铁皮石斛优质试管苗繁育技术研究

以野生铁皮石斛为试材,采用限根培养法,研究了铁皮石斛种子非共生萌发特性及优质试管苗繁育技术。结果表明:授粉120d的种子达到生理成熟,能够顺利萌发;授粉140d种子达到形态成熟,萌发率可达98.51%;低温黑暗限制保存原球茎可控制其生长;在特定容器中用限根培养基MS+0.10mg·L~(-1) 6-BA+0.3mg·L~(-1) NAA+香蕉泥80g·L~(-1)培养小苗可得到优质试管苗;把试管苗移栽到松树皮中,成活率可达97.62%,该研究为铁皮石斛产业化育苗提供了新方法。     

不同浓度激素配比对重唇石斛组织培养的影响

以重唇石斛(Dendrobium hercoglossum Rchb.f.)成熟种子为外植体,MS为基本培养基,研究了植物生长调节素种类及浓度对重唇石斛继代增殖和生根的影响。结果表明:重唇石斛最佳的启动培养基为MS+6-BA 1.5mg·L~(-1)+NAA 0.5mg·L~(-1)。利于继代增殖的培养基为MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.4mg·L~(-1)+KT 0.2mg·L~(-1)+AC 1.0g·L~(-1),最佳的生根壮苗培养基为MS+6-BA 0.5mg·L~(-1)+NAA 2.0mg·L~(-1)+AC 1.0g·L~(-1),平均根长3.12cm,生根率达到90%以上。     

霍山石斛的组织培养研究

以霍山石斛种子为外植体,不同激素为变量,筛选出霍山石斛种子萌发、增殖培养、生根壮苗培养各阶段适宜的培养基配方。结果表明,霍山石斛种子萌发适宜的培养基配方为花宝一号1.5g·L~(~(-1))+花宝二号0.5g·L~(-1)+6-BA0.5mg·L~(-1)+NAA0.3mg·L~(-1)+香蕉100g·L~(-1)+蔗糖30g·L~(-1)+琼脂4.75g·L~(-1)+碳粉0.5g·L~(-1)+肌醇100g·L~(-1)+牛肉蛋白胨1g·L~(-1),种子萌发状态好,颜色翠绿。继代增殖适宜的培养基配方为MS+香蕉100g/L+蔗糖30g/L+碳粉0.5g/L+牛肉蛋白胨1g/L+琼脂4.8g/L+6-BA1.5mg/L+KT1.5mg/L,霍山石斛增殖倍数达到2.5,增殖苗生长势较好,6-BA对霍山石斛增殖实验增殖的影响显著,NAA、KT对霍山石斛增殖的影响不显著。适宜的生根壮苗培养培养基配方为MS+香蕉100g/L+蔗糖30g/L+碳粉0.5g/L+牛肉蛋白胨1g/L+琼脂4.8g/L+6-BA1.5mg/L+NAA0.5~(-1)mg/L+IBA1~(-1).5mg/L。霍山石斛试管苗长势较好,茎粗壮,平均生根数达到9根以上。6-BA对霍山石斛生根壮苗培养株高影响极显著,IBA对霍山石斛生根壮苗培养株高影响显著,6-BA对霍山石斛生根培养茎粗效果极显著。     

‘春绿兰×虎雪兰,F1代组培苗快繁技术

以‘春绿兰×虎雪兰’F_1代的原球茎为外植体,在无菌条件下,以1/2MS培养基为基本培养基,添加不同浓度6-BA与NAA,研究了不同激素配比对原球茎不同培养阶段的增殖、分化和生根的影响。结果表明:1/2MS+1.0 mg·L~(-1) 6-BA+0.5 mg·L~(-1)NAA+80g·L~(-1)香蕉泥,利于原球茎的增殖和分化,增殖率和分化率分别为222.00%、90.57%;1/2MS+1.5mg·L~(-1) 6-BA+0.5mg·L~(-1) NAA+80g·L~(-1)香蕉泥,利于不定芽增殖,增殖率为42.50%;1/2MS+0.5mg·L~(-1) 6-BA+1.5mg·L~(-1) NAA生根效果最佳,生根率为100%,平均株根数为5.50条,平均根长为40.73mm,且植株长势健壮。     

铁皮石斛增殖培养培养基配方的优化

以铁皮石斛不定芽为材料,采用单因素随机区组试验和正交试验设计方法,在25℃,2 000 lx,12 h·d-1条件下,研究基本培养基、NAA、6-BA、BR、蔗糖对铁皮石斛不定芽增殖的影响。结果表明:1/2 MS为铁皮石斛不定芽增殖的最佳基本培养基;NAA是影响铁皮石斛增殖有效芽倍增率和生根有效芽倍增率的主要因素;组合1/2 MS+花宝1号3 g·L-1+NAA 1.0 mg·L-1+6-BA 1.5 mg·L-1+BR 0.001 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+水解络蛋白0.25 g·L-1有利于不定芽增殖,增殖有效芽倍增率(17.31±0.09)、生根有效芽倍增率(5.68±0.03)均极显著高于其他处理。     

