马奶酒酵母菌生物学特性的研究

笔者从内蒙古锡林郭勒盟牧区马奶酒样品中分离到酵母菌10株。按照酵母菌鉴定的有关要求对其形态、培养、生理生化等生物学特性进行了研究。结果表明,在所得菌株中有8株属于酵母菌属。其中小椭圆酵母菌5株,意大利酵母菌1株,罗氏酵母菌1株．斯氏酵母菌1株。另外2株有待进一步研究确定。     

西农萨能奶山羊瘤胃产蛋白酶酵母菌的筛选研究

试验旨在从西农萨能奶山羊瘤胃液中分离出产蛋白酶的酵母菌株,并对其产酶能力进行测定。以蛋白酶的活性进行筛选,得到高产蛋白酶酵母菌,对其产酶条件进行优化。经形态学观察及26S rDNA序列分析鉴定出5株产蛋白酶酵母菌,分别对各菌株产酶条件进行优化,在最佳产酶条件下,菌株库德毕赤酵母Y1(时间48 h、接菌量3%、温度30℃、pH值9)产酶活力达229.89 U/mL,东方伊萨酵母Y5(时间48 h、接菌量4%、温度37℃、pH值9)产酶活力达212.63 U/mL,马克斯克鲁维酵母Y16(时间48 h、接菌量3%、温度37℃、pH值9)产酶活力达208.44 U/mL,近平滑假丝酵母Y20(时间48 h、接菌量4%、温度37℃、pH值9)产酶活力达211.74 U/mL,单孢酿酒酵母Y21(时间48 h、接菌量4%、温度30℃、pH值9)产酶活力达209.96 U/mL。同时对五株酵母菌产水解酶的效果进行了探究,发现库德毕赤酵母Y1、马克斯克鲁维酵母Y16、单孢酿酒酵母Y21具有较高的植酸酶活性,达到14.38、15.34、15.63 U/mL;五株菌株均表现出较高的果胶酶活性,其中单孢酿...     

内蒙古发酵酸乳制品中乳酸菌的分离鉴定

以采集自内蒙古锡林郭勒盟正蓝旗的2份发酵酸乳样品为研究对象,采用传统纯化培养技术、16S rDNA基因序列测定并构建系统发育树的方法,对样品中的乳酸菌进行了分离鉴定,以期解析发酵乳中乳酸菌的多样性,积累食品微生物资源。研究结果显示,共分离15株乳酸菌,被鉴定为3个属9个种,3个属分别为乳酸乳球菌属、明串珠菌属和乳杆菌属,9个种分别为乳酸乳球菌叶蝉亚种（Lactococcus lactis subsp. hordniae,3株）、乳酸乳球菌（Lactococcus lactis,1株）、乳酸乳球菌乳脂亚种（Lactococcus lactis subsp. cremoris,1株）、乳明串珠菌（Leuconostoc lactis,3株）、肠膜明串珠菌肠膜亚种（Leuconostoc mesenteroides subsp. mesenteroides,1株）、肠膜明串珠菌右旋葡聚糖亚种（Leuconostoc mesenteroides subsp. dextranicum,1株）、植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum,1株）、副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei,3株）和干酪乳杆菌（Lactobacillus casei,1株）。综上表明,该研究采集的酸乳样品中乳酸菌资源丰富,是内蒙古传统乳制品优良发酵剂的研发和产业化生产的潜在微生物资源。     

内蒙古牧区人地关系协调发展评价

[目的]探讨内蒙古牧区人地关系的现状及存在的问题,通过协调该区域人地关系,缓解生态环境脆弱、经济发展落后等问题,促进草原生态保护与社会经济的有序和谐发展。[方法]通过对内蒙古牧区人口现状、人口与草地资源承载力的关系、人口分布与草地退化的关系进行分析,探究内蒙古牧区人地关系存在的主要问题。[结果]内蒙古牧区2000、2010、2015年的草地资源承载力指数（LCCI）分别为3.68、3.88、3.89,均大于1.250。2000—2015年,随着牧区人口的增加,草地资源承载力指数呈上升趋势。内蒙古牧区各旗县的草地退化指数均小于90%。[结论]内蒙古牧区人口分布不均,总人口和牧业人口均呈现出东南部密集、西部和北部较稀疏的分布态势。内蒙古牧区人口与草地资源承载力关系表现为人口超载状态,2000—2015年人口超载程度增加。     

