苏云金芽孢杆菌对二化螟致病力及与助剂协同作用研究

二化螟[Chilo suppressalis(Walker)]作为水稻害虫，严重威胁我国水稻生产安全，为提高苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis,Bt）对二化螟杀虫效果，采用生物测定法研究Bt对二化螟致病力及与助剂协同作用。结果表明，8株Bt菌株对二化螟致病力不同，菌株Bt64致病力最高，对1～4龄幼虫致死中浓度LC50分别为4.81×105、2.09×105、2.89×106、3.73×107芽孢·mL-1，对1～2龄幼虫杀虫活性显著高于3～4龄。室外条件下，菌株Bt645×108芽孢·mL-1浓度对二化螟3龄初幼虫第7天防治效果达67.35%，显著高于对照商品Bt制剂防治效果；激健、八神、有机硅3种助剂与菌株Bt64混用对二化螟幼虫杀虫效果均高于菌株Bt64单用，协同增效作用表现为激健>八神>有机硅，助剂激健对菌株Bt64协同增效作用最好。室外条件下，提高菌株Bt64对二化螟防治效果达12%以上。研究结果对Bt生物农药开发和利用、提高田间Bt防治二化螟杀虫效果和减少化学农药使用量具有重要意义。     

球孢白僵菌 GqBb 的分离、鉴定及其对 松果梢斑螟幼虫的致病性研究

为了探寻对松果梢斑螟有高致病性的病原微生物,本研究分离培养了采自秦皇岛北戴河区的感染松果梢斑螟幼虫病原物,结合菌种形态特征及 ITS 序列分析鉴定明确了其主要致病菌种,测定了其致病力。结果表明,该菌株为球孢白僵菌（编号 Gq-Bb 菌株）,当孢子悬浮液浓度从 1×10⁴孢子 /mL 逐步提高到 1×108 孢子 /mL时,其对各虫龄松果梢斑螟幼虫的致病性逐渐增强。当浓度为 1×10⁸孢子 /mL 时,其 1 龄和 2 龄幼虫的累计校正死亡率均达到 100%,3 龄、4 龄和 5 龄幼虫的分别为 96%、90% 和 77.33%。1 ～ 5 龄幼虫的 LC₅₀值分别为1.26×10³、1.90×10³、2.99×10³、2.12×10⁴、2.12×10⁵孢子/m L,LT₅₀分别为4.34～2.57、4.91～2.78、5.19～2.78、5.73 ～ 2.99和 6.44 ～ 3.64 d,...     

继代培养球孢白僵菌对斜纹夜蛾幼虫毒力和产孢量的影响及菌株复壮研究

【目的】明确球孢白僵菌(Beauveria bassiana)在连续继代培养过程中对斜纹夜蛾(Spodoptera litura)二龄幼虫毒力、产孢量的影响,并进行菌种复壮研究,为进一步利用球孢白僵菌对斜纹夜蛾的生物防治提供参考。【方法】将球孢白僵菌SCAUJH19继代培养10代,得到F₁～F₁₀代菌株并测定产孢量。采用浸虫法分别用F₁～F₁₀代菌株处理斜纹夜蛾二龄幼虫,测定其对斜纹夜蛾二龄幼虫的毒力;建立模型分析球孢白僵菌继代培养代数、毒力与产孢量的关系及毒力退化规律。采用活虫复壮法对F₄、F₆、F₈、F₁₀代菌株进行复壮,比较复壮前后对斜纹夜蛾二龄幼虫的毒力效果,并测定产孢量。【结果】球孢白僵菌F₁～F₅代菌株对二龄斜纹夜蛾幼虫毒力无显著差异,处理7 d时校正死亡率为42.44%～45.22%,而F₆、F₈、F_1...     

