧应激感受及其调控的重要器官。     

藏猪促红细胞生成素(EPO)基因多态性分析

选取高海拔低氧环境饲养的藏猪、长白猪为研究对象,利用直接测序法和PCR-RFLP分子标记技术对促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)基因进行多态性分析,结果表明,藏猪EPO基因相对于长白猪存在16个转换,1个15bp片段的缺失。     

血红蛋白水平波动对血液透析患者住院率及病死率的影响

目的 了解血红蛋白(Hb)水平波动对血液透析(Hd)患者住院率及病死率的影响.方法 根据Hb水平,将163例Hd患者分为持续目标值内组、持续目标值外无波动组、目标值以下/以上小波动组、目标值以下/以上大波动组.比较各组生化指标、肾性贫血、住院和死亡情况,并用回归分析筛选住院或死亡危险因素.结果 6组患者Hb水平、促红细胞生成素(EPO)使用剂量及调整次数、住院情况差异有统计学意义(P＜0.01或0.05).回归分析显示Hb水平、EPO使用剂量和调整次数与住院相关(P＜0.05).结论 Hd患者住院与EPO剂量和调整次数、Hb水平波动有关.     

LHR在不同繁殖期牦牛睾丸组织的表达比较

【目的】探讨不同繁殖季节牦牛睾丸促黄体生成素受体(LHR)在牦牛睾丸的定位与表达变化,为牦牛繁殖季节性调控研究提供依据.【方法】用特殊染色结合生物显微技术观察不同繁殖期成年牦牛睾丸组织学特征变化,应用免疫组化法检测LHR在牦牛睾丸组织的分布和定位.【结果】光镜观察表明,不同繁殖期成年牦牛睾丸组织结构差异不明显,生精上皮及间质PAS阳性表达明显,AB主要在生精小管基膜阳性表达,PAS及AB均为繁殖期表达强于繁殖间期.免疫组化结果显示,LHR在繁殖期牦牛睾丸leydig细胞及生精上皮均为弱阳性分布,而在繁殖间期仅强表达于leydig细胞.【结论】高原地区牦牛睾丸组织繁殖间期以酸性粘多糖为主,繁殖活动增强主要与中性粘蛋白关系密切,LHR参与了不同繁殖期牦牛睾丸功能变化的调控.     

大刺鳅促黄体生成素基因克隆及其组织表达分析

[目的]克隆大刺鳅(Mastacembelus armatus)促黄体生成素(LH)基因及明确其表达规律,为进一步阐明LH基因在大刺鳅性腺发育过程中的生理功能及揭示大刺鳅的生殖调控机理提供参考依据.[方法]采用RACE克隆大刺鳅LH基因cDNA全长序列,从GenBank中选择硬骨鱼类、两栖动物、鸟类和哺乳动物等物种的LH氨基酸序列,通过ClustalX 2.1进行氨基酸序列比对,以MEGA 6.0中的邻接法(NJ)构建系统发育进化树,并应用实时荧光定量PCR检测分析大刺鳅LH基因在不同组织及不同性腺发育期的表达情况.[结果]大刺鳅LH基因cDNA序列全长799 bp,包括224 bp的5'非编码区(5'-UTR)、131 bp的3'非编码区(3'-UTR)和444 bp的开放阅读框(ORF),共编码147个氨基酸残基,第1~22位氨基酸残基组成其信号肽区域.大刺鳅LH氨基酸序列C-末端区域高度保守,但N-末端区域与其他硬骨鱼类、两栖动物、鸟类和哺乳动物存在明显差异.大刺鳅LH氨基酸序列与其他鱼类的LH氨基酸序列同源性较高,其中与黄鳝(Monopterus albus)的亲缘关系最近.大刺鳅LH基因在其脑组织中的相对表达量最高,显著高于在其他组织中的相对表达量(P<0.05);在卵巢、心脏、肝脏和精巢中的相对表达量次之;大刺鳅LH基因在不同发育期卵巢和精巢中的表达变化趋势一致,从II期开始其相对表达量随之增加,至V期时达峰值.[结论]大刺鳅LH氨基酸序列具有高度保守区域,其基因在各组织中广泛表达,尤其在脑组织和性腺中具有较高表达量,提示LH的靶基因可能在脑—垂体—性腺轴上,参与大刺鳅的性腺发育调控,主要促进卵母细胞和精子成熟并刺激排卵或排精.     

