富花青素紫色番茄组织培养再生体系的建立

以樱桃型紫色番茄"砚紫1号"种子为试材,通过无菌处理获得无菌苗,用无菌苗的幼嫩子叶为外植体,研究了诱导愈伤组织分化及生根情况,以期建立高效的离体培养再生体系。结果表明:紫色番茄无菌苗子叶在MS+IAA 0.1mg·L~(-1)+6-BA 0.5mg·L~(-1)培养基条件下的愈伤组织诱导状态最佳;将愈伤组织进行暗培养处理,可诱导愈伤产生不定芽,其中最佳的培养基条件是MS+NAA 0.01mg·L~(-1)+6-BA 2.0mg·L~(-1);诱导再生的不定芽经过2周光培养接种至MS+NAA 0.05mg·L~(-1)培养基中,诱导生根良好,可获得完整的再生植株。     

花椰菜小孢子胚状体增殖及植株再生

为建立稳定的胚状体增殖成苗技术体系,以期稳定获得足够的再生植株,以花椰菜小孢子胚状体为试材,研究了植物生长激素6-BA、NAA对胚状体增殖及再生苗生根培养的影响。结果表明,胚状体在附加1.25 mg·L~(-16)-BA+0.025 mg·L~(-1)NAA的改良MS培养基上培养,增殖系数最高,可达10.3;再生苗在附加浓度为1.0 mg·L~(-1)NAA生根培养基上的生根效果最佳,平均每芽上生根数达到8.1个。因此,6-BA和NAA配合使用,可显著提高胚状体增殖系数;生根培养基中,添加适量的NAA可增加再生苗的生根数。     

虎头兰类原球茎诱导、增殖及保存

以虎头兰组培苗为试材,采用单因素和正交实验设计,研究了添加不同种类激素和含量对类原球茎诱导的影响以及不同培养基类型、不同激素含量、活性炭含量对类原球茎增殖的影响,并对诱导出的类原球茎进行包埋保存,以期为虎头兰的组培繁殖和种质保存提供新的方法。结果表明:无菌苗诱导类原球茎添加3 mg·L~(-1) TDZ最佳,30 d诱导率到达80%,90 d达到100%;类原球茎增殖的最佳培养基为花宝1号3 g·L~(-1)+0.1 mg·L~(-1) NAA+3 mg·L~(-1) 6-BA+1 g·L~(-1)活性炭,增殖系数可达4.03;类原球茎通过3.5%海藻酸钠溶液和0.1 mol·L~(-1) CaCl_2包埋在4℃黑暗条件下保存120 d,萌发率可以达到48%,植株再生率可达44%。     

八棱海棠高效再生体系的建立及潮霉素的抗性试验

以八棱海棠子叶为外植体,比较了不同浓度植物激素、不同激素组合、不同暗培养时间及不同浓度潮霉素对八棱海棠再生体系的影响,建立了八棱海棠高效再生体系,筛选并分析了潮霉素在八棱海棠遗传转化中的适宜浓度。结果表明:诱导子叶愈伤的最佳培养基为Sc+2.0 mg·L~(-1) TDZ+0.2 mg·L~(-1) NAA+0.5 mg·L~(-1) GA_3,芽再生的最佳培养基为Sc+2.0 mg·L~(-1) TDZ+0.2 mg·L~(-1) NAA,暗培养最佳时间为10 d,生根最佳培养基为1/2MS+0.25 mg·L~(-1) IBA。八棱海棠在整个再生过程中均对潮霉素敏感,在潮霉素浓度为2.0 mg·L~(-1)的愈伤诱导培养基上,外植体的愈伤诱导率仅为23.33%,分化率仅为9.88%;当潮霉素浓度为4.0 mg·L~(-1)时,愈伤诱导率下降为13.00%,而且愈伤不分化,随着培养时间延长,愈伤组织变得更加致密,之后变褐死亡。在诱导生根培养基上添加3.0 mg·L~(-1)潮霉素,生根率仅为3.52%,大部分外植体再生芽底部只会诱导出愈伤组织,没有根原基形成。八棱海棠子叶愈伤诱导及分化的潮霉素筛选临界浓度为2.0～4.0 mg·L~(-1),生根时潮霉素筛选浓度为2.0～3.0 mg·L~(-1)。     