球孢白僵菌MZ041016菌株对甜菜夜蛾幼虫的毒力测定

[目的]利用球孢白僵菌MZ041016菌株对甜菜夜蛾幼虫的致病性,为该菌株在农业害虫防治中的开发应用研究奠定基础。[方法]采用喷雾法进行球孢白僵菌MZ041016菌株分生孢子液对2龄和3龄甜菜夜蛾幼虫致病性测定。[结果]球孢白僵菌MZ041016菌株对2龄甜菜夜蛾幼虫的最高累计校正死亡率为84.82%,LC50为2.269×104个/ml,LT50为4.186 d;而对3龄幼虫的最高累计校正死亡率为84.76%,LC50为2.429×104个/ml,LT50为4.492 d。[结论]球孢白僵菌MZ041016菌株对甜菜夜蛾2龄幼虫的致病性高于对3龄幼虫的致病性。     

不同温湿度下球孢白僵菌对甜菜夜蛾幼虫的致病力

在室内研究了球孢白僵菌在不同温度和湿度条件下对甜菜夜蛾幼虫的致病力,结果表明:温度、相对湿度、幼虫龄期对白僵菌的致病力具有显著的影响,24～27℃是球孢白僵菌感染甜菜夜蛾的最适宜温度;相对湿度大于90%,甜菜夜蛾的幼虫虫龄越低,越有利于球孢白僵菌对幼虫的感染。     

几种虫生真菌对烟青虫的致病性研究

用4种真菌共9个菌株的固体培养物以及真菌与Bt的混合物,分别对烟青虫2龄幼虫进行了毒力测定,结果表明：（1）球孢白僵菌和莱氏野村菌两个菌种对烟青虫幼虫有明显的防治效果,且前者优于后者;在白僵菌中5S03菌株毒力最高,对烟青虫2龄幼虫的致死中时（LT50）为6.10d,校正死亡率为86.96%,僵虫率为33.33%;另外两个菌株Bb3和Bb98-1的毒力也较高。（2）真菌（5S03）与Bt混用,对防治烟青虫具有相互增效作用。     

球孢白僵菌和中华甲虫蒲螨对冷杉梢斑螟杀虫作用及其相关酶活性影响

为研究球孢白僵菌(Beauveria bassiana)和中华甲虫蒲螨(Pyemotes zhonghuajia)对冷杉梢斑螟(Dioryctria abietella)的毒杀作用及冷杉梢斑螟的解毒、保护机制，采用浸虫法和室内接种蒲螨的方法，测定了CFCC81428、CFCC83116这两株菌的亚致死浓度(LC₂₅)、半数致死浓度(LC₅₀)和中华甲虫蒲螨的亚致死数量(LD₂₅)、半数致死数量(LD₅₀)及幼虫被侵染或寄生后的累计校正死亡率。研究LC₂₅的CFCC81428菌株和LD₂₅的中华甲虫蒲螨对幼虫谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)、乙酰胆碱酯酶(AChE)这2种解毒酶和多酚氧化酶(PPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)这3种保护酶的影响。结果表明：菌株CFCC81428对幼虫的毒力更强，其侵染幼虫第10天的LC₂₅、LC₅₀分别为2.04×10⁴、7.24×10     

辽宁北部玉米螟白僵茵高致病性菌株筛选

采集并分离来源于辽宁北部7个市县的7株野生球孢白僵菌菌株,比较了各菌株产孢量、萌发率和孢子的生长速率生物学指标及对玉米螟3龄幼虫毒力水平进行测试,筛选对玉米螟高致病性的白僵菌菌株。试验结果表明：不同菌株间存在较大的差异,综合各项生物学特性指标数据,筛选出生物学特性表现优良的高致病性菌株1株,即TL3菌株。TL3菌株产孢量达到18．35×107个／cm2,14h的萌发率为93．29％,营养生长量为2．64mm／d。通过对玉米螟3龄幼虫毒力的测定,死亡率达到了98．33％。各项生物学特性指标均显著优于生产上广泛应用的对照（CK）菌株。     