一株改善木薯酒糟发酵蛋白饲料品质的酵母菌株筛选、鉴定和应用

本研究从发酵酒醅中分离出四株具有典型酵母形态的菌株,经过筛选最终获得一株耐酒精且在木薯酒糟中可良好发酵的酵母菌株,命名为JJ-2菌株。经过生理生化特征和18S rDNA鉴定,核苷酸序列与库德里阿兹威毕赤酵母（Pichia kudriavzevii）的同源性达到100%,确定JJ-2菌株为Pichia kudriavzevii。在经过10%黑曲霉处理的木薯酒糟上清液中添加JJ-2菌株可将上清液的化学需氧量（COD）降低33.91%,在木薯酒糟固体发酵过程中,添加JJ-2菌株可以将粗蛋白质含量提高9.29个百分点,真蛋白的含量提高6.83个百分点,有效地改善了木薯酒糟发酵蛋白饲料的品质。 [关键词] 酵母|筛选|鉴定|木薯酒糟|发酵     

水牛精液品质的研究

[目的]本研究测定了摩拉水牛、尼里水牛和槟榔江水牛的射精量、精子密度、精子活力和畸形率。[方法]精液品质按照《牛冷冻精液》标准和《牛冷冻精液生产技术规程》进行测定。[结果]结果得出,摩拉水牛公牛的射精量为5.1±2.37ml（n=2688）、精子密度为7.8±3.68亿/ml、原精活力57.4±16.42%;冷冻精液解冻活力平均为36.0±2.13%（n=1680）、畸形率为20.62±11.04%（n=873）;尼里水牛公牛的射精量为5.3±1.99ml（n=1370）、精子密度为8.4±3.54亿/ml、原精活力62.7±12.51%;冷冻精液解冻活力平均36.5±2.43%（n=1102）、畸形率为15.2±5.71%（n=481）;槟榔江水牛公牛的射精量为5.6±2.26ml（n=271）、精子密度为8.6±5.13亿/ml、原精活力65.2±9.19%;冷冻精液解冻活力平均为37.2±2.48%（n=239）、畸形率为19.6±6.08%（n=110）。[结论]本研究获得了水牛精液品质的基础数据。     

酵母菌培养物对奶山羊产奶性能及乳品质的影响

[目的]分析不同水平酵母菌培养物添加,对奶山羊产奶性能及乳品质的影响。[方法]选择健康的、体重、产奶量、胎次（2～3）相近及泌乳期90～120 d关中奶山羊60只,随机分4组。每组15个重复,每只为一个重复组单栏饲养。1组（基础精料）,2组（基础精料+5 g/kg酵母菌培养物）,3组（基础精料+10 g/kg酵母菌培养物）,4组（基础精料+20 g/kg酵母菌培养物）。预试验10 d,试验期60 d,试验期间测定产奶性能及乳品质。[结果]（1）试验2、3、4组平均日干物质采食量高于1组（P>0.05）;试验3、4组平均日产奶量显著高于1组（P<0.05）,奶料比显著低于1组（P<0.05）。（2）试验2、3、4组乳糖率、非脂固形物、总固形物率高于1组（P>0.05）,试验3、4组乳蛋白率、乳脂率显著高于1组（P<0.05）。[结论]不同水平酵母菌培养物可改善关中奶山羊产奶性能、乳品质,以基础精料+10 g/kg酵母菌培养物添加较适宜,可在临床推广应用。     

新疆部分地区屠宰场羊源细粒棘球蚴分子鉴定及其遗传多样性分析

[目的]了解新疆维吾尔自治区部分规模化屠宰场羊的细粒棘球蚴感染情况及其分子遗传特征。[方法]收集屠宰场羊肝脏组织内经肉眼观察鉴定为细粒棘球蚴的包囊样本96份,全部提取基因组DNA后,基于细粒棘球绦虫cox1基因位点和nad1基因位点进行PCR扩增和测序。通过序列比对数据鉴定其基因型,构建遗传进化树解析其分子遗传特征。[结果]在cox1基因位点上,有81份样本呈PCR扩增阳性（84.37%,81/96）,经序列分析鉴定,所有阳性样本均为细粒棘球蚴G1基因型（n=81）,存在15个单倍型（Hap＿1～15）;在nad1基因位点上,有67份样本呈PCR扩增阳性69.79%(67/96),经序列分析鉴定出2种基因型,分别为细粒棘球蚴G1基因型（n=66）和G3基因型（n=1）,存在19个单倍型（Hap＿1～19）。种系发育分析显示,获得的细粒棘球蚴G1基因型和G3基因型序列,与国内外已报道的多种宿主源的G1基因型和G3基因型序列均处于同一个进化支。[结论]新疆部分地区羊源细粒棘球蚴呈现遗传多样性分布特征,研究结果为该地区羊包虫病的防治提供了基础数据。     

