云南省部分地区牛冠状病毒检测及其N基因序列分析

为深入了解云南省牛冠状病毒（bovine coranarirus,BCoV）在不同地区、不同年龄牛群中的流行情况,2021—2022年采集大理、陆良、石林、寻甸等4个地区5家牛场不同年龄牛的粪便样品357份（腹泻样品61份、非腹泻样品296份）进行BCoV RT-PCR检测,并对BCoV阳性样品进行N基因测序分析。结果显示：在357份粪便样品中,检出BCoV阳性51份,总样品检出率为14.29%,5家牛场均有阳性检出,场阳性率为100%;1周龄、1周龄—1月龄、1~6月龄、1岁以上牛粪便样品的BCoV检出率分别为10.00%、19.23%、10.81%、17.31%;腹泻样品BCoV检出率为36.07%,非腹泻样品为9.78%。通过扩增得到4条完整的BCoV N基因序列;经同源性与遗传进化分析,4条N基因序列高度保守,相互间核苷酸同源性为99.0%~99.8%,与国内参考毒株处于同一小分支,亲缘关系近,核苷酸同源性为97.7%~99.9%,与美国4-17-03、7-16-23、4-17-25和日本GF2020等毒株处于同一个大分支且遗传距离较近;与美国原始毒株Mebus处于不同的大分支,亲缘关系较远,核苷酸同源性为98.1%~98.2%。结果表明：云南省牛群中可能广泛存在BCoV流行,1周龄—1月龄犊牛感染发病风险最高,调运或引种导致BCoV在国内传播的可能性较大。因此,需加强BCoV流行的监测与控制,严格进行检疫,加快疫苗研发和应用。     

吉林省肉牛冠状病毒感染状况调查及分析

旨在全面了解牛冠状病毒(BCoV)在吉林省肉牛群的流行情况,选择吉林省东中西部地区的12个县市的规模化、养殖合作社、家庭型养殖户等牛场在不同季节采集血液、鼻拭子、粪拭子及临床病死牛组织脏器,采用血清学及分子生物学诊断检测技术,对BCoV进行流行病学调查,了解BCoV在该吉林省部分地区的流行情况。共采集临床血清样品1 298份,粪便样品、肝、肺、脾、气管等组织样品462份,应用商品化BCoV抗体检测试剂盒检测血清抗体和纳米PCR新型检测技术对临床样品进行PCR检测,并对核酸检测出的阳性结果测序分析。结果显示BCoV抗体血清阳性率为1.08%,粪便、肝等临床样品阳性率21.10%。经测序分析调查地区BCoV流行株与我国四川流行株相似性达99%以上。本研究对吉林省中部地区BCoV流行情况进行了全面调查,丰富了牛冠状病毒的流行病学调查数据,为指导牛冠状病毒的防控工作奠定了基础。     

黑龙江省大庆市部分地区牛轮状病毒腹泻的分子流行病学调查

为了对黑龙江省大庆市部分地区犊牛轮状病毒腹泻的流行情况进行调查,应用RT-PCR技术对随机采取的6份犊牛腹泻粪便样品的轮状病毒VP7基因进行扩增,采用多重半套式PCR方法对VP7基因阳性样本进行分型鉴定。结果显示,6份犊牛腹泻粪便样品中牛轮状病毒VP7基因均为阳性;VP7基因阳性样本经RT-PCR分型鉴定,均属于G10型。该研究结果表明大庆地区引起犊牛轮状病毒腹泻的轮状病毒主要为G型,因此需要针对G型轮状病毒加以防控。     

