猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型与副猪嗜血杆菌混合感染的诊断及病原分析

为确定河南开封某猪场发生猪呼吸系统疾病综合征（PRDC）的病原,本研究无菌采集病死保育猪肺脏、心脏和脾脏等组织样品,进行细菌学检验和药敏试验,通过PCR/RT-PCR检测样品中猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪圆环病毒2型（PCV2）、猪流感病毒（SIV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）、猪瘟病毒（CSFV）和猪肺炎支原体（Mhp）等病原,并对核酸阳性病毒性病原的抗原结构基因进行测序和遗传演化分析。结果表明,通过细菌分离培养、形态观察、卫星现象观察和16S rRNA基因鉴定,从病死保育猪体内分离鉴定出1株副猪嗜血杆菌（Hps）,药敏实验表明该菌株对对氨苄西林、阿莫西林克拉维酸、头孢噻呋和四环素几种药物敏感。核酸检测PRRSV和PCV2核酸阳性,分别命名为PRRSV/HN-2019和PCV2/HN11-2019;进一步对PRRSV/HN-2019和PCV2/HN11-2019的结构基因分析发现,PRRSV/HN-2019与与NADC30分支的毒株亲缘关系较近,属于NADC30-like毒株;PCV2/HN11-2019与PCV-2d分支的毒株亲缘关系较近,属于PCV-2d分支。综上所述,本研究确定该猪场存在PRRSV、PCV2和Hps的混合感染,为该猪场下一步的PRDC有效防控提供了参考依据。     

2010年上半年11省市规模猪场疫病监测与剖析

为了解近期发病猪场几种病毒性疫病的流行状况,采用RT-PCR和PCR方法,对2010年1月至6月期间,来自11省(市) 50个猪场共147份病料进行猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（HP-PRRSV）、伪狂犬病毒（PRV）和猪圆环病毒2型（PCV2）检测,并采用ELISA方法对其中26个猪场458份血清样品进行伪狂犬gE野毒抗体检测。结果表明,PCV2阳性率最高,为75.3%（70/93）;PRRSV阳性率次之,为57.4%（78/136）,HP-PRRSV阳性率为43.5%（54/124）;CSFV和PRV的阳性率分别为37.7%（52/138）和21.0%（21/100）;伪狂犬gE野毒抗体阳性率为16.4%（75/458）。同时检出2种及2种以上病毒的样品占46.9%（69/147）,其中以HP-PRRSV+PCV2、CSFV+PCV2及CSFV+HP-PRRSV+PCV2三种形式最为常见。PRRSV（50.0%）是猪场繁殖障碍性疾病中的最常见病原;CSFV（56.0%）和PCV2（48.0%）是断奶前后仔猪腹泻的常见病原;HP-PRRSV（53.5%）、CSFV（50.7%）和PCV2（48.0%）是保育猪发生高热症的常见病原。该检测结果为猪场疫病的诊断与防控提供了参考。     

一株针对猪繁殖与呼吸综合征病毒NADC30-like毒株GP5蛋白的单克隆抗体的制备及鉴定

为获得针对猪繁殖与呼吸综合征病毒NADC30-like毒株GP5蛋白的单克隆抗体,采用表达纯化的PRRSV NADC30-like毒株的GP5蛋白按常规方法免疫小鼠,采用间接免疫荧光方法筛选出1株阳性杂交瘤细胞（命名为3E10）,经3次亚克隆后制备腹水并进行纯化鉴定。结果显示：该杂交瘤细胞连续传代20代后细胞上清液的IFA效价仍不低于1:40。纯化后的单克隆抗体腹水浓度为0.204 mg/mL,亚类鉴定为IgM,且未发现有中和活性。特异性检测显示3E10单克隆抗体能与2株PRRSV NADC30-like毒株发生荧光反应,而与4株高致病性PRRSV疫苗毒株、2株经典株PRRSV疫苗毒株以及CSFV、PCV2、BVDV及Marc-145细胞均无荧光反应,显示出较好的应用前景。     

