催产素免疫反应神经元在鸡下丘脑的定位——PAP法研究

应用免疫组化PAP法(非标记抗体过氧化物酶-抗过氧化物酶法)研究了鸡下丘脑催产素(Oxytocin,OT)免疫反应阳性神经元的分布.结果,OT阳性神经元存在于下丘脑室旁核各亚核、视前室旁核、视上核、视前大细胞核、下丘脑外侧核、室周核、室周弓状核,在下丘脑背侧区、视前外侧区和丘脑背外侧核也有零星的OT阳性神经元,视上背侧交叉和正中隆起存在大量的OT阳性纤维和纤维末梢.此外,还观察到视前区和下丘脑前部脑基底表面以及视上核的外缘有OT阳性神经元和纤维(?)达脑的外表,在第三脑室室管膜上存在OT阳性神经元,室旁核的OT阳性细胞突起伸入到室管膜上或突出于第三脑室室腔。结果表明,OT阳性神经元在下丘脑的分布较广泛,OT向脑脊液的释放可能是多途径的.     

鸡脑催乳素免疫反应神经元的分布

运用ＡＢＣ法观察了催乳素（ＰＲＬ）免疫反应神经元在鸡脑的分布。结果,ＰＲＬ阳性胞体主要分布在视交叉上核、视前室旁核、视上核、下丘脑室旁核、弓状核和伏隔核,旧纹状体、正中隆起存在大量阳性纤维末梢,在侧脑室腹侧的室管膜和脑基底神经胶质板上也存在ＰＲＬ阳性神经元。视前室旁核、视交叉上核、下丘脑室旁核、弓状核等核团内的ＰＲＬ阳性神经元有突起向第三脑室投射,伏隔核内及侧脑室室管膜上的ＰＲＬ阳性神经元有突起伸至侧脑室,视上核的ＰＲＬ阳性神经元也有突起投射至脑基底神经胶质板,表明鸡脑内的ＰＲＬ可以释放入脑室系统,参与调节脑－脑脊液神经体液回路。     

LHRH神经元在奶山羊下丘脑和隔区的分布-ABC法研究

本文应用免疫组化ABC法来研究三头成年雌性奶山羊的LHRH核周的及其神经纤维在下丘脑及隔区的分布。结果表明:LHRH核周体形态不规则,有突起,胞体和胞突内充满棕黑色的免疫反应颗粒。核周体主要分布在;(1)嗅脑隔区内由隔三角核、隔内侧核、视前正中核、视前内侧核、视前外侧核、斜角带核、前联合核构成的一条背腹走向的疏松细胞带。(2)由视前交叉上核、视前室周核、视上核、腹内侧核、腹外侧核、弓状核构成的一条斜向于正中隆起的细胞带。每头羊在以上两个细胞带内可查到112～173个LHRH核周体。 LHRH神经纤维呈明显的串珠状,长短与粗细均不一致,除了在上述各核团内有不同程度的分布外,还在正中隆起、血管终板器、灰结节、第三脑室室周均有较多的分布。此外在血管和脑室附近还可见到神经纤维终枝的分布。     

北京鸭下丘脑与摄食行为的关系 Ⅱ.5-羟色胺样神经元在下丘脑的分布PAP法研究

用免疫组化ＰＡＰ法,观察了经秋水仙素预处理的北京鸭下丘脑内５－羟色胺（５－ＨＴ）样神经元的分布。结果,５－ＨＴ样神经元仅散在分布于下丘脑室周器（ｐａｒａｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒｏｒｇａｎ,ＰＶＯ）内,下丘脑室周器腹侧部的５－ＨＴ样神经元数量多于背侧部;阳性反应细胞体呈多角形、椭圆形或棱形,常聚集在血管周围,有突起伸向第Ⅲ脑室内表面。推测北京鸭下丘脑室周器存在含５－ＨＴ的触液神经元。     

应用免疫组化PAP法检测兔出血症病毒抗原的动态分布

应用免疫组化PAP法检测了人工感染成年患兔、30～40日龄患兔以及自然感染患兔体内兔出血症病毒（RHDV）抗原的动态分布。结果表明,在成年患兔的肝、肾、脾、胃、十二指肠、睾丸以及幼兔的肝、肾、脾中检出了RHDV抗原;无论在成年或幼龄患兔,RHDV抗原主要位于受侵害细胞胞浆中,少部分位于核中;在成年患兔,RHDV抗原阳性细胞的数量随病程发展而增加,而在幼龄患兔,这种增加趋势不明显。本文还分析了RHDV抗原在患兔体内的动态分布与病变形成之间的关系。     

