水稻胡麻叶斑病病原菌的分离及鉴定

【目的】对水稻胡麻叶斑病病原菌进行分离和鉴定,为进一步研究该病的发病机理和有效防控奠定基础。【方法】采用常规真菌分离方法分离水稻胡麻叶斑病病原菌,通过回接试验进行柯赫氏法则验证,对确认为水稻胡麻叶斑病病原菌的菌落进行形态学和分子鉴定。【结果】经回接试验确认分离的水稻胡麻叶斑病病原菌的分生孢子梗单生,褐色,不分枝,顶端呈膝状弯曲,分生孢子呈长椭圆形、梭形、倒棍棒状,正直或向一侧弯曲,褐色,两端渐狭,钝圆,种脐较平,有5～10个假隔膜。18S rDNA和ITS序列长度分别约为1.8 kb和570 bp,与待鉴定病原菌18S rDNA同源性最高的是狗牙根平脐蠕孢有性态（Cochliobolus cynodontis）,二者的相似度为99%;与其ITS序列同源性最高的是稻平脐蠕孢（Bipolaris oryzae）,二者的相似度也为99%。聚类分析发现,该病原菌与蟋蟀草平脐蠕孢（Bipolaris eleusines）的18S rDNA同源关系最近,与平脐蠕孢属（Bipolaris sp.）的ITS同源关系最近。【结论】成功分离到水稻胡麻叶斑病病原菌,形态学与分子鉴定结果均显示其为稻平脐蠕孢。     

一种引致水稻稻叶褐条斑的病原鉴定初报

对广东稻区近年来水稻生产上发生较为普遍的水稻稻叶褐条斑病进行了病原分离鉴定,根据柯赫氏法则,初步鉴定其致病病原菌为稻黑孢霉菌[Nigrospora oryzae (Berk.et Br.)petch];其症状与水稻窄条斑病类似,主要见于水稻生长中后期,在叶面上形成黄褐至黑褐色的短细条状斑,严重时均可致全叶枯死,引起穗枯,谷粒结实差或不结实,造成水稻严重减产.对该病在广东主栽水稻上的发生症状、病原鉴别进行了详细描述,并对该病原菌在国内外不同寄主上发生、防治状况进行了综述.     

天津水稻穗腐病病原菌鉴定及室内毒力测定

近年来,水稻穗腐病在天津地区发生较重,成为影响水稻产量和品质的重要病害之一。本试验连续两年对天津地区水稻主产区穗腐病危害进行调查、病原菌分离鉴定,并采用生长速率抑制法测定病原菌对9种杀菌剂的敏感性。病原菌分离鉴定结果显示,引起天津地区水稻穗腐病的病原菌为稻黑孢霉(Nigrospora oryzae)。药剂敏感性测定结果显示,95%咯菌腈和95.3%丙环唑对稻黑孢霉抑菌效果最好,2020年EC₅₀值分别为0.2776、1.3102μg/mL,2021年EC₅₀值分别为0.5171、2.0188μg/mL;80%代森锰锌可湿性粉剂对两年菌株的抑制效果差异较大,对2020年菌株EC₅₀值为8.0151μg/mL,对2021年菌株的EC₅₀值为24.6704μg/mL。75%三环唑对该病原菌无抑制作用,生产上不推荐使用。本研究明确了天津地区水稻穗腐病的致病菌株并筛选了高效抑菌药剂,为生产中该病害的防治提供了参考。     

商丘地区番茄枯萎病病原菌分离与鉴定

本试验以河南省商丘地区患枯萎病番茄植株为试材,采用组织分离、形态观察及ITS序列分析,对引起番茄枯萎病的病原菌进行鉴定.结果表明,病原菌菌落呈圆形、白色,中心呈淡紫色,分生孢子镰刀状或椭圆状.经PCR扩增番茄病原菌ITS序列后得到长度为582 bp的片段,对该序列在NCBI中进行比对,显示与尖孢镰刀菌(Fusarium...     

水稻品种抗南方水稻黑条矮缩病人工接种鉴定技术规程

南方水稻黑条矮缩病是我国一类农作物病虫害,严重威胁水稻生产和粮食安全.种植抗(耐)病品种是防控该病害的有效措施,但对水稻品种的抗病性评价至今尚未有具体操作规程可循.针对水稻品种抗病鉴定评价及抗源筛选的迫切需求,作者在多年实践的基础上,总结制定了抗南方水稻黑条矮缩病人工接种鉴定技术及评价规程,包括有关术语定义,人工接种鉴定流程、结果调查和抗病性评价等,为规范开展水稻品种抗病性鉴定提供指导和参考.本标准适用于水稻品种及育种材料抗南方水稻黑条矮缩病性状的鉴定与评价.     

兰花茎腐病病原菌的分离与鉴定

在绍兴等地发生了较严重的兰花茎腐病,按照Koch法则对病原物进行分离纯化、菌株鉴定及致病性测定.结果表明,兰花茎腐病是由镰刀菌(Fusarium sp.)引起的.     

