黑枸杞花青素研究进展

目的研究青藏高原黑枸杞花青素对小鼠巨噬细胞RAW264.7的凋亡作用及相关分子机制。方法利用扫描电镜、DAPI和Hoechst染色、流式细胞术、RT-qPCR和Western-blot检测不同质量浓度黑枸杞花青素诱导小鼠巨噬细胞24 h后对细胞形态学、细胞凋亡率、JNK信号通路因子及相关因子mRNA和蛋白表达的影响。结果花青素诱导细胞24 h后未见明显凋亡形态,且细胞数量增多,细胞凋亡率极显著下降(P<0.01);随着黑枸杞花青素质量浓度增加,Caspase-3 mRNA及蛋白表达降低,Bax/Bcl-2 mRNA表达量比值降低,JNK通路因子JNK mRNA及p-JNK蛋白表达降低且呈剂量依赖性;JNK抑制剂组能显著降低JNK通路因子JNK mRNA (P<0.05)及p-JNK蛋白表达(P<0.01);与JNK抑制剂组相比,花青素+SP600125组能显著降低JNK通路因子JNK mRNA (P<0.05)及p-JNK蛋白表达(P<0.01)。结论黑枸杞花青素可能通过JNK通路抑制小鼠巨噬细胞RAW264.7凋亡从而发挥免疫调节作用。     

H3N2和H1N1甲型流感病毒感染对猪CDK9基因表达的影响

【目的】研究H3N2和H1N1甲型流感病毒感染对仔猪肺脏CDK9基因表达的影响,揭示流感发病机制与CDK9基因的相关性。【方法】以接种PBS的仔猪为空白对照,利用实时荧光定量PCR技术和半定量免疫组织化学法,检测H3N2和H1N1甲型流感病毒接种感染7d后,仔猪肺脏CDK9的mRNA和蛋白表达的变化,并在电子显微镜下观察CDK9阳性细胞的定位。【结果】实时荧光定量PCR检测表明,H3N2和H1N1甲型流感病毒感染仔猪7d后,肺脏组织内CDK9基因mRNA的相对表达量分别为0.42和0.36,与对照(1.0)相比显著降低(P<0.05)。半定量免疫组织化学检测结果显示,仔猪受到H3N2和H1N1流感病毒感染后,肺脏组织内CDK9蛋白的相对表达水平分别为31.4和38.7,较正常组织(61.4)显著降低(P<0.05)。电子显微镜观察发现,H3N2和H1N1甲型流感病毒感染仔猪后,肺脏细胞界限不明显,CDK9阳性细胞散在分布于终末细支气管和肺泡内,且胞核着色较深,但是细胞整体着色变浅。【结论】受到流感病毒感染后,仔猪肺脏组织内CDK9表达量降低,可能是RNApolⅡ磷酸化水平降低的原因之一。     

采收时间气温对野生黑果枸杞花青素和原花青素的影响

以新疆阿勒泰北屯市西区生态园野生黑果枸杞为材料,成熟期每5d取样1次,用p H示差法和盐酸-香草醛法连续测定野生黑果枸杞中花青素和原花青素,结果表明:新疆阿勒泰北屯市西区生态园野生黑果枸杞适宜采收时间为8月中旬—9月中旬;花青素与原花青素含量与采收前5d及采收当天最低温平均值显著相关,与采收前5d温差值显著相关。     

