兽药中非法添加物检测新技术的应用

食品安全是公众关注的热点问题,兽药产品非法添加化学药物造成食品安全隐患,因此兽药非法添加检测技术显得尤为重要。本文就目前国内兽药非法添加化学药物的检测技术研究情况进行综述,重点介绍高效液相法、液质联用法的研究进展。     

兽药中非法添加药物的检测技术研究进展

兽药非法添加药物现象严重,给兽药监管带来极大的难度,且严重危害消费者身体健康,本文对目前我国兽药非法添加药物现状做一介绍。简述了目前非法添加药物的种类,并着重介绍了兽药非法添加药物的检测技术,包括超高效液相色谱法、表面增强拉曼光谱法等。     

普通高效液相色谱-二极管阵列法自动筛查识别兽药中非法添加物的研究

为了建立兽药中非法添加物筛查的自动识别方法,采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以水-醋酸铵溶液(99∶1)为流动相A,甲醇-醋酸铵溶液(99∶1)为流动相B,二极管阵列检测器测定目标物对照品,记录色谱图和光谱图,建立其主成分紫外光谱和保留时间数据库。兽药样品经处理后上机检测,采集主要成分的紫外光谱及相应保留时间信息,执行峰跟踪,使用光谱库筛选结果,仪器自动识别检测兽药的成分。结果：采用普通高效液相色谱仪配备二极管阵列检测器即可筛查识别农业农村部公告第169号中需要使用超高效液相色谱-二极管阵列法进行筛查的全部153种化合物中的149种,另增加了47种新的化合物,使能够自动筛查识别的非法添加目标物达到196种,并明确了各化合物的最佳提取波长。结论：建立的普通高效液相色谱-二极管阵列法可自动识别兽药中非法添加目标物,方法简单、快速、成本低、效率高;通过方法移植和数据共享,可在具有同类型设备的实验室推广应用。     

微生物管碟法快速检测中兽药散剂中非法添加抗菌药物

建立中兽药散剂中非法添加抗菌药物的微生物管碟快速检测方法。中兽药散剂经水简单溶解灭菌,然后缓冲液稀释后滴入带有藤黄微球菌的管碟,培养16 h,通过是否产生抑菌圈判断中兽药散剂中添加抗菌药物与否。结果发现阴性样品无干扰,检出限为1.5～3.5 mg/g。说明本方法简单、快速、灵敏,可满足中兽药散剂中非法添加抗菌药物检测需求。     

兽药制剂中非法添加化学药物现状及检测技术研究进展

针对目前兽药制剂中非法添加的情况,本文对近年来兽药制剂中非法添加化学药物情况,已查明用于非法添加的化学药物,以及目前用于兽药制剂中非法添加化学药物的检测技术进行综述,并对非法添加物的筛查思路提出展望。     

中兽药散剂中非法添加酰胺醇类药物的检测方法研究

建立了高效液相色谱测定中兽药散剂中甲砜霉素、氟苯尼考、氯霉素3种非法添加药物的方法。采用Waters Atlantis T3色谱柱(4. 6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,流速为1. 0 m L/min,检测波长为224和278 nm。该方法选取4种常见中药散剂:健胃散、止痢散、球虫散、胃肠活。经验证,甲砜霉素的检测限为3 g/kg、氟苯尼考及氯霉素的检测限均为4 g/kg,对照溶液的线性范围为10～500μg/m L,峰面积的相对标准偏差分别为0. 11%、0. 11%、0. 13%。按外标法计算其回收率,三种药物的回收率均在98. 0%～103. 0%,变异系数均在0. 6%～1. 6%。与传统的标准检测方法相比,研究最终完成了几种中兽药制剂中同时检测三种酰胺醇类药物,突破了原有标准中一种药物的检测方法,提高了检测工作效率,同时该方法具有较好的灵敏度、准确度和稳定性,能够满足对三种药物常规检测的要求。在实际工作中,通过对不同类别固体兽药制剂进行实验探索验证,得出该方法具有很好的适用性,为相关检测单位的检测工作提供了一定的技术支持,提高违法添加的检出率。     