小麦茎基腐病苗期快速接种鉴定方法研究

为建立一种小麦茎基腐病快速接种鉴定方法,以扬麦158、Sunco、Kennedy为材料,采用4种接种方法评价了小麦苗期茎基腐病抗性鉴定效果,并以扬麦158/CI12633群体验证了所采纳的最优接种方法的致病效果。结果表明:采用苗期棉球接种法小麦品种间抗性差异明显,操作方便,发病稳定性等方面优于其他方法。因此,小麦茎基腐病抗性种质资源筛选时可以将棉球接种法作为鉴定评价的首选方法。     

水稻细菌性条斑病抗性鉴定方法研究

本文报道了对水稻细菌性条斑病Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓｃｏｍｐｅｓｔｒｉｓｐｖ．ｏｒｇｚｉｃｏｌａ（Ｆａｎｇｅｒａｌ）Ｄｙｅ抗性鉴定方法的研究结果，通过人工接种及大田调查，明确了水稻细菌性条斑病在苗期比成株期感病；针刺与喷雾两种方式在显症率上没有明显差异，且病情严重度呈极显著正相关；明确了接种浓度应不低于每毫升９×１０￣７个细菌，从而总结出了一种人工接种鉴定水稻品种抗细菌性条斑病的方法：即在水稻苗期于中午以强致病力细菌性条斑病菌株配成每毫升９×１０￣７个细菌以上浓度菌液喷雾接种。     

西南地区玉米穗腐病病原分离鉴定及接种方法研究

2010-2011年,从我国西南地区16个市(县)主要玉米产区采集玉米穗腐病标样190份,采用组织分离培养法分离得到393个菌株,将传统形态学分类方法与分子生物学方法相结合,共鉴定出15个种属,其中以拟轮枝镰孢菌(Fusarium verticillioides)分离频率最高为40.20%,为优势菌株;其次为禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum),分离频率为15.01%。选用优势菌株拟轮枝镰孢菌采用花丝注射法、籽粒注射法、花丝喷雾法3种方法进行了穗腐病接种方法筛选,结果表明,籽粒注射法有利于病原菌的侵染发病,发病程度适中,是一种比较理想的接种方法。采用此方法对西南主要推广品种进行了抗病性鉴定,品种间对拟轮枝镰孢菌抗性存在显著差异,无高抗品种,表现好的品种有正大619,正大818,迪卡007,农乐988,正红505和神珠7号等6份。     

水稻生育后期谷粒变色病病原菌的分离鉴定

近年来,水稻谷粒变色病日趋严重。采用常规方法,对成都和重庆两地区的变色谷粒病原菌进行分离,纯化及其致病性测定,获得具致病作用的镛孢力等若干菌株。其中欧氏杆菌,镛孢霉菌为优势种群,各占４５．５％,２７．３％。     

山东省大蒜主产区根腐病病原菌分离与鉴定

为进一步探讨山东省大蒜主产区根腐病的病原菌及种类,于2020年从山东省济宁市任城区、金乡县,菏泽市巨野县,临沂市兰陵县等采集发病大蒜植株,通过组织分离法获得4株分离物,利用形态学鉴定方法,结合Blast同源性分析,利用MAGE 7.0构建系统发育树的方法对分离物进行鉴定.结果表明,尖孢镰孢菌(Fusarium oxysporum)、腐皮镰孢菌(F.solani)、芳香镰孢菌(F.redolens)、木贼镰孢菌(F.equiseti)是山东省大蒜主产区根腐病的致病菌.通过对比4种镰孢菌对大蒜根腐病的致病性发现,分离出尖孢镰孢菌的植株根腐病最为严重,可见尖孢镰孢菌是大蒜根腐病病害的主要致病菌.结果可为大蒜根腐病拮抗菌的筛选和防治及大蒜——根腐病互作机理研究提供理论依据和技术参考.     

水稻叶尖枯病人工接种技术研究

接种试验表明，病菌菌丝液和分生孢子液均可作为接种体。凡能造成伤口的接种方法，都能使稻叶发病，其中以剪叶蘸液接种最为简便、实用。而非伤口接种方法则不行，表明病菌侵入途径主要是伤口。接种后不管保湿与否，均能发病，但保湿时间愈长，病害潜育期愈短，病斑扩展速度愈快。试验还指出，水稻苗期和分蘖期叶片较抗病，而孕穗期、扬花期和乳熟期较感病。因此，孕穗至扬花期是大田接种鉴定水稻品种抗性的适期。     

水稻纹枯病菌分离,培养及人工接种技术研究报告

利用０．１％盐酸升汞液消毒１．５ｍｉｎ或用３．７５％次氯酸钠消毒７ｓ，可以在越冬病标样上分离到纹枯病菌丝。利用无菌水漂洗菌核再加培养也可以分离到纹枯病菌丝。土壤中纹枯病菌丝可用打孔试管埋管法分离。病菌扩繁以小米培养基为好。对稻株接种可以将接种物直接置于叶鞘深处，不必保湿。     

