Antibody to leukemia virus: widespread occurrence in inbred mice

Mice from a wide variety of inbred strains produce immunoglobulin G antibody against murine leukemia virus. This is contrary to the common view that the mouse is immunologically tolerant to its endogenous leukemia virus.     

Enterogastrone inhibits eating by fasted mice

In mice fasted for 17 hours, administration of enterogastrone purified from hog duodenum reduced the food intake. This effect was greatest during the first 30 minutes, but the cumulative reduction continued for at least 4 hours. Other peptides prepared from hog duodenum or colon, as well as glucagon, secretin, glucose, and bovine serum albumin, were ineffective.     

Generation and analysis of interleukin-4 deficient mice

Interleukin-4 (IL-4) promotes the growth and differentiation of many hematopoietic cells in vitro; in particular, it directs the immunoglobulin (Ig) class switch to IgG1 and IgE. Mice homozygous for a mutation that inactivates the IL-4 gene were generated to test the requirement for IL-4 in vivo. In the mutant mice T and B cell development was normal, but the serum levels of IgG1 and IgE were strongly reduced. The IgG1 dominance in a T cell-dependent immune response was lost, and IgE was not detectable upon nematode infection. Thus, some but not all of the in vitro properties of IL-4 are critical for the physiology of the immune system in vivo.     

小鼠鼻粘膜接种伤寒杆菌Fe-SOD的抗体应答

目的：观察小鼠鼻腔接种伤寒杆菌的Fe—SOD后血液和粘膜系统的抗体应答。方法：用IL-1作为佐剂,将伤寒杆菌的Fe—SOD经鼻腔接种小鼠,检测小鼠血液及肠液中的抗体应答。结果：当用IL-1作为佐剂时,经鼻腔接种伤寒杆菌Fe—SOD的小鼠血液和肠液中可产生高水平特异性IgG和IgA类抗体;而腹腔注射仅在血液中产生高水平特异性IgG抗体。结论：用IL-1作为佐剂,伤寒杆菌Fe—SOD经鼻腔接种后可引起小鼠粘膜系统和血液中的抗体应答。     

H5亚型禽流感病毒单克隆抗体的制备和鉴定

采用高致病性禽流感病毒(HPAIV)H5N1亚型A/Duck/Zhenjiang/11/00(DZJ/1100)毒株作为免疫原,免疫8周龄BALB/C雌性小鼠,三次加强免疫后取脾细胞与SP2/0细胞融合,用表达的重组核蛋白(NP)包被ELISA的方法检测筛选,阳性细胞克隆经有限稀释法克隆培养,最后获得H5亚型特异性的单克隆抗体,抗体亚类检测结果表明该抗体亚类为IgG1型k链抗体。ELISA以及免疫荧光检测表明该抗体有良好的特异性。     

Teratogenic effect of 5-hydroxytryptamine in mice

The subcutaneous injection of a single dose of 5-hydroxytryptamine into pregnant mice produced a large number of fetal abnormalities, mostly of the eyes, limbs, and tail; the skull and central nervous system were also sometimes affected. These effects could result from the action of the drug on placental function and blood supply.     

苦参碱抗PCV2诱导小鼠肺炎的作用及其机制研究

为探讨苦参碱在小鼠体内的抗炎作用及其机制,本研究利用猪圆环病毒2型（Porcine circovirus type 2,PCV2）感染诱导小鼠肺炎模型,将32只昆明小鼠均分为空白对照组、PCV2组、苦参碱处理组（40mg/kg）和利巴韦林阳性对照组（40mg/kg）。除空白对照组外,其他各组小鼠每只腹腔注射0.5mL PCV2,攻毒后的第5天开始腹腔注射对应药物,每天给药一次,连续给药5d。在攻毒后的第11天,观察小鼠肺脏的病理组织学变化,qPCR检测PCV2 Cap基因,IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α基因的mRNA表达,Western blot检测相应炎症因子、TLR4/MyD88/NF-κB信号通路及NLRP3炎症小体关键蛋白的表达。结果表明：1）苦参碱可显著抑制PCV2感染诱发的肺间质增宽现象。2）苦参碱可显著降低肺脏PCV2病毒载量（P<0.05）及炎症因子IL-1β(P<0.05)、IL-6(P<0.000 1)、IL-8(P<0.000 1)和TNF-α(P<0.000 1)的mRNA和蛋白（P<0.000 1）的相对表达量。...     

