Design and evolution of new catalytic activity with an existing protein scaffold

The design of enzymes with new functions and properties has long been a goal in protein engineering. Here, we report a strategy to change the catalytic activity of an existing protein scaffold. This was achieved by simultaneous incorporation and adjustment of functional elements through insertion, deletion, and substitution of several active site loops, followed by point mutations to fine-tune the activity. Using this approach, we were able to introduce beta-lactamase activity into the alphabeta/betaalpha metallohydrolase scaffold of glyoxalase II. The resulting enzyme, evMBL8 (evolved metallo beta-lactamase 8), completely lost its original activity and, instead, catalyzed the hydrolysis of cefotaxime with a (kcat/Km)app of 1.8 x 10(2) (mole/liter)(-1) second(-1), thus increasing resistance to Escherichia coli growth on cefotaxime by a factor of about 100.     

Photoproduction of proton gradients with pi-stacked fluorophore scaffolds in lipid bilayers

Rigid p-octiphenyl rods were used to create helical tetrameric pi-stacks of blue, red-fluorescent naphthalene diimides that can span lipid bilayer membranes. In lipid vesicles containing quinone as electron acceptors and surrounded by ethylenediaminetetraacetic acid as hole acceptors, transmembrane proton gradients arose through quinone reduction upon excitation with visible light. Quantitative ultrafast and relatively long-lived charge separation was confirmed as the origin of photosynthetic activity by femtosecond fluorescence and transient absorption spectroscopy. Supramolecular self-organization was essential in that photoactivity was lost upon rod shortening (from p-octiphenyl to biphenyl) and chromophore expansion (from naphthalene diimide to perylene diimide). Ligand intercalation transformed the photoactive scaffolds into ion channels.     

高效液相色谱搭载可变波长检测器测定桃果肉中糖组分

本试验建立了一种无需衍生反应即可实现高效液相色谱搭载可变波长检测器(HPLC-VWD)直接检测桃果肉中蔗糖、葡萄糖、果糖和山梨醇含量的方法,并对该方法进行了评价。对HPLC-VWD和高效液相色谱搭载示差折光检测器(HPLC-RID)测得不同桃品种中糖组分进行比较分析;并利用建立的HPLC-VWD法测定了葡萄、苹果、粉蕉和梨果肉中糖组分。结果显示,本研究建立的HPLC-VWD法可对糖组分进行有效分离和检测,在相应的范围内线性关系良好,相对标准偏差为0.53%~2.71%,回收率为92%~103%;HPLC-VWD和HPLC-RID法测得结果没有显著差异。     

高效液相色谱法-荧光检测器同时检测龙眼中多菌灵和噻菌灵残留

建立了同时检测龙眼中多菌灵和噻菌灵残留的高效液相色谱方法。样品经乙腈提取,硅胶柱净化,然后采用高效液相色谱法-荧光检测器测定,外标法定量。对样品前处理和色谱分离条件进行了研究和优化。两种杀菌剂在0.01μg/mL～2.00μg/mL范围内线性良好,相关系数分别为0.9990和0.9996。添加两个浓度水平(0.1、0.4μg/mL)两种杀菌剂在龙眼中的回收率均在95.7%～96.2%之间,相对标准偏差不大于2%。方法简便、快速、净化效果较好,可同时满足龙眼中两种杀菌剂残留的检验工作需要。     

地方本科高等学校学科建设中存在的问题与对策

本文从分析地方本科高等学校开展学科建设的意义着手,分析了地方本科高等学校学科建设存在的问题及其特殊性,进而提出了地方本科高等学校开展学科建设要坚持的4项策略：重视学科管理,坚持以管促建;突出重点学科,坚持以点带面;造就学科梯队,坚持以人为本;加大经费投入,坚持以研促发。     

