牛白细胞黏附缺陷症(BLAD)的检测与单倍型分析

牛白细胞黏附缺陷症（BLAD）是由常染色体上CD18基因单碱基突变（A→G）引起的隐性遗传疾病,隐性基因纯合时导致白细胞表面的β2整合素表达明显减少或缺乏而引起临床发病,患病牛的主要特征是机体免疫力降低、易患病从而影响生产性能的表现,严重的影响了奶牛场的经济效益。本研究重点对牛白细胞黏附缺陷症（BLAD）的致病基因CD18基因第2外显子（exon2）进行检测分析,通过对样品进行PCR-SSCP分析,结果发现了4种单倍型：单倍型H1、H2、H3及H4,经测序发现,此扩增片段共存在2个SNPs位点,分别位于CD18基因exon2的C20T和A55G位点,其中C20T突变是首次发现,属于同义突变,而A55G突变即是引起BLAD的错义碱基突变,单倍型为H1、H2和H3的个体是正常牛,单倍型H4是BLAD携带者,从而建立了一种筛选BLAD有害基因的新方法-SSCP法。     

牛白细胞黏附缺陷病液相基因芯片检测方法的建立

从福建某奶牛场200头进口荷斯坦牛采血提取牛血液DNA,根据已知牛染色体上CD18编码基因序列383位基由A变为G而引起牛白细胞黏附缺陷症（BLAD）设计特异性野生型和突变型引物,建立液相基因芯片检测方法用于牛白细胞黏附缺陷症（BLAD）的检测,结果检出2头母牛为BLAD携带者,检出率为0．67％,没有发现患病牛。结果证明建立的液相基因芯片检测方法是一种敏感性和特异性很高的筛选奶牛BLAD有害基因的新方法     

北京地区荷斯坦牛白细胞黏附缺陷症的检测分析

牛白细胞黏附缺陷症(BLAD)是由常染色体上CD18基因单碱基突变(A→G)引起的隐性遗传疾病,患病牛只机体免疫力降低、易患病,影响其生产性能的表现。本研究采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应方法(PCR-RFLP),检测了北京502头荷斯坦母牛CD18编码基因第二外显子的多态性。结果表明,3个奶牛场中共检测到2种基因型——AA和AG,未检测到GG基因型。检测群体BLAD基因携带率为3.1%,说明北京地区规模化奶牛场使用的公牛冻精中BLAD基因没有得到彻底净化,导致母牛群体中BLAD基因携带率在3.0%以上。在奶牛育种和生产中,应有计划的淘汰携带BLAD基因的个体,净化京郊荷斯坦奶牛群体。     

牛白细胞黏附缺陷病等位基因频率分析

为了解荷斯坦奶牛群中成母牛白细胞黏附缺陷病情况,抽取1 000头牛血样,采用RT-PCR方法对血样进行分析,并用TaqⅠ内切酶对RT-PCR产物进行消化,再用1.2%琼脂糖凝胶分析Taq Ⅰ限制性位点酶切片段.结果表明:1 000头荷斯坦奶牛中有19头BLAD基因携带者,1头BLAD基因纯合个体;BLAD基因携带者和纯合个体所占的比率分别为1.9%和0.1%;无BLAD和携带BLAD的基因频率分别为0.989 5和0.010 5.     

奶牛白细胞黏附缺陷症焦磷酸测序检测方法的建立及应用

奶牛白细胞黏附缺陷症（bovine leukocyte adhesion deficiency,BLAD）是一种常染色体隐性、致死性、遗传性疾病,严重影响奶牛生产性能和奶牛场的经济效益。为建立快速可靠的BLAD检测方法,本试验根据GenBank中BLAD CD18序列设计引物,PCR扩增后纯化产物,构建A/A、A/G和G/G 3种基因型标准质粒。用标准质粒建立焦磷酸测序检测方法。用建立的方法检测奶牛血液样品,其结果与Sanger测序结果进行比较,分析和验证检测结果的准确性。用建立的方法对300份奶牛血液样品进行检测,结果显示样品中A/A基因型检出294例,占总体比例的98%;A/G基因型检出6例,占总体比例的2%。随机抽取30份已检测样品进行Sanger测序,结果显示与焦磷酸测序法结果一致。本试验结果表明焦磷酸测序法检测BLAD,具有特异、灵敏、快速的特点,其检测结果准确可靠,适合于试剂盒的研发及应用于BLAD的临床诊断。     

禽流感检测方法研究进展

禽流感是一种可以感染多种禽类和人的烈性传染病，其病毒亚型众多，宿主范围广，病毒容易发生变异和重组，该病毒可以突破种间障碍感染人，具有重要的公共卫生学意义。近年来禽流感的发不仅给养禽业造成了毁灭性打击，而且该病的快速诊断与防治也提到了前所未有的高度。文章就近年来禽流感检测方法的发展概况进行了简单的综述，主要包括传统的病毒分离与鉴定、血清学诊断方法，以及为了满足快速检测的需要所发展起来的分子生物学检测方法。     

三聚氰胺检测方法的研究进展

全面分析和比较了目前三聚氰胺的检测方法,主要包括色谱检测法（高效液相色谱法、液相色谱—质谱/质谱法、气相色谱—质谱联用法和超高效液相色谱—质谱联用法）、离子色谱法、光谱检测法（拉曼光谱法、红外光谱法、近红外线吸收检测法和核磁共振法）、容量分析法（苦味酸法、升华法、电位滴定法、毛细管电泳检测法和试剂盒检测法）及其他检测方法（比色法、纳米粒子颜色法、化学发光法和浊度法）。     

禽流感检测方法研究进展

禽流感是一种可以感染多种禽类和人的烈性传染病,其病毒亚型众多,宿主范围广,病毒容易发生变异和重组,该病毒可以突破种间障碍感染人,具有重要的公共卫生学意义.近年来禽流感的发不仅给养禽业造成了毁灭性打击,而且该病的快速诊断与防治也提到了前所未有的高度.文章就近年来禽流感检测方法的发展概况进行了简单的综述,主要包括传统的病毒分离与鉴定、血清学诊断方法,以及为了满足快速检测的需要所发展起来的分子生物学检测方法.     