2017—2020年浙江省猪主要病毒性传染病的流行病学调查与分析

为了解浙江省猪主要病毒性传染病的流行情况及变化规律,本试验对2017-2020年浙江省不同地区规模化猪场送检的血清和病料样品进行猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪伪狂犬病病毒(PRV)4种疫病病原和抗体检测。抗体检测结果显示：PRRSV、CSFV、PCV2、PRV-gE/gI、PRV-gB的抗体平均阳性率分别为81.4%,83.6%,91.4%,36.1%,94.3%;不同年份中,CSFV和PCV2抗体水平一直呈稳中上升趋势,2020年PRRSV和PRV-gE/gI抗体水平下降明显。病原检测结果显示：PRRSV、CSFV、PCV2和PRV的感染具有普遍性,病原平均阳性率分别为22.9%,2.5%,17.3%,6.6%,其中PRRSV/PCV2双重感染较多,阳性率为9.7%;不同日龄中,PRRSV、PCV2和CSFV保育猪病原阳性率最高,育肥猪次之,而PRV产房仔猪阳性率最高;此外,2019-2020年CSFV、PCV2和PRV的病原阳性率下降明显。     

一例HP-PRRSV与NADC30-like毒株混合感染的实验室诊断

2022年10月中旬，湖南长沙某规模化猪场发生疑似猪繁殖障碍综合征疫情。为探究发病原因，采集病料样品进行细菌分离鉴定和常见病原荧光定量PCR（q PCR）鉴定。结果发现，病料样品中未分离得到细菌，q PCR检测结果显示组织病料为HP-PRRSV和NADC30-like毒株核酸阳性，其他病原核酸均为阴性。为进一步分析该猪场PRRSV流行株遗传变异情况，对PRRSV Nsp2基因序列进行逆转录PCR（RT-PCR）扩增、测序及分析。结果显示，HP-PRRSV株Nsp2基因序列与Hu N4-F112株（PRRSV弱毒疫苗株）同源性最高，类NADC30株Nsp2基因序列与已知NADC30株同源性最高。以上研究结果表明，该场疫情是HP-PRRSV和类NADC30株混合感染引起，其中HP-PRRSV可能为弱毒疫苗株。     

某地区部分猪场5种疫病抗体及病原的检测

研究旨在对某地区部分猪场常见疫病抗体及病原情况进行调查,使用ELISA抗体检测法及PCR方法,对26个猪场送检的3 000份血清样本及1 000份病料样本进行猪瘟病毒（CSFV）、猪蓝耳病病毒（PRRSV）、口蹄疫病毒（FMD）、猪圆环病毒病病毒（PCV）、猪伪狂犬病病毒（PrV）检测。结果显示,血清样本检测中CSFV、PRRSV、FMD、PCV、PrV阳性率分别为8.83%、8.50%、7.17%、9.50%、8.33%。病料样本检测结果显示,CSFV、PRRSV、FMD、PCV、PrV阳性率分别为8.50%、9.50%、0.50%、14.50%、3.00%。研究表明,该地区26个猪场内猪瘟等疫情问题依旧不容忽视,可采取疫苗接种防疫、强化检疫、猪舍环境控制、饲料科学管理、严格把控猪源等措施提高防疫水平,保证猪场经济效益。     

规模猪场4大疫病的血清学检测及免疫抑制病因分析

选取杭州、绍兴、嘉兴和湖州4个地区的规模猪场为试验猪场,用正向间接血凝试验(IHA)检测猪瘟病毒(CSFV)和口蹄疫病毒(FMDV)抗体合格率;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)抗体阳性率,分析免疫抑制状况。同时,采取临床可疑病料,用RT-PCR技术检测PRRSV、PCV2、CSFV和伪狂犬病毒(PRV)的感染率。结果显示:不同年龄猪群中,PCV2抗体阳性率都在96.0%以上,而CSFV、FMDV抗体合格率及PRRSV抗体阳性率呈现一致的变化趋势,即母猪最高,哺乳仔猪其次,培育猪和肥育猪最低;在病原检测中,PRRSV和PCV2检出率最高,分别为44.3%和60.7%。另外,双重感染和多重感染明显,特别是PRRSV+PCV2+CSFV三重感染,阳性率达7.6%。本试验结果为制定有效的免疫程序等防治措施提供科学依据。     

齐齐哈尔地区猪呼吸道疾病综合征病毒性病原调查研究报告

为了解齐齐哈尔地区引起规模化猪场猪呼吸道疾病综合征病毒性病原的感染状况,笔者应用PCR或RT-PCR方法对2015年-2017年齐齐哈尔地区规模化猪场147份病料进行了猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病毒(PRV)和猪圆环病毒2型(PCV2)4种主要病毒性病原检测。结果显示,CSFV阳性率为4.72%,PRRSV阳性率为5.44%,PRV阳性率为1.36%,PCV2阳性率为9.52%。PRRSV和PCV2的混合感染呈上升趋势,CSFV和PRV趋于稳定。研究结果表明,控制猪呼吸道疾病综合征的关键是控制好PRRSV和PCV2的传播,根本是开展主要病原的净化工作。     