用高效液相色谱法检测底泥环境中孔雀石绿的方法

研究了用高效液相荧光法检测养殖池塘底泥中孔雀石绿的方法,比较了不同提取液对孔雀石绿的提取效果,针对相应的提取液用正交试验建立最佳提取方案,采用硼氢化钾将孔雀石绿还原成隐色孔雀石绿后用高效液相色谱荧光检测器进行定量分析。结果表明:前处理中采用甲醇和二氯甲烷混合提取比较简单,最适宜提取方案是提取液用量为20 mL,震荡提取5 m in,重复提取2次;硼氢化钾还原效果良好,用量2 mg即能将该体系中的孔雀石绿完全还原。本方法在0.5⁸00 ng/mL范围内具有很好的线性,孔雀石绿总量最低检出限为0.36μg/kg。孔雀石绿和隐色孔雀石绿的加标回收率分别为82.4%800 ng/mL范围内具有很好的线性,孔雀石绿总量最低检出限为0.36μg/kg。孔雀石绿和隐色孔雀石绿的加标回收率分别为82.4%⁸4.8%、88.1%84.8%、88.1%⁹2.3%,相对标准偏差为3.16%92.3%,相对标准偏差为3.16%⁴.74%、1.91%4.74%、1.91%⁴.11%。     

用高效液相色谱法检测底泥环境中孔雀石绿的方法

研究了用高效液相荧光法检测养殖池塘底泥中孔雀石绿的方法,比较了不同提取液对孔雀石绿的提取效果,针对相应的提取液用正交试验建立最佳提取方案,采用硼氢化钾将孔雀石绿还原成隐色孔雀石绿后用高效液相色谱荧光检测器进行定量分析。结果表明：前处理中采用甲醇和二氯甲烷混合提取比较简单,最适宜提取方案是提取液用量为20mL,震荡提取5min,重复提取2次;硼氢化钾还原效果良好,用量2mg即能将该体系中的孔雀石绿完全还原。本方法在0．5—800ng／mL范围内具有很好的线性,孔雀石绿总量最低检出限为0．36μg/kg。孔雀石绿和隐色孔雀石绿的加标回收率分别为82．4％～84．8％、88．1％～92．3％,相对标准偏差为3．16％～4．74％、1．91％～4．11％。     

唑草酮在水稻和稻田中的气相色谱检测

为建立水稻和稻田中除草剂唑草酮的气相色谱检测方法,开展试验.糙米、稻壳、水稻茎秆和土壤中的唑草酮残留物采用丙酮/水提取,石油醚萃取,弗罗里硅土柱净化后,乙酸乙酯洗脱,正己烷定容后采用气相色谱检测;稻田水样品经过滤后石油醚萃取,弗罗里硅土柱净化后,乙酸乙酯洗脱,正己烷定容后采用气相色谱检测.所有样品均采用外标法定量.结果...     

RP-HPLC-PAD法测定薄荷中乌索酸和齐墩果酸的含量

建立反相高效液相色谱法测定薄荷中乌索酸和齐墩果酸的含量。采用Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)和二极管阵列检测器,流动相为甲醇∶水∶磷酸(90∶10∶0.2),流速0.8 mL.min-1,柱温28℃,检测波长210 nm。乌索酸进样量0.67-6.03μg(r=0.999 62),齐墩果酸进样量0.66-5.94μg(r=0.999 65),具有良好的线性关系。乌索酸和齐墩果酸平均回收率分别为97.6%、99.8%,RSD分别为1.6%、2.1%。方法简便、准确,重现性好,线性范围宽,可用于同时测定薄荷中乌索酸和齐墩果酸的含量。     

N_2热处理马尾松木材的耐腐性能

以氮气(N2)为介质,采用均匀设计法对人工林马尾松木材进行热处理,探讨处理工艺对木材耐腐性能及物理力学性质的影响.结果表明:经过N2热处理的木材,尺寸稳定性能明显提高,密度、顺纹抗压强度略有下降.处理材腐朽后质量损失率为16.4%,耐腐性能达到Ⅱ级.SEM分析表明:处理材的结构基本完好,腐朽程度较素材轻得多,说明木材的耐腐性能明显提高.马尾松木材N2热处理的较佳工艺条件为:处理温度220℃,保温时间4 h,升温速率15℃·min-1.     

我国棉花抗黄萎病育种研究进展及问题

本文通过对棉花黄萎病抗性育种研究的评述和分析,探讨抗病育种工作急待解决的问题,以提高育种工作成效.     