南疆野生黑果枸杞果实抗氧化成分与土壤理化性质、微生物特征的相关性

【目的】黑果枸杞(Lycium ruthenicum Murr.)是一种耐盐小灌木,其果实富含花青素和多糖等抗氧化成分,经济价值高。影响黑果枸杞抗氧化成分含量的因素较多,测定南疆不同生态条件下野生黑果枸杞根际土壤理化性质、微生物特征和果实抗氧化成分的组成情况,分析三者之间的相关性,为黑果枸杞开发利用提供依据。【方法】采用常规测定方法、Biolog微平板和分光光度计法分别测定土壤理化性质、微生物特征和果实抗氧化成分,运用统计学方法对这三者之间的相关性进行分析。【结果】黑果枸杞根际土壤理化性质、微生物特征和果实抗氧化成分含量不同地区差异较大,但存在着一定的相关性。(1)根际土壤p H、电导率的变化幅度分别为8.86~8.04和16.43~0.06 ms/cm,二者与微生物活性(AWCD)、Shannon丰富度指数之间呈显著负相关;电导率与Simpson优势度指数、Mc Intosh均匀度呈显著正相关。(2)144 h Biolog碳源利用表明,黑果枸杞的根际土壤微生物的AWCD值阿克陶和野云沟分别为2.04和1.62,库尔楚园艺场为0.71,其余均较低。土壤养分含量与AWCD和Shannon指数呈负相关;与Simpson指数和Mc Intosh指数呈正相关。载荷因子分析表明,影响黑果枸杞根际土壤微生物的碳源类型为碳水化合物、羧酸类和多聚物类碳源。(3)果实中花青素、还原糖和多糖含量分别变化于46.88~11.75、351.16~229.19和176.34~169.52 mg/g。土壤p H、电导率、有机质、全氮与黑果枸杞果实花青素呈正相关。p H和多糖呈显著正相关;但电导率和养分与多糖呈负相关。Shannon指数与花青素和多糖含量呈显著正相关。【结论】提高p H、盐分含量和微生物丰富度能增加果实抗氧化成分的累积。     

金属离子对黑果枸杞中花青素颜色稳定性的影响

以黑果枸杞(Lycium ruthenicu Murr)中的花青素为研究对象,以CIELAB色空间为研究方法,通过观察a*、b*和△E*随时间的变化情况,研究了10种金属离子对黑果枸杞花青素水提液颜色稳定性的影响。K~+、Na~+、Ca~(2+)、Mn~(2+)、Mg~(2+)、Zn~(2+)对黑果枸杞花青素颜色稳定性无显著影响;Cu~(2+)对花青素溶液有明显退色作用;Al~(3+)使花青素溶液明显增色;Fe~(2+)使花青素溶液产生紫黑色沉淀;Fe~(3+)会破坏花青素类物质。在黑果枸杞花青素的制备和应用中,应尽可能避免铁、铜、铝制品的接触,以免影响颜色的稳定性。     

BIX-01294对山羊胎儿成纤维细胞生长状态和组蛋白H3K9二甲基化的影响

为探讨BIX-01294对供核细胞的影响,使用不同浓度的BIX-01294处理山羊胎儿成纤维细胞(Goat embryonic fibroblasts,GEFs),并检测其细胞活力、细胞周期、细胞凋亡、H3K9me2水平和多能性基因的mRNA水平。细胞活力检测结果显示,BIX-01294浓度在1.0μmol/L以下不会影响细胞活力,2.0μmol/L时24h和48h处理组的细胞活力显著下降(P0.05),≥4.0μmol/L时所有处理组的细胞活力均极显著下降(P0.01)。细胞周期和凋亡检测结果显示,H3K9me2下调会引起细胞周期的停滞和正常细胞的减少,其中BIX-01294在大于2.0μmol/L时G0/G1期细胞的比例极显著升高(P0.01),4.0μmol/L时凋亡细胞极显著增加(P0.01)。处理后的细胞H3K9me2水平均极显著下降(P0.01),但大于1.0μmol/L的处理浓度能获得较好的下调效果。处理后细胞Oct4、Sox2和Nanog的mRNA水平均有不同程度的增加,其中Oct4和Nanog的mRNA水平增加极显著(P0.01)。说明:采用1.0μmol/L BIX-01294处理山羊胎儿成纤维细胞,可以下调H3K9me2水平,增加G1/G0期细胞比例,上调细胞多能性基因表达量,而且不影响细胞活力。     