牛病毒性腹泻病毒TaqMan探针荧光RT-PCR方法的建立和临床应用

为建立一种牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的快速检测方法,本研究根据国内BVDV流行毒株5’-UTR序列保守区域设计1对特异性引物和TaqMan探针,并优化了反应条件,最终建立了一种检测BVDV基因1型(BVDV-1)的TaqMan探针荧光RT-PCR检测方法,并开展7省份BVDV-1型检测和流行情况分析。结果显示：所建立方法能够特异性检测出BVDV-1,与基因2型BVDV、猪瘟病毒、边界病毒、牛冠状病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛轮状病毒等病原无交叉反应;灵敏度高,最低检测下限为4.3 copies/μL;批内和批间变异系数均小于2%,重复性良好。7省份规模化牛养殖场BVDV-1型平均阳性率为17.40%(161/925),序列分析表明我国主要流行的为BVDV-1a,BVDV-1c亚型。本研究成功建立了一种良好的诊断BVDV的方法,监测地区优势流行毒株为BVDV-1a与1c亚型,为临床中BVDV早期诊断和流行病学调查监测提供了技术和数据支持。     

江西部分地区猪瘟疑似病例中牛病毒性腹泻病毒感染情况的初步调查

参照资料选择并验证了一对牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,简称BVDV)特异性引物,摸索了检测BVDV的RT-PCR方法的不同反应条件,选择出了最佳条件,建立了特异性的RT-PCR检测方法。并对已做过CSFV检测的52份病料进行BVDV的回归性检测,其中BVDV检测结果为阳性的病料7份,表明江西省部分猪群存在BVDV的感染,结合之前做过的猪瘟病毒(CSFV)检测结果,可说明江西省部分猪群存在BVDV的单纯感染和BVDV与CSFV的混合感染。     

青海省部分地区3种牛病毒性腹泻病原的感染情况调查

为了解青海省部分牛群中牛病毒性腹泻病毒（bovine viral diarrhea virus,BVDV）、牛轮状病毒（bovine rotavirus,BRV）和牛冠状病毒（bovine coronavirus,BCV）3种牛病毒性腹泻病原的感染现状,本研究采用RT-PCR方法首次对2012～2013年青海省部分地区的32份具有腹泻症状的临床病料及152份健康牛粪便样品进行了BVDV、BRV、BCV的核酸检测与分析。结果显示,32份腹泻牛病料样品中BVDV、BRV、BCV的阳性率分别为65.63%（21/32）、18.75%（6/32）、34.38%（11/32）,且存在2种或3种病原的混合感染;152份健康牛粪便样品中BVDV、BRV、BCV的阳性率分别为3.95%（6/152）、1.97%（3/152）、0（0/152）。该结果表明青海省部分牛群中普遍存在BVDV、BRV、BCV的感染,且混合感染现象严重,需进一步加强青海省地区牛病毒性腹泻病原的综合防控。     

新疆部分规模化奶牛场牛病毒性腹泻调查

为了了解新疆部分规模化奶牛场BVDV的感染情况,对采集的奶牛血清、流产死胎和鼻拭子等组织病料应用Ruminant BVD/BD p80-Serum阻断ELISA实验及牛病毒性腹泻(BVD)实时荧光RTPCR的方法进行检测,BVDV血清学检测阳性率为63.8%,组织病料样品中阳性率为13.46%,结果表明BVDV在新疆规模化奶牛场中已存在感染,因此应该对发病动物进行隔离或者淘汰,避免相互感染传播,降低感染率。     

广西河池地区牛肠道病毒和牛冠状病毒流行病学调查及遗传变异分析

为了解广西壮族自治区河池地区牛肠道病毒(BEV)和牛冠状病毒(BCoV)的流行情况及毒株序列特征,本试验应用TRIzol法抽提核糖核酸(RNA),采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)对2021—2022年广西河池各地区采集得到的422份粪便样品进行病原检测及遗传变异分析。结果显示,广西河池地区BEV的检出率为3.23%～19.51%,BCoV的检出率为2.44%～4.62%,BEV和BCoV混合感染率为2.44%～4.44%。按照不同品种牛群对BEV和BCoV检测结果进行分析,结果显示,西门塔尔杂交牛BEV感染率为13.99%,BCoV感染率为2.07%;本地黄牛BEV感染率为9.00%,BCoV感染率为0.95%;杂交水牛BEV感染率为33.33%,BCoV未发现感染;安格斯牛BEV和BCoV均未发现感染。按照不同年龄对BEV和BCoV检测结果进行分析,结果显示,0～180日龄BEV感染率为22.11%,BCoV感染率为4.21%,大于180日龄牛群BEV感染率为7.95%,BCoV感染率为0.61%。按照不同养殖模式对牛群BEV和BCoV检测结果进行分析,结果显示,农户养殖B...     

