预防猪流行性腹泻病毒间接传播的生物安全措施评估

正本研究采取了不同的生物安全措施利用可控的试验条件来评估由生物安全防护措施来减少猪流行性腹泻病毒(PEDV)传播的有效性,这些结果表明,通过污染的个人防护用品导致的PEDV间接传播较为迅速,在养猪生产体系实施生物安全防护措施,可以有效地降低猪群之间PEDV传播的风险。猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrheavirus,PED)是一种高度传染性疾病,可导致猪严重腹泻。猪流行性腹泻病毒(PEDV)可以在已     

猪流行性腹泻病毒N蛋白杆状病毒表达与间接ELISA方法建立

为了检测猪群中猪流行性腹泻(PED)抗体水平,用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,构建含有PEDV N基因的重组杆状病毒r Bac-PEDV N并在昆虫细胞中获得表达。用纯化的重组N蛋白作为包被抗原,建立了检测PEDV抗体的间接酶联免疫吸附试验(ELISA)方法。与Western Blot的符合率为91.3%,说明该方法适用于PED的临床诊断。     

猪流行性腹泻病毒一步法RT-PCR检测方法的建立与初步应用

为建立一种快速检测猪流行性腹泻病毒(Porcine Epidemic Diarrhea Virus,PEDV)病原的方法,根据GenBenk上的猪流行性腹泻病毒N基因序列,设计合成一对引物,建立了检测PEDV的一步法RT-PCR方法,并对其特异性、灵敏性及重复性进行了研究。结果表明:建立的一步法RT-PCR方法具有较好的特异性、灵敏性及重复性,最低可检测出约1pg PEDV的RNA。该方法为PEDV的病原检测及其分子流行病学调查提供了有效的诊断方法,可用于猪流行性腹泻的早期确诊和病毒鉴定。     

猪流行性腹泻的诊断与防治概述

正猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的猪的一种高度接触性肠道传染病,由于该病的流行对养猪业造成了巨大的经济损失。因此,本文从猪流行性腹泻的诊断、预防和治疗三个方面进行综述,为养殖场猪流行性腹泻的防控提供参考。猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引     

检测猪流行性腹泻病毒的R-PCR方法的建立

根据猪流行性腹泻病毒 (PEDV)的N基因自行设计和合成了一对可扩增长度为 641bp目的片段的引物 ,成功地建立了检测的猪流行性腹泻病毒的RT PCR方法。对猪轮状病毒 (PRV)、猪传染性胃肠炎病毒 (TGEV)的RT PCR检测结果均呈阴性。对PEDV JS株的RT PCR产物的序列分析表明 ,与CV777株的同源性为 97 3 %。     

猪流行性腹泻病毒结构蛋白及其在侵染宿主细胞中的作用

猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)是猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea, PED)的病原,PEDV可导致猪的急性腹泻、脱水甚至死亡。如今PEDV已成为引起猪腹泻最常见病原体之一,给我国养猪行业造成极大的经济损失。PEDV的四种结构蛋白在病毒结构、感染宿主、复制和组装过程中发挥着重要功能,同时在逃避宿主天然免疫方面也起着重要作用。阐述了PEDV四种结构蛋白Spike(S)蛋白、Membrane(M)蛋白、Nucleocapsid(N)蛋白、Envelope(E)蛋白在病毒感染中与宿主细胞的互作机制,为PEDV防控以及疫苗研发等提供理论研究基础。     

猪流行腹泻病毒N蛋白表达与PPA-ELISA抗体检测方法的建立

为建立一种快速的猪流行性腹泻病毒抗体检测方法,本研究参照已发表的猪流行性腹泻病毒(PEDV)N基因序列,RT-PCR扩增了长约1 300 bp的N基因片段,连接pET30a表达载体后获得了以可溶性形式表达的重组N蛋白.重组蛋白纯化后,经免疫印迹检测证明具有良好的抗原性和特异性.以该蛋白作为诊断抗原,建立检测PEDV抗体的PPA-ELISA诊断方法.该诊断方法具有良好的敏感性、特异性和重复性,为PEDV的快速诊断、免疫猪群抗体监测和PEDV流行病学调查提供了一种快速、简便的血清学诊断方法.     