猪Cyclin A和CDK2蛋白对猪细小病毒增殖的调控作用

【目的】探究猪细胞周期素Cyclin A(pCyclinA)及其依赖性激酶2(pCDK2)对猪细小病毒(PPV)增殖的调控作用,为开展PPV复制机制研究提供依据。【方法】采用RT-PCR扩增pCyclinA和pCDK2基因,克隆至真核表达载体pEGFP-C1中构建重组载体,转染猪睾丸细胞(ST),经新霉素(G418)筛选获得pCyclinA或pCDK2过表达的ST细胞株。设计pCyclinA和pCDK2基因特异性干扰片段(shRNA)CycA894和CDK1163,构建干扰表达载体,转染ST细胞,经G418筛选得到pCyclinA和pCDK2低表达的ST细胞株,实时荧光定量PCR检测其干扰效率。流式细胞术分析pCyclinA和pCDK2过表达和低表达对ST细胞周期的影响。将猪细小病毒NY毒株(PPV-NY)接种过表达和低表达的ST细胞,用免疫过氧化物酶单层细胞染色法(IPMA)检测病毒滴度。【结果】pCyclinA和pCDK2基因的开放阅读框(ORF)分别为1 299和897 bp,构建了重组载体pEGFP-pCyclinA和pEGFP-pCDK2。荧光显微镜观察结果显示,融合蛋白EGFP-pCycA和EGFP-pCDK2分别在过表达细胞株ST-pEGFP-pCyclinA和ST-pEGFP-pCDK2中稳定表达。构建了干扰载体pGPU6-GFP/CycA894、pGPU6-GFP/CDK1163和pGPU6-GFP/-shNC(阴性对照);低表达细胞株ST-pGPU6-GFP/CycA894和ST-pGPU6-GFP/CDK1163中的pCyclinA、pCDK2基因的mRNA表达量均极显著降低(P0.01)。pCyclinA或CDK2过表达分别极显著或显著降低ST细胞S期的比例(P0.01或P0.05)。pCyclinA低表达能极显著降低ST细胞G0/G1期的比例(P0.01)、极显著增加S期和G2/M期的细胞比例(P0.01);pCDK2低表达能显著增加ST细胞G0/G1期的比例(P0.05),但却显著降低S期的细胞比例(P0.05)。PPV在过表达细胞株ST-pEGFP-pCyclinA和ST-pEGFP-pCDK2中的滴度均极显著低于对照细胞(P0.01)。低表达细胞ST-pGPU6-GFP/CycA894中PPV滴度极显著增加(P0.01),而ST-pGPU6-GFP/CDK1163中的PPV滴度无显著变化(P0.05)。【结论】pCyclinA或pCDK2过表达均能抑制PPV增殖;pCyclinA低表达可促进PPV增殖,pCDK2低表达对PPV增殖无显著影响;pCyclinA低表达极显著降低G0/G1期细胞比例、但极显著增加S期和G2/M期细胞比例。     

柴达木黑果枸杞抗氧化物组分分析

为探究柴达木盆地黑果枸杞抗氧化物质含量与特性,利用福林酚法、分光光度法和反相高效液相色谱—二极管阵列检测法等方法对柴达木盆地成熟黑果枸杞干果进行检测。结果表明:柴达木盆地黑果枸杞中总多酚、总黄酮和维生素E的质量分数分别为17.92 mg·g~(-1)、2.39%和0.51 mg·g~(-1);共检测到12种花青素类化合物,矮牵牛素(m/z317)、飞燕草素(m/z303)、锦葵素(m/z331)和矢车菊素(m/z287)是其主要的母核物质,并通过进一步分析花青素结构,对其中10种花青素类化合物命名;不同地区黑果枸杞多酚和花青素的质量分数及各组分占比均不同。研究结果为柴达木盆地黑果枸杞的人工选育栽培和开发利用提供了数据支撑和理论基础。     

河西走廊荒漠草地黑果枸杞群落结构特征及土壤性质研究

探讨河西走廊荒漠草地黑果枸杞群落特征与土壤性质之间的关系，为黑果枸杞种群保护提供理论依据。通过对河西走廊黑果枸杞群落物种组成、多样性及土壤性质的研究，结果表明：1)调查群落中共有植物种27种，分属10科27属，其中灌木植物7种，多年生草本11种，1年生草本9种；单科单属种较多，占到了总科数的1/2;不同区域内黑果枸杞群落优势地位明显。2)河西走廊黑果枸杞群落不同区域内土壤性质差异显著，民勤县白土井、酒泉市金塔县西坝乡电导率最高，分别为8 393.06、6 652.78 ms,酒泉市玉门镇刺窝湖黑果枸杞样地全N、速效P含量最高，分别为0.134%、1.624 mg·100 g^-1,与其他样地间差异显著(P<0.05),土壤养分含量总体偏低、含量不均。3)河西走廊黑果枸杞群落物种多样性以民勤县兴和村轻度盐碱地物种丰富度(R)、辛普森(Simpson)指数、香浓-威纳(Shanon-Wiener)指数均高于中度、重度和极重度盐碱地，分别为10、0.714、1.532,但Pielou均匀度指数、生态优势度低于中度、重度和极重度盐碱地，不同盐渍化程度黑果枸杞群落物种组...     