牛病毒性腹泻／粘膜病流行情况调查

牛病毒性腹泻/粘膜病(BVD/MD)是牛的一种流行较广的传染病。此病在欧美国家广泛存在,感染率相当高。我国由1980年以来陆续报道了诊断和调查的情况,证明我国也有此病流行,有的地区感染率也很高。在我省牦牛中,大牛和小牛的腹泻时有反映,黄南、玉树、果洛等地曾分离出犊牛付伤寒的病原,使用付伤寒死菌苗进行防制。有的地区可以降低发病率(如黄南).     

2020年云南省边境地区牛蓝舌病血清学调查

为了解蓝舌病(bluetongue,BT)在云南边境地区的流行和分布情况,2020年采用竞争ELISA方法,在云南省边境地区12个县市随机采集135个养殖场、活畜交易市场和散养户的3800份牛血清样品进行蓝舌病病毒(bluetongue virus,BTV)抗体检测。结果显示:12个边境县市均检出阳性血清样品,平均样品阳性率为77.9%,场户阳性率为93.3%;样品阳性率有一定的地区差异,其中陇川县最高(92.0%),孟连县最低(48.0%),差异存在统计学意义(P<0.05);境外牛血清样品阳性率(84.8%)显著高于本地牛(67.9%),P<0.05;不同饲养方式下的样品阳性率存在差异,其中舍饲最高(81.4%),半放牧半舍饲(62.5%)最低,P<0.05;黄牛样品阳性率(80.0%)明显高于水牛(61.4%),P<0.05。结果推断,BT在云南边境地区可能广泛存在且流行严重,需要持续开展血清学调查、监测,重点加强对境外牛的控制。本研究为我国西南边境地区BT防控提供了数据参考。     

西昌市牛皮蝇幼虫病感染情况调查

牛皮蝇幼虫病是由牛皮蝇和纹皮蝇的幼虫寄生于牛皮背部所引起的。该病可使患牛消瘦。幼畜发育迟缓，产乳量下降，皮革质量降低。造成较大的经济损失。为了摸清西昌市牛皮蝇幼虫病的感染状况．我们对西昌市屠宰牛的牛皮蝇幼虫病进行了检验。为制定有效防制措施提供基础资料。     

青海省牛隐孢子虫感染状况的调查研究

对青海省牦牛、奶牛和黄牛的281份牛粪样进行隐孢子虫检查,发现隐孢子虫感染率为36.65%,其中牦牛为39.74%、黄牛为35.00%、奶牛为32.73%。犊牛感染率高于成年牛,暖季感染率高于冷季。     

2020年我国部分地区猪繁殖与呼吸综合征分子流行病学调查

为了解我国猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）的流行及遗传变异情况,2020年对来自7个省的570份疑似PRRSV感染样品进行RT-PCR检测,并对60个PRRSV阳性样品进行ORF5基因测序及分析比较。RT-PCR检测结果显示,2020年送检样品中,PRRSV阳性检出率为23.68%(135/570),其中保育猪病料的阳性检出率最高,为32.24%(108/335)。同源性对比及遗传进化分析结果显示,60个PRRSV均为PRRSV2（美洲株）,主要属于谱系1和谱系8,占比分别为51.67%和43.33%。氨基酸分析结果显示,60个PRRSV的GP5蛋白氨基酸以点突变为主,其中10个PRRSV的GP5蛋白氨基酸出现缺失突变,且非中和表位、中和表位、潜在毒力位点及N-糖基化位点均发生不同程度的变异。结果表明,保育猪群为PRRSV高发病群体,谱系1 PRRSV或已成为国内流行优势毒株,且PRRSV不断发生变异,这或许会影响现有疫苗的免疫保护效果。因此,针对PRRS需要综合防控,除选用安全...     