EPO联合应用左旋卡尼汀治疗CRF贫血患者的护理干预效果

目的观察促红细胞生成素(EPO)联用左旋卡尼汀治疗慢性肾脏病慢性肾衰竭维持血液透析患者贫血的护理效果。方法54例随机护理干预组(n=28)和非护理干预组(n=26),对两组的住院天数、血红蛋白和血细胞压积和不良反应作了比较。结果护理干预组的疗效明显高于非护理干预组,两组的血红蛋白、血细胞压积及不良反应差异有统计学意义(P<0.01或0.05)。结论针对EPO联合应用左旋卡尼汀治疗慢性肾脏病慢性肾衰竭贫血患者的特点,可从心理、治疗过程不良反应、瘘管、饮食护理及改善注射方式和改变注射部位等方面,提高患者治疗的依从性。     

脑红蛋白在成年牦牛脑中的表达研究

【目的】探寻脑红蛋白(Neuroglobin,NGB)在成年牦牛脑不同部位中的分布特征。【方法】选择健康成年牦牛8只,宰杀后取其大脑皮质、小脑皮质、海马、延髓、纹状体及嗅球等部位的脑组织,利用免疫组织化学染色SP法和实时荧光定量PCR技术,对NGB在成年牦牛脑不同部位中的分布特征及定量关系进行观察与检测。【结果】NGB在成年牦牛脑不同区域的表达强弱有明显差异,在大脑皮质中NGB基因的相对表达量(262.69±9.19)极显著高于小脑皮质(137.00±7.29)、海马(1.00±0.22)、延髓(3.43±0.76)、纹状体(7.65±0.61)及嗅球(2.14±1.22)。【结论】NGB在成年牦牛脑不同部位中高表达,提示NGB在脑组织的氧利用及功能活动中发挥着重要作用。     

蔗糖铁联合EPO治疗晚期肺癌贫血疗效及临床意义探讨

目的 探讨蔗糖铁联合促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)治疗晚期肺癌患者贫血的疗效及其对生存预后的影响.方法 66例晚期肺鳞癌伴轻度-中度贫血且预估生存时间大于3个月的患者,采用单药(吉西他宾或紫杉类)非铂类化疗方案者47(71.2％)例,联合铂类(顺铂或卡铂)化疗者19例(28.8％);完成化疗<4...     

长期慢性低氧对牦牛和黄牛血液中HIF-2α、 EPO水平及红细胞相关指标的影响

为探讨牦牛和迁饲黄牛血液中红细胞(RBC)、血红蛋白(HB)、低氧诱导因子-2α(HIF-2α)、促红细胞生成素(EPO)等因子对高原适应和习服的不同特征及调控机理,按照海拔低于3 500m和高于3 500m两组采集青海地区的牦牛血样,同时采集高山迁饲黄牛(海拔2 500m)及低海拔黄牛(海拔1 300m)血液,采用全自动血液分析仪测定血液中红细胞、血红蛋白、红细胞比容(HCT)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)等;采用双抗夹心酶标法测血液中EPO、HIF-2α含量。通过t检验及单因素方差分析法分析指标间的差异性,并分析各指标与HIF-2α、EPO的相关性。结果表明,海拔高于3 500m牦牛组的RBC、HB、HCT显著升高,而HIF-2α和EPO水平却未发生显著变化。与迁饲黄牛和低海拔黄牛相比,牦牛血液中的RBC明显降低,而MCH、HIF-2α和EPO显著升高。牦牛血液中EPO、RBC、HB、HCT、MCH水平与HIF-2α水平呈显著相关;迁饲黄牛血液中红细胞分布宽度(RDW-SD)与EPO水平呈显著相关;低海拔黄牛血液EPO、MCH水平与HIF-2α水平呈显著相关。推测:海拔升高引起的低氧是影响牦牛血液RBC、HB、HCT改变的主要因素;与黄牛相比,低RBC、低MCH、高HIF-2α、高EPO水平是牦牛适应低氧的主要特征,且牦牛血细胞各指标对血液中HIF-2α水平的改变更敏感。提示牦牛通过遗传进化成功适应高原环境。     