起垄高度对黑果枸杞生长及生理特性的影响

为了探究低洼盐碱地的合理利用方式，以黑果枸杞为试验材料，设置不起垄（对照，H1）、起垄20 cm(H2)、起垄40 cm(H3)共3个栽培处理，研究不同起垄高度对黑果枸杞生长和抗逆生理指标的影响。结果表明：起垄处理的土壤全盐含量显著高于不起垄处理。起垄处理的植株枝长和叶面积显著高于不起垄处理；叶绿素含量除8月份外，其他时期均显著高于对照。可溶性糖含量不同时期的变化幅度较小。脯氨酸含量仅在后期大幅上升，其中H2处理显著高于对照。在8月份时起垄处理的叶片K+含量显著高于H1处理，10月份时则呈相反趋势；Na+含量则一直呈现出起垄处理显著低于对照的趋势。总的来看，起垄种植黑果枸杞更有优势，起垄处理虽增加了土壤盐分含量，但对黑果枸杞生长的影响较小，而相对降低的地下水位埋深对黑果枸杞的生长影响更大，研究结果对低洼盐碱地黑果枸杞的规范化栽培具有一定的理论指导意义。     

起垄高度对黑果枸杞生长及生理特性的影响

为了探究低洼盐碱地的合理利用方式，以黑果枸杞为试验材料，设置不起垄（对照，H1）、起垄20 cm(H2)、起垄40 cm(H3)共3个栽培处理，研究不同起垄高度对黑果枸杞生长和抗逆生理指标的影响。结果表明：起垄处理的土壤全盐含量显著高于不起垄处理。起垄处理的植株枝长和叶面积显著高于不起垄处理；叶绿素含量除8月份外，其他时期均显著高于对照。可溶性糖含量不同时期的变化幅度较小。脯氨酸含量仅在后期大幅上升，其中H2处理显著高于对照。在8月份时起垄处理的叶片K+含量显著高于H1处理，10月份时则呈相反趋势；Na+含量则一直呈现出起垄处理显著低于对照的趋势。总的来看，起垄种植黑果枸杞更有优势，起垄处理虽增加了土壤盐分含量，但对黑果枸杞生长的影响较小，而相对降低的地下水位埋深对黑果枸杞的生长影响更大，研究结果对低洼盐碱地黑果枸杞的规范化栽培具有一定的理论指导意义。     

黑果枸杞中原花青素稳定性和抗氧化性研究

对黑果枸杞(Lycium ruthenicum)中原花青素的稳定性和抗氧化性进行了研究。结果表明,避光、自然光和日光灯照射条件下,原花青素稳定性很好,不同的温度和p H对原花青素的稳定性影响较大。在较低的温度和p H条件下,原花青素比较稳定;当温度大于50℃或p H≥6,原花青素稳定性明显降低。原花青素具有显著的清除·DPPH的能力,当浓度低于0.005 mg/m L时,随浓度增加,原花青素清除自由基的活性逐渐增加,清除率可达到77.26%。     

不同生境条件下黑果枸杞种群生殖配置特征

为研究河西走廊不同生境条件下黑果枸杞种群生殖配置参数特征，揭示黑果枸杞种群繁殖投入规律与特征，以石羊河流域下游不同生境黑果枸杞种群为对象，测定黑果枸杞生殖配置参数及土壤含水率等指标，分析不同生境条件下黑果枸杞种群生殖配置特征。结果表明:1）石羊河流域下游不同生境条件下黑果枸杞种群高度、冠幅、单株生物量以及繁殖投入存在显著差异性（P<0.05）。2）不同生境条件下，黑果枸杞种群生殖配置、茎叶生物量分配呈不同的规律性。覆沙地生殖配置最大，达到了14.15%，与固定半固定沙丘、中度覆沙盐碱地差异不显著（P<0.05），其次为湖积盐渍化土地，其余均<8%。干旱荒漠区黑果枸杞生殖配置水平较低，茎生物量分配较高，叶生物量分配次之。3）黑果枸杞繁殖投入与土壤平均含水率呈正线性相关关系，判定系数达到了0.616 2，土壤含水率对黑果枸杞生殖配置影响较大。4）不同生境条件下，黑果枸杞叶片长宽、果实长宽均表现出一定的差异性（P<0.05），固定半固定沙丘叶片和果实较大，覆沙地次之，而重度盐渍化地叶片和果实最小，黑果枸杞会通过减小叶片和果实大小来适应干旱盐渍化环境。因此，生境条件对黑果枸杞种群生长指标、生殖配置及形态指标产生了显著影响。     

