文心兰花粉离体萌发培养基的筛选及萌发率的测定

【目的】研究不同培养基组分、培养温度及培养时间对文心兰花粉离体萌发的影响,以期筛选出文心兰花粉离体萌发的适宜培养基及培养条件,为文心兰种质资源创新利用提供科学依据。【方法】以盛花期当天开放的花朵为试验材料,采用液体培养基,比较蔗糖、H₃BO₃、Ca(NO₃)·4H₂O、MgSO₄·7H₂O及KNO₃对文心兰花粉离体萌发的影响,正交试验筛选文心兰花粉离体萌发培养基的最佳组合及培养条件;在此基础上,测定收集保存的68份文心兰种质资源的花粉离体萌发率。【结果】一定质量浓度的蔗糖、H₃BO₃、Ca(NO₃)·4H₂O、MgSO₄·7H₂O及KNO₃对文心兰花粉的离体萌发具有一定的促进作用,各因素的最佳作用效果从高到低依次为H₃BO₃、Ca(NO     

除草链格孢菌HY-02的培养和发酵条件优化

【目的】明确生防菌株 HY-02 的除草活性,探究最优培养基成分配比及其最适发酵条件。【方法】通过 7种固体培养基的筛选确定菌株 HY-02 的最适固体培养基,利用单因素试验优化菌株的各成分配比,筛选出菌株HY-02 最佳发酵培养基;通过响应面设计筛选出最佳碳、氮源及无机盐的成分配比;对温度、转速、装液量、发酵时间及 pH 等条件进行筛选,得到最适培养条件。【结果】通过优化,菌株 HY-02最佳碳、氮源及无机盐的成分配比为：蔗糖：79. 789 g/L,NaNO₃:8. 763 g/L,无机盐：5. 472 g/L(其中 K₂HPO₄3. 44 2g/L、KCl 0. 860 g/L、MgSO₄·7H₂O1. 147 g/L、FeSO₄0. 022 9 g/L)。最适发酵条件：装液量 200 mL、发酵时间 4 d、温度 25 ℃、转速 165 r/min 和pH=7。【结论】通过优化提高了菌株HY-02的产孢量,为生防制剂的研究奠定理论基础。     

蒿柳花粉离体萌发及花粉管生长特性

为明确蒿柳的花粉萌发特征,采用花粉离体培养法,研究了不同温度、光照和培养基对蒿柳花粉萌发的影响。结果表明:培养温度和光照强度均影响蒿柳花粉萌发率和花粉管长度,20~25 ℃是蒿柳花粉萌发的最适温度区间,1 500和2 000 lx是蒿柳花粉萌发的最佳光照强度。正交试验中,一定质量浓度的蔗糖、H₃BO₃及pH值均可显著影响蒿柳花粉萌发,3个因子最佳组合为蔗糖100 g/L、H₃BO₃ 200 mg/L,pH5.0,在光照强度为1 000 lx,温度为25 ℃时,萌发率高于48.8%。利用试验筛选出的蒿柳花粉最佳离体培养组合培养花粉,并与花粉在柱头上活体萌发相比较,二者花粉管长度无显著差异。      

‘保罗兰’睡莲花粉离体萌发及花粉管生长的研究

【目的】研究不同培养基组分、不同培养时间对‘保罗兰’睡莲花粉萌发和花粉管生长的影响,为睡莲杂交育种提供科学的依据。【方法】采用花粉离体萌发法,用显微镜观察花粉离体萌发情况。【结果】20和40 mg/L的硼酸(H_3BO_3)处理均能促进花粉萌发,适宜浓度的蔗糖和低浓度的Ca~(2+)处理能显著提高花粉的萌发率;睡莲花粉在培养的4 h之内,花粉萌发率上升较快,4～6 h萌发率趋于稳定。花粉管生长在前2 h生长较快,2～6 h生长趋于稳定。【结论】10%蔗糖+20 mg/L或40 mg/L H_3BO_3+20 mg/L氯化钙(CaCl_2)是‘保罗兰’睡莲花粉最适萌发培养基组分,最佳镜检时间为4 h。     