不同培养基继代培养球孢白僵菌对西花蓟马毒力和产孢量的影响

【目的】通过开展连续继代培养对高毒菌株产孢和毒力的影响研究,获得对西花蓟马(Frankliniella occidentalis)毒力和产孢量均高且稳定的球孢白僵菌（Beauveria bassiana）菌株,进一步提出有效防止菌株退化、优良菌株保存和改良的方法与措施,为高效菌株的规模化生产提供参考。【方法】室内条件下,采用浸虫法,用浓度为1×107个孢子/mL球孢白僵菌悬浮液处理西花蓟马初羽化成虫,分别测定28株不同来源的菌株对西花蓟马的毒力;并将筛选出的4株高毒力菌株的分生孢子分别涂布于玉米琼脂（CMA）培养基与SDAY培养基上,比较不同菌株以及不同培养基之间产孢量的差异,筛选出高产孢菌株与产孢培养基,以筛选得到的白僵菌菌株为初始菌株F0,把F0代球孢白僵菌分别接种于CMA培养基、添加蝉蜕的CMA培养基和添加西花蓟马虫尸粉的CMA培养基,分别测定经过不同培养基连续5代继代培养得到的球孢白僵菌对西花蓟马成虫的毒力,并测定产孢量。使用模型模拟分析球孢白僵菌菌株经过不同培养基继代培养后培养代数与产孢量的关系,并对不同培养基培养得到的不同培养代数的白僵菌菌株的产孢量与其对西花蓟马的致死中时（LT₅₀）进行回归分析,研究毒力与产孢量的相关关系。【结果】经过室内毒力测定,处理5 d后,菌株DZDC-9、GZGY-5、WLMQ1-8、SZ-26对西花蓟马成虫的校正累积死亡率均高于90%,LT₅₀均在3 d内,毒力显著高于其他菌株;比较高毒力菌株在两种产孢培养基上的产孢量,发现4株球孢白僵菌的产孢量存在显著差异,菌株DZDC-9的产孢量显著高于其他3株,4株菌株在CMA培养基中的产孢量均明显高于SDAY培养基。随着白僵菌菌株在CMA培养基上连续5代的继代培养,菌株对西花蓟马成虫的致病力呈现下降趋势,从第3代开始致病力显著降低,而添加蝉蜕的CMA培养基培养得到的不同培养代数的分生孢子对西花蓟马致病力则没有显著差异,添加西花蓟马虫尸粉的CMA 培养基培养得到的不同代数的分生孢子对西花蓟马致病力有一定的增强趋势;通过模型可以发现单纯以CMA培养基继代培养白僵菌的产孢量随培养代数呈现指数下降,而在培养基中添加蝉蜕或西花蓟马虫尸粉白僵菌产孢量则随培养代数呈现指数上升,蝉蜕或西花蓟马虫尸粉的添加对产孢量有一定的增强作用。白僵菌菌株产孢量与毒力存在一定正相关关系,产孢量相对较高的菌株对西花蓟马成虫的致病力相对较高,致死中时短。【结论】筛选得到一株对西花蓟马高效的白僵菌菌株DZDC-9,产孢培养基中加入蝉蜕和西花蓟马虫尸可以维持菌株生长特性,延缓毒力退化趋势;同一菌株的产孢量可以作为菌株毒力评价的一个指标。     

球孢白僵菌对斜纹夜蛾幼虫的致病性研究

测定球孢白僵菌MZ050724菌株在3.0×105、3.0×106、3.0×107、3.0×108个/mL等4个浓度下对斜纹夜蛾2龄、3龄幼虫的毒力。结果表明:球孢白僵菌MZ050724菌株对斜纹夜蛾2龄、3龄幼虫具有较高毒力,2龄幼虫的最高死亡率达87.46%,致死中时间为4.49 d;3龄幼虫的死亡率达80.56%,致死中时间为5.52 d。随着施药时间增加,2龄幼虫的致死中浓度2.047×105个/mL,3龄幼虫的致死中浓度2.192×105个/mL。说明该菌株对斜纹夜蛾幼虫有较强的致病性,具有一定的开发应用前景。     