清热解毒类中兽药中非法添加吲哚美辛的HPLC-PDA检测方法的建立

建立了HPLC-PDA法测定清热解毒类中兽药中吲哚美辛的检测方法。采用ODSC₁₈色谱柱(柱长150 mm,内径4.6 mm,粒径5μm),流动相为乙腈:0.1 mol/L冰醋酸(50∶50,V₁∶V₂)为流动相,采集波长范围为200～400 nm,定量波长为317 nm,进样量为10μL。试验结果表明,吲哚美辛在5～200μg/mL范围内线性良好(r=0.9999),各基质中吲哚美辛的检测限均为1.0 g/kg,峰纯度检查和光谱相似度检查均符合要求。其中,板二黄片中吲哚美辛的平均回收率为96.5%,相对标准偏差(RSD)为0.9%(n=6);三黄散中吲哚美辛的平均回收率为99.3%,RSD为1.3%(n=6);扶正解毒散中吲哚美辛的平均回收率为100.6%,RSD为0.8%(n=6)。本法应用清热解毒类中兽药中非法添加吲哚美辛的检测,结果准确可靠。     

HPLC-DAD法测定兽药恩诺沙星注射液中非法添加呋塞米

建立了兽药恩诺沙星注射液中非法添加呋塞米的HPLC-DAD检查方法。以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以水-四氢呋喃-冰醋酸(70∶30∶1)为流动相;柱温30℃;流速1.0 mL/min;进样量20μL;二极管阵列检测器检测,采集波长范围为190～400 nm,提取波长为272 nm。通过液相色谱保留时间、紫外吸收光谱和峰纯度分析对非法添加物进行确认。结果表明,呋塞米与其他组分在色谱条件下分离情况良好。呋塞米在2.0～100.0μg/mL范围内线性关系良好,R²=0.9999。回归方程为：Y=1.0629X+0.0685,R²=1.0000。按高、中、低三个浓度水平添加呋塞米,每个浓度水平各平行配制3份阳性添加样品溶液进行测定,每个平行进样2次,测得平均回收率为100.8%,RSD=1.0%。方法的检测限为1.0μg/mL。方法准确,可靠,可以用于检查兽药恩诺沙星注射液中非法添加呋塞米。     

UPLC-PDA法测定杨树花口服液中非法添加物黄芩苷

为了建立超高效液相色谱-二极管阵列检测法(UPLC-PDA法)测定杨树花口服液中非法添加物黄芩苷,取适量黄芩苷对照品、杨树花口服液阴性样品、阳性添加样品、抽检样品经50%甲醇溶解,超声提取,滤液过滤并定量稀释后,作为供试品溶液,采用UPLC-PDA法检测。色谱分离采用ACQUITY UPLCTMHSS T3色谱柱为分离柱,柱温:35℃;流动相体系:A项为乙腈,B项为0.4%磷酸水溶液,进行梯度洗脱;流速:0.35 m L/min;进样量:10μL;选择二极管阵列检测器,检测波长为278 nm,上机测定。通过保留时间、光谱图、峰纯度等参数对黄芩苷进行定性定量检测。结果表明,黄芩苷在0.5~100μg/m L的范围内线性关系良好(R2=0.999);杨树花口服液中添加黄芩苷0.05 mg/m L,信噪比(S/N)3,确定为方法的检测限;添加0.1 mg/m L,信噪比(S/N)10,确定为方法的定量限;杨树花口服液在0.1、0.2、0.4、0.6 mg/m L黄芩苷添加水平的回收率为95%~105%,批内批间变异系数均小于10%,准确度和精密度良好,完全满足检测需求。而且峰纯度角与阈值符合要求。本方法经济快速、灵敏、重现性好,适用于杨树花口服液中非法添加黄芩苷的定性定量检测。     

UPLC-PDA联合UPLC-MS/MS法确证一批标称杨树花口服液中非法添加物甘草酸

采用UPLC-PDA联合UPLC-MS/MS方法确证了一批标称杨树花口服液中非法添加物甘草酸。样品经提取稀释后,采用ACQUITY UPLC T₃色谱柱为分离柱,UPLC-PDA初步筛查,再用负离子扫描,液相色谱串联质谱仪上机测定。通过对比色谱图保留时间和光谱图的峰形以及质谱图,结果表明最终确证该批样品中非法添加物为甘草酸。UPLC-PDA方法中甘草酸检测限为20μg/mL,定量限为50μg/mL。本方法快速、灵敏、重现性好,适用于本批标称杨树花口服液中甘草酸的检测。     

禽蛋和禽肉中兽药残留检测技术研究进展

随着我国家禽产业的规模不断扩大,兽药残留问题也更加严峻。兽药残留对人体与环境危害重大。现对目前禽蛋和禽肉中常见的兽药残留种类及最大残留限量进行综述,探讨了(超)高效液相色谱法、(超)高效液相色谱-质谱法、气相色谱-质谱法和免疫学检测法、分子印迹技术、生物芯片技术、生物传感器检测法在禽蛋和禽肉中的应用价值,以期为兽药残留检测和监管提供依据。     