消化道肿瘤贫血患者促红细胞生成素与贫血治疗方案的关系

目的分析消化道肿瘤患者内源性促红细胞生成素水平及贫血状态,探讨使用重组人促红细胞生成素治疗消化道肿瘤相关性贫血的方案.方法内源性促红细胞生成素采用Elisa检测,血红蛋白采用常规检测.消化道肿瘤非贫血患者为对照组,消化道肿瘤贫血患者组为观察组.结果统计发现男女之间的贫血率没有差异,消化道肿瘤相关性贫血患者占38.95%,其中以胃癌居首,占42.2%,食管鳞癌最低,占35.6%.消化道肿瘤患者在化疗前贫血比非贫血患者EPO高而Hb低,两者存在逆相关关系,化疗后贫血患者Hb继续降低,EPO上升;而在化疗后非贫血患者中出现的26例贫血患者,其中16例出现EPO急剧上升,10例EPO几乎不变,EPO存在极显著差异,具有统计学意义,而Hb没有明显的差异.结论消化道肿瘤相关性贫血发生率较高,在临床治疗中要密切关注.     

促红细胞生成素联合生血宁防治极低体重儿贫血的效果观察

目的:观察促红细胞生成素(EPO)联合铁叶绿酸钠(生血宁)防治极低体重儿贫血的临床效果。方法:将入住新生儿病房的60例极低体重儿随机分成治疗组及对照组各30例。治疗组生后第7天起给予EPO及生血宁治疗,对照组仅予生血宁治疗,疗程均为4周。分别于生后第7、14、28、42天检查两组患儿血常规并记录Hb、RBC、H ct、网织红细胞(R et)及血清铁蛋白(Fe )。结果:两组患儿生后的Hb、RBC、H ct均下降,但治疗组下降程度较轻,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。治疗组患儿的R et经治疗后较对照组显著升高(P<0.01)。两组的血清Fe 生后均逐渐下降,以治疗组下降更明显,但治疗结束时,治疗组的血清Fe 上升,两组差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组有5例(16.7%)出现贫血症状,明显高于对照组的56.7%(17/30)(χ2=10.331,P<0.01)。结论:早期使用EPO联合生血宁能减轻极低体重儿的贫血程度。     

LHR在雌性山羊颈前神经节中的分布

采用免疫组织化学SP法检测促黄体生成素受体(LHR)在雌性山羊颈前神经节(SCG)中的分布特点及表达情况。结果显示,在雌性山羊SCG中,LHR免疫反应阳性物质主要分布在神经元胞体的胞膜和胞质中,为LHR强阳性或中等阳性。部分神经元胞体可见其突起,为LHR中等阳性。图像分析表明,LHR在神经元和非神经元中的表达量呈极显著差异(P0.01)。研究表明,SCG具备接受LH作用的条件,提示LH可能会影响SCG交感节后神经元胞体对其支配的头面部腺体、血管以及眼睛、咽喉等器官的调控作用。     

大剂量益比奥治疗肾性贫血的疗效观察

目的 :观察大剂量益比奥治疗肾性贫血的疗效。方法 :维持血液透析的肾性贫血患者 36例随机分为两组 :对照组 1 8例 ,采用进口重组人红细胞生成素 (rh EPO)利血宝 30 0 0 IU皮下注射 2次 /周治疗 ;试验组 1 8例 ,采用大剂量国产 rh EPO益比奥 (EPLAO) 1× 1 0 4 IU皮下注射 1次 /周治疗。治疗期间观察血常规、血清电解质、肾功能、血压的变化及不良反应。结果 :试验组显效 1 1例 ,有效 6例 ,无效 1例 ;对照组显效 1 3例 ,有效 4例 ,无效 1例。结论 :大剂量 EPLAO每周 1次与常规剂量利血宝每周 2次治疗肾性贫血的疗效及不良反应 ,差异无显著性 ,但减少了注射次数 ,提高了患者的依从性 ,价格 /药效明显低于利血宝。     