烟青虫高毒力白僵菌菌株筛选及其感菌后 体内保护酶活性的变化

从烟田烟青虫(Helicoverpa assulta)自然感病虫体上新分离鉴定一株球孢白僵菌Bb062,将其与已有的不同来源地和寄主的10株白僵菌(Beauveria spp.)一起,分别测定其对烟青虫3龄幼虫致病力以及烟青虫3龄幼虫感染高毒力白僵菌后体内保护酶活性的变化。结果表明,在供试的11个白僵菌菌株中,Bb062对烟青虫3龄幼虫毒力最高,10 d累计校正死亡率达91.07%,LT50(致死中时)为4.67 d,且与其他菌株差异显著。以孢子1.0×106、1.0×107和1.0×108个·m L-1悬浮液处理时,烟青虫3龄幼虫累计死亡率随菌液浓度的提高和接菌后时间的延长而增大,LC50(致死中浓度)为孢子1.82×107个·m L-1。烟青虫3龄幼虫感染球孢白僵菌后72 h,其体内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性均表现出先急剧升高,再急剧下降的变化过程。在所测试的菌株中,Bb062菌株对烟青虫毒力最高,且能够显著抑制其体内保护酶活性,因此,该菌株具有作为烟青虫生防菌的应用潜力。     

球孢白僵菌SCAUJH19和甲维盐对斜纹夜蛾的协同作用及制剂研究

菌药复配可弥补各自的不足，为害虫防治提供了新的思路。为明确球孢白僵菌SCAUJH19与甲氨基阿维菌素苯甲酸盐(甲维盐)的相容性及其联合毒力和复配制剂，本文测定了不同浓度甲维盐和球孢白僵菌SCAUJH19混合后对菌株孢子萌发和菌落生长的影响，测定了球孢白僵菌SCAUJH19与甲维盐联合使用对斜纹夜蛾2龄幼虫的毒力，并根据最优菌药组合对复配制剂进行了研究。结果表明：球孢白僵菌SCAUJH19和甲维盐有较好的相容性；0.5～20 mg/L甲维盐处理的球孢白僵菌SCAUJH19在第3天时孢子萌发率为96.11%～98.01%;在第7天时0.5 mg/L、2.5 mg/L、5.0 mg/L甲维盐处理球孢白僵菌SCAUJH19的菌落直径分别为42.95 mm、44.50 mm、41.98 mm,与空白对照差异不显著。球孢白僵菌SCAUJH19和甲维盐组合1×10⁸孢子/mL+1.5 mg/L、1×10⁸孢子/mL+0.5 mg/L和1×10⁷孢子/mL+1.0 mg/L第7天时对斜纹夜蛾2龄幼虫校正死亡率分别为100%、95%和95...     

三种微生物杀虫剂对三种小花蝽的安全性评价

为了探究微生物杀虫剂对天敌昆虫小花蝽的安全性，为微生物杀虫剂与小花蝽联合使用防治害虫提供理论依据，本试验在实验室条件下采用浸虫法测定球孢白僵菌(Beauveria bassiana)、金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)和苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis)对微小花蝽(Orius minuius)、南方小花蝽(Orius similis)、东亚小花蝽(Orius sauteri)的毒力，比较其毒性大小，并比较了田间推荐使用剂量下用药7 d对小花蝽的致死率，评价其安全性。结果表明，球孢白僵菌对东亚小花蝽毒性最小，LC₅₀为2.88×10⁸ CFU/mL;金龟子绿僵菌对微小花蝽毒性最小，LC₅₀为5.20×10⁵ CFU/mL;苏云金杆菌对微小花蝽的毒性最小，LC₅₀为1.24×10⁵ IU/mL。按照国际生物防治组织的评价标准，球孢白僵菌对东亚小花蝽的致死率为25.13%,属于无害，但对其余两种小花蝽轻度有害；金...     