黄百香果花粉离体培养基筛选及贮藏试验

【目的】分析不同配方培养基及贮藏条件对大果型黄百香果花粉离体萌发效果的影响,为大果型黄百香果花粉活力鉴定、人工辅助授粉及杂交育种提供理论依据。【方法】采集花瓣刚好完全展开大果型黄百香果花朵的花粉,采用L_(25)(5~4)正交试验设计,筛选适宜其离体培养的蔗糖、硼酸、硝酸钙浓度及pH;利用最适宜花粉离体培养基,开展花朵不同采样时间、花粉离体贮藏湿度和温度对花粉活力影响试验,确定适宜大果型黄百香果花粉的离体贮藏条件。【结果】正交试验分析结果表明,影响大果型黄百香果花粉萌发率的因素排序为硝酸钙蔗糖硼酸pH,确定花粉离体萌发的最适培养基为100.00 g/L蔗糖+0.02 g/L硼酸+0.40 g/L硝酸钙,培养基pH 5.0。在最适培养基中,大果型黄百香果花粉的萌发率为85.55%;于11:30—17:30采集大果型黄百香果花粉的萌发率均在80.00%以上,其中,开花后3 h(16:30)花粉的活力最强,显著高于除13:30和15:30外的其他时间采集花粉的萌发率(P0.05,下同)。花粉贮藏试验结果表明,平铺在硫磺纸上自然风干处理3～48 h的花粉萌发率均显著高于同时间段密封于离心管中常温贮藏和平铺在硫磺纸上置于干燥器中贮藏处理,其中在硫磺纸上自然风干贮藏48 h的花粉萌发率仍达34.28%;自然风干5 h后密封于离心管中4℃贮藏24 h的花粉萌发率为61.49%,显著高于自然风干5 h后密封于离心管中-20℃贮藏24 h的花粉萌发率(55.22%)。【结论】大果型黄百香果花粉离体萌发最适培养基为100.00 g/L蔗糖+0.02 g/L硼酸+0.40 g/L硝酸钙及pH 5.0;当天采集花朵的花粉自然风干5 h后密封于离心管4℃贮藏其萌发效果最佳。     

藏药蓝玉簪龙胆的种子萌发和愈伤繁殖特性

【目的】为保护蓝玉簪龙胆的种质资源，探索其人工繁育方法。【方法】试验采用浸种和组织培养技术，通过不同培养基和不同激素的筛选，讨论蓝玉簪龙胆种子萌发以及愈伤组织分化的最佳策略。【结果】蓝玉簪龙胆种子在200 mg/L GA₃处理4 h发芽率最高，为44.84%；在不同基本培养基中培养，B5培养基萌发效果最佳，发芽率达53.21%。以B5培养基为基础，向培养基中添加不同浓度的GA₃、NAA和6-BA，得到蓝玉簪龙胆种子萌发的最优培养基为：B5+0.5 mg/L GA₃+1 mg/L 6-BA，发芽率达66.01%；诱导愈伤组织生长的最适宜培养基为：B5+0.5 mg/L GA₃+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L 6-BA，诱导率为34.28%。以愈伤组织生长最适培养基为基础，添加不同浓度6-BA，进一步优化培养基配方，得到最适合蓝玉簪龙胆愈伤组织继代培养的方案：B5+0.5 mg/LGA₃+0.5 mg/L NAA+1 mg/L 6-BA。【结论】愈伤组织继代培养方案可以...     

不同激素配比对梅花花粉离体萌发的影响

以绿萼梅花粉为材料,在液体培养基上进行离体培养,研究蔗糖、硼酸、氯化钙和PEG 4000不同激素配比对梅花花粉萌发的影响。结果表明,激素配比为蔗糖20 g/L+硼酸150 mg/L+氯化钙10 mg/L+PEG 4000 15 g/L时,花粉萌发率最高,达54.34%;蔗糖和硼酸对绿萼梅花粉萌发率有极显著影响,氯化钙和PEG 4000对绿萼梅花粉萌发率影响不显著。对高质量浓度蔗糖和硼酸培养液单因素研究结果表明,蔗糖质量浓度为40 g/L时,花粉萌发率最高;硼酸质量浓度为300 mg/L时,花粉萌发率最高。蔗糖40 g/L+硼酸300 mg/L+氯化钙10 mg/L+PEG4000 15 g/L激素配比可作为绿萼梅花粉萌发培养的最佳培养基。     