5-羟色胺对鸡新城疫疫苗抗体效价的影响

研究了5-羟色胺(5-HT)对鸡新城疫疫苗抗体效价的影响,结果表明:5-HT受体激动剂中剂量组的抗体效价明显高于对照组,且呈现一直上升的趋势;5-HT受体拮抗剂中剂量组的抗体效价明显低于对照组,且呈现一直下降的趋势;这表明5-HT对新城疫疫苗的抗体效价有明显的调节作用。     

Antibody formation: initiation in "nonresponder" mice by macrophage synthetic polypeptide RNA

The RNA extracted from normal peritoneal macrophages exposed to a linear, random synthetic polypeptide, Glu(60)Ala(30)Tyr(10), initiated an immune response in C57B1/6J mice, although this strain responds very poorly to the antigen itself. From 10 to 150 micrograms of RNA obtained from mouse, rat, or rabbit macrophages was injected intraperitoneally into recipient mice, and specific antibody was detectable by passive hemagglutination 3 to 4 weeks later. Treatment of the RNA with ribonuclease destroyed its ability to initiate a specific immune response. The RNA contained by weight 0.02 percent of the (specific) antigen. The RNA obtained from cells incubated with a second polypeptide, Glu(36)Lys(24)Ala(40), initiated a response specific for this polymer. This RNA even when incubated in vitro with Glu(60)Ala(30)Tyr(10) failed to initiate antibody formation specific for Glu(60)Ala(30)Tyr(10).     

抗克百威单克隆抗体的研制

用与牛血清蛋白(BSA)交联的克百威人工抗原(BFNB-BSA)免疫的BALB/C鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选、克隆,得到1株能稳定分泌克百威抗体的单克隆细胞株(1E8)。鉴定结果表明,1E8的抗体类型及亚类均为IgG1,其轻链为κ链。制备单克隆抗体腹水,腹水的间接ELISA(酶联免疫吸附分析)效价在1×10-6以上。直接ELISA线性回归方程为y=15.70lg(x)-5.879 5,r2=0.990 4,抑制中浓度IC50=35.1μg.L-1,最低检测限IC20=5.2μg.L-1。该单克隆抗体与克百威特异性结合反应的50%抑制质量浓度为35.1μg.L-1。除丁硫克百威以外与其他克百威结构类似物无交叉反应。     

五株食源性致病菌特异性卵黄抗体的研制

目的:确定制备用作食品添加剂的引起食品中毒常见的5种致病菌的高免卵黄抗体的技术参数。方法:以食品中常见的由该实验室分离和鉴定的沙门氏菌,金黄色葡萄球菌,溶血性链球菌,副溶血弧菌．变形杆菌五株地方性致病菌株的等量混合茵液用油佐剂乳化后免疫新开产的蛋鸡,收集高免蛋．利用水稀释法制备多克隆卵黄抗体,并用超滤法对其进行浓缩。结果:免疫后高免蛋收集的最佳时间为三免后第2-8周,水稀释法最佳稀释比例为1:6,pH值为5．2,通过超滤IgY浓度提高了6．48倍,IgY的纯度由原来的24．6％提高到42．3％。结论:通过上述工艺参数可以大量制备针对5株病原菌特异性的高滴度卵黄抗体,最终浓度为1426μg/ml。     