蒙古族传统奶酪中8种脂溶性维生素和β-胡萝卜素高效液相色谱检测方法的建立

[目的] 建立同时测定蒙古族传统奶酪中VA、VD₂、VD₃、α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚、VK₁共8种脂溶性维生素及天然色素β-胡萝卜素含量的高效液相色谱方法（high performance liquid chromatography,HPLC）。[方法] 选取蒙古族传统奶酪为试样,经无水乙醇提取,酶解后用正己烷萃取,旋蒸浓缩,复溶过滤膜。经Agilent poroshell 120 EC-C18（150 mm×4.6 mm,4 μm）色谱柱分离,以甲醇和水（体积比为95∶5）为流动相,采用FLD和VWD检测器检测,外标法定量。[结果] VA、α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚、VK₁、β-胡萝卜素在0.1~1.0 μg/mL浓度范围内线性关系良好,VD₂、VD₃在0.05~1.00 μg/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数R²均大于0.998。[结论] 建立的HPLC方法具有简便、快捷、灵敏度高、回收率高、分析时间短等优点,可为蒙古族传统乳制品中多种脂溶性维生素及天然色素的快速检测提供技术支撑。     

传染性法氏囊病毒免疫原基因在毕赤酵母中的高效分泌表达

从国内分离的鸡传染性法氏囊病毒（IBDV）众多流行株中获得超强毒株（vvIBDV）,应用RT-PCR方法,扩增得到IBDV主要保护性抗原VP2基因的开放编码框,克隆至巴斯德毕赤酵母表达载体pPICZαA,将该重组质粒pPICZαA-VP2以电转化方法转入毕赤酵母X-33感受态细胞中,通过PCR鉴定、表型筛选和抗生素浓度梯度筛选,获得高拷贝阳性重组酵母菌株X-33-pPICZαA-VP2。经摇瓶诱导表达试验获得稳定高效分泌表达的酵母工程菌,表达量为0.459mg/ml,聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）、免疫印迹（Western-blot）以及动物试验表明,重组酵母工程菌表达的目的蛋白具有鸡传染性法氏囊病病毒天然蛋白的生物活性和免疫原性。     

日粮中添加活性干酵母对西门塔尔育肥牛饲料消化率和日增重的影响

[目的] 研究活性干酵母（active dry yeast,ADY）对西门塔尔育肥牛饲料消化率和日增重的影响。[方法] 选择西门塔尔肉牛30头,随机分成3组,A组为对照组,B组、C组为试验组。A组牛饲喂基础日粮,B组每头牛每天基础日粮+饲喂10 g酵母菌1,C组每头牛每天饲喂基础日粮+10 g酵母菌2,分早晚2次饲喂。预饲期为5 d,正试期为28 d。利用粪便分离筛对育肥牛饲料消化率进行评估,并计算日增重。[结果] 试验第21天,C组上层粪筛滞留物比例显著（P<0.05）低于A组。试验第28天,C组中层粪筛滞留物比例低于A组和B组,并显著（P<0.05）低于试验第7天、第14天和第21天。试验第28天,C组下层粪筛滞留物比例最高,并显著（P<0.05）高于试验第7天和试验第14天。2个试验组的平均日增重均高于对照组,试验C组的平均日增重显著（P<0.05）高于A组和B组。[结论] 日粮中分别添加2种活性干酵母可提高西门塔尔育肥牛的日增重,并在一定程度上提高饲料消化率,酵母菌2的效果更好。     

应用Kappa检验比较猪蓝耳病ELISA抗体检测试剂盒

[目的]比较两个猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）抗体酶联免疫吸附试验（ ELISA）检测试剂盒结果的一致性。[方法]对390份猪血清进行PRRSV抗体ELISA检测,应用Kappa检验比较两种试剂盒检测结果的一致性并进行分析。[结果]两种试剂盒联合检测出250份PRRSV抗体阳性和70份阴性,阳性一致性为80.65%,阴性一致性为87.50%,符合率82.1%,结果一致性为中度一致（ Kappa值=0.552）。[结论]2种方法检测结果一致性较好,建议根据实际需要选择PRRSV抗体检测试剂盒。     