白僵菌对马铃薯块茎蛾致病力的测定

在国内首次进行白僵菌对马铃薯块茎蛾致病力的测定.用7个分离自本地的球孢白僵菌菌株和一株从CIP引进的布氏白僵菌对马铃薯块茎蛾幼虫的致病力作了室内测定.实验表明,菌株 XW 0108001对马铃薯块茎蛾幼虫有较强的致死率;在108个/ mL孢子浓度下,其校正死亡率达89.4 %, 毒力回归方程为y=0.366x+3.409((R=0.956),剂量效应的 LC50=2.24×104孢子/ mL.每毫升含107个孢子的时间效应的LT50为4.3 d.     

球孢白僵菌Bb01菌株的生物学特性

[目的]探索高致病白僵菌受自然环境影响条件下的生物学特性.[方法]研究外部环境条件对球孢白僵菌Bb01生长的影响及对青杨脊虎天牛幼虫致病力的影响.[结果]球孢白僵菌Bb01菌株的最适培养基为改良马丁氏培养基,菌落生长和产孢的最优培养温度为26℃,最佳湿度为100％,菌落的生长和孢子产量随着紫外线照射时间的延长而减少;球孢白僵菌Bh01对青杨脊虎天牛成虫的致病力不高,仅为16.67％;26 ～ 28℃条件下对青杨脊虎天牛幼虫的致病力最大,致死中时(LT50)分别为2.23和2.58 d,湿度在100％时致病力最大,LT50为2.57d;通过虫体传代白僵菌可增强菌株的致病力.[结论]试验结果为提高病原真菌的适应性和生产实践提供了理论依据.     

5种杀虫剂对重庆地区草地贪夜蛾田间种群的毒力测定

为筛选适用于重庆地区的草地贪夜蛾防治药剂，通过浸叶法测定了5种杀虫剂对4～5龄幼虫的室内毒力，通过浸虫法测定了5种杀虫剂对2～3龄幼虫的室内毒力。结果表明：在使用浸叶法测定4～5龄幼虫室内毒力中，5%甲维盐对草地贪夜蛾的毒杀作用最高，48 h LC₅₀为3.193 mg/L;8%虫螨腈、5%氯虫苯甲酰胺的毒杀作用次之，48 h LC₅₀分别为153.555 mg/L、223.101 mg/L;25 g/L溴氰菊酯和5%虱螨脲的毒杀作用较低，48 h LC₅₀分别为830.532 mg/L、1 199.584 mg/L。在使用浸虫法测定2～3龄幼虫室内毒力中，5%甲维盐对草地贪夜蛾的室内毒杀作用最高，48 h LC₅₀为0.201 mg/L;25 g/L溴氰菊酯、8%虫螨腈的毒杀作用次之，48 h LC₅₀分别为8.499 mg/L、27.419 mg/L;5%虱螨脲和5%氯虫苯甲酰胺室内毒杀作用较弱，48 h LC₅₀分别为66.983 mg/L、121....     

