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食用菌DNA提取方法研究 总被引:16,自引:0,他引:16
DNA是最重要的遗传物质,因此,DNA的提取方法和技术是生物化学及分子生物学最基本的技术,也是生物工程最常用的技术,为了得到足够纯的食用菌DNA进行基因和遗传操作,已经报导了各种样的提取DNA的方法,但是都比较复杂。本论文通过对多种提取方法对多种食用菌的研究,得出一种操作简便,不需要昂贵仪器设备,用时短,产品纯度高,即适合大规模生产,又能体现食用菌生物学特性的食用菌DNA提取技术。 相似文献
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高质量枣基因组DNA提取方法 总被引:11,自引:2,他引:11
主要针对枣组织中多糖严重干扰基因组DNA提取质量的问题,比较了常规CTAB法、TE3D法和改良CTAB法3种方法的处理效果。结果表明:常规CTAB法提取DNA难以除去多糖类杂质;TE3D法提取的DNA多糖杂质少,但产率低,易降解,褐化严重;改良CTAB法提取DNA产率高,无明显降解,杂质少,D260nm/D280nm比值1.80左右,通过基因组DNA-AFLP指纹图谱分析,完全满足实验要求。并对改良CTAB法的关键步骤作了具体分析讨论。 相似文献
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山葡萄基因组DNA提取及RAPD鉴定 总被引:26,自引:0,他引:26
以雌花山葡萄(73064)冷藏幼叶,香妃葡萄新鲜幼叶为试材,分别采用修改的CTAB法,高盐法、SDS法提取基因组DNA。结果表明,三种方法所提的DNA纯度及产率有差别,从综合结果看,以CTAB法为好,所得DNA不需经氯化铯梯度离心或柱层析,可直接用于RAPD分析。 相似文献
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辣椒叶片DNA提取方法的优化 总被引:10,自引:0,他引:10
对提取植物DNA的CTAB法进行了改进.使用Retsch研磨仪极大地提高了效率,并在CTAB提取液中添加0.2%的二硫苏糖醇可以有效防止酚类物质的氧化及与DNA的不可逆结合.紫外吸收检测DNA A260/A280=1.7~1.8;经琼脂糖凝胶电泳检测得到一条带型较宽且清晰的DNA谱带,辣椒叶片DNA平均产量为29.8μg/100 mg,证明所提取DNA的质量和得率均较高;酶切结果表明DNA质量较高,能够酶切完全;PCR扩增到的特异性条带明亮、整齐,基本无拖尾,达到各种分子标记等研究技术的要求. 相似文献
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以天竺葵为试材,比较分析了CTAB法、简单法、高盐低pH值法、CTAB-SDS法、SDS法对天竺葵叶基因组DNA提取的效果。结果表明:5种方法提取的天竺葵总DNA在纯度上有很大的差别。所得到的DNA提取纯度依次为简单法、CTAB-SDS法、CTAB法、高盐低pH法、SDS法。酶切结果为简单法、CTAB法效果最好,其次SDS法,高盐低pH法、CTAB-SDS法不能被EcoRI酶完全消化。经综合的比较分析,认为简单法是最佳的提取方法。因其步骤简单、快捷,得到的基因组DNA降解少、杂质含量少,能获得高质量的DNA模板,可以用于分子生物学试验研究。 相似文献
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辣椒基因组DNA提取方法研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本项研究采用SDS法、CTAB法和高盐低pH法对辣椒(CapsicumannuumL.)叶片基因组DNA进行提取;紫外吸收检测法与琼脂糖凝胶电泳法对DNA的纯度进行检测。紫外吸收检测结果表明,SDS法提取的辣椒叶片DNA具有典型的天然DNA分子的标准紫外吸收光谱特点,其A260/A280在1.771~1.912之间。SDS法提取的DNA经琼脂糖凝胶电泳检测得到一条迁移率很低的整齐清晰的DNA谱带,所提取DNA的质量和产率均较高,用该法提取的辣椒DNA进行RAPD分析,DNA扩增效果较好,带形清晰、整齐,说明SDS法提取的DNA分子较为完整,能用作PCR模板来开展辣椒分子水平的研究。 相似文献