飞蝗表皮蛋白LmKnk3-5′的抗体制备及组织定位

【目的】LmKnickkopf3-5′(LmKnk3-5′)是飞蝗（Locusta migratoria）蜕皮发育中重要的表皮蛋白。本文旨在制备LmKnk3-5′特异抗体并对其进行组织定位,为LmKnk3-5′生物学功能研究提供蛋白水平的证据,同时为进一步深入探究LmKnk3-5′与其他表皮蛋白在飞蝗表皮形成过程中的协同作用打下基础。【方法】首先比对飞蝗Knickkopf(Knk)家族4个基因LmKnk、LmKnk2、LmKnk3-FL和LmKnk3-5′的氨基酸序列,选取LmKnk3-5′的3段特异抗原序列R1、R2和R3,设计包含BamH I、Hind III酶切位点的引物,以LmKnk3-5′全长cDNA为模板,PCR获得LmKnk3-5′的特异抗原片段;然后将特异抗原片段与pET-32a经双酶切、T4连接酶连接、测序验证、成功构建重组质粒后,转入BL21（DE3）表达菌株中,加入IPTG（终浓度0.5 mmol·L^-1）低温（16℃）诱导重组蛋白表达,SDS-PAGE检测重组蛋白表达情况;接着扩大培养可在菌体裂解液的上清中表达重组融合蛋白的大肠杆菌,提取蛋白并用Ni-NTA对其进行纯化,之后再用纯化后的重组特异抗原免疫小鼠4次,获得anti-LmKnk3-5′多克隆抗体,ELISA法对其进行效价检测,并用Western blot法检测其特异性。取飞蝗5龄若虫第8天表皮,制备石蜡切片,通过免疫组化法对LmKnk3-5′蛋白进行组织定位。【结果】通过氨基酸序列比对,选取LmKnk3-5′的特异抗原区域R1、R2和R3,分别包含208、147和131个氨基酸残基,蛋白理论分子量分别为24.0、17.0和14.8 kD。酶切连接后,成功获得 pET-32a-R1、pET-32a-R2 和pET-32a-R3重组质粒。诱导表达检测,发现只有含pET-32a-R2的表达菌在菌体裂解液的上清液中大量表达重组蛋白。将其扩大培养纯化后获得 R2重组融合蛋白,免疫小鼠取抗血清进行效价检测,抗体效价高达1﹕512 000,可满足抗体使用需求。Western blot结果表明,注射dsLmKnk3-5′后飞蝗体壁LmKnk3-5′的蛋白表达显著减少,表明anti-LmKnk3-5′抗体特异性良好。免疫组化试验结果表明,表皮蛋白LmKnk3-5′在飞蝗腹部体壁皮细胞及新表皮中均有分布,特别是新合成的外表皮顶端。【结论】成功获得飞蝗LmKnk3-5′多克隆抗体,证明其特异性良好。LmKnk3-5′在飞蝗腹部体壁新合成的外表皮顶端分布较多。研究结果为飞蝗表皮蛋白LmKnk3-5′功能研究提供了蛋白水平的证据。     

羊抗鸡酶标二抗用于鹅血清抗体检测的研究

通过比较鸡IgG与鹅IgG的相似性,探讨羊抗鸡酶标二抗用于检测鹅血清抗体的可行性。用辛酸-硫酸铵盐析法提纯鸡、鸭、鹅、小鼠、兔、猪、羊的IgG,比较上述动物IgG粗提物的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱,并用蛋白免疫转印法定性检测上述动物血清IgG与羊抗鸡酶标二抗的结合情况;然后用直接ELISA方法分析不同动物血清分别与抗鸡酶标抗体和抗鹅酶标抗体结合程度的差异;最后用间接ELISA方法比较两种酶标抗体对同一鹅群大肠杆菌抗体的检测结果。结果表明,鸡、鸭、鹅IgG具有较大的相似性,都能够与抗鸡酶标二抗结合;羊抗鸡酶标二抗可以替代抗鹅酶标二抗来检测鹅的血清抗体。     

Antibody Formation in Embryos

The production of agglutinins to Salmonella typhi was studied in the opossum embryo in the period immediately before and after the development of thymic and lymph node lymphoid tissue. Antibody was found only in embryos older than 8 days which corresponds to an 8- to 10-week human embryo in terms of organogenesis and is the earliest stage at which antibody production has been recorded.     