甘肃省猪繁殖与呼吸综合征病毒流行毒株ORF5基因的遗传变异分析

为了解甘肃省地方猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)的感染情况，对2015-2020年采集的20个猪场332份疑似PRRSV感染猪的样品，首先进行血清学检测，然后通过RT-PCR方法开展病原检测，扩增PRRSV的ORF5基因；测序后利用DNA Star软件分析获得的ORF5基因及其编码的GP5氨基酸与国内外不同PRRSV毒株的遗传进化关系。血清学检测结果阳性率为93.07%,扩增获得的PRRSV ORF5基因，经核苷酸序列比对属于PRRSV美洲型，有NADC30-like毒株和NADC34 like毒株。结果表明，当前PRRSV不同流行毒株存在一定的遗传差异，为甘肃省PRRS防控提供了科学依据。     

NADC30-like PRRSV和PCV2d共感染与继发感染PCV2抗体阳性断奶仔猪的致病性

为了确定近年来国内主要流行的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)NADC30-like谱系与猪2型圆环病毒(PCV2d亚型)共感染与继发感染后对猪的致病作用,使用本实验室分离的NADC30-like谱系PRRSV与PCV2d毒株感染PCV2抗体阳性断奶仔猪。选取30只5周龄PCV2抗体阳性断奶仔猪,随机均分为6组,分别为PBS、PCV2、PRRSV、PCV2-PRRSV、PRRSV-PCV2和Co-PRRSV-PCV2感染组。记录各组临床指征(体温、体质量、临床症状和存活率);检测特异性抗体及TNF-α、IFN-γ、IL-4和IL-10共4种细胞因子的变化;并对主要组织脏器的病理变化进行分析。结果显示,各感染组在感染PRRSV后均出现体温升高、体质量减轻、咳喘、腹泻、精神沉郁等临床症状;Co-PRRSV-PCV2、PRRSV-PCV2和PRRSV组表现出更为严重的肉样变和淋巴细胞浸润;先感染PCV2可以延迟PRRSV特异性抗体的产生;PRRSV组表现出高水平的TNF-α和IL-10;NADC30-like PRRSV与PCV2d共感染与继发感染PCV2抗体阳性仔猪会出现严重的临床症状和...     

2016—2018年广西玉林市部分规模猪场猪繁殖与呼吸综合征病原检测与混合感染分析

为了解广西玉林市规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）感染情况及其与猪瘟病毒（CSFV）、猪圆环病毒2型（PCV2）和猪伪狂犬病病毒（PRV）混合感染情况,采用RT-PCR/PCR方法,对2016—2018年采集自玉林市存栏母猪300头以上规模化猪场的661份临床健康猪血清样本和896份表现呼吸道症状和繁殖障碍发病猪只的组织样本,进行PRRSV病原检测,并对检出的PRRSV病原阳性样本进行CSFV、PCV2、PRV病原检测,并对结果进行统计分析。结果显示：2016—2018年收集的血清样本中,PRRSV病原阳性率分别为6.86%、19.33%和10.17%,场阳性率分别为25.00%、46.67%和40.00%;PRRSV血清阳性样本混合感染率分别为52.38%、65.22%和62.50%,以与PCV2、PRV混合感染为主。2016—2018年收集的病料组织样本中,PRRSV病原检出率分别为46.38%、48.24%和48.81%,场阳性率分别为42.11%、35.37%、37.10%;PRRSV病料阳性样本混合感染率分别为50.00%、52.99%和52.35%,同样以与PCV2、PRV混合感染为主。结果表明,广西玉林市规模猪场中PRRSV流行广泛且呈加重趋势,与PCV2和PRV等病原的混合感染较严重。结果提示,玉林市规模猪场应制定科学的免疫程序,加强这些疫病的综合防控。     