PEDV流行株重组截短N蛋白间接ELISA检测方法的建立

为了建立猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)抗体检测的间接ELISA方法,本研究以纯化的原核表达的PEDV截短N蛋白作为包被抗原,建立了PEDV抗体检测的间接ELISA方法,将该方法命名为rnPED-ELISA。该抗原不与其他常见的7种猪病的阳性血清发生交叉反应,批内和批间重复性试验的变异系数均小于13%;rnPED-ELISA相对于血清中和试验(SN)试验的敏感性为93.33%,特异性为90.00%;rnPED-ELISA与TSZ全病毒抗体检测试剂盒的符合率达91.67%。采用rnPED-ELISA方法检测200份临床样品,PEDV抗体阳性检出率为69.5%。本试验建立的rnPED-ELISA方法具有良好的敏感性和特异性,可为免疫猪群抗体监测和猪流行性腹泻流行病学调查提供一种快速、简便的血清学诊断方法。     

猪流行性腹泻研究概况

<正>猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea vims,PEDV)引起的一种高度接触性肠道传染病。PEDV的感染可引起腹泻、呕吐、脱水以及哺乳仔猪的高死亡率。PEDV属于冠状病毒科冠状病毒属,基因组为线形单股正链RNA病毒。PEDV基因组编码4种结构蛋白:S蛋白、E蛋白、M蛋白和N蛋白,ORF3编码一个未知功能且具有多态性的     

抗猪流行性腹泻病毒制剂研究进展

<正>猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起猪的一种急性肠道传染病。PEDV属于α冠状病毒,单股正链RNA病毒,分别编码4个结构蛋白,即纤突蛋白(S)、小膜蛋白(E)、膜糖蛋白(M)和核衣壳蛋白(N),以及15个非结构蛋白(Nsp1-Nsp15)和ORF3~([1])。PEDV靶向     

犬瘟热病毒RT-PCR检测方法的建立

根据GenBank上发表的犬瘟热病毒融合蛋白F基因序列,设计合成了1对寡聚核苷酸引物,扩增大小为337bp的目的片段,建立犬瘟热病毒F基因的RT-PCR检测方法。结果表明,该方法具有很强的特异性和很高的敏感性,可作为犬瘟热临床快速诊断的一种方法。     

牛病毒性腹泻病毒一步法RT-PCR检测方法的建立与应用

为建立一种快速检测牛病毒性腹泻病毒病原的方法,本研究根据GenBank上登录的牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)基因组序列,设计1对引物,建立了检测BVDV的一步法RT-PCR方法。该方法对牛传染性鼻气管炎病毒、猪瘟病毒、牛副流感病毒3型的扩增结果均为阴性,检测的敏感性达1 ng RNA。该一步法RT-PCR方法具有良好的特异性、敏感性、重复性,可以准确快速检测出极低含量的BVDV,将为BVDV的病原检测及分子流行病学调查等提供一种快速、灵敏、特异、准确的分子生物学检测方法。     

衣原体单克隆抗体在羊血清诊断上的应用

采用淋巴细胞杂交瘤技术，研制出的抗衣原体单克隆抗体，应用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法，对本地区所采用的698份羊血清进行检测，羊血清阳性检出率为22．06％，选择50份羊血清用已建立的检测衣原体抗体ELISA方法与传统的间接血凝试验(IHA)进行比较，其敏感性高。羊血清ELISA阳性检出率为26％，IHA为22％，前者比IHA高出4个百分点。     

Relation of serological- and CPE- classification of porcine enteroviruses to the classification by immunoperoxidase (IP) staining, and observation of CPE by IP staining method.

Characteristics of CPE produced by porcine enteroviruses (PEV) were examined by Immunoperoxidase (IP) staining method. Viral antigens were detected earlier than appearance of CPE. Distinctive characteristics of the three CPE types were clearly showed by the method. In cross reactions by IP staining, the titers of the staining were high (1:6,400 to 1:25,600), even though neutralizing titers of PEV with CPE II or III were low (1:200 to 1:400). The very close relationship was detected between PEV with the same CPE type, but the very low relationships were detected between PEV with the different CPE type. The relationships in CPE I group were various. The results by IP staining were more relative to CPE type than the serotype. Thus, IP staining is one method to classify PEV clearly.     