HPLC-PDA法测定兽药中非法添加四种解热镇痛抗炎类药物

建立了7种兽药中非法添加对乙酰氨基酚、安乃近、地塞米松和地塞米松磷酸钠药物的HPLC-PDA法。采用十八烷基键合硅胶为填充剂,磷酸二氢钠缓冲液（磷酸二氢钠3．0 g加水至1000 mL,加三乙胺1 mL,用氢氧化钠调pH值至7．0±0．2）-甲醇（80∶20）为流动相,梯度洗脱,二极管阵列检测器进行全扫描和240 nm波长测定,并采用峰纯度检查和光谱相似度检查辅助对照品比对方法,对四种目标分析物进行确证。结果显示,4种解热镇痛抗炎药物与其他物质峰分离良好,在测定范围内线性关系良好,平均回收率为73．5％～119．2％,RSD为0．1％～5．8％。本方法准确、可靠、重现性好,可用于兽药制剂中非法添加四种解热镇痛抗炎药物的定性和定量检测。     

红霉素药物残留检测技术的研究进展

本文介绍了红霉素药物的特性、残留危害以及目前国内外主要的检测方法和技术,包括高效液相色谱法、薄层色谱法、气／质联用法、液,质联用法、微生物法、酶联免疫法,并对红霉素残留分析前景进行了展望。     

分子印迹技术在兽用抗生素残留分析中的应用进展

随着规模化养殖业发展,兽用抗生素大量使用,不合理甚至违法添加使用导致的残留现象已成为威胁动物源食品安全的重要因素,迫切需要建立灵敏可靠的残留分析方法。从复杂的生物样品中提取纯化微量的残留药物是制约兽药残留检测方法建立的关键。分子印迹技术具有特异性强、灵敏度高、操作简便等优点,在兽药残留检测研究中得到越来越多重视。文章主要综述了分子印迹聚合物的最新制备方法及在兽用抗生素残留分析中的最新研究进展。     

基于非线性混合效应模型分析兽药药代动力学研究进展

利用数学建模分析兽药药代动力学历来已久。兽药药代动力学中应用数学建模和模拟分析可简化和加快兽药研发进程。非线性混合效应模型分析方法是兽药药代动力学建模和模拟的主要方法之一,该方法对临床合理用药、新药研发及评审更高效具有很大意义,同时阐明一些传统药动学无法回答的问题。本文综述了非线性混合效应模型在分析兽药药代动力学主要原理及应用进展,以期望非线性混合效应模型分析方法在我国新兽药研发与评审中应用提供积极有益的参考。     

中兽药防治动物疫病研究现状

近年来,随着科学技术的进步和畜牧业水平的提高,我国传统的中兽医理论(正气存内,邪不可干)和中草药的物性(阴阳寒凉温热)、物味(酸苦甘辛咸)、物间关系及辅以现代技术和生产工艺生产的纯天然药物和纯天然中草药饲料添加剂,已在世界各地悄然兴起.     

兽药对生态环境影响的研究进展

综述了兽药对陆生和水生生态环境影响方面的研究进展，探讨了兽药对陆生植物、土壤动物、土壤微生物与原生生物等陆生生态环境的影响及对浮游类生物与微生物、鱼虾与水体甲壳动物等水生生态环境的影响及其生态毒理效应。     

国内外兽药监管信息化建设现状及趋势

兽药监管信息化是提高兽药监管效率、保障兽药产品质量的有效途径。以美国、加拿大和欧盟为例,重点回顾了国外兽药监管信息化主要进展。针对兽药产销全过程重要环节,归纳总结我国兽药产销全过程的审批、生产、流通、监督检验和追溯环节的信息化建设现状,以及我国兽药网络信息共享与应用取得的最新成效。对比分析国内外兽药产销全过程重要环节信息化建设差异,明晰了我国兽药监管信息化存在的主要问题,提出了我国兽药监管信息化发展方向及应对措施,为提高我国兽药监管信息化水平、实现兽药全过程追溯提供参考。     

王丽娜，郝利忠，韩春晓，苗翠

畜产品中药物残留主要包括β-受体激动剂类、抗生素类、性激素类等药物。ELISA检测技术因其灵敏度高、特异性强、仪器设备简单、成本低、方法快速、简便等优点,成为畜产品中药物残留目前最理想的检测技术之一。为了考察试剂盒的各项指标与标示指标是否一致和能否正确使用试剂盒,本文就ELISA检测技术在畜产品中兽药残留检测试剂盒的选择原则和使用注意事项进行了归纳总结。