PEG-4000、蔗糖及pH值对七子花花粉萌发的影响

莱用花粉液体培养法研究PEG-4000(聚乙二醇4000)、蔗糖和pH值对七子花花粉萌发及花粉管生长的影响.结果表明,最适的培养基组分浓度为:H3BO3 10mg·L-1,Ca(NO3)2 O.03%,PEG-4000 15%,蔗糖15%,最适pH值为7.在该培养基内花粉萌发率约为73.26%,净萌发率约为64.49%.PEG-4000对七子花花粉萌发有促进作用,但蔗糖也是必不可少的.     

茶树花粉的离体萌发研究

选用无性系茶树品种龙井长叶花粉为材料,通过离体条件下花粉的萌发来探讨茶树离体花粉萌发的最适条件及最适保存方法.取蕾白期茶树花苞,干燥15 h后取花粉,以30 mmol/L的MES缓冲液(pH值5.5)为母液配制0.01% H3BO4+0.03% Ca(NO3)2+10% 蔗糖+15% 聚乙二醇4000(PEG-4000)溶液(pH值6.5),作为基本培养基,统计不同组分的浓度、不同pH值和不同碳源对25 ℃处理1 h的花粉萌发率的影响.结果表明,茶树花粉萌发和花粉管生长的最适液体培养基是:0.01% H3BO4+0.05% Ca(NO3)2+5% PEG-4000+5%麦芽糖,pH值在5.0~6.0之间(30 mmol/L MES).在此条件下的萌发率为82.24%,花粉管生长长度为492 μm.     

蜂糖李花粉离体萌发及活力保存研究

【目的】明确蜂糖李花粉活力影响因素和贮藏特性,为蜂糖李花粉的保存提供支持。【方法】以蜂糖李花粉为研究对象,青脆李花粉为对照,采用离体培养萌发法,研究不同质量浓度蔗糖、H_3BO_3、植物生长调节剂(NAA、GA_3和6-BA)以及不同贮藏方式(4℃低温干燥、-20℃冷冻干燥及蔗糖密封保存)对2种李花粉活力的影响。【结果】蜂糖李和青脆李花粉萌发及花粉管生长的最佳培养基组合为150 g/L蔗糖+0.10 g/L H_3BO_3+10 g/L琼脂,在此条件下花粉萌发率分别为53.68%和57.06%,花粉管长度分别为1 554.70和1 353.43μm,均无较大差异。10～30 mg/L NAA能极显著提高蜂糖李的花粉萌发率;但所有NAA处理均极显著抑制其花粉管的生长;不同质量浓度GA_3均可极显著促进蜂糖李花粉的萌发,且20和50 mg/L GA_3可极显著促进其花粉管生长;5～10 mg/L 6-BA能极显著提高蜂糖李花粉萌发率,质量浓度达20 mg/L时会极显著抑制其花粉管伸长。蔗糖密封保存能有效减缓2种李花粉活力的下降速度,延长花粉贮藏时间;贮藏至20 d时,蔗糖密封保存的蜂糖李花粉萌发率(39.54%)分别是4℃低温干燥保存、-20℃冷冻干燥保存的2.11和1.94倍。【结论】蜂糖李最适花粉萌发和花粉管生长培养基组分为150 g/L蔗糖+0.10 g/L H_3BO_3+10 g/L琼脂;GA_3是最适宜的植物生长调节剂,20和50 mg/L GA_3能同时促进蜂糖李花粉萌发和花粉管生长;花粉保存以蔗糖密封保存方式为宜。     