强啡肽A1—13免疫反应神经元在鸡脑的定位：ABC法研究

取健康成鸡（星杂２８８）１０只，经秋水仙素处理，灌流固定后取脑，作冰冻连续切片，ＡＢＣ法显示，鸡脑强啡肽Ａ１－１３（ＤｙｎＡ１－１３）免疫反应神经元分布于端脑的上纹状体，新纹状体、旧纹状体、外纹状体、海马、旁嗅区和伏隔核；间脑的下丘脑外侧核、丘脑背内侧核后部、丘脑背外侧核后部，室旁核和视前大细胞核等；中脑和延髓的视峡核，中脑外侧核背侧部、峡核、视叶脑室室周灰质、螺旋外侧核、被盖背外侧核、三叉神经中     

不同饲粮蛋氨酸水平鸡血清对鸡下丘脑神经元NPY和AgRp mRNA表达的影响

试验研究饲喂不同水平蛋氨酸饲粮的鸡血清对鸡下丘脑NPY和AgRp mRNA表达的影响。3个处理组的鸡分别饲喂高、中、低3种水平蛋氨酸饲粮9周。结果表明:饲喂不同水平蛋氨酸饲粮鸡血清对鸡下丘脑NPY mRNA表达影响显著,其中公鸡低水平组极显著高于高水平组,中水平组显著高于高水平组,中水平与低水平组之间无显著性差异;母鸡低水平组显著高于中水平组,高水平组与中水平组无显著性差异。3个处理组之间公鸡下丘脑AgRp mRNA表达低水平组极显著高于高水平组,显著高于中水平组,高水平组与中水平组之间无显著性差异;母鸡与公鸡表达结果一致。饲喂不同水平蛋氨酸饲粮的鸡血清对鸡下丘脑神经元NPY和AgRp mRNA表达均有显著影响。     

强啡肽A_（1－13）免疫反应神经元在鸡脑的定位──ABC法研究

取健康成鸡（星杂２８８）１０只，经秋水仙素处理，灌流固定后取脑，作冰冻连续切片，ＡＢＣ法显示，鸡脑强啡肽Ａ１－１３（ＤｙｎＡ１－１３）免疫反应神经元分布于端脑的上纹状体、新纹状体、旧纹状体、外纹状体、海马、旁嗅区和伏隔核；间脑的下丘脑外侧核、丘脑背内侧核后部、丘脑背外侧核后部、室旁核和视前大细胞核等；中脑和延髓的视峡核、中脑外侧核背侧部、峡核、视叶脑室室周灰质、螺旋外侧核、被盖背外侧核、三叉神经中脑核、动眼神经核、中脑中央灰质、前庭核和延髓背侧网状核等。在侧脑室、第三脑室、中脑导水管和视叶脑室的室管膜上有阳性细胞和纤维分布，与脑脊液接触。结果表明，鸡脑ＤｙｎＡ１－１３阳性神经元分布十分广泛，提示ＤｙｎＡ１－１３可通过侧脑室、第三脑室、中脑导水管和视叶脑室释放入脑脊液。     

酶联免疫吸附法检测鸡肝肾中氯霉素残留的分析

试验用六种浓度的氯霉素标准品(0.025ng／mL,0.05ng／mL,0.1ng／mL,0.2ng／mL,0.5ng／mL,2ng/mL)做工作标准曲线,设计鸡肝脏、肾脏两个待测样品,同时分别加六种标准品于肝脏和肾脏中测定样品中氯霉素的回收率。试验结果表明:ELESA方法测定鸡组织中氯霉素的检出限为0.02ng／mL,样品中不同浓度的氯霉素标准品回收率均达84.8％以上。说明该方法灵敏、准确。     

精子介导法制备转基因鸡的研究

以LacZ基因为报告基因，构建载体质粒p-OV-β-Gal，转移到鸡早期胚胎内，对外源基因的整合及表达情况进行检测分析，为制备转基因鸡探索新的方法。采用脂质体介导法、精子介导法以及电激法相结合的方法将载体质粒p-OV-β-Gal转移到鸡早期胚胎内，进行转基因鸡研究，结果发现其外源基因整合阳性率为13.2%（7/53），表达阳性率为20.7%（11/53）。说明该方法可作为制备转基因鸡的有效方法。     