2015—2019年湖南省5个原种猪场主要繁殖障碍性疫病监测

为了解湖南省原种猪场主要繁殖障碍性疾病的流行情况及免疫抗体水平,2015—2019年对5个原种猪场,采集血清及对应扁桃体样品各1 000份进行主要繁殖障碍性疾病检测,其中对扁桃体样品进行猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（HP-PRRSV）、伪狂犬病病毒（PRV）、圆环病毒2型（PCV2）、猪细小病毒（PPV）病原检测,对血清样品进行CSFV、PRRSV、PRV-gB免疫抗体检测。结果显示：CSFV、PRRSV、HP-PRRSV、PRV、PCV2和PPV病原阳性率分别为0、2.1%、1.3%、9.5%、22.1%、28.9%;部分场PRV感染抗体（gE）反复出现转阳,多数猪场PCV2和PPV感染较严重;CSFV、PRRSV、PRV-gB免疫抗体合格率分别为96.9%、99.7%、98.7%,均超过了国家规定的70%的最低标准。结果表明,这5个原种猪场的CSFV、PRRSV、PRV抗体保护水平良好,且猪瘟基本达到了免疫无疫状态,但部分原种猪场仍存在不同程度的PRRSV、HP-PRRSV、PRV、PCV2、PPV感染,其中PCV2与PPV感染较为严重,需通过免疫、监测、生物安全控制等综合措施,加强控制与净化。     

湖南省某规模场育肥猪多种病原混合感染的诊断及防控

湖南省某规模猪场的保育猪在转至育肥舍10 d后(约80日龄)陆续出现发病死亡情况。为确诊病情,查找病因,采集不同年龄段的猪血清进行猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、圆环病毒2型(PCV2)抗体检测,同时对4头发病猪进行剖检观察,并采集病料进行CSFV、PRRSV、PCV2病原检测以及细菌分离、药敏分析。结果显示:疫病发生前后的生猪CSFV抗体均不理想,无高抗体水平个体出现,但病原检测为阴性;生猪PRRSV、PCV2抗体整体上均经历了母源抗体下降、发病时抗体又上升的阶段,且病原检测均有阳性样本存在;在病料中分离到葡萄球菌、链球菌、副猪嗜血杆菌。由此推断,该次生猪发病原因可能为PRRSV、PCV2以及多种细菌的混合感染。结合病因推测,制定了防治方案,并有效控制了病情,也验证了此次发病的原因推断。本起疫情的诊断和防治为猪场多病原混合感染防控提供了参考,也提示规模猪场需要开展疫病的综合防控。     

我国部分地区4种猪病毒病感染的血清学调查

为了解我国部分地区猪群中猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪蓝耳病病毒(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的流行与分布情况,研究采用ELISA(酶联免疫吸附试验)方法分别对2013—2014年采自河北、河南、山东、江苏等部分地区规模化养殖场和散养户的882份发病猪血清样品进行CSFV、PRV、PRRSV、PCV2抗体检测。结果显示,两年CSFV平均抗体阳性率为72.8%,PRV平均抗体阳性率为72.6%,PRRSV平均抗体阳性率为78.5%,PCV2平均抗体阳性率为61.5%。CSFV、PRV、PRRSV抗体阳性率2014年较2013年有下降的趋势,PCV2抗体阳性率2014年较2013年有略微上升的趋势,CSFV、PRV、PRRSV、PCV2的2种、3种及4种病原混合感染抗体阳性率2014年较2013年有上升的趋势,表明我国猪群中CSFV、PRV、PRRSV、PCV2的混合感染现象日益突出,应引起对这4种猪病的重视,加强这4种猪病疫苗的免疫接种,有效控制猪病的发生和流行。     

新疆北疆地区某规模化猪场主要传染病抗体检测与分析

为了解新疆北疆地区某规模化猪场几种主要传染病的抗体水平,便于及时发现猪场潜在的疾病风险。本试验采用间接酶联免疫吸附试验（ELISA）方法对某规模化猪场各阶段猪群进行猪瘟病毒（CSFV）抗体、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒（PRRSV）抗体、猪圆环病毒2型（PCV2）抗体、猪O型口蹄疫病毒（FMDV-O）抗体,及猪伪狂犬病病毒（PRV）gB与gE蛋白抗体进行检测。试验结果表明,该场的CSFV、PRRSV、PCV-2、FMDV-O、PRV-gB蛋白、PRV-gE蛋白的平均抗体阳性率分别为83.57%、90.56%、90.29%、71.86%、82.84%、18.29%;不同类别猪群间抗体水平参差不齐,种猪群的PRRSV抗体阳性率仅为52.63%,保育猪群的CSFV抗体阳性率仅为44.12%,育肥猪群的PRV-gB抗体阳性率为30.00%,种公猪的PRV-gE抗体阳性率为30.00%,育肥猪群的FMDV-O抗体阳性率为6.25%,基于以上试验结果,为该场免疫程序的制定和优化提供参考依据,以期达到有效控制及逐渐净化疫病的目的。     