动物医学试验中参试动物数目的估计

应用数理统计方法，结合动物医学试验设计中关于动物数目的确定进行讨论，分别得出一个总体和两个总体对总体率、总体均值等指标研究时必需的参试动物数目的估计公式。其方法和结果对从事动物医学研究的专业人员有着重要的参考价值和指导意义。     

猪瘟病毒RT—LAMP实验诊断初报

为了探索猪瘟病毒诊断的新方法,本研究采用环介导等温扩增法（RT-LAMP）与RT—PCR方法分别对随即采样的80份猪瘟疑似病料进行猪瘟病毒实验室诊断及对比研究。结果表明RT-LAMP与RT—PCR检测得出的阳性率分别为38．75％和36．25％。RT—LAMP检测方法更加灵敏、特异、快速,可用来检测猪瘟病毒,在等温条件下进行,不需要复杂的仪器,操作简单,整个扩增反应可在1h内完成,为临床检测猪瘟病毒提供了一个快速简便的分子生物学方法。     

Efficacy of repeated trickle applications of oxalic acid in syrup for varroosis control in Apis mellifera: influence of meteorological conditions and presence of brood

Oxalic acid field trails for the control of varroosis (Varroa destructor) were carried out in an apiary located on the Mt. Imittos (Attica, Greece). The colonies received four successive applications (approximately one every 16 days) with 4.2% oxalic acid (OA) and 60% sugar solution by trickling method with two alternative types of syringes (an automatic self-filling dosing and a single-use) from the broodright to broodless period. The results indicate that the first three applications (from 6th October to 25th November-broodright period) resulted in 65.3% cumulative mite mortality, while only the last application (after the 26th November-broodless period) resulted in 77.3% mite mortality. Very low outern temperatures reduce to the minimum the bee movability, which may result into a slower development of the OA efficacy. No poor colony growth or queen loss were observed even if the bee colonies were received the four successive OA applications with the last one taken place at a very low outern temperature (6.2 degrees C). The trickling method using an automatic-filling syringe seems to be a very quick way for applying oxalic acid in large apiaries (approximately 150hives/h).     

鸭坦布苏病毒RT-PCR诊断方法的建立与应用

为建立一种快速的鸭坦布苏病毒病原检测方法,本研究根据GenBank上登录的鸭坦布苏病毒(duck Tembusu virus,DTMUV)基因组序列,设计1对引物,建立了检测DTMUV的RT-PCR诊断方法。该方法对Ⅰ型鸭肝炎病毒、新城疫病毒、减蛋综合征病毒、鸭肠炎病毒等常见鸭病的扩增结果均为阴性,检测的敏感性达1 ng RNA。该RT-PCR方法具有良好的特异性、敏感性、重复性,可以准确快速检测出极低含量的DTMUV,将为DTMUV的病原检测及分子流行病学调查等提供一种快速、灵敏、特异、准确的分子生物学检测方法。     

Transgenic cattle constitute a breakthrough in production of innovative medicine. From milk to medicine

The continuously increasing demand for biomolecules, e.g. human proteins, for applications in human health care, is one of the main driving forces for the development of safe, large-scale production systems. One very promising approach is the production of biomolecules in the milk of transgenic cattle. By using nuclear transfer technology, transgenic cattle can be generated in a very safe and efficient manner, thereby offering a significant time reduction when compared to conventional breeding methods. As a result, that the transgenic cattle platform offers an efficient, safe and cost-effective method for producing large amounts of biopharmaceuticals, which is essential to the development of innovative health care products.     

小鹅瘟PCR诊断方法的建立和初步应用

根据发表的鹅细小病毒B株VP3基因序列 ,设计合成了 1对寡聚核苷酸引物。以国内分离的小鹅瘟病毒为摸板 ,筛选了 (PCR)最佳反应条件 ,并进行了敏感性、特异性和初步应用试验。结果表明 ,在 4 0 μL体积中 ,PCR最佳系统组成为 2uTaq酶、0 5mol/LdNTP和 2 0 pmol引物 ;最佳反应参数为 96℃变性 4 0s ,5 4℃退火 1min ,72℃延伸 1min ,30个循环。本方法可检出 2 5× 10 -1 5EID50 小鹅瘟病毒 ,并且仅能从小鹅瘟病毒的鹅胚培养物中扩增出与设计值大小相同的 375bp核苷酸片断 ,对照病毒扩增结果为阴性。通过对 6份临床病料的检查 ,2份呈阳性 ,其中 1份来自有典型小鹅瘟症状的雏鹅 ,1份来自无典型小鹅瘟症状的雏鹅。由此说明 ,本试验所建立的诊断小鹅瘟的PCR方法具有潜在的临床应用价值