不同的生长调节剂对黑果枸杞硬枝扦插育苗的影响

[目的]研究不同的生长调节剂对黑果枸杞硬枝扦插育苗的影响。[方法]采用5种不同生长调节剂75mg/LIBA、750mg/LIAA、750mg/LGGR7号、300mg/LNAA和300mg/LGA3对黑果枸杞插条进行处理,调查硬枝扦插的出苗率、新生枝数量、新生根数量、新生根平均根长。[结果]对黑果枸杞出苗影响最大的是IBA,其苗率最高为85%,其次是IAA（80%）、GGR7号（78%）、NAA（75%）、GA3（73%）,清水出苗率最低为65%。NAA和GGR7号对黑果枸杞新生枝数量有显著促进作用。对黑果枸杞扦插苗新生根数量有极显著促进作用的是GGR7号,其次为IBA。对黑果枸杞扦插苗新生根平均根长有极显著促进作用的为GGR7号,其次为IAA。[结论]750mg/L生根粉GGR7号对黑果枸杞硬枝扦插育苗促进作用最大。     

HPLC测定黑果枸杞鲜果中花青素含量的方法研究

目的:优化并建立黑果枸杞鲜果中HPLC的测定方法。方法:采用乙醇、盐酸、水为提取液,超声提取、水浴水解后用HPLC测定黑果枸杞鲜果中的花青素含量。对乙醇浓度、盐酸浓度、超声时间、水浴温度进行正交实验条件优化,对实验的检出限、线性关系、重复性及回收率进行了考察。结果:确定各因素影响主次顺序为水解温度盐酸浓度超声时间乙醇浓度,最优提取条件为盐酸30%、乙醇50%、超声时间15min、沸水浴。本方法6种花青素的检出限都可达到12mg/kg,在1～50μg/mL范围内,除天竺葵色素R2=0.9989外,其余花青素R2均大于0.999,6次独立平行测定RSD均小于4%,6种花青素回收率在89.0%～91.7%。结论:该方法可以用于黑果枸杞鲜果中花青素含量的测定。     

黑果腺肋花楸花青素的提取工艺及其稳定性

为了黑果腺肋花楸花青素的开发利用,以黑果腺肋花楸果实为原料,通过正交试验确定花青素最佳提取条件,并进行稳定性研究。结果表明:黑果腺肋花楸花青素最佳提取条件为乙醇浓度50%、料液比1∶25(g/mL)、提取温度50℃、提取时间30min。pH值为2时,黑果腺肋花楸花青素溶液吸光值最大,且红色显现明显,pH值≥4时,颜色开始失去红色;黑果腺肋花楸花青素溶液吸光值随光照时间的增加和处理温度的升高逐渐减小;氧化剂H2O2和还原剂NaHSO3对黑果腺肋花楸花青素均具有破坏作用;金属离子中K+、Na+对黑果腺肋花楸花青素均无影响,Mg2+有一定的护色作用,Cu2+、A13+使花青素溶液产生沉淀。     

黑果枸杞光合作用日变化规律研究

以盆栽的黑果枸杞组培苗为材料,自然条件下用便携式光合-荧光测量系统GFS-3000对黑果枸杞光合作用进行测定,对影响其光合作用的生理因子和环境因子进行相关性分析。结果表明:黑果枸杞净光合速率的日变化在夏季表现为双峰曲线,有光合"午休"现象,日平均光合速率为10.27μmol/m~2·s;光补偿点(LCP)为41.31μmol/m~2·s,光饱和点(LSP)为1698.88μmol/m~2·s,表现出阳性植物特征,适合在光照充足的地区栽培;表观量子效率(AQY)为0.051,这说明黑果枸杞对光的利用率较高,有较强的光合能力。相关分析结果表明黑果枸杞的净光合速率(Pn)与光合有效辐射(PAR)、叶室温度(Tcu)、叶片温度(Tl)、大气温度(Ta)、气孔导度(Gs)及蒸腾速率(Tr)具有极显著正相关关系(p0.01),与空气CO_2浓度(Ca)显著正相关(p0.05),与胞间CO_2浓度(Ci)具有极显著负相关关系。     