牛白细胞粘附缺陷病的研究进展

牛白细胞粘附缺陷病 ( bovine leukocyte adhesion de-ficiency,BLAD)是一种牛的造血系统遗传性疾病。以严重的重复性感染、缺少脓液形成、损伤愈合延迟和白细胞增多症为特征 ,实质是白细胞粘附及相关的功能包括吞噬和趋化作用缺陷 [1 ,2 ] 。 1 974年 ,世界上首次报道了人发生的一种容易感染、白细胞增生和趋化、吞噬功能缺陷的疾病 ,1 984年确定其病因 ,它是一种与白细胞粘附有关的细胞表面糖蛋白——整合素表达缺陷所致 ,并定名为白细胞粘附缺陷病 ( leukocyte adhesion deficiency,LAD) [3 ]。近年来 ,在病人中又发现了一种以反复感…     

北京地区荷斯坦牛BLAD遗传缺陷基因的分子筛查

牛白细胞黏附缺陷症(BLAD)是由常染色体上CD18基因单碱基突变(A→G)引起的隐性遗传疾病,隐性基因纯合时导致白细胞表面的β2整合素表达明显减少或缺乏而引起临床发病,患病牛的主要特征是机体免疫力降低、易患病,从而影响生产性能的表现,可严重影响奶牛场的经济效益。本研究利用PCR-SSCP方法对北京地区246头公牛样本和409头母牛样本进行了检测分析,研究结果表明,在所检测的样本中,荷斯坦种公牛(含后备公牛)和母牛BLAD携带率分别为0.81%和3.91%,BLAD基因频率分别为0.21%和1.95%,并通过系谱追踪发现,BLAD遗传缺陷可追溯到美国一头非常优秀的公牛Osborndale Ivanhoe(USA.1189870,BL),其后代在我国有一定的影响。通过剔除BLAD携带者公牛可以有效控制该遗传缺陷的传播,但是,我国部分BLAD携带者公牛冻精依然在商业化使用,所以,有效监控BLAD携带者在奶牛群中的状况对BLAD剔除计划是有益的。     

牛传染性鼻气管炎诊断方法研究进展

进行牛传染性鼻气管炎分子流行病学调查时,首先通过临床症状观察进行初诊,然后再进行实验室确诊。目前实验室诊断主要包括病原学诊断和血清学诊断。病原学诊断方法包括包涵体检查、病毒分离和病毒核酸检测;血清学诊断方法包括中和试验、琼脂扩散试验、间接血凝试验、酶联免疫吸附试验和变态反应。有时还要进行鉴别诊断,鉴别诊断主要有单克隆抗体法、鉴别PCR等。牛传染性鼻气管炎在世界范围内流行,给全球的养牛业造成了很大的影响。论文综述了牛传染性鼻气管炎诊断方法研究进展,为预防和消除该病提供参考。     

中国荷斯坦种公牛BLAD遗传缺陷的分子检测及系谱分析

本试验运用限制性片段长度多态性聚合酶链式反应（RFLP-PCR）方法,检测我国荷斯坦种公牛白细胞粘附缺陷（bovine leukocyte adhesion deficiency,BLAD）基因的携带频率。共检测了来自全国14个公牛站的587头种公牛,发现BLAD携带者8头,携带率为1.36%。对现有公牛系谱信息分析显示,携带者公牛来自美国、加拿大和中国,其中6头携带者公牛可以追溯到共同祖先Osborndale Ivanhoe。此外,本研究还对我国荷斯坦牛遗传缺陷的控制和携带者公牛的利用提出建议。     

鸭疫里默氏菌疫苗及其效力检测方法研究进展

简要概括了鸭体液和细胞免疫的特点,并对鸭疫里默氏菌疫苗及其效力检测方法的研究进展情况进行了概述。     

隐孢子虫检测方法研究进展

隐孢子虫是一种能引起人、畜和野生动物共同感染的原虫.由于隐孢子虫卵囊很小,在光镜下观察缺乏明显的特征,检测比较困难,为寻找高效的检测方法,国内外学者在隐孢子虫检测方面进行了大量的研究.文章综述了近年来用于检测隐孢子虫的主要方法,并初步分析了各种方法的 优、缺点.     

牛腺病毒载体研究进展

动物腺病毒与人腺病毒具有相似基因组结构 ,用其构建的动物腺病毒载体可将外源基因转移到人体细胞内表达 ,却又不能在其中复制繁殖 ,且人体内不存在针对它们的免疫应答 ,有望代替人腺病毒作为基因治疗和基因免疫的载体 ,目前已构建了多种动物腺病毒载体。文章综述了近年来牛腺病毒载体构建的一些研究进展。