陕西部分地区市售猪肉卫生状况的调查研究

近几年．猪肉因致病菌污染及兽药残留超标而出现的质量安全问题比较突出．对消费者的健康构成一定程度的威胁。被污染的猪肉不但对人体造成危害．而且可能污染环境．影响国内及国际贸易。猪肉质量安全不但得到了政府部门的高度重视．也受到了社会的普遍关注。[第一段]     

宁夏部分地区牛病毒性腹泻的血清学检测

[目的]掌握宁夏地区部分牛场犊牛病毒性腹泻病毒感染情况,为犊牛病毒性腹泻的净化和综合防治提供依据。[方法]从宁夏4个市9个县(区)的25个发病牛场(户)采集血清样品191份,采用ELISA方法,进行血清学调查。[结果]宁夏4个地级市犊牛病毒性腹泻的抗体阳性率高达64.92%,并有一定程度的抗原阳性,且主要发生在1月龄以内的犊牛。[结论]牛病毒性腹泻是具有重大经济意义的疾病,是今后宁夏养牛业应重点防范的疾病之一。     

贵州省规模猪场伪狂犬病免疫和感染情况调查

为摸清贵州省规模猪场伪狂犬病免疫与野毒感染情况,利用g E-ELISA方法,对从贵州省181个规模猪场采集的3 192份猪血清样品进行抗体检测。结果显示:129个规模场存在伪狂犬病阳性样品,场点阳性率为71.27%(129/181),检出538份阳性样品,样品阳性率为16.85%(538/3 192)。其中:种猪场场点阳性率为64.29%(18/28),样品阳性率为30.81%(65/211);免疫猪场场点阳性率为51.39%(25/47),样品阳性率为9.20%(110/1 196);其他猪场场点阳性率为81.13%(86/106),样品阳性率为20.34%(363/1 785)。对从26个免疫猪场采集的1 061份样品进行g B-ELISA抗体检测,发现场点免疫抗体阳性率为100%(26/26),样品阳性率为60.79%(645/1 061)。对来自屠宰场等16个监测场点的179份扁桃体样品进行伪狂犬病病毒荧光PCR检测,检出1份阳性样品。调查结果表明,贵州省规模猪场存在伪狂犬病野毒感染且隐性带毒情况较为严重;疫苗免疫虽有一定的免疫效果,但个体免疫抗体阳性率不高。调查结果提示,贵州省应加强PRV野毒检测,掌握病毒基因变异情况,科学调整免疫程序,从而为全省规模猪场的伪狂犬病净化奠定基础。     

广西部分地区鸭圆环病毒感染情况调查

为了解广西鸭圆环病毒(duck circovirus,DuCV)感染情况,根据已发表的鸭圆环病毒序列合成了1对PCR引物,利用该引物对采集于百色、柳州和桂林3个市的321份鸭组织样品进行了检测。结果表明,58份样品能扩增出228 bp的特异条带,总阳性率为18.07%;且3个市均能检出阳性样品,阳性率分别为18%（54/300）、5.6％（1/18）和100％（3/3）。结果证实,广西百色、柳州、桂林地区的鸭群中不同程度地存在鸭圆环病毒感染现象。     

安徽省部分地区牛衣原体的血清学调查

牛衣原体病是由鹦鹉热衣原体引起的一种接触性人兽共患传染病。本调查采用间接血凝法(IHA)对安徽省部分地区的535份牛血清进行了衣原体抗体检测,结果显示,血清抗体阳性率为22.43%(120/535);4个奶牛场的群阳性率为75%,个体阳性率为23.21%(68/293);9个肉牛场的群阳性率为88.9%,个体阳性率为21.49%(52/242)。对不同用途、不同年龄段、不同购入来源以及不同送检地区的牛衣原体抗体阳性率进行统计分析。结果表明安徽省的牛群中存在不同程度的衣原体感染。IHA法检测衣原体抗体简便、快速,适合在基层推广。