猪链球菌2型和猪圆环病毒2型混合感染的检测

2006年9月,温州某猪场断奶仔猪出现消耗性综合征,剖检的仔猪主要表现为淋巴结肿大和脑膜炎等。分别设计针对猪圆环病毒2型CAP蛋白和猪链球菌2型溶血素蛋白基因的特异性引物,用PCR技术从患病仔猪的肺脏、脾脏、淋巴结和脑组织中扩增出了猪链球菌2型和猪圆环病毒2型特异性片段。结合本病的临床症状和病理变化,病例确诊为猪链球菌2型和猪圆环病毒2型的混合感染。     

广东省屠宰场猪群PRRSV感染状况调查及基因测序分析

为了解广东省育肥猪群猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)携带情况,2019年在广东省43个生猪屠宰场,采集临床健康生猪淋巴结样品840份,运用商品化荧光定量RT-PCR试剂盒进行PRRSV核酸检测。设计PRRSV ORF5基因引物,选取部分阳性样品进行RT-PCR,测序后进行基因序列分析。结果显示:840份样品的PRRSV阳性率为17.02%,其中美洲型为14.29%,欧洲型为2.73%;成功获得15份样品的ORF5基因序列,其中12株为美洲型,3株为欧洲型;美洲型毒株中包含:JXA1-like毒株5株,GM2-like毒株3株,NADC30-like和VR2332毒株各2株;美洲型毒株基因相似度为87.5%～99.6%,欧洲型为90.2%～90.4%。对美洲型毒株的ORF5基因编码的氨基酸进行分析,发现检测到的不同亚群毒株各个功能区存在广泛的、显著的变异。结果表明,广东省屠宰场猪群的PRRSV隐性带毒率较高,且毒株复杂多样,以美洲型毒株为主,且已存在欧洲型毒株。建议落实并强化规模化猪场生物安全措施,加强流行病学监测,继续推动PRRSV净化工作。     

双重实时荧光PCR快速检测猪链球菌2型方法的建立及应用

根据GenBank上公布的MRP与CPS2J的开放性阅读框保守序列,运用BEACON Desigener 2.0软件设计和合成了2对引物和其相应的荧光探针,优化各个反应物的浓度和实时荧光PCR循环程序,建立从组织中直接检测2型链球菌主要毒力因子MRP与CPS2J的实时荧光PCR方法.双重实时荧光PCR检测2型猪链球菌方法能够从病料中直接检测2型猪链球菌并可以检测出该菌的主要毒力基因MRP,运用该方法可以最低检测到24CFU/mL 2型猪链球菌,并且与其他血清型链球菌和其他病原菌无交叉反应.特异性良好.通过对8个样品在3个不同时间的检测.结果显示该方法的稳定性和重复性均很好.     

一例猪链球菌2型感染的病原分离鉴定及药敏试验

2016年2月,上海市崇明区某乡镇一规模养猪场出现40多头5~8周龄仔猪发病死亡情况。经细菌分离、分离菌株生化鉴定和PCR检测,确诊为猪链球菌2型感染。对该菌株采用K-B纸片法,进行10种常用抗菌药物的体外药敏试验,结果发现该细菌对青霉素、阿莫西林、恩诺沙星敏感,对诺氟沙星、阿奇霉素、壮观霉素、卡那霉素、阿米卡星、庆大霉素和氨苄西林不敏感。根据药敏试验结果,建议养猪户使用阿莫西林和恩诺沙星进行治疗,并做好病猪的隔离与护理。一周后病情得到控制。     

应用荧光PCR方法检测猪链球菌2型

应用荧光PCR方法，对东莞市12个屠宰场份的120猪内脏和11个冻肉库的110份冻肉进行了猪链球2型检测，结果均为阴性。并随机从样品中选出22份样品进行了细菌分离鉴定，均未分离出猪链球菌2型。结果表明猪链球菌2型荧光PCR检测方法与传统的细菌分离鉴定方法一致，猪链球菌2型荧光PCR检测方法适合大规模动物产品的检测。     

人感染猪链球菌2型的研究进展

猪链球菌2型是一种重要的人畜共患病原菌,可引起人的脑膜炎、败血症等疾病.2005年6月发生的四川疫情是由猪链球菌2型引起的人猪共同感染,流行广,发展快,人猪患病数量多.本文从病原、流行特点、感染途径、临床表现、实验室鉴定(包括培养特性、形态特征、生化特性、血清凝集、毒力基因)等方面做了详细的综述,初步探讨了2型猪链球菌病的防治方法.     