2022年猪场蓝耳病的流行动态与防控建议

<正>2022年猪场蓝耳病病毒（PRRSV）抗原阳性率为414%,样品阳性率为302%;临床二重感染以PRRSV+PCV3（圆环病毒3型）与PRRSV+PCV2（圆环病毒2型）为主,三重感染以PRRSV+PCV2+PCV3为主;而抗体平均阳性.率为736%,免疫群体抗体平均阳性率为84%,比不免疫群体高30%;各个饲养阶段对比看,以公猪、60日龄猪抗体阳性率偏低。虽然PRRS（蓝耳病）防控技术不断进步,但彻底解决猪场PRRS问题任重而道远。     

猪繁殖与呼吸综合征病原流行病学调查

为了解山东省鲁北地区猪繁殖与呼吸综合征病原流行状况,从而全方位做好该病的防控工作。2017年全年在鲁北地区的9个县采集295份病料样品,对病料中的PRRSV进行扩增检测,试验结果显示,总平均阳性率为48.4%,PRRSV以单一感染数为主,占阳性样品总数的79.7%),且于CSFV、PCV2和PRV存在不同程度的混合感染。然后对PRRSV阳性病料进行分型检测,结果显示,HP-PRRSV阳性率为48.3%,类NADC30阳性率为39.9%,经典毒株阳性率为7.7%,HP-PRRSV毒株和类NADC30毒株混感的比率为4.2%。从而为鲁北地区更好的开展PRRS的防控工作提供了依据。     

断乳仔猪多系统衰竭综合征病原检测与分析

应用PCR技术,结合,临床观察、病理解剖对福建省不同地区断乳多系统衰竭综合征（PMws）发病猪群采集的病料进行多重病原检测与分离。结果表明50份病料中猪圆环病毒2型（PCV2）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪瘟病毒（CSFV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）阳性率分别为40％、26％、4％、0,不同地区各病原检出率差别不大。病毒性混合感染以PCV2和PRRSV为主,感染率为22％;PCV2与CFSV混合感染率为4％;PRRSV与CFSV混合感染率为4％;PCV2、CFSV、PRRSV三种病原混合感染率为4％。研究结果表明福建大部分地区猪群PMWS的发生是PCV2、PRRSV、CSFV等多种病原混合感染的结果,其主要病原为PCV2,该病的发生没有明显地域性。     

四川南充地区部分猪场呼吸道疫病主要病原调查与分析

当前猪呼吸道疾病综合征是引发各类猪场经济损失的重要原因之一。该病病原种类繁多,危害巨大。本文通过PCR或病原菌分离鉴定,对四川省南充部分地区规模化猪场及散养户间猪呼吸道疾病综合征（PRDC）主要病原的混合感染状况进行了分析。对送检病料的猪伪狂犬病病毒（PRV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪瘟病毒（CSFV）、猪圆环病毒2型（PCV2）、猪肺炎支原体（MH）、猪链球（SS）、产毒性巴氏杆菌（Pm）和副猪嗜血杆菌（HPS）等共计8种主要病毒性或细菌性病原进行检测。实验结果证明PRDC在四川省南充部分地区感染情况普遍存在,且致病病原种类繁多,感染类型复杂,所以在日常饲养中加强PRDC感染情况的监测,可有效地防控PRDC的发生。     

2018—2020年新疆地区哺乳仔猪主要病毒性传染病的抗体检测与分析

为了解2018—2020年新疆地区哺乳仔猪主要疫病的抗体水平,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）对采集的270份血清进行了猪瘟病毒（CSFV）、伪狂犬病gB蛋白（PRV-gB）、伪狂犬病gE蛋白（PRV-gE）、圆环病毒2型（PCV2）、蓝耳病病毒（PRRSV）抗体检测。结果显示,CSFV抗体阳性率为77.35%(140/181)、PRV-g B抗体阳性率为90.29%(158/175)、PRV-g E抗体阳性率为26.26%(52/198)、PRRSV抗体阳性率为76.30%(206/270)、PCV2抗体阳性率为57.30%(106/185),其中PCV2抗体水平低于国家规定的70%,可通过提高母源抗体水平来提高PCV2的抗体阳性率。试验结果可为该地区哺乳仔猪主要猪病流行病学调查提供参考,也可为免疫程序的调整提供帮助。