牦牛与黄牛胃中脑红蛋白表达的比较研究

为了探讨脑红蛋白(NGB)在牦牛与黄牛胃中的表达差异,试验选择健康成年牦牛与黄牛各5头,利用免疫组织化学染色SP法,观察脑红蛋白在牦牛与黄牛瘤胃、网胃、瓣胃及皱胃组织中的表达差异.结果表明:NGB在牦牛和黄牛胃中均有分布,分别表达于瘤胃、网胃、瓣胃的黏膜上皮和固有层,以及皱胃的黏膜上皮和胃底腺.牦牛和黄牛瘤胃、网胃、瓣胃黏膜上皮NGB的表达强度均高于固有层,皱胃黏膜上皮和胃底腺NGB的表达强度相当.半定量分析结果表明,NGB在牦牛瘤胃、瓣胃黏膜上皮和固有层以及皱胃黏膜上皮和胃底腺中的阳性表达强度均显著高于黄牛(P0.05),而在网胃黏膜上皮和固有层中牦牛与黄牛的NGB阳性表达差异不显著(P0.05).NGB在牦牛与黄牛胃中的表达,提示其在胃部生理活动尤其是氧代谢环节中发挥着重要作用.牦牛胃部分组织中NGB的表达强度高于黄牛,可能与其对高原低氧环境的适应性有关.     

犏牛、牦牛睾丸组织中Ghrelin 与GHSR 基因mRNA 表达水平研究

对犏牛、牦牛睾丸组织中生长素(Ghrelin)与生长激素促分泌素受体(GHSR)基因mRNA表达水平进行研究。运用荧光定量PCR方法,检测Ghrelin、GHSR基因在犏牛、牦牛睾丸组织中m RNA的表达水平差异,结果显示:在犏牛、牦牛睾丸组织中,Ghrelin基因m RNA相对表达量犏牛显著高于牦牛(分别为0.8177±0.0225、0.4656±0.0222,P0.05);GHSR基因mRNA相对表达量也是犏牛显著高于牦牛(分别为0.8622±0.0347、0.4722±0.0761,P0.05)。相对于牦牛睾丸组织,犏牛睾丸组织中Ghrelin与GHSR基因m RNA均高表达可能是犏牛雄性不育的原因之一。     

降钙素基因相关肽在牦牛附睾中的定位与表达

【目的】分析降钙素基因相关肽（calcitonin gene related peptide,CGRP）在牦牛附睾中的转录水平及蛋白分布特点,探究其对精子运输及成熟的功能。【方法】采集6头3~4岁健康成年牦牛的附睾,将其解剖为头、体、尾三部分,应用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）、Western blotting分别检测CGRP mRNA和蛋白在附睾的头、体、尾中的表达水平;采用H.E染色法分析附睾组织结构特点;采用免疫组化和免疫荧光技术分析附睾各部分CGRP的分布及表达情况。【结果】RT-qPCR结果表明,CGRP在牦牛附睾头的相对表达量显著高于附睾体和附睾尾（P＜0.05）,附睾尾表达量最低（P＜0.05）;Western blotting检测结果表明,CGRP蛋白水平在附睾尾中的表达水平显著高于附睾头和附睾体（P＜0.05）。显微镜下观察表明,牦牛附睾组织纤毛长度从头部至尾部逐渐降低,差异显著;附睾头间质组织的间质平滑肌层厚度显著低于附睾体和附睾尾（P＜0.05）;基细胞和晕细胞在附睾尾分布显著,上皮厚度亦在附睾尾显著降低。免疫组化及免疫荧光分析发现,CGRP主要分布于附睾上皮、基底膜及附睾间质小血管,附睾上皮晕细胞的表达强度最高。【结论】CGRP主要分布于牦牛附睾上皮和间质小血管,提示CGRP对牦牛附睾间质小血管的收缩发挥调节作用。牦牛附睾尾晕细胞数量最多,晕细胞中CGRP的高强度表达提示其可能参与附睾尾的免疫调节。     