无核君迁子离体叶片的植株再生

以"赞圆无核"君迁子组培苗叶片为试材,研究了基本培养基类型、植物生长调节物质浓度和暗期处理对离体叶片不定芽再生的影响,并获得了完整的再生植株。结果表明:最适宜的基本培养基为MS(1/2N),最佳的生长调节剂组合为5.0mg·L~(-1) ZT+0.10mg·L~(-1) IAA,其愈伤组织诱导率、不定芽形成率及平均出芽数分别达到99.1%、87.3%和5.4个;暗培养4周,再转为光下培养2周效果最佳;将叶片再生植物转入(1/2N)MS+0.5mg·L~(-1) ZT+0.01mg·L~(-1) IAA培养基中继代培养,以1/2MS+1.0mg·L~(-1) IAA+20g·L~(-1)蔗糖+7g·L~(-1)琼脂培养基诱导生根,生根率60.5%;生根苗大田移栽成活率63%。     

金叶杨组织培养再生体系的建立

以金叶杨(Populus nigra cv.'Jinye')带腋芽的茎段为试材,采用了组织培养的方法,研究了金叶杨的腋芽诱导、继代增殖、生根培养,以期为保持其优良性状、实现工厂化育苗提供参考。结果表明:1年生茎段最佳消毒方式是使用0.1%HgCl_2溶液处理10 min;最佳诱导培养基为MS培养基;腋芽诱导最佳激素配比为6-BA 0.5 mg·L~(-1)+NAA 0.3 mg·L~(-1),腋芽诱导率为92.6%;增殖效果最佳的激素配比为6-BA 1.0 mg·L~(-1)+NAA 0.4 mg·L~(-1)+GA_3 0.2 mg·L~(-1),增殖系数为4.4;组培苗生根培养效果最好的培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg·L~(-1),生根率为91.2%。     

红金银花茎段愈伤组织的诱导

以红金银花当年生幼嫩茎段为试材,采用正交实验设计,研究了红金银花愈伤组织诱导和增殖培养的影响因素。结果表明:6-BA、KT促进了愈伤组织的诱导,提高了出愈率;当NAA、KT分别为0.4、1.0mg·L~(-1)时最有利于愈伤组织的增殖培养。不同季节外植体愈伤组织诱导效果不同,春季采集的当年生的幼嫩茎段更有利于愈伤组织的诱导;MS培养基中添加6.5mg·L~(-1)琼脂比较适宜;红金银花愈伤组织诱导最适宜的培养基为MS+KT 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.2mg·L~(-1)+6-BA 1.5mg·L~(-1);愈伤组织增殖培养最适宜的培养基为MS+6-BA 1.5mg·L~(-1)+NAA 0.4mg·L~(-1)+KT 0.1mg·L~(-1)。     

大花蕙兰原球茎诱导、增殖与分化影响因素研究

以大花蕙兰试管组织为试材,MS为基本培养基,研究了不同添加物6-BA、NAA、IBA、活性炭,对大花蕙兰原球茎诱导、增殖和分化的影响。结果表明:适宜原球茎诱导、增殖的最佳培养基为MS+1.00mg·L~(-1) 6-BA+0.1mg·L~(-1) NAA,适宜原球茎分化的最佳培养基为MS+1.0mg·L~(-1) 6-BA+0.2mg·L~(-1) NAA,在培养基中添加0.3%活性炭有利于原球茎的增殖和分化。     

“鲁加5号”柱型苹果胚状体再生体系优化

利用胚状体再生植株,可以获得遗传稳定性好且数量多的再生植株,这对于建立高频稳定的遗传转化体系具有重要意义。该试验以苹果新品种"鲁加5号"为试材,采用叶片再生方法,研究了其胚状体再生体系,为建立遗传转化体系奠定了基础。结果表明:MS+6-BA1.0mg·L~(-1)+NAA 0.20mg·L~(-1)为"鲁加5号"最适宜的继代增殖培养基。叶片的最佳放置方式为近轴面接触培养基。胚胎发育阶段最佳暗培养时间为10d。最佳体细胞胚诱导培养基为MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 5.0mg·L~(-1)+TDZ 0.5mg·L~(-1)。胚胎发育阶段,通过胚状体不同时期形态学组织学观察,显示胚状体发育时期经历原胚、球形胚、心形胚、鱼雷形胚、子叶胚和成熟胚阶段。     

欧李优系试管苗增殖关键技术研究

以欧李优系试管苗为试材,采用单因素试验设计,研究了不同生长调节物质组合、基本培养基类型、附加物和蔗糖浓度对试管苗生长状态和增殖效率的影响。结果表明:在MS+6-BA 0.5mg·L~(-1)+KT 0.5mg·L~(-1)+IBA 0.05mg·L~(-1)培养基上,附加水解乳蛋白(LH)300mg·L~(-1)、蔗糖35g·L~(-1)、琼脂5.8g·L~(-1),为欧李优系试管苗增殖的最佳培养条件。