乌鸡小脑的解剖学及神经肽Y神经元分布的研究

为了探明乌鸡小脑的形态结构及其细胞构筑和神经肽Y免疫反应神经元在小脑内的分布情况 ,采用石蜡切片HE染色和免疫组化SABC染色技术 ,对 1 0只泰和乌鸡的小脑进行了研究 ,并与北京鸭、肉鸽、本地鸡及非洲鸵鸟等禽类的相关结构进行了比较。结果表明 :①泰和乌鸡小脑皮质分 3层 ,由外至内依次为分子层、蒲肯野氏细胞层和颗粒层 ;②小脑分 1 0叶 ,Ⅰ、Ⅱ和Ⅹ为单叶 ,其余都有2个～ 3个小叶 ;③小脑中央核的神经元数量稀少 ;④神经肽Y免疫阳性神经元主要存在小脑皮质的蒲肯野氏细胞层 ,分子层、颗粒层 ,在小脑中央核未见阳性反应细胞 ;⑤泰和乌鸡小脑的形态结构及其细胞构筑与其它家禽相似 ;⑥小脑内NPY阳性神经元在蒲肯野氏细胞层的分布与鸡、肉鸽、大鼠的大体相似 ,在小脑白质内与肉鸽的有一定差异     

神经肽Y免疫反应神经元在鸽小脑中的定位--SABC 法研究

采用石蜡切片和免疫组化SABC法（链霉亲合素-生物素-过氧化物酶连结法），对10只肉鸽小脑内神经肽Y免疫反应神经元的分布状况进行了研究．并与北京鸭、鸟鸡、肉鸡及大鼠的相关结果进行了比较。在光镜下观察分析了阳性神经元的分布状况．并用图像分析软件进行了半定量分析。结果显示：（1）小脑内神经肽Y（neuropeptide Y，NPY）阳性神经元主要存在于小脑皮质的蒲肯野氏细胞层，且以小叶顶端的蒲肯野氏细胞阳性明显；（2）小脑白质中央核可见到少量阳性神经元．不同于鸟鸡、肉鸡及大鼠；（3）分子层、颗粒层未见阳性反应细胞。表明：鸽小脑NPY阳性神经元的分布在皮质中与鸡、大鼠大体相似；在白质中与鸡、大鼠有差异。     

放射免疫法快速检测鸡肉中青霉素类药物残留

主要探讨应用Charm Ⅱ放射免疫分析方法检测鸡肉中青霉素类药物残留。确定制样和控制点设定的方法,评价了免疫反应体系的灵敏度和特异性,验证了青霉素类药物最大残留限量的检测稳定性。90min可出检测结果。     

鸡贫血病毒VP1和VP2蛋白在家蚕中的联合表达

将鸡贫血病毒VP1和VP2基因分别克隆入转换载体pBacPAK8中，获得重组转移质粒pBac-vp1和pBac-vp2。以上两质粒分别与CvnⅠ酶切线性化的亲本病毒Bm-BacPAK6DNA共转染家蚕细胞，通过蓝白斑筛选，纯化得到重组病毒Bm-vp1和Bm-vp2。PCR分析表明Vp1和Vp2基因已整合进杆状病毒基因组中。将Bm-vp1和Bm-vp2共感染5龄家蚕，通过表达产物免疫SPF鸡产生的抗血清与CAV感染的MDCC－MSB1细胞的间接荧光抗体分析，证明表达产物能诱导鸡产生相应的抗体。该研究表明，表达VP1和VP2蛋白的重组家蚕杆状病毒（recombinant BmNPV）是很有前途的CAV亚单位疫苗的生产系统。     

肉鸡组织中环丙沙星残留的微生物学检测方法的建立

以藤黄微球菌为工作菌,用杯碟法测定环丙沙星在鸡组织中的残留。结果表明,环丙沙星在磷酸盐缓冲液、肌肉、肝脏和肾脏中的最低检测限分别为0.025μg/mL,0.05μg/g和0.075μg/g。标准曲线的工作范围为0.025μg/mL~0.4μg/mL。在肌肉、肝脏和肾脏中分别添加环丙沙星0.100μg/g和0.150μg/g的回收率分别为73.68%±10.01%和76.25%±9.45%。表明该方法灵敏度和回收率高,操作简便,不需特殊设备,样品用量少,易于推广,适用于环丙沙星的定量分析。