广西不同年龄猪群中2型猪链球菌抗体水平调查分析

为调查规模化猪场不同年龄猪群中2型猪链球菌(S.suis 2)抗体水平,本研究采用以荚膜多糖为抗原的间接ELISA对来自广西地区母猪群、肥猪群、生长猪群共1 908份血清样品进行了S.suis 2抗体检测和分析。结果显示:成年猪群中抗S.suis 2的抗体水平普遍较高,种猪场母猪血清抗体阳性率可高达95%以上,不同地区屠宰场的育肥猪血清抗体阳性率在39.2%~97.5%。对不同日龄仔猪群抗体水平检测分析显示:14日龄~42日龄期间,抗体水平随仔猪日龄的增长而呈逐渐下降的趋势;而42日龄~130日龄期间,抗体水平随日龄的增长而呈逐渐上升的趋势。此外,经产母猪群抗体水平略高于后备母猪群,并且随胎次的增加,抗体的离散度缩小。以上结果表明S.suis 2抗体在仔猪生长阶段的空白期即42日龄时,仔猪群抗体水平最低。因此,在这个阶段和之前做好S.suis的预防和免疫工作对猪群链球菌病的防控至关重要。     

上海地区屠宰场猪扁桃体致病性链球菌2型携带情况调查

唐晓萍等分别于2006年3月、7月、11月在上海市4家规模化生猪屠宰场进行生猪扁桃体采样。475例样品经选择性普通琼脂绵羊血平板培养、革兰氏染色、过氧化氢酶试验、API20 Strep生化鉴定系统鉴定和聚合酶链式反应（PCR）检测后，有27例样品鉴定为猪链球菌2型，     

猪链球菌2型PCR诊断方法的建立

根据猪链球菌2型荚膜多糖基因序列设计1对引物,建立了猪链球菌2型PCR诊断方法,该方法对猪链球菌2型的扩增结果为阳性,对照菌株扩增结果均为阴性,对猪链球菌2型检测的灵敏性为1 pg总DNA量。并用建立的PCR诊断方法检测40份猪链球菌疑似病料,检出阳性病例12份。以上结果表明,该PCR方法特异性强、敏感性高、简便、快速,可用于猪链球菌2型疾病的诊断。     

河池市屠宰猪群中猪链球菌2型的流行病学调查

从我市4个县区的屠宰场采集屠宰猪扁桃体426份,其中东兰195份、宜州78份、环江35份、巴马118份.采用多重PCR方法检测样品中猪链球菌2型的流行病学情况.检出240份(56.34%)样品猪链球菌(SS)阳性,其中7份(1.64%)携带猪链球菌2型(SS2).表明河池市屠宰猪群中广泛存在猪链球菌,但猪链球菌2型带菌率较低.     

猪链球菌2型的PCR快速检测

根据猪链球菌 2型的荚膜多糖抗原基因 cps2 J,合成 1对可扩增长度为 6 75 bp目的片段的引物 ,建立了检测猪链球菌 2型的 PCR法。应用 PCR对 9株经玻片凝集试验检测为猪链球菌 2型的菌株进行了检测 ,均呈阳性 ;而对马链球菌兽疫亚种 (C群 )、猪葡萄球菌、猪丹毒杆菌、猪肺疫巴氏杆菌、猪肺炎霉形体等检测结果均呈阴性 ,表明了本方法的特异性。用此法对 88份正常猪的扁桃体样品的细菌分离物进行了检测 ,36份呈阳性 ,同时用玻片凝集试验进行对照检测 ,也全部呈阳性。而此法不需进行细菌的纯分离培养 ,即可用于猪链球菌 2型的快速诊断以及流行病学调查。     

猪链球菌2型感染SPF小型猪模型的构建

构建了致病性猪链球菌2型(SS2)感染模型。通过典型临床症状观察、剖检病变和组织学观察及病原分离鉴定,证实该模型能成功模拟自然感染状态下SS2引起的典型临床症状和病理变化特点,稳定性好,可进一步用于致病性SS2在动物体内动态分布规律、致病机制和机体免疫应答以及疫苗的效果评价和相关药物筛选等方面的研究,对于猪链球菌2型感染的防控具有重要意义。     

临床健康猪群猪链球菌2型带菌率流行情况调查

为了解钦州市临床健康猪群中猪链球菌2型的流行情况,采用PCR方法对采集的病料进行检测分析。374份样品的PCR检测结果显示,链球菌、猪链球菌、猪链球菌2型的带菌率分别为81.8%、48.9%、2.9%,表明钦州市健康猪中猪链球菌带菌率高,但猪链球菌2型带菌率较低。     