陕西杨陵葡萄黑痘病病原菌的分离与鉴定

采用常规组织法对陕西杨陵葡萄黑痘病病原菌进行分离、纯化,共获得病原菌菌株24个,并对菌株YL018进行形态学鉴定、致病性测定及病原菌DNA同源性分析。利用ITS区域通用引物ITS1-F/ITS4进行病原菌DNA PCR扩增,将获得的病原菌rDNA-ITS区域的DNA序列进行Blast比较分析。结果发现,菌株YL018与GenBank登录号分别为AY826763、AY826762和AY826764的Elsinoe ampelina位于一个分支上。从而证明分离到了陕西杨陵葡萄黑痘病病原菌。也为进一步研究在病原菌侵染葡萄过程中,植物防御系统中酶类物质的变化及作用做好了前期基础。     

日本鳗鲡爱德华氏菌病病原菌的分离与鉴定

从江苏海安和广东中山等地送检的患爱德华氏菌病的日本鳗鲡中分离到１２个菌株,经过对菌株的形态观察,直接荧光抗体法鉴定和生化特性测试,证明了其中１０个菌株为迟缓爱德华氏菌。选用其中４个菌株进行致病力测试结果表明,注射菌液后的日本鳗鲡能出现与自然发病相同的症状,并导致供试日本鳗鲡１００％死亡。对分离菌株进行的药敏试验结果表明,所有菌株均对链霉素、四环素、氯霉素、土霉素和杆菌肽比较敏感,而对红霉素、青霉素     

香蕉冠腐病病原菌的分离和鉴定

对海南省东方、乐东、三亚、琼海、儋州和澄迈六市县的香蕉进行抽样调查，对发生典型冠腐病症状的香蕉进行组织分离，培养，统计带菌率和带菌种类，结果显示六个市县香蕉的带菌率为13．3％—87．2％，其中以三亚的最高。在分离到的9个菌株中，镰刀菌6种，经过致病力测定和生物学鉴定，确定引起省内香蕉冠腐病的主要病原菌为亚粘团串珠镰孢(Fusorium moniliforme var.subglutinans)、半裸镰孢霉(F．semitectum)、导管镰孢霉(F.aquaeductuum)；阳弯喙镰孢霉(F.comptoceras)。     

大花蕙兰根腐病病原菌的分离与鉴定

从唐山地区采集大花蕙兰根腐病病株样品50份,按照柯赫氏法则对其进行了病原物的分离、纯化、致病性测定及菌株鉴定.结果表明,发病部位分离物中有2类病原菌,为镰孢属(Fusariumspp.)和枝顶孢属(Acremoni-um link=Cephalosporiumcorda).但主要优势菌群为镰孢属.分离物经致病性测定和复合接种试验发现,茄病镰刀菌(F.solani)及尖孢镰刀菌(F.oxysporum)致病性最强,接种后发病株率达85%以上,木贼镰刀菌(Fusariumequiseti)、串珠镰孢中间变种(F.moniliformevar.intermediumNeish et Leggetl)和占枝顶孢霉(A.strictum Gams.)致病性弱,潜伏期长,接种发病率为5%~18%.占枝顶孢霉与茄病镰刀菌和尖孢镰刀菌混合接种后的发病率均高于单独接种的发病率.证实大花蕙兰根腐病是以茄病镰刀菌及尖孢镰刀菌为主要病原菌,并由木贼镰刀菌、串珠镰孢中间变种和占枝顶孢霉复合侵染导致的一种病害.     

水稻叶尖枯病人工接种技术研究

接种试验表明，病菌菌丝液和分生隐子液均可作为接种体。凡能造成伤口的接种方法，都有命名稻叶发病，其中以剪叶蘸液接种最为简便、实用。而非伤口接种方法则不行，表明病菌侵入途径主要是伤口，接种后不管保湿与否，均能发病，但保湿时间愈长，病害潜育期愈短，病斑扩展速度愈快，试验还指出，水稻苗期和分蘖期叶片较抗病，而孕穗期、扬花期和乳熟期较感病。因此，孕穗至扬花期是大田接种鉴定水稻品种抗性的适期。     

蓝莓枝枯病病原菌分离鉴定及孢子萌发条件研究

2016年在浙江省蓝莓种植基地发现原因不明的幼苗木整株枯死现象,为明确其致病菌,通过组织分离法和单孢培养法进行菌株的分离纯化,通过科赫氏法则进行分离菌的致病性检测,运用常规形态学和rDNA-ITS序列分析相结合的方法进行病原菌分类鉴定,同时使用载玻片法进行病原菌孢子萌发条件研究。结果表明:蓝莓整株植株枯死是由枝枯病所致,纯化菌株ZA1为该病病原真菌。其菌落圆形,白色;分生孢子呈纺锤形,被4个真隔膜分成5个细胞,中间细胞呈褐色,两端细胞无色。结合r DNA-ITS 序列分析,菌株ZA1被鉴定为棒状拟盘多毛孢菌(Pestalotiopsis clavispora)。菌株ZA1孢子萌发的最适温度为30℃;对悬浮液酸碱度的适应性较广,p H 3~12时孢子均可萌发;光照和复合碳源均有助于孢子萌发。