大豆高隆象致病球孢白僵菌菌株BEdy1的鉴定及毒力测定

【目的】大豆高隆象（Ergania doriae yunnanus）是我国南方大豆田间主要害虫之一。本研究旨在明确一株高隆象自然致病真菌的种类及其生物学特性,并测定该菌株对大豆高隆象成虫的毒力,为大豆高隆象的生物防治提供新材料。【方法】对采集的真菌进行分离、纯化培养,形态学观察;提取真菌DNA进而扩增rDNA-ITS,利用BLAST比对和系统进化树构建,鉴定田间致高隆象自然死亡的真菌种类;设置不同培养温度,通过十字交叉法和血球计数板方法测量计算真菌生长速率和产孢量;配置不同浓度的球孢白僵菌（Beauveria bassiana）BEdy1孢子悬浮液,采用浸虫处理法测定对大豆高隆象的毒力,与商品化球孢白僵菌产品LH毒力进行对比;大豆叶片喷施BEdy1孢子悬浮液,评价高隆象取食后的致死效果。【结果】致使高隆象田间自然发病死亡的真菌为球孢白僵菌,菌株命名为BEdy1。该菌株在22—28℃有较高的生长速率,26℃下生长速率最高,达4.34 mm·d^-1;在20—26℃有较高的产孢量,22℃下产孢量最大,为4.63×10⁶孢子/mm²。浓度为1.0×10⁵、1.0×10⁶、1.0×10⁷和1.0×10⁸孢子/mL的BEdy1孢子悬浮液处理高隆象成虫10 d,死亡率分别为49.33%、77.33%、88.67%和98.00%,对照死亡率仅为10%。1×10⁸孢子/mL孢子悬浮液处理下,LT₅₀为（6.79±0.13）d,僵虫率为74.67%,发病严重度最高。10 d的LC₅₀和LC₉₅分别为4.80×10⁴和3.57×10⁷孢子/mL。浓度为1×10⁸孢子/mL的商品化球孢白僵菌产品LH处理高隆象成虫,10 d死亡率为58.00%,僵虫率为4.67%,极显著低于同浓度的BEdy1处理。大豆叶片喷施BEdy1孢子悬浮液后喂食高隆象,10 d死亡率为100%,僵虫率为63.33%,LT₅₀为（5.27±0.35）d。【结论】适当环境条件下,球孢白僵菌菌株BEdy1生长速度快,产孢量高,对大豆高隆象成虫有很高的致死率,具有较大的开发应用潜力。     

球孢白僵菌4菌株对桃蚜的控制效果研究

试验研究了球孢白僵菌(Beauveria bassiana)不同菌株对桃蚜[Myzus persicae(Sulzer)]的侵染致病力、生殖力及种群参数的影响,探讨了球孢白僵菌的侵染致病力及其开发潜力。结果表明:球孢白僵菌对桃蚜的侵染致病力、生殖力及种群参数的影响在总体上基本一致,但3个指标在4菌株间也有一定的差异,强弱依次为Bb7001>Bb7004≥Bb4014>Bb8001。桃蚜接种4菌株不同浓度孢子后在第3~5 d达到死亡高峰期;lgLC50分别为3.67,4.80,4.45,5.11。接种球孢白僵菌4菌株孢子浓度106个/mL后,桃蚜成蚜的生殖力在第3 d均与对照组桃蚜生殖力有显著差异,10 d内日均产仔与对照蚜相比下降43.71%~62.89%;球孢白僵菌4菌株对桃蚜净生殖力有极显著的降低作用,内禀增长率也有一定的降低,接种4菌株后的桃蚜,净生殖力下降了53.22%~73.36%,内禀增长力降低了21.78%~36.19%,但对世代历期几乎没有影响。综合3个方面来看,以菌株Bb7001显示了较高的杀蚜毒效,可考虑作为防治桃蚜的首选菌株进行开发。     

水稻二化螟高毒力白僵菌菌株筛选

从水稻田间采集自然感染白僵菌的水稻二化螟僵虫,分离纯化菌株,进行不同菌株生物学特性指标比较以及在室内对水稻二化螟3龄幼虫进行毒力测定,从中筛选出生长性状优良、对水稻二化螟毒力较强的菌株HN1、YJ2。其产孢量分别为19.03×107个/cm2、17.30×107个/cm2;14 h萌发率分别为93.67%、91.08%;营养生长量分别为2.822 mm/d、2.748 mm/d;对水稻二化螟3龄幼虫的校正死亡率分别为97.33%、96.00%。HN1、YJ2菌株各项生物学特性指标均显著高于实验室原有保藏菌株(CK),具有很好的生防潜力。     

苏云金芽孢杆菌对黏虫致病力及生长发育的影响

黏虫[Mythimna separata(Walker)]作为一种易爆发成灾的迁飞性害虫,是我国危害最重的粮食害虫之一.采用生物测定方法,测定9株苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)菌株对黏虫致病力,筛选出一株对黏虫具有较高致病力菌株Bt46.该菌株对1龄幼虫致病力最弱,对2龄幼虫致病力...