变波长高效液相色谱法同时检测葡萄酒中4种合成色素的研究

【目的】建立一种可同时测定葡萄酒中不允许添加的4种人工合成着色剂(柠檬黄、日落黄、胭脂红和苋菜红)的变波长高效液相色谱检验方法,为葡萄酒中不允许添加人工合成着色剂的检测提供参考。【方法】将葡萄酒样品分别用液-液萃取法、聚酰胺吸附法、直接进样法进行前处理,对变波长高效液相色谱法的检测条件进行优化,并采用该方法进行精密度和加标回收率试验。【结果】葡萄酒样品采用聚酰胺吸附法进行前处理,优化的色谱条件为:Agilent ZORBAX SB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)反相色谱柱,流动相A液为甲醇,流动相B液为醋酸铵溶液(0.02 mol/L),流速为1.0 mL/min,梯度洗脱,变波长检测葡萄酒样品中柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄的检测波长分别为430 nm(0~2.2 min),230 nm(2.50~3.95 min),480 nm(3.95~5.00 min)和480 nm(3.95~5.00 min),柱温35℃,检测时间为5 min,进样量为20μL。对葡萄酒样进行的精密度及加标试验表明,以上4种人工色素的相对标准偏差(RSD)为0.73%~1.51%,回收率为87.83%~107.42%。【结论】建立了一种能同时检测葡萄酒中4种人工合成色素的变波长高效液相色谱法,该方法简单快速,精确可靠,重复性好。     

中国特色农业智库建设要求、存在问题及政策建议

随着乡村振兴战略的全面实施和城镇化的不断推进,建设中国特色农业智库迫在眉睫.中国农业智库曾为中国"三农"事业做出巨大贡献.在新时代,面对新的挑战,中国的农业发展对中国特色农业智库建设提出了更高的要求.本文认为中国农业智库具有政治性、系统性、实践性、独特性和多样性等特征,并分析了目前中国农业智库存在高度依附于政府、市场机制不完善、社会影响力较小等问题,从人才培养、合作交流和战略把控等方面给出政策建议.     

气相色谱-电子捕获检测器检测白菜中有机磷、苯基吡唑、烟碱类农药残留

建立了白菜中10种属于有机磷、苯基吡唑和烟碱等不同类别的农药残留的气相色谱-电子捕获检测器检测方法。样品用乙腈提取,经石墨化碳黑-氨基固相萃取柱净化,旋转蒸发浓缩定容后,用基质标准溶液进行外标法校正定量。10种农药在0.01～1.0μg/mL浓度范围内具有良好的线性关系;本方法回收率为88.6%～115.3%,变异系数在1.2%～6.4%之间;方法检出限为0.00007～0.001 mg/kg。此方法准确、可靠、灵敏度高,可以满足日常蔬菜农残检测的要求,同时可为农药残留检测提供一种新思路。     

Detection of an antigen associated with acute leukemia

Antiserums to a purified cell membrane component from a Burkitt's lymphoma tissue culture cell line were produced in rabbits. These antiserums were cytotoxic to peripheral white blood cells from 8 of 15 patients with acute leukemia and 5 of 41 relatives, but not to peripheral white blood cells from leukemia patients in clinical remission or from normal individuals. These antiserums appear to be detecting an acute leukemia associated antigen or antigens.     

1例老龄犬子宫蓄脓的手术治疗

[目的]对1例子宫蓄脓的老龄犬进行手术治疗。[方法]通过子宫卵巢完全切除术,对1例子宫蓄脓的老龄犬进行治疗。[结果]老龄犬进行手术治疗后,生命体征稳定。术前要考虑犬只的生理状态和血压及血糖含量,术中注意监护,术后注意保温及给与抗生素治疗并防止犬只撕咬伤口。[结论]子宫切除术可作为犬子宫蓄脓的治疗方法之一。     

Demonstration of X-ray Holography with an X-ray Laser

An x-ray hologram was made by means of an x-ray laser and a laser-quality near normal incidence x-ray mirror. The high brightness and large coherence lengths of x-ray lasers now offer the potential for in vitro three-dimensional high-resolution holographic images of dynamically varying biological microstructures.