猪链球菌2型感染猪和人的现状及研究进展

猪链球菌2型可引起人和猪的感染,甚至死亡,是一种严重的人兽共患病病原,其引起的疫病在我国被列为二类疫病。它能引起仔猪脑膜炎、支气管肺炎、败血症、关节炎及人的化脓性关节炎、眼内炎和心内膜炎等。在世界上许多国家和地区广泛分布,已发现的致病因子有十多种,但致病机理尚未彻底阐明。由于该菌引起的疫病危害性大,所以对该菌的快速诊断检测和防治方法也在不断改进。论文对猪链球菌2型病的流行状况、致病性、检测方法、防治等研究现状进行综述。     

猪链球菌通用及2型TaqMan荧光PCR检测技术建立与应用

在对设计合成的引物和6-carboxy-fluorescein(6-FAM)荧光素标记的TaqMan水解探针进行筛选的基础上,通过反应体系优化,建立了检测猪链球菌通用和2型的2种荧光PCR检测技术,实现了对猪链球菌的快速检测和定型。敏感性、特异性、重复性、感染组织模拟试验及临床样品的检测结果均表明建立的方法快速、特异、灵敏,整个检测过程(包括样品的前处理时间)可在1.5 h内完成,检测培养物和模拟组织样品的灵敏度可达10 CFU～100 CFU。     

猪链球菌2型四川分离株猪体回归试验

选用35~38日龄的健康断奶仔猪21头,分3组,用2005四川分离株SSsc0501分别经静脉、肌肉注射和口服3种途径感染,进行猪体回归试验。肌肉注射组(含菌0.6×108个/mL)16 h开始出现症状,至36 h全部死亡,发病率、病死率均为100%;静脉注射组(含菌0.2×108个/mL)25 h开始出现症状,48 h内全部死亡,发病率和病死率均为100%;口服攻毒组(含菌2×108个/mL)90 h后开始有发病症状,第9天有1头死亡,发病率75%,病死率33%。从感染病死猪的肝脏、脾脏、肾脏、心血、大脑、脑脊液、淋巴结、肺脏和关节液中均分离到链球菌,经鉴定为试验攻毒的目的菌,表明猪体能够很好地用于猪链球菌2型动物感染模型,同时说明该菌侵害器官广泛,为进一步探讨该病的综合防制提供了重要技术依据。     

2015年华中地区猪链球菌2型感染的血清学调查

监测华中地区22个未免疫猪链球菌疫苗猪场2015年不同月份、不同猪群的猪链球菌2型(SS2)抗体水平,以期揭示SS2的感染流行情况。共收集923份血清样品,结果 442份为SS2抗体阳性,阳性率为4789%,表明SS2在华中地区感染普遍存在;统计分析发现不同月份感染阳性率差别较大,其中6~9月份最高,说明该病与季节有一定的关系,在夏季尤其应该注意该病的防控;不同阶段猪群统计结果表明保育猪阳性率最低,更应做好保育猪的SS2免疫防控工作。     

猪链球菌2型西藏小型猪感染模型的初步建立

选取3个流行病学背景不同的猪链球菌2型菌株人工感染西藏小型猪,探讨西藏小型猪作为猪链球菌2型毒力评价模型动物的可行性.12头西藏小型猪分成4个组,A组为阴性对照组接种肉汤培养基;B、C、D三组分别接种猪链球菌2型分离株GZ06-122B、SH06-21D和HA9801.GZ061-22B株和SH06-21D株分离自华南...     

猪链球菌2型荧光PCR检测方法与常规检测方法的比较

为验证猪链球菌2型荧光PCR检测方法对临床样品检测的敏感性和适用性以及该方法所拥有的独特优点,分别用荧光PCR法、常规PCR法和细菌分离法对人工感染猪链球菌2型的小鼠肝脏和发病猪的心、肝、脾、肾等实质器官和血液、喉拭子进行抗原检测。结果显示,荧光PCR法检出率为70.8%,明显高于普通PCR法（检出率为20.8%）,也高于常规细菌分离法（检出率为45.8%）。由于临床样品常常会被其他细菌污染,细菌分离法很难准确分离到链球菌。但荧光PCR法不受其他细菌污染的影响,对实验室培养的猪链球菌2型菌液,该方法检测滴度可达10-6/0.1mL（42～52 CFU/0.1 mL）,而普通PCR方法检测滴度仅为10-4。