裂褶菌高产菌丝体发酵培养基的优化

【目的】探明裂褶菌高产菌丝体液体发酵培养基配方,为其菌丝体的批量生产及活性产物的开发提供依据。【方法】采用单因素及正交试验方法,通过摇瓶培养优化裂褶菌高产菌丝体发酵培养基中的碳源(葡萄糖、蔗糖、乳糖、麦芽糖、淀粉)、氮源(牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、土豆浸粉、大豆蛋白胨)及生长因子(维生素B₁、L-谷氨酸、α-萘乙酸、油酸、吲哚丁酸)。【结果】筛选出最优碳源(蔗糖)、氮源(牛肉膏)、生长因子(L-谷氨酸)进行正交试验的3个浓度水平(30 g/L、40 g/L和50 g/L,6 g/L、8 g/L和10 g/L,1.5 mg/L、2 mg/L和2.5 mg/L),各因子菌丝体的产量分别为16.10～19.56 g/L,13.26～14.53 g/L,9.40～9.78 g/L;裂褶菌高产菌丝体发酵培养基的优化配方为蔗糖50 g/L+牛肉膏8 g/L+L-谷氨酸2 mg/L+MgSO₄·7H₂O 1 g/L+KH₂PO₄ 2 g/L,pH 6.0。在此条件下裂褶菌菌丝体产量达21.51...     

10个菊花品种花粉生活力测定和贮藏方法研究

【目的】筛选菊花花粉离体培养生活力测定的最佳培养基配方,探究花粉贮藏的最适温度和耐贮藏时间,并挑选出较耐贮藏的菊花品种,为菊花新品种选育和种质资源保存提供参考。【方法】以10个菊花品种盛花期花粉为试验材料,通过离体萌发测定法筛选菊花花粉萌发最适培养基,以该培养基测定花粉在4℃、-20℃和-80℃3种温度下进行60 d或120 d贮藏周期的生活力变化趋势观测,每隔15 d取样检测1次;对贮藏120 d的花粉进行授粉,统计结实率。【结果】培养基为ME_3+200 g·L~(-1)PEG 4000+6 g·L~(-1)琼脂的处理,10种花粉都能萌发,且萌发率较其他培养基有显著差异;花粉贮藏60 d后,所有花粉生活力均下降,其中‘5’、‘52’、‘64’和‘85’4个品种花粉生活力下降较缓慢;4种花粉贮藏120 d后,在-80℃贮藏的花粉生活力较高,花粉授粉后均能够结实,且品种‘5’花粉授粉结实率最高,平均每个授粉花序结实8粒。【结论】花粉萌发培养基、植物品种基因型、贮藏温度和贮藏时间都会影响菊花花粉生活力。本文研究表明,菊花花粉最适贮藏温度为-80℃,品种‘5’花粉可贮藏120 d保持较高的授粉结实率,在杂交育种中可优先考虑。     

不同品种龙眼花营养成分分析

【目的】千里香自然播种的繁殖方式无法满足大面积生产种植需求,通过建立高效的离体再生 体系为千里香组培种苗工厂化繁育奠定基础。【方法】以千里香成熟种子为外植体材料,研究不同激素浓度与 配比和不同有机物对千里香种子萌发、增殖培养、壮苗培养和生根培养阶段的影响,获得无菌组培苗,进行炼 苗移栽。【结果】千里香种子经 75% 酒精与 0.1% 升汞预处理后,最适萌发培养基为 MS+6-BA 0.5 mg/L,萌发 率为 62.5%;丛生芽继代增殖最适基本培养基为 MS 培养基;增殖培养最适培养基配方为 MS+6-BA 0.50 mg/L+ NAA 0.15 mg/L,增殖系数达 2.37;壮苗培养适宜培养基配方为 MS+ 马铃薯汁 30 g/L,40 d 株高增长 2.0 cm; 生根培养最适培养基配方为 1/2MS+IBA 0.6 mg/L+ 马铃薯汁 30 g/L+ 香蕉汁 30 g/L+ 活性炭 0.1 mg/L,生根率为 55.6%。驯化后将生根苗移栽于泥炭土∶黄心土∶珍珠岩∶钙镁磷肥（3 ∶ 2 ∶ 1 ∶ 0.2）的混合基质中,成活 率 85%。【结论】不同激素及浓度对千里香种子萌发和丛芽增殖过程影响显著,添加马铃薯汁和香蕉汁利于壮 苗和生根培养。     