神经营养因子受体Trkb对湖羊垂体细胞增殖及促性腺激素分泌的影响

[目的]本研究旨在探究神经营养因子酪氨酸激酶B受体(Trkb)基因对湖羊垂体促性腺激素分泌的影响。[方法]利用qPCR方法对Trkb进行组织表达谱分析;构建Trkb过表达载体并转染至湖羊垂体细胞,利用qPCR、Western blot、EdU以及ELISA等技术检测过表达Trkb对垂体细胞增殖及促性腺激素分泌的影响。[结果]Trkb在湖羊心、肝、脾、肺、肾以及下丘脑和垂体等各个组织中均有表达,但在垂体中表达水平显著高于其他组织(P<0.05)。Trkb在湖羊垂体组织不同发育阶段差异表达,其中在6月龄垂体组织中高表达(P<0.05),在5日龄和3月龄表达水平较低。与对照组相比,过表达Trkb基因显著促进了垂体细胞增殖率(P<0.05),增殖标记基因Pcna表达水平与Bcl2/Bax比值均显著提高(P<0.05)。此外,过表达Trkb显著提高了促性腺激素相关基因Fshβ和Lhβ的表达水平,促进了垂体细胞促卵泡素(FSH)分泌(P<0.05)。[结论]过表达Trkb能够显著促进湖羊垂体细胞增殖,降低细胞凋亡水平从而显著提高促性腺激素的分泌水平。本研究初步验证Tr...     

牦牛和雄性不育犏牛睾丸中Prm1和Prm2基因表达

为探索牦牛(Bos grunniens)杂交后代(犏牛)雄性不育的分子机制,比较了牦牛及其杂交后代睾丸中两种精蛋白(Prm)基因的表达。从成年牦牛(n=13)和犏牛(n=7)睾丸中提取总RNA,定量PCR分析表明,犏牛睾丸中Prm1和Prm2基因的m RNA水平均极显著低于牦牛(P0.01),这将影响正常精子发生的过程,推测可能与犏牛雄性不育有一定关系。     

松蘑提取液对D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化作用的研究

[目的]研究松蘑提取液对D-半乳糖所致衰老小鼠的抗氧化作用。[方法]将50只小鼠随机分成空白对照组、模型组和松蘑提取液低、中、高剂量组,采用D-半乳糖复制衰老模型,试验6周后处死动物,测定血清、脑及肝脏中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)的含量。[结果]松蘑提取液可明显提高衰老小鼠血清、脑及肝脏中的SOD和GSH-Px的活性,降低MDA的含量,且呈剂量依赖性。[结论]松蘑提取液有一定的抗衰老作用,其机制可能与抗氧化作用有关。     

舍饲牦牛、犏牛和放牧牦牛屠宰性状、肉质及其营养成分比较

为探究舍饲对牦牛(Bos mutus)的屠宰性能、肌肉品质及其营养成分的影响,随机选择了4.5岁体况中等的金川公牦牛6头和公犏牛3头,分为舍饲牦牛、舍饲犏牛和放牧牦牛组,进行对比测定3个组的屠宰性能、肌肉品质及其营养成分差异。结果表明,舍饲牦牛在宰前活重、胴体重、净肉重、肉骨比等方面显著高于放牧牦牛(P0.05),但与舍饲犏牛在胴体重、肉骨比等指标上无显著差异,二者增重效果差异不大;舍饲方式对牦牛肌肉系水力的影响有限,但是显著地改善了牦牛的肌肉嫩度,提高了其熟肉率,有利于牦牛肉下游加工制品的生产。同时牦牛肉各项营养成分检测结果显示,3个组间的营养成分、氨基酸组成含量相差不大,即短期舍饲对牦牛肉的营养成分无明显影响。