组培条件下铁皮石斛幼芽分蘖和生根的影响因素研究

以铁皮石斛幼芽为外植体,研究比较了不同基本培养基、不用浓度NAA和不同天然添加物对铁皮石斛分蘖和生根的影响,以期探讨组培条件下影响铁皮石斛幼芽分蘖及生根的培养条件.结果表明:培养基类型、NAA浓度及天然添加物的类型和浓度对铁皮石斛幼芽的分蘖和生根有显著的影响.1/2MS培养基适合幼芽分蘖繁殖,2.0mg/L的NAA和10％香蕉泥可促进幼芽的分蘖与生根.     

金叶锦带组培技术

以金叶锦带的腋芽为外植体,采用组织培养法,通过在培养基中添加不同浓度激素,筛选最佳培养基,为金叶锦带的大面积推广提供技术支撑。结果表明:最佳诱导培养基为MS+0.6mg·L~(-1) 6-BA+0.1mg·L~(-1) NAA+蔗糖30g·L~(-1)+琼脂7g·L~(-1),诱导率达86.3%;最佳增殖培养基为MS+1.0 mg·L~(-1) 6-BA+1.0 mg·L~(-1) GA3+蔗糖30g·L~(-1)+琼脂7g·L~(-1),增殖系数7.250 6;最佳生根培养基为1/2MS+1.0mg·L~(-1) IBA+蔗糖30g·L~(-1)+琼脂7g·L~(-1),生根率100.0%。     

走马胎离体培养及植株再生

以走马胎幼嫩叶片为外植体,研究不同培养基对走马胎叶片愈伤组织诱导、不定芽分化、增殖及生根培养的影响。结果表明:叶片在MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 1.0mg·L~(-1)培养基上诱导产生的愈伤组织最适合用于进行分化和增殖;愈伤组织分化不定芽的最适培养基为MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1),分化率高达88.9%;壮苗培养基为MS+6-BA0.5mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+10%椰子水(CW);最适的生根培养基为MS+NAA0.1mg·L~(-1)+IBA 1.0mg·L~(-1),生根率达100%,根系发达,植株生长健壮。经生根培养及练苗,走马胎的假植成活率达85%。     

6-BA和GA3对NaCl胁迫下铁皮石斛幼苗生长及可溶性糖含量的影响

以铁皮石斛为试材,在NaCl胁迫下,研究了6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)和赤霉素(GA3)对铁皮石斛幼苗生长、色素及可溶性糖含量的影响。结果表明:2.0mg·L~(-1) 6-BA可以显著提高NaCl胁迫下铁皮石斛幼苗根的生长率,而4.0mg·L~(-1) GA3则显著的提高其根的生长率,但二者均降低铁皮石斛茎的生长率;2.0mg·L~(-1) 6-BA则可以降低叶绿素b含量,而4.0mg·L~(-1)6-BA则可以提高叶绿素的含量,且不同浓度6-BA对叶绿素a和类胡萝卜素的含量无显著性影响;2.0mg·L~(-1) GA3均可以提高叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素的含量,而6.0mg·L~(-1) GA3则降低叶绿素b含量;4.0mg·L~(-1) 6-BA和6.0mg·L~(-1) GA3均可以提高可溶性糖含量。因此,添加适当浓度的外源植物激素可以促进铁皮石斛中可溶性多糖的合成与积累。     

报春石斛组培快繁技术体系的建立

以报春石斛蒴果为外植体,通过对种子无菌萌发和原球茎诱导、原球茎增殖及丛生芽诱导、生根壮苗以及移栽驯化的研究,以期建立报春石斛的组培快繁技术体系。结果表明:培养基MS+6-BA 1.0mg·L^-1+NAA 0.1mg·L^-1+蔗糖20g·L^-1最适报春石斛种子无菌萌发和原球茎的诱导;原球茎增殖及丛生芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg·L^-1+NAA 0.1mg·L^-1+香蕉泥100g·L^-1+蔗糖20g·L^-1,继代培养45d,增殖系数达8.2;最佳生根壮苗培养基为MS+6-BA 1.0mg·L^-1+KT 0.5mg·L^-1+NAA 0.2mg·L^-1+香蕉泥100g·L^-1+蔗糖30g·L^-1+活性碳1.0g·L^-1,培养3个月,生根率达100%,根系较长,苗壮;3—4月是桂林地区移栽报春石斛组培苗的最佳季节,生根苗在栽培基质Ⅰ(树皮∶水苔∶珍珠岩∶蛭石=10∶2∶1∶1,体积比)的长势好于栽培基质Ⅱ(树皮∶珍珠岩∶蛭石=10∶1∶1,体积比),成活率为92.3%。