不同硅处理方式对干旱胁迫下大麦萌发的影响

【目的】研究不同处理方式下不同浓度的硅对干旱胁迫下大麦萌发的影响,综合评价各处理下大麦幼苗的抗旱性,确定最佳处理。【方法】分别在种子发芽前使用硅溶液浸种(A处理)和在种子发芽的培养过程中向发芽盒里加硅培养液(B处理)两种方式处理新啤6号大麦种子,两种方式均设置0.0、0.5、1.0、1.5和2.0 mmol/L Na₂SiO₃·9H₂O浓度水平,研究对干旱胁迫下大麦发芽指标、形态指标和生长量的影响。【结果】A处理下随着硅浓度的增加发芽势、发芽指数、活力指数、根长、芽长、芽鞘长、根数、根和芽的鲜重与干重均呈现先增加后降低的趋势,而根芽比呈先降低后增加的趋势,发芽率无显著变化。B处理下0.0和0.5 mmol/L Na₂SiO₃·9H₂O浓度下各指标均无显著差异,1.0～2.0浓度区间内根芽比随硅浓度增加呈降低趋势,其他各指标随硅浓度增加而增加。【结论】1.0 mmol/L Na₂SiO₃·9H₂     

外源物质对油茶花粉萌发和花粉管生长的影响

以普通油茶花粉为材料,研究不同浓度的植物生长调节剂、矿质元素、一氧化氮(NO)和活性氧(ROS))对花粉萌发和花粉管生长的影响,并采用正交试验优化普通油茶花粉的萌发条件。结果表明：0.5～5.0 mg·L^-1赤霉酸(GA₃)、0.5 mg·L^-1萘乙酸(NAA)显著促进花粉萌发和花粉管生长,最大花粉萌发率分别为59.07%,71.29%,而高浓度的NAA、GA₃(50 mg·L^-1)却极显著抑制花粉萌发和花粉管生长。10～50 mg·L^-1 MgSO₄处理的萌发率为56.88%～65.83%,24 h最大花粉管长度为2 809.56μm。50～150 mg·L^-1 CaCl₂·2H₂O处理的萌发率为59.91%～63.28%,24 h最大花粉管长度为2 770.11μm,差异达显著水平。随着Ca²⁺的抑制剂乙二醇双四乙酸EGTA、乙烯利(ETH)和...     

响应面法优化雨生红球藻培养基

雨生红球藻(Haematococcus pluvialis)是生产高值天然虾青素(Astaxanthin,AST)的优质藻种,优化培养基营养盐组成对提高藻细胞密度和虾青素产量具有重要意义。以雨生红球藻为受试藻株,BG11为基础培养基,作单因素试验筛选NaNO₃、MgSO₄·7H₂O、K₂HPO₄·3H₂O和Na₂CO₃共4种营养盐最适浓度范围,采用响应面法优化培养基关键营养盐浓度,并作验证试验。结果表明,(1)雨生红球藻相对适宜营养盐NaNO₃、MgSO₄·7H₂O、K₂HPO₄·3H₂O和Na₂CO₃质量浓度范围分别为1 500～2 000、80～640、20～60和20～80 mg·L^-1,对藻细胞密度的影响强弱依...     

大红火龙果花粉离体萌发条件的优化及其活力测定方法筛选

为大红火龙果人工授粉及其丰产栽培、杂交育种及果实品质改良提供参考,采用单因素试验,研究不同培养基组分对花粉萌发的影响,并运用离体萌发法测定花粉萌发率;比较TTC染色法、醋酸洋红染色法、亚历山大红染色法和I_2-KI染色法测定大红火龙果的花粉活力,筛选准确测定大红火龙果花粉活力的最佳方法。结果表明:大红火龙果花粉离体萌发最佳培养基组分为Ca(NO_3)_2·4H_2O 0.3g/L+MgSO_4·7H_2O 1.2g/L+KNO_3 0.1g/L+15%蔗糖+700mg/L硼酸+1%琼脂,pH为6.7,此条件下花粉萌发率高,为(43.9±6.27)%,且利于花粉管伸长。醋酸洋红法测定的大红火龙果花粉活力为(37.67±4.18)%,与离体萌发法测定的萌发率无显著差异,为花粉活力的最佳测定方法。     