犬细小病毒结构蛋白VP2基因的克隆和在毕赤酵母中表达

表达犬细小病毒VP2蛋白（CPV—VP2）,用于重组蛋白免疫小鼠制备单克隆抗体,并为犬细小病毒病的诊断奠定基础。采用PCR方法对CPVVP2基因进行扩增,将CPVVP2基因克隆到毕赤酵母分泌表达载体pPICZAA中,构建真核重组表达载体pPICZAA-VP2,将该重组质粒线性化后,转化巴斯德毕赤酵母（Pichiapastoris）X-33中,甲醇诱导表达CPVVP2,SDs_PAGE和Westernblotting鉴定表达蛋白。结果,成功扩增了CPV—VP2基因,构建了真核重组表达载体pPICZAA—VP2,在毕赤酵母菌中表达出约68000蛋白。Western—blotting鉴定表明,表达蛋白为目的蛋白VP2。表达菌株扩大表达体系于培养基中培养,上清液用70％过硫酸铵4℃沉淀浓缩,采用His选择镍-亲和层析柱分离纯化获得重组的酵母表达的带组氨酸标签的VP2蛋白,表达量约3mg／L。结果表明,在毕赤酵母中成功地表达了CPV—VP2蛋白,且能被犬细小病毒VP2单克隆抗体特异识别。     

苏尼特羊体重与体尺的相关性分析

[目的]分析内蒙古自治区锡林郭勒盟地方特色肉羊品种苏尼特羊体重与体尺指标的关联程度。[方法]随机选取5~6月龄发育及健康状况良好的苏尼特羊公羊247只、母羊260只,对羊只的体重（Y）、尾长（X₁）、尾宽（X₂）、体高（X₃）、体长（X₄）、胸围（X₅）进行生产性能测定,数据整理后使用SPSS 26.0统计学软件对体重与体尺指标进行相关性分析和多元线性回归分析,最终建立最优回归模型。[结果]影响苏尼特羊公羊和母羊体重的主要体尺指标为尾宽、体高、体长和胸围,且与体重均呈极显著（P<0.01）相关;逐步回归分析建立了多元线性回归模型,公羊的最优线性方程为：Y=0.57X₅+0.325X₄+0.241X₂-35.795,R²=0.834;母羊的最优线性方程为：Y=0.577X₅+0.246X₄+0.205X₂-31.94,R²=0.799。[结论]回归方程中胸围、体长、尾宽与体重相关性均较高,皆可作为苏尼特羊的体重预测模型。     

刈割留茬高度对大针茅草原物种多样性及地上生物量的影响

刈割作为草地有效管理手段之一,对生态系统功能与多样性均具有重要的影响。本研究以内蒙古锡林郭勒盟大针茅草原为研究对象,利用围封草地作为对照,探讨了不同刈割留茬高度（留茬8 cm、留茬5 cm和留茬2 cm）对群落生物量与多样性的影响。结果表明：与围封草地相比,留茬8 cm对地上生物量无显著影响,留茬5 cm和2 cm处理显著降低了群落地上生物量（P<0.05）;多年生禾草和大针茅生物量在留茬2 cm处理下显著降低（P<0.05）;留茬8 cm和5 cm处理显著提高了群落物种多样性指数（P<0.05）。相关结果表明合理的留茬高度对草原物种多样性和地上生物量有积极影响,本试验对指导当地生产实际、提高草地合理利用等方面具有重要意义。     

蛹虫草废弃米基发酵工艺初探

为提高蛹虫草废弃米基作为饲料中的蛋白含量，本试验采用蛹虫草废弃米基作为发酵培养基，筛选优势发酵菌种，并通过正交试验和单因素考察试验确定一套适用于蛹虫草废弃米基的二次发酵工艺。结果表明：采用酵母菌发酵效果较好。一次发酵的米基添加量为10%（m/m），酵母菌接种量为1%（m/m），发酵时间为20 h|二次发酵的米基添加量为12.5%（m/m），接种量为6%（m/m），发酵时间为48 h。综上，蛹虫草废弃米基经发酵处理后粗蛋白质含量提高了25.61%， Ca、P等无机盐含量也略有提高，同时发酵工艺对虫草素无干扰，发酵产物中保留了虫草素成分。此试验结果可作为蛹虫草废弃米基开发新型饲料的技术基础。 [关键词] 二次发酵|粗蛋白质|酵母菌|嗜酸乳杆菌     