基于转录组信息的黑果枸杞MYB转录因子家族分析

【目的】MYB基因家族是植物中最大的一类转录因子家族,广泛参与植物的生长发育和代谢调控过程。目前仍没有针对枸杞等木本作物MYB转录因子家族的系统分析。基于转录组数据鉴定分析黑果枸杞MYB基因家族,可为该类基因生物学功能和代谢调控机制的研究提供参考。【方法】基于黑果枸杞转录组测序(RNA-Seq)数据,利用NR、NT、Swiss-Prot和PFAM 4个数据库和NCBI网站,对黑果枸杞MYB基因进行筛选注释;利用Web Logo3、Prot Comp 9.0、MEGA5.0软件进行保守结构域、亚细胞定位和系统进化等生物信息学分析。基于转录组数据分析MYB基因在黑果枸杞果实不同发育期的差异表达模式,并采用荧光定量PCR方法进行验证。【结果】基于转录组测序数据,注释得到83个黑果枸杞MYB类转录因子基因,根据结构特性将其分为4大类:R2R3-MYB、1R-MYB、3R-MYB和4R-MYB。结构域分析表明:R2R3-MYB类转录因子的R2 MYB基序中包含3个极度保守的色氨酸残基,R3 MYB基序中的第一个色氨酸残基被疏水氨基酸替代。比较分析黑果枸杞MYB家族和拟南芥MYB家族共同构建的进化树发现,黑果枸杞的MYB家族在进化上包括3个大类,6个亚类。亚细胞定位预测结果显示,44个MYB转录因子定位于细胞质中,37个定位于细胞核中。基于转录组数据的MYB差异表达模式分析表明,黑果枸杞MYB基因可能参与了果实不同发育时期花青素变化的调控;基于荧光定量PCR的差异表达数据进一步验证了部分MYB转录因子在果实不同发育时期的花青素合成中可能起到调控作用。【结论】黑果枸杞MYB基因家族注释得到83个黑果枸杞MYB类转录因子基因,为进一步研究MYB家族的基因结构和生物学功能奠定了基础。     

CCAAT增强子结合蛋白α在香烟提取物刺激气道平滑肌细胞增殖中的作用

以免疫印迹法检测不同浓度香烟烟雾提取物(CSE)作用下气道平滑肌细胞(ASMCs)中CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、细胞周期蛋白激酶2(CDK2)、细胞周期蛋白激酶4(CDK4)的蛋白水平。以MTT法、流式细胞术分析不同浓度CSE作用下ASMCs的增殖及细胞周期分布。分别以阴性对照siRNA、C/EBPαsiRNA进行ASMCs的细胞转染,比较阴性对照siRNA组与C/EBPαsiRNA组中ASMCs的C/EBPα、CDK2、CDK4的表达及细胞增殖、细胞周期分布的差异。结果表明:1随CSE浓度的增高,C/EBPα的表达逐渐降低,而CDK2、CDK4的表达及细胞增殖程度逐渐增高(P0.05);C/EBPα蛋白的表达与细胞增殖程度、CDK2、CDK4的表达均呈负相关,其相关系数(r)分别为0.813、0.862、0.784(P0.05);2 C/EBPαsiRNA组AMSCs中C/EBPα的表达低于阴性对照siRNA组(P0.05),而CDK2、CDK4的表达及细胞增殖程度高于阴性对照siRNA组(P0.05)。C/EBPαsiRNA组AMSC中G0/G1比例低于阴性对照siRNA组;而S期、G2/M期比例高于阴性对照siRNA组(P0.05)。研究说明在CSE作用下ASMCs中C/EBPα表达减弱,使CDK2、CDK4表达增加而加速细胞周期进程,最终促进AMSCs的增殖。     

黑果枸杞多糖的纯化工艺研究

研究黑果枸杞(Lycium ruthenicum Murr)水溶性多糖的纯化工艺。结果表明,三氯乙酸法为最佳脱蛋白方法,过氧化氢法为最佳脱色方法,脱色条件为温度45℃,时间30min,pH 8～9,用量为每100mL粗糖液5mL H2O2。黑果枸杞经超声加热提取、醇沉、脱蛋白、脱色后得黑果枸杞粗多糖(crude Lycium rutheni-cum polysaccharides,CLRP)。CLRP经DEAE-Cellulose柱层析,用蒸馏水以及0.05、0.1、0.25、0.5mol/LNaHCO3洗脱液进行分段洗脱,分离得到LRP1、LRP2、LRP3、LRP4、LRP5五个多糖组分,多糖含量最高的LRP5经Sephadex G-100柱层析后得到LRGP5。经高效凝胶渗透色谱法分析,LRGP5为均一多糖,测得相对分子质量约为1.37×105。