测定RHDV抗体的间接ELISA方法的建立

通过氯仿和PEG6000处理,SephadexG 200层析纯化RHDV抗原,建立了检测RHDV抗体的间接ELISA试验方法。该方法的抗原最适包被浓度为10μg/ml,血清样品最佳稀释度为1∶400。与血凝抑制试验方法(HI)等相比,该方法具有快速、简单、特异性和重复性好等优点。     

利用羊抗鸡抗体检测鹅血浆中的抗体水平

利用商品供应的山羊抗鸡抗体ELISA检测鹅血液中抗体水平的可行性.在相同条件下,以羊抗鸡抗体作为第2抗体,在ELISA分析中检测利用同一抗原免疫后鸡和鹅血浆样品中抗体水平.经过相同倍数梯度稀释的鸡和鹅血浆样品中,所测到的鹅血样的D450 nm值曲线在处理组和对照组均与鸡的D450 nm值曲线变化趋势相同,只是随血样的稀释倍数上升,鹅血样D450 nm值的下降速度较慢.结果表明只要反应条件适当,抗鸡抗体可以作为第2抗体用于ELISA检测鹅血液中的抗体.通过抗原/血浆浓度梯度交叉试验,ELISA中抗原的最适包被质量浓度为100 μg/mL(150 μL/孔),血样最佳稀释比为1:12 800.ELISA测定所得鹅免疫试验中的抗体变化与理论预计结果一致,与在鸡上的变化也类似.     

ELISA双抗夹心法检测IBDV抗原

采用IBD细胞毒油佐剂灭活苗多次免疫易感鸡，制取高免血清效价1：64，提纯IgG抗体并用HRP标记同一IgG抗体，建立一种检测IBDV的敏感性方法──ELISA双抗夹心法。实验用盐析法和离子交换层析法纯化IgG。酶标抗体E／IgGmol比1：43。方阵实验确定最佳反应条件；包被抗体50ug／ml，E－Ab2稀释度为1：120，Ag灵敏度为1：3200；取代反应，抗原阻断反应，无关病毒对照试验均为阴性，并与AGP法对照实验．灵敏度高200倍。以上结果表明：本实验敏感性高，特异性强，简单快速判定客观，对临床诊断IBD流行病有很好的使用价值和推广价值。     

卵黄抗体测定与鸡新城疫免疫接种的应用研究

利用血凝（ＨＡ）和血凝抑制（ＨＩ）试验，对来自同一机体和同一鸡群非同一机体的２７９６只罗曼蛋鸡血样及蛋样进行了鸡新城疫血清和卵黄抗体水平的检测。结果表明：血清和卵黄无论来自同一机体，还是来自同一鸡群，所测抗体效价基本一致。对６１０枚入孵种蛋不同时间卵黄抗体和该批种蛋孵出的６１０只雏鸡不同日龄血清抗体水平进行了检测，发现种蛋卵黄抗体效价与雏鸡血清抗体效价有一定的相关性，用卵黄监测种蛋的抗体水平可以得知雏鸡出壳后首免时间。     

抗体工程的研究进展

根据当前抗体工程在食品科学方面的最新研究进展，并综合抗体工程的一些传统技术及抗体食品与传统抗体工程的比较，综合阐述了抗体是食品的发展潜力，并展望抗体食品的一些发展趋势。     

H5型高致病性禽流感免疫抗体监测及免疫效果分析

[目的]为了评估目前临床上大量免疫高致病性禽流感疫苗的免疫效果和质量。[方法]利用翅静脉法在127个养鸡场2、2个养鸭场、2个养鹅场1、个养鸽场采集血样,通过血凝抑制试验对H5型高致病性禽流感抗体进行监测,并分析免疫效果。[结果]5个养鸡场免疫不合格,8个养鸭场免疫不合格(主要为肉鸭场),2个养鹅场和1个养鸽场均免疫合格。抗体合格率为88.05%,免疫合格场达91.40%[。结论]雏鸡的最佳首免时间应为2周左右。经2次免疫接种的禽类保护力很高,免疫有效期可达4~6个月。