杭州市规模化养殖场湖羊芽囊原虫的PCR检测与基因亚型鉴定

[目的]掌握杭州市规模化养殖场中湖羊芽囊原虫的感染情况和基因亚型分布。[方法]从杭州市4个规模化养殖场采集167份湖羊的新鲜粪便样本,提取粪便全基因组DNA;基于小亚基核糖体RNA(SSU rRNA)基因,对粪便DNA样本进行PCR扩增,对阳性产物进行测序;经序列比对鉴定芽囊原虫基因亚型,构建系统进化树解析其遗传进化关系。[结果]167份样本中,检测出芽囊原虫阳性样本18份,感染率为10.78%(18/167);3个养殖场呈芽囊原虫阳性,感染率依次为21.43%(3/14)、21.21%(14/66)和2.13%(1/47),1个养殖场未检测出芽囊原虫;不同养殖场之间湖羊芽囊原虫的感染率存在极显著（P<0.01）差异。鉴定出7个芽囊原虫基因亚型,分别为ST7(n=1)、ST10(n=9)、ST21(n=3)、ST23(n=1)、ST24(n=2)、ST26(n=1)、ST30(n=1),以ST10亚型为优势感染亚型（9/18,50.00%）;基于芽囊原虫SSU rRNA基因的系统进化树分析发现,6种基因亚型序列聚类形成1个大群,其中ST10和ST23聚类形成亚群,ST21、ST2...     

不同栖息地类型对东北大兴安岭红花尔基地区鸟类群落结构与组成的影响

2001～2002年和2004～2005年分别于5～6月,在内蒙古红花尔基地区,应用样方调查法研究了环境因子与鸟类群落结构的关系,结果表明：（1）在草地生境中,鸟类多样性与草的高度和盖度相关性显著,鸟的密度与草的高度和盖度相关性不显著。（2）在樟子松森林生境中,叶层高度多样性指数（FHD）与鸟类多样性指数（BSD）呈正相关（r=0．814,P〈0．05）,回归方程为Y=1．332x＋0．103（R^2=0．663）。叶总量（IF）与鸟类多样性指数（BSD）有显著的正相关（r=0．912,P〈0．05）,回归方程为y=1．267x＋0．428（R^2=0．832）。（3）樟子松林的胸径和森林的郁闭度与鸟类多样性呈显著的正相关,树的高度、密度、森林下草的高度和盖度与鸟类多样性相关性不显著：樟子松森林的郁闭度与鸟类的密度呈显著的正相关,即随着樟子松森林郁闭度的增加,鸟类密度增加。树的高度、密度、胸径、森林下草的高度,草的盖度与鸟类密度相关不显著。     

林麝白介素-2在毕赤酵母中的表达

克隆林麝（Moschus．berezovskii）白介素-2（interleukin．2，IL-2）到酵母表达载体pPIC9K，SalⅠ酶切后转化毕赤酵母GS115，G418抗性筛选高拷贝克隆，再由酵母菌落PCR鉴定；阳性克隆用甲醇诱导表达，SDS-PAGE分析．结果在诱导至第6d的酵母上清浓缩液中，检测到与预测林麝IL-2分子量相接近的，分子量约为18Ku的诱导表达带；TRIzol提取表达期间的酵母总RNA，并通过RT-PCR扩增IL-2 mRNA，发现表达期的重组酵母细胞中存在IL-2 mRNA，而对照没有检出，表明林麝IL-2存在低水平的表达。     

低温发酵乳品质特性研究

以青藏高原传统发酵牦牛乳中分离的保加利亚乳杆菌（编号为CGMCC2603）和酸乳球菌（编号为CGMCC1.3920）为研究对象，研究菌株低温发酵酸乳的感官特性、后酸化能力、粘度及双乙酰含量变化。结果表明试验菌株在25℃发酵的酸乳凝乳状态较好，冷藏14d后酸度分别提高29．2°T和8．5°T，后酸化较弱。冷藏期间粘度变化与发酵温度没有直接关系。低温有利于双乙酰的积累，双乙酰含量最高分别为12．04ug／mL和9．78ug／mL。本研究时开发低温发酵剂具有重要意义。