‘嘎拉’苹果花粉萌发中培养基组分和培养条件优化

旨在优化‘嘎拉’苹果花粉萌发中不同培养基组分的添加量和培养条件,为生产中人工授粉和开展相关研究提供参考。采用花粉液体培养法,研究不同培养基组分和培养条件对花粉萌发的影响,结果表明,在液体培养基内添加硼酸(H_3BO_3)、氯化钙(CaCl_2·2H_2O)、尿素、聚乙二醇(PEG-3350)和蔗糖,均能促进‘嘎拉’苹果花粉萌发和花粉管生长;在一定范围内,花粉萌发率和花粉管长均随培养基组分添加量的增加而增加,但超过一定添加量时,促进作用逐渐减弱;当H_3BO_3、CaCl_2·2H_2O、尿素、PEG-3350和蔗糖的添加量分别为0.3、0.3、3.0、150和80g/L时,‘嘎拉’苹果花粉萌发率最高,花粉管长也达到最大值;花粉萌发率和花粉管长均随培养基pH的升高呈先增加后降低的趋势,花粉液体培养最适pH为6.5;随着培养温度的增加,花粉萌发率和花粉管长则呈先快速增加后骤降的趋势,花粉液体培养最适温度为25~30℃。     

4种木兰属植物花粉萌发特性

以望春玉兰Magnolia biondii,长花玉兰Magnolia ‘Changhua’,丹馨玉兰Magnolia ‘Danxin’,黄山木兰Magnolia cylindrica等4种木兰属Magnolia植物为试验材料,运用不同质量浓度蔗糖、硼酸、分子量为4000的聚乙二醇(PEG-4000)对花粉进行单因子及正交试验处理,研究不同培养基、培养温度及培养时间对4种植物花粉萌发率的影响。结果表明:①蔗糖、硼酸、PEG-4000对4种木兰属植物花粉萌发均有显著影响(P < 0.05)。不同植物所需适宜的离体培养基组分质量浓度不同,望春玉兰为50 g·L-1蔗糖+50 mg·L-1硼酸+200 g·L-1PEG-4000;长花玉兰为100 g·L-1蔗糖+200 mg·L-1硼酸+200 g·L-1PEG-4000;丹馨玉兰为100 g·L-1蔗糖+100 mg·L-1硼酸+150 g·L-1PEG-4000;黄山木兰为50 g·L-1蔗糖+100 mg·L-1硼酸+250 g·L-1PEG-4000。②4种植物花粉萌发最佳培养温度均为25 ℃,温度过高会抑制花粉萌发。③随着处理时间的延长,4种植物花粉萌发率增加,但达到最大萌发率所需时间有所不同,其中望春玉兰和黄山木兰在培养9 h时萌发率最高,萌发率分别为71.19%和59.82%,而长花玉兰和丹馨玉兰在培养12 h时萌发率最高,萌发率分别为44.50%和23.43%。     

富铁酿酒酵母菌株的选育及其培养条件优化

【目的】分离鉴定高效富铁酿酒酵母菌株,优化其培养基组分和发酵条件。【方法】从果园根际土壤中分离选育耐铁酿酒酵母菌,对其进行形态学、生理生化分析和26 S rDNA基因序列分析鉴定;采用单因素试验,分别设置不同碳源种类(葡萄糖、蔗糖、乳糖、果糖、麦芽糖)、氮源种类(硫酸铵、酵母膏、蛋白胨、尿素)及不同质量浓度Fe²⁺(100,200,300,…,1 000,1 200,1 600,2 000μg/mL)、碳源(10,20,30,40,50,60,70,80,90 g/L)、氮源(无机氮源2,4,6,8,10,20 g/L;有机氮源4,8,12,16,20,24,28 g/L)、无机盐(MgSO₄·7H₂O 0.3,0.5,1.0,1.5,2.0 g/L;KH₂PO₄ 0.5,1.5,2.5,3.5,4.5 g/L)的培养基进行试验,探究不同培养基组分对酿酒酵母富铁能力的影响。采用单因素试验研究温度(26,28,30,32,34,36,38℃)、初始pH值(3.5,4.0,4.5,...